Sumário

A metástase continua a ser uma das causas mais prevalentes que levam à baixa sobrevida a longo prazo de pacientes com câncer colorretal (CRC). Os significados clínicos de supressor de tumor metastático, N-myc regulada negativamente o gene 1 (NDRG1), foram relatados em inconsistentemente uma variedade de doenças cancerosas. Neste estudo com 240 amostras clínicas de CRC, que mostraram que a expressão NDRG1 foi significativamente diminuído na maioria dos tecidos de CRC em comparação com os homólogos não-tumorais emparelhados. A análise estatística revelou uma significativa correlação inversa de expressão NDRG1 com o estágio do tumor, estado de diferenciação e metástase. Comparado com o grupo NDRG1-negativo, o grupo NDRG1-positve tiveram melhor sobrevida livre de doença /total (

p

= 0,000) mais de 5 anos de follow-up. Além disso, NDRG1 foi considerada um fator prognóstico independente para a sobrevida global (

p

= 0,001) e recorrência (

p

= 0,003). Nosso estudo conclui que NDRG1 é um romance preditor favorável para o prognóstico em pacientes com CCR

Citation:. Mao Z, Sun J, Feng B, Ma J, Zang L, Dong F, et al. (2013) O supressor de metástase, N-myc subregulado Gene 1 (NDRG1), é um biomarcador de prognóstico para câncer colorretal humano. PLoS ONE 8 (7): e68206. doi: 10.1371 /journal.pone.0068206

editor: Anthony Federação das Índias Ocidentais Lo, da Universidade Chinesa de Hong Kong, Hong Kong

Recebido: 04 de março de 2013; Aceito: 28 de maio de 2013; Publicação: 09 de julho de 2013

Direitos de autor: © 2013 Mao et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este estudo foi financiado pela National Natural Science Foundation da China (NSFC, 30,873 milhões). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer colorretal (CRC) é uma das neoplasias mais comuns em todo o mundo [1]. Demonstrou-se que, na fase precoce, CRC podem ser curados por ressecção cirúrgica minimamente invasiva radical [2]. No entanto, uma grande população de CRC paciente foi diagnosticado em um estágio avançado e opções de tratamento convencionais tornam-se indisponíveis [3]. Além disso, CRC representa um tipo de forma agressiva invasiva e metastática do tumor [4] e recidiva metastática continua a ser uma das causas mais comuns que levam à sobrevivência a longo prazo pobre e alta taxa de mortalidade [5]. Portanto, a compreensão da patogênese molecular de recorrência e metástase do câncer vai ajudar a melhorar os regimes de tratamento e prognóstico da doença para pacientes com CCR

carcinogênese colorretal é um processo complicado que envolve inúmeros proto-oncogenes e genes supressores de tumor [6] -. [9 ]. Nós e outros descobriram que o gene expressão anormal de um romance supressor de metástase, N-myc regulada negativamente 1 (NDRG1), estava envolvido no processo de desenvolvimento de CRC [9] – [12]. NDRG1 exerce a sua função através de modulação das principais vias de sinalização em uma grande variedade de tipos de tumor, incluindo CRC [9], [10], [13] – [15]. No entanto, a associação de NDRG1 com a progressão do câncer tem sido relatada com observações inconsistentes. Por exemplo, a expressão NDRG1 na mama, fígado, pulmão e cânceres cervicais foi positivamente correlacionada com a recidiva da doença e foi um indicador de mau prognóstico para a sobrevida do paciente [16] – [20]. Pelo contrário, a expressão NDRG1 na próstata, cólon e tumores esofágicos era um factor favorável para o resultado do paciente clínico [21] – [23]. Aparentemente, o papel clinico da doença cancerosa no NDRG1 ocorre de um modo dependente do contexto.

os significados clínicos e os valores de prognóstico de NDRG1 em CRC não foram bem avaliados. Tradicionalmente, a profundidade infiltração tumoral, o número de linfonodos metastáticos, localização do tumor, metástase distante e integralidade da excisão, e os níveis de soro pós-operatória antígeno carcinoembrionário (CEA) e antígeno de carboidrato 19-9 (CA19-9) têm sido usados ​​como indicadores de prognóstico, que não são inteiramente fiáveis ​​ainda [24]. Portanto, o desenvolvimento de novos biomarcadores de prognóstico será de grande importância para orientar o tratamento da CRC. Recentemente, um número de biomarcadores putativos foram desenvolvidos para prever a resposta ao tratamento adjuvante específico. Estes biomarcadores incluem antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), CEA, CA19-9, p53, Kirstenrat sarcoma-2 oncogene vírus (K-ras), instabilidade de microssatélites (MSI), fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e

etc

. [25]. Do ponto de vista clínico, os seus significados prognósticos e terapêuticos não foram totalmente validado [25]. Neste estudo, a expressão de NDRG1 e seus significados clinicopatológicas foram investigados em 240 espécimes de CRC e os seus homólogos não-tumorais emparelhados. Nossos estudos demonstraram que NDRG1 é um romance biomarcador favorável para a sobrevivência a longo prazo em pacientes com CCR.

Materiais e Métodos

Os pacientes Seleção

Os pacientes que foram submetidos a cirurgia laparoscópica para câncer colorretal foram selecionados consecutivamente de janeiro de 2006 até dezembro de 2007. o estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Ruijin Hospital, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, eo consentimento informado de todos os pacientes envolvidos antes deste estudo. Nenhum dos doentes incluídos tinham sido aceites radioterapia pré-operatória ou quimioterapia. estadiamento do câncer de pré-operatório foi realizado por tomografia computadorizada reforçada. Todos os pacientes incluídos são elegíveis para serem tratados por via laparoscópica, após a avaliação pré-operatória. Todos os procedimentos laparoscópicos foram realizados pela mesma equipe cirúrgica. Todas as operações cirúrgicas seguido um protocolo de dissecção de linfonodos norma D2 de acordo com as orientações do Radical Laparoscópica Cirurgia Câncer Colorretal (2006) estabelecidos pelo Grupo de Estudo de laparoscópica e Cirurgia Endoscópica Filiada à Associação Médica Chinesa. Todos os pacientes de CRC que foram patologicamente diagnosticados como estágio III-V aceitou quimioterapia adjuvante pós-operatório. Os critérios de exclusão foram:

in situ

doença, apresentação de emergência, índice de massa corporal (IMC) 35 kg /m

2, Sociedade Americana de Anestesiologia (ASA) de classificação IV-V, doenças gastrointestinais associados que requerida extensa avaliação operatório ou intervenção, gravidez ou doença maligna nos últimos 5 anos (exceto carcinoma de células escamosas ou basal superficial da pele ou

in situ

câncer cervical). estadiamento clínico pós-operatório foi baseado no manual UICC câncer de estadiamento (7ª edição, 2009), avaliando

via

pré-operatório reforçada tomografia computadorizada, descobertas intra-operatórias em conjunto com avaliações patológicas pós-operatórias.

imuno-histoquímica (IHQ)

os tecidos tumorais e os tecidos não tumorais emparelhados nas margens de ressecção foram coletadas, fixadas com formol e embebido com parafina. IHC coloração foi realizada como previamente descrito [26]. Depois de permeabilização e antigénio-recuperação, as secções foram incubadas com anticorpos anti-NDRG1 (HPA006881, Sigma-Aldrich, St Louis, MO, EUA) a 4 ° C durante a noite, seguido por incubação durante 1 h /20 ° C, com a peroxidase de rábano (HRP) -conjugated anticorpo secundário (Sigma-Aldrich). Os controlos negativos foram obtidos pela adição de péptido de bloqueio para o anticorpo primário. As secções foram então lavadas com TBS e tratou-se com o kit de DAB-2 Solução (Invitrogen, Camarillo, CA, EUA) de acordo com o procedimento do fabricante. Os tecidos foram contrastadas com hematoxilina de Mayer.

Scoring de Resultados IHC coloração

Todas as seções IHC foram examinados e marcou sob um microscópio de luz (Olympus, Tóquio, Japão) por um patologista eo principal pesquisadores. Casos com pontuações discrepantes foram recodificados pelos mesmos ou adicionais marcadores para obter uma pontuação de consenso. NDRG1 de pontuação foi feito de acordo com o sistema de pontuação semi-quantitativa alemão amplamente utilizado, tendo em conta a intensidade de coloração e a percentagem de células de tumor coradas [27], [28]. níveis de coloração foram marcados como 0 (sem coloração), 1 (coloração fraca), 2 (moderada coloração) e 3 (coloração forte), com base na intensidade da coloração nas células tumorais. A percentagem de células de tumor coradas em cada secção foi contada e as secções foram marcados em conformidade ( 10% = 0, 10-25% = 1, 26-50% = 2, 51-75% 3 = 76-100% = 4). A pontuação imuno-histoquímica finais de cada secção de tecido do tumor foi determinado multiplicando as pontuações de intensidade com os escores de células tumorais marcadas positivamente, com o valor mínimo de 0 e uma pontuação máxima de 12. seções tumor com marcador para 1-4 foram considerados como negativos, Considerando secções de tumores com pontuação 5-12 foram considerados positivos.

Extração de proteínas e Immunoblotting

tecidos cancerosos frescos provenientes de 10 pacientes com CCR (fase III-IV) e as contrapartes não-tumorais emparelhados foram colhidas e as proteínas totais foram extraídas. As imunotransferências foram realizados de acordo com os protocolos estabelecidos [10]. As expressões de NDRG1 e GAPDH foram avaliadas com anticorpos primários contra NDRG1 (HPA006881, Sigma-Aldrich) e GAPDH (SC-32233; Santa Cruz, CA, EUA), seguida de incubação com conjugado com HRP anti-coelho (A9169) e anti anticorpos -mouse (A4416) (Sigma-Aldrich). Os sinais quimioluminescentes foram visualizados e capturado com o Sistema bioimaging (Bio-Rad, Hercules, CA, EUA) e analisadas utilizando o software no laboratório ™ Versão 4.0.1 (Bio-Rad). As experiências foram repetidas pelo menos três vezes, independentemente. Os níveis de expressão NDRG1 relativas em ensaios em triplicado foram normalizados para o nível de GAPDH.

acompanhamento pós-operatório Avaliação

Todos os pacientes foram acompanhados após a alta do hospital até a data de 10 de de dezembro de 2012. as recorrências foram confirmados clinicamente ou histologicamente se metástases à distância, a recidiva loco-regional (o crescimento do tumor restrito à anastomose ou da região de operação primária) e metástase incisional foram detectados. A duração a partir da data da operação para a data indicando o último follow-up avaliação, falha do tratamento /reincidência ou morte foi registrada.

Análise Estatística

Os dados foram coletados usando um banco de dados informatizado de acordo de pré-estudo de

Power

cálculo. Os dados quantitativos foram acessados ​​usando Student

t

-teste. dados de contagem foram avaliadas por Mann-Whitney, Qui-quadrado ou teste exato de Fisher quando apropriado. Recorrência e sobrevida global foram avaliados pelo método de Kaplan-Meier e comparadas pelo teste de log-rank. Análise de fatores preditivos de sobrevida foi realizada e as variáveis ​​associadas a recorrência e sobrevivência foram então usados ​​para a análise multivariada usando uma Cox modelo de regressão de riscos proporcionais de passo a passo. A significância estatística foi definida como

p Art 0,05. Todos os cálculos foram realizados com a versão do pacote de software SPSS 12.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, EUA).

Resultados

Demográfico, anatomopatológico e dados clínicos

Um total de 240 pacientes foram incluídos no estudo. A idade média do início da doença foi de 68, com a maioria dos pacientes com idades entre 60 e 80 (61,67%) (Tabela 1). Havia 132 (55%) pacientes do sexo masculino e 108 (45%) pacientes do sexo feminino envolvidos neste estudo, com IMC de 21,6 ± 5,8 kg /m

2 (16,3-31,7) (Tabela 1). Entre estes 240 pacientes, 136 pacientes foram combinadas com doença co-mórbida perioperatória (Tabela 1). Além disso, a localização do tumor na população do estudo também foi mostrado na Tabela 1.

investigações para amostras de pós-operatório indicou que a margem de ressecção proximal foi de 12,3 ± 5,9 cm e a margem de ressecção distai foi de 10,8 ± 4,1 cm nos casos de câncer de cólon. Em casos de câncer retal, a margem de ressecção proximal foi de 9,1 ± 2,7 cm eo margem de ressecção distal foi de 5,2 ± 1,9 cm (Tabela 2). margens de ressecção foram medidos em amostras frescas após a cirurgia sem fixação. A confirmação patológica pós-operatório indicou que não houve nenhum caso com margem de ressecção positiva. Além disso, os nódulos linfáticos foram obtidos a partir de cada amostra após a fixação e o número de gânglios linfáticos obtidos foi de 14 ± 6 (Tabela 2). Estes resultados apoiou o efeito dos procedimentos operacionais padronizados neste estudo.

pós-operatória estadiamento patológico foram realizados por um grupo de patologistas experientes. O tamanho médio do tumor foi de 4,6 ± 1,7 cm (1.5-9.0 cm) (Tabela 2). Os tumores foram definidos como bem diferenciado em 26 casos (10,83%), moderadamente diferenciado em 140 casos (58,33%), mal diferenciadas em 34 casos (14,17%) e carcinoma mucinoso em 40 casos (16,67%) (Tabela 2 ). As avaliações de infiltração tumoral (PT), metástase ganglionar (PN) e metástase (pM1) foram apresentados na Tabela 2. No total, o estadiamento TNM clínico indicou que 30 casos (12,5%) estavam em estágio I, 124 casos (51,67 %) no estágio II, 62 casos (25,83%) no estágio III e 24 casos (10%) em estágio IV (Tabela 2).

Todos os pacientes foram acompanhados, em conformidade com o protocolo de vigilância pós-operatória proposto . A duração total de acompanhamento foi de 3.8-83.9 meses, com um tempo médio de acompanhamento de 67,4 meses. De todos os pacientes inscritos, 72 casos (30%) foram confirmados como recidiva pós-operatória (Tabela 3). Além disso, a taxa de mortalidade global foi de 28,33% (68 casos), em que 66 casos (27,5%) eram tumor-relacionada e duas mortes foram causadas por hemorragia aguda cerebral e disfunção respiratória, respectivamente (Tabela 3). Nestes 66 casos, 45 casos (68%) foram NDRG1 negativo e 21 casos (32%) foram NDRG1 positiva (p = 0,000). Não foram observadas relações significativas entre NDRG1 e os critérios clínico-patológicos neste “grupo da morte” (Tabela 4).

NDRG1 Expressão foi reduzida no CRC tecidos Comparando aos tecidos emparelhados não-tumorais

expressão NDRG1 no CRC e tecidos não tumorais foi examinado por IHC e immunoblot. IHC coloração indicou que NDRG1 foi apresentada predominantemente no citoplasma em células normais e células de CRC nos tecidos não tumorais colorrectais emparelhados. NDRG1 expressão também foi observada na membrana celular (Figura 1). Em amostras de CRC, expressão NDRG1 foi negativo em 104 casos (43,33%), e positivo em 136 casos (56,67%). No entanto, nos tecidos não tumorais, NDRG1 mostrou uma expressão elevada em 196 casos (81,67%) e expressão negativa em 44 casos (18,33%). Isto indicou que a redução ou perda de NDRG1 pode facilitar tumorigênese no cólon.

(A-D) As amostras representativas com coloração HE (A) e expressão negativa NDRG1 (B) em tecido de cancro, bem como coloração HE ( C) e expressão positiva NDRG1 (D) no tecido não tumoral emparelhado. (E-H) As amostras representativas com coloração HE (E) e expressão NDRG1 positivo (F) no tecido do cancro, bem como coloração HE (G) e expressão positiva NDRG1 (H) no tecido não tumoral emparelhado. As setas pretas indicam expressão NDRG1 no citoplasma, enquanto que as setas indicam ocos expressão NDRG1 na membrana celular. Ampliação, 200 ×.

expressão NDRG1 foi também analisada por immunoblot em 10 tumores CRC na fase III-IV e 10 pares de tecidos não tumorais (Figura 2). Comparando o nível de NDRG1 nos tecidos não tumorais, tecidos de CRC 8 mostrou uma redução significativa da NDRG1 (

P

0,001-0,01). Somente dois tecidos CRC expressa um nível semelhante de NDRG1 à observada nos tecidos não tumorais emparelhados. Em geral, estes dados suportado ainda uma diminuição de expressão NDRG1 em tecidos avançados CRC

C:. Tecido não-tumoral; T: tecido do tumor. níveis NDRG1 foram expressos relativamente ao controlo de carga, de GAPDH. Os dados são típicos de 3-5 experiências e os valores de histograma são a média ± DP. **

p Art 0,01, ***

p

. 0,001, em relação ao respectivo grupo de controlo

Expression NDRG1 no CRC correlaciona-se com resultados de paciente

Uma vez que a expressão de NDRG1 CRC nos tecidos foi significativamente diminuída em comparação com que em tecidos não-tumorais, as correlações entre a expressão NDRG1 em CRC e as características clínicas foram analisados ​​e resumidos na Tabela 5. expressão foi detectada em NDRG1 136/240 (56,67%) casos de CRC. expressão NDRG1 foi inversamente correlacionado com a PT (

p

= 0,013), PN (

p

= 0,012), PM (

p

= 0,027), a diferenciação patológica (

p

= 0,042) e estágio TNM clínico (

p

= 0,011) (Tabela 5). Nossos dados revelaram que NDRG1 foi altamente expresso em tumores menos agressivos e tinha uma correlação inversa com os fatores de avaliação de prognóstico bem estabelecidos. Assim, NDGR1 poderia ser usado como um potencial biomarcador de prognóstico favorável no CRC.

A seguir, investigou a correlação de expressão NDRG1 à sobrevida do paciente. Como mostrado na Figura 3A, a taxa de sobrevida global em 5 anos no grupo positivo NDRG1 foi de 82,35%, enquanto que no grupo negativo NDRG1, a taxa de sobrevida global em 5 anos foi de 51,92%. Além disso, o tempo de sobrevida global estimada foi de 76,4 ± 2,4 meses no grupo positivo NDRG1 e 55,3 ± 4,1 meses no grupo negativo NDRG1. O grupo positivo NDRG1 mostrou uma melhor taxa de sobrevida global significativa em comparação com o grupo negativo NDRG1 (

p =

0,000) (Figura 3A).

(A) análise de sobrevivência global entre NDRG1 positivo e negativo grupo foi realizada pelo método de Kaplan-Meier. A população NDRG1 positiva teve significativa (

p

= 0,000) melhor sobrevida global do que a população NDRG1 negativo. (B) Análise de sobrevida livre de cancro de entre o grupo positivo e negativo NDRG1 foi realizada pelo método de Kaplan-Meier. A população NDRG1 positiva teve significativa (

p

= 0,000) melhor sobrevida livre de câncer do que a população NDRG1 negativo.

A taxa de sobrevida livre de câncer 5 anos no grupo positivo NDRG1 foi 80,89%. No entanto, este foi apenas 44,23% no grupo negativo NDRG1. Além disso, o tempo de sobrevida global estimada foi de 75,7 ± 2,6 meses no grupo positivo NDRG1 e 47,2 ± 4,8 meses no grupo negativo NDRG1. O grupo positivo NDRG1 mostrou uma melhor taxa de sobrevida livre de câncer significativa em comparação com o grupo negativo NDRG1 (

p =

0,000) (Figura 3B). Assim, NDRG1 poderia ser um biomarcador ideal para a sobrevivência e recuperação livre de doença em CRC paciente.

Expression NDRG1 pode ser considerado como um fator de risco para CRC Paciente

Como demonstrado na Tabela 6, univariada análise indicou que a diferenciação patológica (

p

= 0,008), PT

(p

= 0,030), pN (

p

= 0,001), pM (

p

= 0,000) expressão, estágio clínico (

p

= 0,001) e NDRG1 (

p

= 0,000) foram encontrados para ser fatores de risco independentes para a sobrevida global. O tamanho do tumor (

p

= 0,044), PT (

p

= 0,006), PN (

p

= 0,014), estadiamento clínico (

p

= 0,000) e NDRG1 (

p

= 0,000) foram considerados fatores de risco independentes para recorrência.

Da mesma forma, a análise multivariada (Tabela 7) indicou ainda que a pT (

p

= 0,002), pN (

p

= 0,007), pM (

p

= 0,004), estadiamento clínico (

p

= 0,032) e NDRG1 (

p

= 0,001) foram fatores de risco independentes para a sobrevida global. No entanto, apenas a fase clínica (

p

= 0,021) e NDRG1 (

p

= 0,003) foram os fatores de risco independentes para recorrência. Tomados em conjunto, NDRG1 é um biomarcador independente promissora para acessar a recidiva da doença e sobrevida em pacientes com CCR.

Discussão

Apesar dos avanços nas terapias cirúrgicas e não cirúrgicas para CRC, metástase e recorrência ainda permanecem os principais desafios para cirurgiões e oncologistas [4]. Recorrência e metástase representam a principal causa de morte em pacientes com CCR após cirurgias radicais [1], [29]. Os biomarcadores disponíveis clínicos, incluindo PCNA, CEA, CA19-9, p53, K-ras, MSI e VEGF, têm sido utilizados para a detecção precoce e siga-ups para a recidiva pós-operatória e metástase [25]. Embora estes biomarcadores podem fornecer informações úteis para predizer o resultado do paciente, há uma falta de boa relação linear com o CRC metástase e taxa de recorrência [25]. Por conseguinte, o desenvolvimento de novos biomarcadores de prognóstico com maior especificidade e sensibilidade para beneficiará pacientes com CCR na intervenção terapêutica.

A maioria de tumores sólidos humanos são caracterizados como alta taxa metabólica, a migração celular e capacidade de invasão activa e aberração de transduções de sinalização que desempenham papéis fundamentais na metástase [30]. Dadas estas características em células tumorais, estas células são cultivadas em um ambiente com uma escassez de oxigênio e nutrientes até a angiogênese do tumor ou implantação de novo ambiente [31], [32]. Assim, os genes induzidos por hipoxia, tais como NDRG1 [33], pode afectar a sobrevivência de células cancerosas e metástases. Nós e outros demonstraram que NDRG1 é um romance supressor de tumor metastático em células de tumor diferentes, incluindo CRC [9], [10], [12]. Neste estudo, a expressão de NDRG1 em amostras de pacientes de CRC foi investigada. Nós mostramos que a expressão NDRG1 foi significativamente reduzido nos tecidos CRC em comparação com os tecidos não tumorais emparelhados, apoiando ainda mais a função supressora de tumor um de NDRG1 em CRC como relatado anteriormente [11], [22]. Resultados semelhantes foram também observados no pâncreas, da próstata, da mama e tecidos de carcinoma esofágico, onde os níveis de mRNA e proteína NDRG1 foram ambos diminuiu em comparação com contrapartes normais [21], [34] – [38]. Em contraste, NDRG1 foi encontrado para ser altamente expressa em tecidos do fígado e do cancro do colo do útero e a sua expressão foi associada com a invasão vascular, metástase, e prognóstico pobre [13], [16], [17]. É plausível que o papel de NDRG1 na progressão do cancro é regulada pelos seus possíveis mutações na doença cancerosa diferente, levando a uma “perda de função” ou por o mecanismo genético intrínseca dos órgãos específicos.

Várias investigações têm foi relatado referindo-se aos mecanismos detalhados de NDRG1 na inibição da migração de cancro colo-rectal, invasão e metástase

in vitro

[9], [10], [12].

NDRG1

ARNm, bem como a expressão da proteína foi relatada a ser sobre-expressos em tecidos epiteliais normais do cólon humano [39]. Além disso, Li e Chen informou que NDRG1 desempenha um papel vital na metástase supressão do tumor e é frequentemente silenciada em cancros do cólon metastático [12]. Eles demonstraram uma correlação entre o aumento do H3S10p histona e silenciamento do gene NDRG1 na linha celular de cancro do cólon SW620, sugerindo um mecanismo potencial de repressão NDRG1 durante a metástase do cancro do cólon. Estudos recentes demonstraram novas funções de NDRG1 na inibição da transição epitelial-mesenquimal induzida por TGF-β (EMT) [9] e de filamentos de actina do conjunto de fibras de polimerização e o stress através de modulação da via ROCK1 /pMLC2 em linhas celulares de CRC [10]. Estes resultados revelaram potenciais mecanismos subjacentes a função supressora de tumor de NDRG1 no CRC observada neste estudo.

Estudos anteriores indicaram que a expressão NDRG1 diminuiu era fatores prognósticos desfavoráveis ​​independentes para a sobrevida de pacientes com estágio de alto risco II cancro colorectal [ ,,,0],22]. Em apoio desta, que incluiu 240 amostras de CRC com vários estágios TNM (I-IV) para investigar o potencial clínico de NDRG1 sozinho como um fator prognóstico independente. Nestes casos CRC que foram submetidos a procedimentos laparoscópicos, expressão NDRG1 inversamente correlacionada com pT, pN, o PM e estágio TNM. Curiosamente, a análise de Kaplan-Meier mostrou que pacientes com CCR com tumores NDRG1 negativos tiveram pior prognóstico significativa tanto na sobrevida global ea sobrevida livre de câncer. Assim, NDRG1 foi um fator prognóstico independente tanto para a sobrevida global e recorrência e sua positividade pode ser um biomarcador de prognóstico favorável para aplicação clínica em pacientes com CCR. Dada a importância dos outros biomarcadores conhecidos, incluindo PCNA, K-ras e MSI no CRC, é de relevância clínica para examinar a associação de NDRG1 com estes biomarcadores em pacientes com CCR.

Reconhecimentos

agradecem o Centro Municipal de Xangai para o Controle de Doenças Prevenção para investigações de seguimento dos pacientes. Agradecemos também especialmente Prof. Qian Zhao e Dr. Ying Zheng de Xangai Jiao Tong University School of Medicine por seus valiosos comentários e revisão do manuscrito.