Sumário

Os genes NER variados e fumar são dois importantes fatores de risco de câncer de bexiga, mas o mecanismo da proteína NER e tabagismo na progressão do cancro, no entanto, ainda não está claro. Neste relatório, nós comparamos as expressões de genes NER em 79 tecidos de cancro da bexiga com ou sem qualquer recorrência por PCR em tempo real e, em seguida, analisaram os genes NER variadas por imunoquímica em amostras de tecido de cancro da bexiga 219. Com base nos dados clínicos, analisamos o valor clínico de genes NER variada e tabagismo em 219 cancros da bexiga pelo método de Kaplan-Meier e Cox riscos proporcionais regressão. Encontramos as expressões da XPF gene NER e XPC foram significativamente menores em tecidos de cancro da bexiga com uma recorrência em comparação com aqueles sem uma recorrência a nível mRNA. Além disso, os pacientes com a XPF e XPC defeito teve um tempo de sobrevida estatisticamente significativa menor mediana livre de recorrência do que aqueles sem a XPF e XPC defeito, e fumar pode fazer a diferença mais notável. Nossos resultados sugerem que XPF e expressão XPC pode ser um potencial fator preditivo para câncer de bexiga, e fumar pode não só influenciar a recorrência de cancro da bexiga como um único fator, mas também agravar os resultados do defeito e XPC defeito XPF.

Citation: Qiu J, Wang X, Meng X, Y Zheng, Li G, Ma J, et al. (2014) atenuou NER expressões de XPF e XPC associados ao tabagismo estão envolvidos na recorrência de cancro de bexiga. PLoS ONE 9 (12): e115224. doi: 10.1371 /journal.pone.0115224

editor: Xinbin Chen, da Universidade da Califórnia em Davis, Estados Unidos da América

Recebido: 23 Abril de 2014; Aceito: 20 de novembro de 2014; Publicação: 23 de dezembro de 2014

Direitos de autor: © 2014 Qiu et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Data Availability:. O autores confirmam que todos os dados subjacentes às conclusões estão totalmente disponíveis sem restrições. Todos os dados relevantes estão dentro do papel

Financiamento:. O estudo foi apoiado pela Science Programa de Tecnologia Coluna de China (No. 2011A322). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

os tumores da bexiga são as segundas neoplasias mais comuns no domínio urológica. O câncer de bexiga é o quarto câncer mais comum em homens eo nono mais comum em mulheres [1]. Dos pacientes, cerca de 50% vai experimentar uma recorrência dentro de 2 anos após um diagnóstico inicial, e 16-25% terão recorrência após ressecção endoscópica [2]. Portanto, a ocorrência frequente de cancro da bexiga é um grande problema médico.

O tabagismo, como fator de risco predominante para o cancro da bexiga, é responsável por cerca de metade dos casos em homens e uma terceira em mulheres [3], [4]. Como cancerígenas relacionadas com o tabaco muitas vezes formam adutos volumosos DNA, dano base, quebras de cadeia simples e quebras de cadeia dupla [5]. Além disso, por causa da natureza da bexiga como uma importante órgão vazio, as células uroteliais estão continuamente expostos a muitos reagentes que danificam o ADN contido na urina. Assim, a reparação do ADN desempenha um papel importante na prevenção de efeitos induzidos por danos no DNA deletérios, como a acumulação de mutações e ocorrência do tumor [6].

Existem várias vias de reparação de DNA existentes em células humanas e cada via efetivamente remove especial tipos de danos no ADN [7]. Com base no tipo de danos no ADN, as vias de reparação do ADN podem ser classificados em reparação de excisão de nucleótidos (ILM), base de reparação da excisão, reparação de emparelhamentos incorrectos, e a reparação recombinatória [8], [9]. A via de NER é a principal via de reparação do ADN para a reparação de danos no ADN volumoso gerado pela maioria dos factores ambientais para manter a integridade genética e prevenir o desenvolvimento de muitas doenças [10], [11].

NER constituída por cerca de 30 proteínas que remover as lesões que distorcem hélice por quatro etapas: (a) reconhecimento do DNA; (B) a abertura de uma bolha ao redor da lesão; (C) A incisão de ADN a montante e a jusante da lesão por endonucleases; e (d) resíntese de ADN e de ligação [12], [13]. XPA a G (grupos xeroderma pigmentoso A-G), ERCC1 (excisão reparação cruz complementação grupo1), RPA1, RPA2 (proteína de replicação A1, A2 proteína de replicação) são as principais proteínas nesta via e há dois braços de reconhecimento de danos do NER via: reparação genoma global (GGR) e reparação de acoplamento de transcrição (TCR). GGR engloba as partes não codificantes do genoma, os genes silenciosos e o suporte não-transcritas de genes activos. TCR assegura que a cadeia transcrita dos genes activos é reparado com prioridade mais elevada do que o resto do genoma utilizando a ARN-polimerase II, tal como um sensor de lesão. Uma vez que o dano é reconhecida através de um destes processos, o restante do processo de reparação resulta de uma via convergente [14], [15].

Neste estudo, foi investigada a expressão de ARNm de 9 genes (para XPB XPG, ERCC1, RPA1, RPA2) envolvida na via NER em tecidos de cancro da bexiga com /sem recidiva, em comparação com o tecido normal câncer de bexiga. Os pacientes sem recorrência em 2 anos foram incluídos no grupo de não-reincidência e os pacientes com recidiva em 2 anos serviu como o grupo recaída. Suas amostras de tumores ressecados na primeira operação foram estudados. Em seguida, os genes acima com expressão significativamente diferente de mRNA foram analisados ​​por um método de imuno-histoquímica (em 219 pacientes com câncer de bexiga) e a correlação entre esses genes e a recorrência de câncer de bexiga foi determinada.

Considerando o tabagismo é um fator de risco predominante para o cancro da bexiga, analisamos o valor clínico de genes NER variadas e tabagismo em 219 cancros da bexiga com base nos dados clínicos pelo método de Kaplan-Meier e Cox riscos proporcionais regressão.

Materiais e Métodos

2.1 ética Declaração

todo o protocolo de pesquisa foi aprovado pelo conselho de ética do Hospital Paz Internacional Bethune e hospitalar Xinqiao na Universidade de Medicina Terceiro Militar e todos os participantes forneceram consentimento informado por escrito.

. assuntos

2.2 estudo

O estudo foi projetado com dois conjuntos independentes

O primeiro conjunto incluiu 79 pacientes submetidos a ressecção transuretral ou cistectomia parcial (idade média de 62,4 ± 12 anos, sendo 52 homens e 27 mulheres) em nosso departamento de 2007 a 2011. Nenhum dos 79 pacientes tinham recebido drogas anticâncer antes do primeiro cystectomy. Entre esses 79 pacientes, 37 deles não têm uma recorrência em pelo menos 24 meses após a primeira cistectomia e ainda estavam vivos agora, 29 deles haviam recebido uma segunda cistectomia e 13 deles morreram (5 casos recebeu uma segunda cistectomia e 8 casos não). Os espécimes de tumores de todos os pacientes cirúrgicos foram recolhidos e mantidos adequadamente. Os pacientes sem recorrência em 2 anos foram incluídos no grupo de não-reincidência e os pacientes com recidiva em 2 anos serviu como o grupo recaída. Suas amostras de tumores ressecados na primeira operação foram estudados. As amostras foram congeladas rapidamente com a maior brevidade possível após a ressecção.

O segundo conjunto incluiu 219 pacientes que não eram os mesmos que os 79 pacientes acima. Os tecidos embebidos em parafina cera de carcinoma da bexiga papilar urotelial foram coletadas de pacientes submetidos à ressecção transuretral de tumor da bexiga em nosso departamento de 2002 a 2007. Estes tecidos, de acordo com a nova classificação da OMS, foram atribuídos patologicamente a neoplasia urotelial papilar de baixo maligno (PUNLMP; 58 casos), carcinoma papilar de baixo grau urotelial (93 casos) e carcinoma papilar de alto grau (68 casos). Os pacientes sem recorrência em 36 meses foram incluídos no grupo de não-reincidência e os pacientes com recidiva em 36 meses serviram como os níveis de expressão de recaída group.The de genes NER em tecidos de cancro da bexiga destes pacientes foram analisados ​​pelo método de imuno-histoquímica.

2,3 de ARN e síntese de ADNc

fragmentos tumorais foram homogeneizados em tampão de lise de ARN em gelo com um Ultra-Turrax e o ARN foi purificado usando o RNA total SV Purification Kit. Retro-transcrição de ADNc foi feita utilizando o Kit de alta capacidade de cDNA Archive, de acordo com as sugestões do fabricante.

2,4-PCR em tempo real

a expressão do gene Relativa foi medida em triplicado e normalizadas para

β

actina (ΔCT), utilizando ensaios de expressão gênica TaqMan e o sistema de PCR 7500 em tempo real para os seguintes transcritos do gene: XPB (Hs0554450_ml), XPC (Hs01104206_m1), XPD (Hs00361161), XPE (Hs00172018_ml), XPF (Hs00193342), XPG (Hs00164482), ERCC1 (Hs01012161), RPA1 (Hs00161419_m1), RPA2 (Hs00358315_m1). Para garantir thatâ-actina em si não mudou entre as amostras diferentes, a relação ofÂ-actina a um GAPDH segundo gene de referência [16], foi medido.

2.5 Imuno-histoquímica

As secções de tecido de 5 mm foram desparafinizadas, re-hidratadas em álcoois graduados e processadas utilizando o método da imunoperoxidase estreptavidina. Em resumo, as secções foram submetidas a recuperação de antigénios por tratamento em microondas forno por 10 min em 0,01 mol /L de tampão citrato (pH 6,0). As lâminas foram subsequentemente incubadas em soro normal a 10% durante 30 min, seguido por uma incubação durante a noite a 4 ° C com o anticorpo primário apropriadamente diluído. O anticorpo monoclonal anti-humano de ratinhos (XPC, XPF) foi utilizado a uma diluição 1:100. Após o anticorpo primário, as amostras foram incubadas com anti-ratinhos biotinilados ou as imunoglobulinas anti-coelho durante 15 min a 37 ° C, seguido por estreptavidina peroxidase de complexos durante 15 minutos a 37 ° C. 3,3′-diaminobenzidina foi usado como o cromogénio, e hematoxilina foi utilizado como um corante de contraste nuclear.

A imunohistoquímica foi conduzida por, pelo menos, dois observadores independentes que marcou a percentagem estimada de células tumorais que apresentam coloração nuclear, independentemente do sinal força. Os resultados foram pontuados de lesões de carcinoma urotelial calculando a percentagem de células tumorais que apresentam coloração nuclear característica. Um corte definido arbitrariamente 10% foi feita para classificar os dados de CTP em grupos categóricos (positivos contra negativos).

2.6 estatística A análise

A análise estatística foi feita por SPSS 13.0. a expressão do gene relativo foi calculado usando 2

-ΔCT, e testes desemparelhados bicaudal t foram usadas para identificar expressões significativamente alterada em tecidos de cancro comparativamente com recorrentes tecido de cancro não recorrente. A tabela de contingência foi gerado com o qui-quadrado ou teste exato de Fisher para dados de imuno-histoquímica. probabilidade de recorrência foi calculada pelo método de Kaplan-Meier, com diferenças estatisticamente avaliados pelo teste de log rank. O risco relativo de recorrência de cancro da bexiga foi estimado por um modelo de riscos proporcionais de Cox multivariada. Para todos os testes estatísticos, p 0,05 foi considerado significativo

Resultados

3.1 genes Ner, e a recorrência de cancro da bexiga

Para esclarecer a correlação entre o mecanismo NER e câncer de bexiga. recaída, os níveis de genes NER incluindo XPB de XPG, ERCC1, RPA1 e RPA2 em tecidos de câncer de 79 pacientes com câncer de bexiga de expressão foram determinadas por PCR em tempo real. Nestes 79 pacientes, 37 pacientes não tiveram recidivas em 24 meses, e estes foram incluídos no grupo não-recaída; 29 pacientes tiveram uma recaída em 24 meses e foram incluídos no grupo de recaída; e os outros 13 pacientes morreram e foram incluídos no grupo de morte. Os resultados do estudo mostraram os níveis de XPC e XPF expressão foram significativamente reduzidas no grupo de grupo de recorrência e de morte em comparação com o grupo não-recaída (Fig. 1 e Tabela 1). No entanto, XPB, XPD, XPE, XPG, ERCC1, RPA1 e RPA2 não se alterou significativamente. Em comparação com o grupo de recorrência, os níveis de expressão XPC e XPF foram muito mais baixos no grupo de morte; no entanto, ele não tinha significância estatística

genes NER transcrição foram detectados pelo real-time RT-PCR quantitativo em cancros da bexiga de três subgrupos:. Grupo não-reincidência, os pacientes que não tiveram uma recorrência em 2 anos ; Recorrência Group, pacientes que tiveram uma recorrência dentro de 2 anos; Grupo mortos, os pacientes que estavam mortos após a cirurgia dentro de dois anos. A mudança vezes foi normalizado contra a GAPDH e, em seguida, todos os genes em comparação com as expressões de XPC no Grupo A recorrência (+ sinal). *, P 0,01 em comparação com o Grupo the.Non-recorrência

3.2 Os níveis de expressão de XPF e XPC e a patologia do cancro da bexiga

Para investigar a relação. entre XPF, XPC eo desenvolvimento de cancro da bexiga, foi analisada a relação entre os níveis de expressão de XPF e XPC e a patologia do cancro da bexiga. Verificou-se que as proporções de XPF (-) e XPC (-) eram de 54,4% e de 50,0% no tecido de cancro papilar de alto grau, 39,7% e 37,9% em tecidos de cancro PUNLMP e 49,5% e 45,2% em cancro papilar de baixa qualidade tecidos (Tabela 2 e Fig. 2). Os resultados da análise estatística sobre os dados de imuno-histoquímica sugeriu que as proporções de XPF (-) e XPC (-) eram significativamente mais elevados em tecidos de cancro papilar alto grau do que em tecidos de cancro PUNLMP (P 0,05). Não foi observada diferença estatística entre o PUNLMP e tumores de baixo grau (P 0,05). Além disso, as proporções de XPF e XPC com expressão concomitantemente reduzida foram significativamente mais elevados em tecidos de cancro papilar alto grau do que em tecidos de cancro PUNLMP (P 0,05).

(a) As expressões de XPF e XPA em bexiga normal, tecido. (B) a expressão XPF positiva e expressão XPC positivo. (C) expressão XPF positiva e expressão XPC negativo. (D) a expressão XPF negativa e expressão XPC positivo. (E) a expressão XPF negativa e expressão XPC negativo.

3.3 Expressão de genes NER e tabagismo

A conexão entre os níveis de expressão de genes NER e tabagismo em 79 de bexiga pacientes com câncer foi analisada. A situação do tabagismo foi dividida em 4 níveis: nunca fumaram, 20 maços-anos, 20-50 anos-maço e 50 anos-maço. Os resultados do estudo mostraram que, embora sem significância estatística existia entre os grupos 4 fumadores, ainda havia uma tendência definida. Os níveis de XPF e XPC expressão foram ligeiramente mais baixos nos tecidos tumorais de fumantes pesados ​​do que naqueles de pacientes levemente fumadores (Fig. 3).

As expressões de XPF e XPC em 79 o cancro da bexiga, de 4 de fumar subgrupos. A linha sólida grossa representa o valor CT média e as barras de erro representam o erro padrão.

Para explorar ainda mais a conexão entre a expressão de genes NER e fumar, os níveis de XPF expressão e XPC em 219 doentes com cancro da bexiga e suas situações fumadores foram analisados. Nós não encontraram nenhuma diferença nas proporções de XPF (-) e XPC (-) entre os grupo de 20 anos-maço, o grupo de 20-50 anos-maço e o grupo nunca fumaram. Curiosamente, as proporções de XPF (-) e XPC (-) na . 50 maços-ano foram maiores do que aqueles no grupo nunca fumou e 20 grupo maços-ano (Tabela 2 e Tabela 3)

3.4 Expressão de XPF e cancro da bexiga XPC recorrência

Para investigar mais a relação entre os níveis de expressão reduzidos de XPF e XPC e o desenvolvimento de cancro da bexiga, a ligação entre os níveis de expressão XPF e XPC com recidiva do cancro de bexiga foi analisada. FIG. 4 mostra as curvas de Kaplan-Meier dos dois genes e tabagismo com os valores de P ajustados. Descobrimos que os pacientes com baixo nível de XPF e XPC teve uma maior taxa de recorrência do que aquelas com alto nível de XPF e XPC (Fig 4a e 4b P . 0,05), além disso, essa diferença foi mais evidente no grupo XPF (- ) XPC (-.) (Figura 4C). Entre as variáveis ​​clínico-patológicas, o grau do tumor eo estágio resultou fatores prognósticos como significativos em análise univariada (Tabela 3). A análise multivariada por Cox foi realizada, incluindo todas as variáveis ​​significativamente associadas à sobrevivência no uni e indicaram que o estágio da doença foi o único fator independente de previsão de evolução dos pacientes (Tabela 4).

Curvas de Kaplan-Meier utilizando testes de log rank para a recorrência de cancro da bexiga em pacientes. (A) A recorrência de cancro da bexiga em pacientes com XPF (-) e XPF (+); (B) A recorrência de cancro da bexiga em pacientes com XPC (-) e XPC (+); (C) A recorrência de cancro da bexiga em pacientes com XPF (-) combinado com XPC (-) e XPF (+) combinado com XPC (+), a simultaneidade; (D) A recorrência de cancro da bexiga em pacientes com nunca fumou e nunca fumaram.

Cum, cumulativos

.

3.5 O tabagismo e câncer de bexiga reincidência

tinha sido confirmado que o tabagismo está associado com câncer de bexiga [30] e verificou-se que o tabagismo também foi associada com a recorrência de cancro da bexiga. FIG. 4d mostra as curvas de Kaplan-Meier de tabagismo com os valores P ajustados, os pacientes que tiveram um histórico de tabagismo teve uma maior taxa de recorrência do que os pacientes que não têm a história de tabagismo. Além disso, verificou-se que o tabagismo não era um fator independente para o câncer de bexiga, ele pode trabalhar com XPF e genes XPC simultaneamente, especialmente nos pacientes com um baixo nível de XPF (Fig. 5 A e C) e XPC (Fig. 5 b e d). Além disso, a quantidade de fumo da paciente estava relacionada com a recorrência de cancro da bexiga, especialmente no grupo de XPF (Fig. 5) (-) e XPC (-). (Fig. 5 e e f)

Curvas de Kaplan-Meier, utilizando testes de log rank para a recorrência de cancro da bexiga em pacientes. (A) A recorrência de cancro da bexiga em XPF (-) de grupo com status diferente de tabagismo (nunca fumou, 20 anos-maço, 20-50 anos-maço e 50 maços-anos); (B) A recorrência de cancro da bexiga em XPC (-) de grupo com status diferente de fumar; (C) A recorrência de cancro da bexiga no grupo XPF (+) com o estado diferente de fumar; (D) A recorrência de cancro da bexiga no grupo XPC (+) com o estado diferente de fumar; (E) A recorrência de cancro da bexiga em pacientes de XPF (-) com nunca fumaram e XPF (-) com fumado mais de 50 maços-anos; (f) A recorrência de cancro da bexiga em pacientes de XPC (-) com nunca fumaram e XPC (-) com fumado mais de 50 maços-anos; (g) A recorrência de cancro da bexiga em pacientes de XPF (+) com nunca fumaram e XPF (+) com maços-anos, mais de 50 defumados; (H) A recorrência de cancro da bexiga em pacientes de XPC (+) com nunca fumaram e XPC (+) com maços-anos, mais de 50 fumadas.

Discussão

O câncer de bexiga recaída é um problema clinicamente comum. Neste estudo, foi investigada a conexão entre a recidiva do cancro de bexiga e genes NER. Os resultados do estudo sugerem que dois genes Ner, XPF e XPC, estavam envolvidos na recidiva do câncer de bexiga. Além disso, também descobrimos que como um fator externo, o tabagismo não foi apenas envolvida na recidiva do câncer de bexiga de forma independente, mas também combinado com genes NER a desempenhar um papel maligno.

XPF, também conhecido como o reparo de excisão crosscomplementing grupo 4 (ERCC4), está criticamente envolvida na via de NER [17]. XPF Hasan papel importante na reparação de recombinação, reparo incompatível e classe de comutação possivelmente imunoglobulina [18], [19]. XPF contém o domínio catalítico da nuclease e ERCC1 é necessária para a ligação e estabilização da XPF ADN. O complexo ERCC1-XPF poderia remover 3 ‘abas single-ressaltou a partir termina e se unirá DNA 5’ lado de uma bolha no NER para excisar em direção a lesão [20]. Encontramos XPF foi significativamente menor em tecidos tumorais de câncer de bexiga recaída e os resultados da comparação patologia mostrou que a possibilidade de recaída no prazo de 3 anos foi maior para pacientes com câncer de bexiga com XPF (-) do que para aqueles com XPF (+). É claramente indicado que XPF estava envolvido na recidiva do cancro da bexiga, o que era consistente com os resultados a partir de Z Zhang et al [21]. Eles observaram que o polimorfismo do site XPF-357 estava estreitamente correlacionada com a expressão de XPF e afetou ainda mais a recidiva do câncer de bexiga. No entanto, eles não tinham investigado os diferentes níveis de XPF expressão em tecidos tumorais de câncer de bexiga recaída e não-recaída e também não tinha retirado uma conclusão clara. Nós não só investigou os diferentes níveis de XPF expressão em tecidos de tumor de cancro da bexiga recidiva e não-recidiva, mas também estudou a conexão entre a proporção de XPF (-) e da bexiga classificação patológica. Encontramos a proporção de XPF (-) foi significativamente maior em tecidos de câncer papilar de alto grau do que em tecidos de câncer PUNLMP e tecidos de câncer papilar de baixo grau, sugerindo XPF jogado não só um papel importante na recidiva de cancro da bexiga, mas também um papel protetor na o desenvolvimento de cancro da bexiga. O XPF reduzida estava envolvido no desenvolvimento de cancro da bexiga.

XPC é uma proteína de reconhecimento de danos no DNA que desempenha um papel importante no processo NER. A proteína XPC liga-se fortemente com uma proteína HR23B para formar um complexo XPC-HR23B estável. Estudos indicam que o complexo XPC-HR23B é o primeiro componente de proteína que reconhece e se liga aos locais danificados [22]. A proteína XPC também pode desempenhar um papel importante em outras respostas celulares induzidas por danos no DNA, incluindo a regulação do checkpoint do ciclo celular e apoptose [23] – [25]. defeitos XPC foram encontrados em muitos tipos de cancro, incluindo o cancro do pulmão e da pele [26], [27]. XPC knock-out estudos ratos transgénicos revelar a elevada incidência de uma predisposição para muitos tipos de cancro [28]. Embora vários estudos tenham demonstrado a estreita relação entre XPC eo desenvolvimento de cancro da bexiga, ainda não há evidências de que XPC está envolvido na recidiva do câncer de bexiga.

Encontramos XPC foi atenuada expressos em câncer de bexiga do que recaíram câncer de bexiga não-recaída. Ele sugere que o XPC reduzida pode ser envolvido na recidiva do cancro da bexiga. Para confirmar esta hipótese, analisamos a relação entre os níveis de XPC expressão em tecidos tumorais de 219 pacientes de câncer de bexiga e seu prognóstico e encontrou XPC (-) pacientes tiveram uma taxa de recidiva significativamente mais elevado. Além disso, a proporção de XPC (-) estava correlacionada com a classificação patológica de cancro da bexiga. Isto é consistente com os resultados de Chen et al:. XPC derrota estava intimamente relacionado com, e envolvidos no desenvolvimento de cancro da bexiga [29]

Embora a baixa expressão de XPF e XPC estava envolvido na recaída da bexiga câncer, a análise abrangente constatou que não houve efeito de aumento sinérgico entre a expressão reduzida de XPF e XPC. A análise de caso-controlo mostraram que a taxa de recidivas dos pacientes com expressão reduzida de XPF concorrentemente e XPC não foi significativamente mais elevada do que a dos pacientes com expressão reduzida de XPF única ou XPC. Isto sugere que XPF e XPC estão ambos relacionados com a recidiva de câncer de bexiga e envolvidos em várias vias resposta celular. No entanto, como para a substituição de cancro da bexiga, XPF XPC e desempenhar as suas funções no mesmo mecanismo, o mecanismo NER, mas não em diferentes mecanismos.

Muitos estudos mostraram que o fumo desempenha um papel no desenvolvimento maligno de cancro da bexiga [30] – [32]. Nosso estudo confirmou ainda mais esta conclusão. Ao analisar cuidadosamente o tabagismo, a expressão de genes NER e a recidiva do câncer de bexiga, nós deduzimos a conclusão de que o tabagismo não é apenas envolvidos na recidiva do câncer de bexiga de forma independente, mas também combina com genes NER como XPF e XPC para jogar um papel maligno simultaneamente, o que agrava ainda mais os resultados malignos de câncer de bexiga. Estudos anteriores sugeriram que o tabagismo pode afetar a recidiva do cancro da bexiga através do mecanismo NER. No entanto, nosso estudo mostrou fumar não só afetou o papel protetor do mecanismo NER no cancro da bexiga, mas provavelmente também influenciou outros mecanismos de proteção durante o desenvolvimento de cancro da bexiga.

Apesar de nosso estudo mostrando que XPF, XPC e tabagismo estavam intimamente relacionados com a recidiva de câncer de bexiga, a razão para a baixa expressão de XPF e XPC ainda não estava claro. Além do polimorfismo de XPF e XPC promotores podem afectar a expressão desses genes, provavelmente há alguns mecanismos desconhecidos que afectam a transcrição e tradução de genes XPF XPC e, até mesmo afectar a sua degradação e proteínas de eficiência proteica, etc. Para elucidar completamente o mecanismo biológico de recidiva do câncer da bexiga, estes campos precisam de uma investigação mais aprofundada. No entanto, o fato de que XPF e XPC estão envolvidos na recidiva do câncer de bexiga traz uma nova pista de confiança para novos estudos sobre o mecanismo de recorrência do cancro da bexiga.

Reconhecimentos

Os autores gostariam de obrigado Xinhong Zhao e Dr. Junlei Zhang (Departamento de Microbiologia) pela sua excelente assistência técnica e leitura crítica e comentários valiosos para o manuscrito.