Abstract

Objectivos

invasão e metástase são as principais razões para a morte por câncer de pâncreas e identificação de moléculas de sinalização que são especificamente utilizados na invasão do tumor é de grande importância. O objetivo deste estudo foi o de elucidar o papel do GEP100 na invasão de células do cancro do pâncreas e metástase eo mecanismo molecular correspondente.

Métodos

linhas de células estáveis ​​com GEP100 knocked-down foram estabelecidas através de transfecção GEP100 shRNA vector em células PaTu8988 e seleccionado por puromicina. qRT-PCR e Western blot foram realizados para detectar a expressão do gene. ensaio de Matrigel-invasão foi utilizado para detectar a invasão de células do cancro

in vitro

. metástase hepática

in vivo

foi determinada por injecção baço de linhas celulares indicadas seguido de ressecção do baço. estudo de imunofluorescência foi utilizado para detectar a localização intracelular da caderina-E.

Resultados

Nós descobrimos que o nível de proteína GEP100 expressão foi estreitamente relacionado com a capacidade invasiva de um painel de 6 humana diferente linhas celulares de cancro pancreático. A sub-regulação de GEP100 em células PaTu8988 diminuiu significativamente a actividade invasiva por ensaio de invasão de Matrigel, sem afectar a migração, invasão e viabilidade. A actividade inibido invasivo foi resgatada por sobre-expressão de cDNA de GEP100.

In vivo

estudo mostrou que metástases hepáticas diminuiu significativamente nas células PaTu8988 com GEP100 estavelmente knocked-down. Além disso, uma alteração morfológica epitelial semelhante, imitando uma mesenquimais para epiteliais de transição (MET) foi induzida por GEP100 a sub-regulação. A expressão da proteína E-caderina foi aumentada 2-3 dobras acompanhados por sua redistribuição para os contactos célula-célula, enquanto não se observaram alterações óbvias para o ARNm da E-caderina. Inesperadamente, o mRNA de Slug foi aumentado em GEP100 knock-down.

Conclusão

Estes resultados forneceram evidências importante que GEP100 desempenha um papel importante na invasão do cancro do pâncreas através da regulação da expressão de E-caderina eo processo de MET, indicando a possibilidade de se tornar um potencial alvo terapêutico contra o câncer pancreático

Citation:. Xie Cg, Wei Sm, Chen Jm, Xu Xf, Cai Jt, Chen Qy, et al. (2012) regulação negativa dos GEP100 provoca aumento nos níveis de E-caderina e inibe celular do cancro do pâncreas Invasion. PLoS ONE 7 (5): e37854. doi: 10.1371 /journal.pone.0037854

editor: Aamir Ahmad, Faculdade de Medicina da Wayne State University, Estados Unidos da América

Recebido: 23 Janeiro, 2012; Aceite: 30 de abril de 2012; Publicado em: 25 de maio de 2012