Abstract
Objectivo
O objetivo deste estudo foi avaliar sistematicamente a terapêutica eficácia de células assassinas induzida por citocinas (CIK) para o tratamento de câncer de pulmão de células não pequenas.
Materiais e Métodos
a busca computadorizada de ensaios clínicos randomizados para terapia baseada em células CIK era realizada. A sobrevida global, taxa de resposta clínica, foram avaliados os efeitos de avaliação imunológica e laterais.
Resultados
ensaios No geral, 17 randomizados controlados de câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) com um total de 1172 pacientes foram incluídos na presente análise. O nosso estudo mostrou que a terapia celular CIK melhorou significativamente a taxa de resposta objectiva global e sobrevivência em comparação com o grupo tratado com células não-CIK. células após CIK terapia combinada, observamos um aumento substancial percentagens de CD3
+, CD4
+, CD4
+ CD8
+, CD3
+ CD56
+ e NK, enquanto que significativa diminuições foram observadas na percentagem de células CD8
subgrupos de células T reguladoras (Treg) + e. Um aumento significativo em Ag-NOR foi observada no grupo de pacientes tratado com CIK (
P
= 0,00001), ao passo que o antigénio carcinoembrionário (CEA) foi mais susceptível de ser reduzida para um nível normal após o tratamento com CIK (
p
= 0,0008). Dos possíveis efeitos colaterais principais, apenas a incidência de febre no grupo CIK foi significativamente maior em comparação com o grupo que recebeu apenas quimioterapia.
Conclusão
A célula CIK terapia combinada demonstrou superioridade significativa no a sobrevida global, taxa de resposta clínica, e linfócitos T respostas e não apresentou qualquer evidência de eventos adversos maiores em pacientes com NSCLC
Citation:. Wang M, Cao JX, Pan JH, Liu YS, Xu BL, Li D, et al. (2014) Adoptive imunoterapia de citocinas induzida por Terapia Celular assassino no tratamento de não-pequenas células do cancro do pulmão. PLoS ONE 9 (11): e112662. doi: 10.1371 /journal.pone.0112662
editor: Nupur Gangopadhyay, da Universidade de Pittsburgh, Estados Unidos da América
Recebido: 27 de maio de 2014; Aceito: 23 de setembro de 2014; Publicação: 20 de novembro de 2014
Direitos de autor: © 2014 Wang et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Data Availability:. O autores confirmam que todos os dados subjacentes às conclusões estão totalmente disponíveis sem restrições. Todos os co-autores do artigo fazem todos os dados subjacentes às conclusões descritas no nosso manuscrito totalmente disponível sem restrições e estamos em conformidade com a política da PLOS. Todos os dados subjacentes aos resultados descritos no nosso manuscrito pode ser encontrado e estão livremente disponíveis para outros pesquisadores no corpo do manuscrito
Financiamento:. Este trabalho de pesquisa foi apoiada pela National Science Foundation Natural da China (Sem . 31171427 e 30971651 para Zheng-Xu Wang), Beijing Science Projeto de Tecnologia; As características clínicas e Pesquisas Aplicação da Capital (No. Z121107001012136 para Zheng-Xu Wang) e da Fundação de Pós-Doutorado da China (No. 20060400775 para Jun-Cao Xia). Zheng-Xu Wang desenhou a pesquisa; Jun-Xia Cao é uma das pessoas que realizaram a pesquisa e escreveu o jornal. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
o cancro do pulmão é a principal causa de mortalidade relacionada ao câncer em todo o mundo [1]. De acordo com o relatório anual de 2012 inscrição câncer chinesa, mais de 3 milhões de novos casos de câncer de pulmão serão diagnosticados a cada ano, e os cerca de 2,7 milhões de mortes por câncer de pulmão serão responsáveis por 13% das allmortalities. Não há dúvida de que a incidência e mortalidade do cancro do pulmão são muito prevalente [2]. Em pacientes com doença pulmonar avançada, as taxas de sobrevivência de 1 ano são tipicamente 35%, e as taxas de sobrevivência de 2 anos foram mostrados para se aproximar de 15% -20% em estudos recentes [3]. Na melhor das hipóteses, a taxa de sobrevida global em 5 anos de câncer localizado é de 15,9%, e apenas metade dos pacientes estendida em estágio tem uma chance de 3,7% de sobreviver 5 anos [4]. A maioria dos doentes com NSCLC foram localmente avançado ou cancro metastático na fase IIIB-IV no momento do diagnóstico, deixando apenas paliativos opções terapêuticas. Com base nos dados clínicos já existentes, a quimioterapia parece ter benefícios limitados e desgostosos prognósticos [5].
A nova abordagem de imunoterapia adoptiva de células depende de uma expansão ex vivo das células efectoras específicas do tumor autólogo antes da reinfusão no hospedeiro [6]. Desde o desenvolvimento da presente imunoterapia, um número de células efectoras imunológicas têm sido empregues para o tratamento do cancro e eliminar células tumorais residuais após a cirurgia, tais como células de CIK, células assassinas activadas por linfocina (Laks), linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), naturais células assassinas (NKS), e células de linfócitos T citotóxicos (CTL) [7], [8]. Entre eles, Laks, que são uma mistura de activadas por linfocina CD3
+ e linfócitos T CD3
-CD56
+ CD16
+ NK células, foram cultivadas com interleucina-2 recombinante (rIL-2 ) durante 3 dias, e CTLs foram isolados a partir dos próprios tecidos do paciente, incluindo células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), TILs, linfonodos de drenagem, ou PBMC após a vacinação com células tumorais autólogas irradiadas (ATC) [7], [8]. Depois de imunoterapia celular adotiva feito grandes progressos devido aos esforços de várias gerações de pesquisadores, as células CIK foram encontrados para possuir maior proliferativa e capacidades citolíticos do que as células NK ou LAK. CIK células são linfócitos citotóxicos de MHC-sem restrições que podem ser gerados a partir de PBMC in vitro e cultivados com a adição de IFN-γ, IL-2 e anticorpo monoclonal CD3 (CD3mAb). actividade citotóxica anti-tumoral é representado por meio de marcadores de superfície para ambas as células T (TCR-α /β, CD3) e células NKT (CD3
+ CD56
+) [9].
O primeiro ensaio clínico da terapia celular CIK para pacientes com câncer foi relatado em 1999 [10]. Logo depois, um número crescente de estudos clínicos têm sugerido que CIK terapia produz altamente convincentes respostas clínicas objectivas de vários carcinomas sólidos em comparação com outros efetores imunológicos. Uma análise dos resultados dos 792 pacientes com carcinomas sólidos indicaram que o tratamento com células CIK está associada com um prolongamento significativo da taxa de controlo tempo médio de sobrevivência e a doença [11]. Recentemente, os dois ensaios clínicos chineses com 563 pacientes e ensaios clínicos registrados internacionais com 426 casos de terapia celular CIK forneceram evidências para uma aplicação clínica alargada com base em uma avaliação positiva do imunológicas e respostas clínicas [12], [13]. Algumas revisões sistemáticas têm analisado terapia celular CIK e mostrado que ele seja seguro e eficaz para o tratamento de carcinoma de células renais, carcinoma hepatocelular e câncer de cólon [14] – [16]. Além disso, a terapia celular CIK foi percebido para ter benefícios significativos de sobrevivência em alguns ensaios clínicos NSCLC [17] – [22]. Estes estudos mostraram que a imunoterapia de cancros com células CIK pode melhorar as respostas imunológicas e clínicas, promover a qualidade de vida (QV) de pacientes com câncer e prolongar a sua vida se estende sob certas condições. No entanto, não há nenhuma revisão sistemática para avaliar a eficácia terapêutica de terapias celulares CIK combinadas com quimioterapia em NSCLC; por isso, foi realizada uma meta-análise sistemática da terapia celular CIK com ensaios clínicos randomizados em NSCLC. Nossos ensaios clínicos em larga escala de imunoterapia celular CIK analisados sistematicamente a eficácia clínica e segurança considerando a sobrevida global, a resposta clínica, as avaliações imunológicos e efeitos colaterais.
Métodos
O desenho do estudo, estratégia de pesquisa e da elegibilidade critérios
os estudos relevantes foram identificados através de pesquisa PubMed, o Centro Cochrane Register of Controlled Trials, Science Direct, Embase, e Infra-estrutura China National Conhecimento para ensaios clínicos randomizados (RCT) nas mais recentes décadas. A estratégia de busca incluiu ‘câncer de células não pequenas do pulmão, “as palavras-chave’ imunoterapia adotiva ‘e’ adotivos braços imunoterapia de citocinas induzida células assassinas ‘sem tratamento adjuvante em pacientes com NSCLC, exceto aqueles que tinham sofrido a mesma quimioterapia, em comparação com o controle de armas . Além disso, procurou manualmente um site de ensaios clínicos para estudos em andamento. Foram pesquisados ’cancro do pulmão de não-pequenas células “palavras-chave e’ citocinas induzida células assassinas” no site https://www.clinicaltrials.gov/. Os ensaios clínicos registrados com citações de publicação são exibidos na parte inferior do texto na guia View completa de um registo de estudo, sob a rubrica mais informações. listas de referência dos estudos previamente publicados e artigos de revisão pertinentes foram examinados para outros estudos elegíveis. Não há restrição de linguagem foi aplicada. Artigos de revisão e teses de pós-graduação também foram examinados para resultados publicados. Além disso, realizamos pesquisas manuais em listas de referência e actas de conferências da Sociedade Americana de Oncologia Clínica (ASCO) reunião anual e da Conferência Europeia do Cancro (ECCO). Foram excluídos os resumos que nunca foram posteriormente publicados como artigos completos e estudos em animais e linhas celulares.
critérios de seleção de dados
A extração de dados foi conduzido de forma independente por dois revisores (Min Wang e Jun-Xia Cao ) utilizando uma abordagem padronizada. O desacordo foi julgado por um terceiro revisor (Zheng-Xu Wang) depois de se referir de volta para as publicações originais. Os critérios de selecção foram os seguintes: (1) estudos de língua Inglês em ensaios clínicos em humanos com os pacientes em todas as fases de NSCLC foram incluídos; (2) RCT com imunoterapia baseada em células CIK combinado com quimioterapia contra quimioterapia sozinha para o tratamento de NSCLC foram incluídos; (3) todos os ensaios aprovados pelo comitê de ética local e no qual todos os pacientes assinaram um termo de consentimento específico do estudo antes da entrada no estudo foram incluídos; (4) estudos de caso, artigos de revisão, e estudos que envolvem menos de 10 pacientes foram excluídos; (5) doenças metabólicas descontrolada, a função hepática insuficiente, disfunção renal, desordens neurológicas e outras doenças infecciosas foram excluídos do estudo; e (6) foram excluídas as amostras de sangue que receberam qualquer quimioterapia ou radioterapia no prazo de um mês antes do tratamento.
A qualidade global de cada incluídos papel foi avaliada pela Escala de Jadad [23]. Alguns dos principais critérios foram utilizados como um sistema de classificação seguinte: (1) a randomização; (2) ocultação de alocação; (3) cegueira; (4) perdeu para acompanhamento; (5) ITT (intenção de tratar); e (6) da linha de base. Nós também usamos um gráfico de funil para avaliar o viés de publicação.
Definição de medidas de resultados
Os desfechos clínicos primários em RCT para terapias contra o câncer empregadas as medidas de tempo de sobrevivência médio (MST) e progressão sobrevida livre (PFS). O tempo até à progressão (TTP) não pode considerar aqueles pacientes que morrem por outras causas, mas é frequentemente usado como equivalente a PFS. Os desfechos secundários foram a taxa de resposta clínica, incluindo a taxa de resposta objectiva (ORR) e taxa de controle da doença (DCR). A ORR foi definido como a soma das taxas parcial (PRS) e as taxas de resposta completas (CRS), e a DCR foi definido como a soma de a doença estável (SD), PR e CR, de acordo com os critérios da Organização Mundial de Saúde. Os efeitos colaterais e toxicidade foram classificados de acordo com os critérios do National Cancer Institute Common toxicidade. Os dados foram obtidos diretamente dos artigos ou calculado utilizando os dados representados graficamente em artigos usando o Photoshop e um olheiro gráfico software digitalizador.
A análise estatística
A análise foi realizada utilizando Review Manager Version 5.0 ( Nordic Cochran Centre, Copenhagen, Dinamarca). A heterogeneidade foi avaliada para determinar qual o modelo deve ser utilizado. Para avaliar a heterogeneidade estatística entre os estudos, a Q-teste de Cochran foi realizada usando um limiar de significado predefinido de 0,1. Os efeitos do tratamento são reflectidas pelo odds ratio (OR), que foram obtidos utilizando um método relatado por Mantel e Haenszel. Para avaliar se os resultados dos estudos foram homogêneos, foi realizado o teste Q de Cochran. Também calculamos a quantidade I
2, que descreve a porcentagem de variação entre os estudos que se deve à heterogeneidade em vez de oportunidade. A OR foi obtida usando um modelo de efeito fixo sem heterogeneidade estatisticamente significativa; Caso contrário, foi utilizado um modelo de efeitos aleatórios. Os valores de p 0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Todos os valores P relatadas foram em frente e verso.
Resultados
Seleção dos ensaios
As pesquisas de dados rendeu 167 referências, 91 dos quais foram considerados inelegíveis por razões diferentes ( 44 não-CIK imunoterapia, analisa 19 cancer múltipla, 18 avaliações e 10 modelos animais). Os restantes 76 artigos foram ainda avaliados, e 59 ensaios foram excluídos devido à língua, a falta de um ECR, e dados insuficientes. As finais 17 artigos foram incluídos na meta-análise com ensaios clínicos randomizados de terapia baseada em células CIK para o tratamento de NSCLC (Figura 1, veja também a lista de verificação S1).
A avaliação da qualidade 17 estudos estão resumidos na Tabela 1. também utilizado um gráfico de funil para avaliar o viés de publicação. Em nossa análise, a sobrevida global, taxa de resposta clínica e os efeitos colaterais sofridos baixo publicada viés. No entanto, a avaliação imunológica e subgrupos de células T observada uma alta viés publicada (Figura 2), que demonstrou que o nó da linha vertical não atende a uma horizontal no ponto médio por análise com Review Manager versão 5.0.
características de CIK baseada em células terapia
as características dos 17 ensaios estão listados na Tabela 2. a 17 seleccionado ensaios com um total de 1172 pacientes com NSCLC na fase I-IV foram incluídos em a presente análise, e 90% deles incluídos metastático ou localmente avançado NSCLC. As idades inscritos tinham entre 28 e 82 anos de idade, com uma idade média superior a 50.
Em todos os 17 ensaios, o braço de controle foi quimioterapia ou cyberknife sozinho, enquanto o braço de tratamento foi quimioterapia ou cyberknife combinada com a terapia celular CIK. Em cada ensaio, todos os pacientes no grupo de CIK foram tratados de forma idêntica aos do grupo de quimioterapia em termos de doses de quimioterapia e ciclos. Em todos os 17 ensaios de o braço de tratamento, a maior parte dos pacientes foram tratados com células CIK mais imunoterapia DC combinada com a quimioterapia, embora os pacientes em quatro dos ensaios foram injectados com células CIK combinadas com quimioterapia [6], [30], [38 ], [39]. A maioria dos grupos CIK DCs utilizado sem pulso, isto é, as DCs foram induzidas a única tornam-se maduros antes de co-cultura com células CIK. Em 4 de 17 estudos, as DCs foram injetados ao ser pulsadas com antígenos de câncer de pulmão ou lisado de tumor [17], [22], [33], [37]. Algumas das citoquinas necessárias foram fornecidos em uma cultura de CIK, IL-2, IFN-γ, e CD3mAb em uma variedade de meios de cultura. Os pacientes receberam infusões celulares de 1 × 10
9-2 × 10
12 células por curso, principalmente em uma ordem de 10
9 de magnitude. A maioria dos tratamentos com infusões repetidas de células CIK foram administrados durante pelo menos 2 semanas, e alguns deles durou mais de 1 mês. A rota injetada para imunoterapia foi principalmente por via intravenosa para células CIK e, por injecção subcutânea de DCs (File S1 e S2 arquivo).
Survival
Os pacientes no grupo CIK tinha significativamente prolongada MST comparação com aqueles no grupo não-CIK (95% CI -7,45 a -0,66,
P
= 0,02) (Tabela 3). Os resultados da análise reunidas mostrou que o braço CIK alargado significativamente a sobrevivência global no final do seguimento, em comparação com o grupo não-CIK (Tabela 4). Três subgrupos de pacientes do grupo de terapia baseada em células CIK a sobrevivência de 1 ano, a sobrevivência de 2 anos, e sobrevida em 3 anos apresentaram benefícios significativos de sobrevivência em comparação com os pacientes no grupo de não-CIK (OR CI 0,64, 95% 0,46 -0,91,
p
= 0,01; OR 0,36, 95% CI 0,22-0,59,
p Art 0,0001; OR 0,37, 95% CI 0,20-0,70,
p
= 0,002, respectivamente), o que foi consistente com a sobrevivência global (OR 0,50, IC de 95% 0,39-0,64,
P
0,0001). Com base nos resultados da nossa análise, o subgrupo sobrevivência a curto prazo mostrou uma diferença significativa nas sobrevivências de 1 ano e dois anos. A sobrevivência de 1 ano para os 282 pacientes do grupo de CIK foi de 56%, ao passo que uma taxa de sobrevivência ligeiramente inferior de 1 ano foi determinada para o grupo não-CIK (45% de 278 pacientes). Uma diferença significativa foi também demonstrada no grupo de sobrevivência de 2 anos, o que era 43,22% para 236 pacientes do grupo de CIK e 27,47% de 233 doentes sem o tratamento com células CIK. As taxas de sobrevivência a longo prazo do grupo CIK mostrou uma ligeira diminuição em comparação com a taxa de sobrevivência a curto prazo; no entanto, foi encontrada uma diferença significativa nas taxas de sobrevivência a longo prazo em comparação com o grupo não-CIK (
p
= 0,002).
No que diz respeito a mediana PFS, o grupo CIK não produziu nenhuma melhoria significativa em comparação com os grupos de controle correspondentes (IC 95% -13,27 a 3,89,
p
= 0,28), enquanto que o TTP mediano claramente prolongou o tempo mediano até à progressão da doença no CIK grupo (IC 95% -2,70 a -0,47, p
= 0,005) (Tabela 3).
A taxa de resposta
O grupo de terapia baseada em células CIK mostrou resultados favoráveis quando submetido a ambos análise do ORR (OR 0,58, 95% CI 0,44-0,78,
p
= 0,00003) eo DCR (OR 0,41, 95% CI 0,29-0,58,
p
0,0001), em comparação com os braços de controlo correspondentes. Com nenhuma heterogeneidade significativa, um modelo de efeito fixo foi utilizada nas análises Orr e DCR (Tabela 4). teste Q de Cochran resultou em um P-valor estatisticamente significativa, ea quantidade correspondente para I
2 foi de 0% para ambos os grupos, indicando que não houve evidência de heterogeneidade entre os estudos individuais.
avaliação imunológica de subgrupos de células T
Quando a heterogeneidade foi observada nos subgrupos de células T, foi aplicado um modelo de efeitos aleatórios para a análise global e subgrupo de avaliações imunológicas de células T (Tabela 5). Os resultados demonstraram um aumento substancial proporção de CD3
+ (MD 8,21, IC 95% 5,79-10,64,
p Art 0,00001), CD4
+ (MD 5,59, 95% CI 4.10- 7,07,
p Art 0,00001), CD4
+ CD8
+ (MD 0,49, 95% CI ,37-,61,
p Art 0,00001), CD3
+ CD56
+ (MD 7,80, 95% CI 2,61-12,98,
p
= 0,003) e células NK (CD3
-CD16
+ CD56
+) (MD 6,21, 95% CI 2,25-10,17,
p
= 0,002), enquanto que a proporção de CD3
+ CD8
+ (MD 2,55, 95% CI -2,46 a 7,56,
p
= 0,32) gerado nenhuma melhoria estatística após o tratamento CIK. Além disso, a análise conjunta mostraram uma diminuição significativa no percentual de CD8
+ (MD -2,75, IC 95% -3,88 a -1,63,
p Art 0,00001) e Treg (CD4
+ CD25
+ CD127
-) (MD -1,26, IC 95% -1,94 a -0,58,
p
= 0,0003) subgrupos após o tratamento com a terapia baseada em células CIK
.
avaliação imunológica de expressão Ag-NORs e CEA
Devido aos dados limitados apresentadas nos documentos publicados, apenas algumas das avaliações imunológicos, por exemplo, Ag-NOR (regiões organizadoras de nucléolos argyrophilic) , e NSCLC marcadores tumorais, por exemplo, CEA, foram submetidas a análise. A heterogeneidade foi observada, e um modelo de efeitos aleatórios foi, portanto, aplicada para a análise dos subgrupos e a análise global. A análise mostrou que o grupo CIK melhorou significativamente a atividade imunológica dos linfócitos T do paciente, mostrando melhor Ag-NOR (MD -0,71, IC 95% -0,94 a -0,47,
p
= 0,00001), em comparação com a não grupo terapia -CIK (Tabela 6). O nível de expressão de CEA na análise baseou-se em dois ensaios [38], [39]. O CEA no plasma foi significativamente reduzida no grupo CIK em comparação com o grupo não-CIK (MD 3,96, IC de 95% 1,64-6,28,
P
= 0,0008) (Tabela 6).
toxicidade e reacções adversas
os pacientes no grupo de CIK observados menos efeitos colaterais graves de quimioterapia, tais como menos casos de grau III e IV leucopenia, as reacções adversas do tracto gastrointestinal, anemia e disfunção hepática (Figura 3). Sem heterogeneidade significativa, foi utilizado um modelo de efeito fixo (método de Mantel-Haenszel) para a análise efeito colateral.
Alguns efeitos adversos graves foram observadas significativamente menos frequentemente no grupo CIK. Devido à falta de heterogeneidade, foi utilizado o modelo de efeito fixo.
Depois de transfusão de glóbulos CIK, a maioria dos pacientes desenvolveram uma febre ligeira, entre 37,5 e 39 graus, mas os pacientes recuperados dentro de um alguns dias sem efeitos colaterais graves. Quatro tipos de sérios efeitos colaterais de quimioterapia pode conduzir a reacções tóxicas em ambos os grupos de pacientes. A análise conjunta mostrou que os efeitos adversos de reacções adversas gastrointestinais (OR 1,77, 95% CI 1,20-2,59,
p
= 0,004) e anemia (OR 2,80, 95% CI 1,37-5,73,
p
= 0,005) gerou uma diferença significativa, com menos episódios no grupo CIK. Leucopenia e disfunção hepática foram observadas com menor frequência nos pacientes que receberam o tratamento CIK, mas nenhum conjunto de dados exibidos uma diferença significativa em comparação com o grupo não-CIK (OR 1,59, 95% CI 0,93-2,72,
p
= 0,09; OR 1,11, 95% CI 0,60-2,06,
p
= 0,73)
Discussão
a imunoterapia tem beneficiado de uma maior compreensão da imunologia do tumor e genética.. Um número de estudos confirmaram que a imunoterapia é uma opção de tratamento seguro e praticável para doentes com cancro [12] – [16]. Portanto, a terapia convencional combinada com imunoterapia adoptiva de células está associado a um prognóstico favorável em comparação com apenas quimioterapia [18]. A análise foi concebida para elucidar os efeitos da terapia de célula CIK sobre a melhoria da eficácia terapêutica e tratamento de doentes com NSCLC segura com base numa variedade de índices de avaliação, incluindo os resultados clínicos de sobrevivência, as taxas de resposta clínica e efeitos adversos imunofenótipos.
no nosso estudo, 17 ensaios foram seleccionadas para a análise da cultura de células CIK e os regimes de tratamento. A maioria dos ensaios recolhidos 50-100 ml de sangue periférico autólogos e separadas as células mononucleares de mais de indução. Algumas das citoquinas necessárias foram fornecidos às culturas de células CIK, tais como IL-2, IFN-γ, e CD3mAb, em 1640 ou meio isento de soro. Com base no nosso estudo, a maioria dos tratamentos com infusões repetitivas de 1 × 10
9-2 × 10
12 CIK células foram administrados durante pelo menos 2 semanas em cada segundo dia, durante um mínimo de dois ciclos de tratamento. No entanto, as diferentes doses e ciclos de transfusões de células CIK podem levar a diferentes resultados e respostas imunes.
No presente estudo, o grupo de terapia baseada em células CIK foi associado com resultados favoráveis com base em uma avaliação tanto do sobrevida global e respostas clínicas (Tabela 4). A sobrevivência de 1 ano (OR 0,64, 95% CI 0,46-0,91,
p
= 0,01), sobrevida de 2 anos (OR 0,36, 95% CI ,22-,59,
p
0,0001), e 3 anos de sobrevida (OR 0,37, 95% CI 0,20-0,70,
p
= 0,002) mostraram prolongou significativamente durações no grupo de terapia celular CIK. A DCR favorável e ORR também foram observados em pacientes recebendo terapia com células CIK (p 0,0001). O MTTP e MST também mostraram melhorias significativas no grupo CIK (
p
= 0,005,
p
= 0,02). células CIK, que também são conhecidas como células NKT, apresentam tanto as actividades de citotoxicidade de linfócitos T e a atividade do tumor-matança restritiva por não-MHC das células NK, entre os quais os principais efetores são CD3
+ CD56
células + [7]. No total, quatro de 17 ensaios DCs pulsadas com antigénios do cancro do pulmão ou de lisado de tumor utilizado, ao passo que 9 ensaios utilizados DCs maduras co-cultivadas com células CIK (Tabela 2). DCs possuem actividades apresentadoras de antigénio na superfície extracelular e são capazes de activar a proliferação de células T e células CIK. Portanto, considerando a fraca imunogenicidade da infusão de NSCLC, CIK com um imunoadjuvante ou antígeno DCs pulsadas específicas do tumor aumentou as respostas imunes [24]. Portanto, a terapia baseada em células CIK mesmo agindo através completamente diferentes mecanismos para combater as células cancerosas, pode conduzir a uma melhoria nas respostas objetivas clínicos com base na avaliação de critérios RECIST tradicionais [40].
A resposta imune humana contra as células cancerosas é principalmente dependente de imunidade celular. Estudos anteriores mostraram que as proporções numéricas de subconjuntos de linfócitos T no sangue periférico estão desordenados em pacientes com tumores [17]. No presente estudo, observou-se uma percentagem substancialmente mais elevada de CD3
+ e CD4
+ (
p Art 0,001), a proporção de CD4
+ CD8
+ e CD3
+ CD56
+ (
p Art 0,001) e células NK (
p
= 0,002), mas uma diminuição significativa no percentual da CD8
+ (
p Art 0,001) e Treg (
p
= 0,0003) subgrupos após o tratamento DC-CIK por meta-análise. Muitos estudos têm demonstrado que as células CIK possuem forte citotoxicidade contra uma variedade de populações de linfócitos T, entre os quais CD3
+ CD56
+ é o principal responsável pela actividade anti-tumoral sem restrições MHC [8]. Além disso, o número de células CD4
+ e CD8
+ células T desempenha um papel importante ao afectar os resultados clínicos em NSCLC. A activação do
+ células T CD4 contribui para a secreção de citoquinas reguladoras imunes, incluindo IL-2, IL-12, e IFN-γ, que por sua vez facilitar uma elevação na citolítica
+ respostas de células CD8 T , induzindo assim a morte de células de tumor [25]. A activação do
+ células T CD4 + também aumenta a actividade de morte de células NK e a actividade fagocítica de macrófagos, desencadeando uma resposta imunitária humoral que leva à produção de anticorpos, assim CD4
+ e CD8
+ têm um relação sinérgica nas respostas imunes. Nossa meta-análise demonstrou que CD3
+, CD4
+, CD4
+ CD8
+, CD3
+ CD56
+ e as células NK foram aumentadas após o tratamento DC-CIK, portanto, o que sugere a melhoria da função imunológica após imunoterapia nos pacientes com NSCLC.
Além disso, devemos notar que CD8
+ células T não aumentaram significativamente após a imunoterapia, que também mostrou os imunofenótipos variadas comparação com os resultados de outras avaliações de células T por tratamento CIK em diferentes carcinomas sólidos [11] – [13]. Naïve CD4
+ linfócitos T sofrem diferenciação de células na presença do antigénio, as moléculas co-estimuladoras e citocinas, e estas células podem ser divididos em vários grupos principais: de Th1, Th2 e as células Treg [26]. ajudante células Th1 são os efetores da imunidade do hospedeiro contra bactérias intracelulares e protozoários. Estas são provocadas pela IL-12, IL-2 e o efector de citoquina IFN-γ. As principais células efectoras de imunidade de Th1 são os macrófagos, células T CD8 +, as células B de IgG, e células T CD4. células Th2 helper são os efetores da imunidade do hospedeiro contra helmintos multicelulares [26]. As principais células efectoras são eosinófilos, basófilos, e mastócitos, assim como células B de IgE e IL-4 /IL-5 de células T CD4 [27]. As células T reguladoras expressar FoxP3 e produzir TGF-β e CD4
+ CD25
+ CD127
– subgrupos T para suprimir respostas imunes contra Th1 e Th2. Além disso, as células tumorais também exprimem altos níveis de CD4
+ CD25
+ células T reguladoras, que ajudam citocinas imunossupressoras directas para o microambiente do tumor [28], de modo que a diminuição da célula Treg podem ser úteis para retirar o imunossupressor para efectuar a doentes com NSCLC, e os nossos resultados também demonstraram um número menor de células T reguladoras. Maiores proporções de Treg e em proliferação de CD8
+ células T foram ambos associados com fraca sobrevivência no cancro malignidades do pulmão [41], sugerindo que a DC-CIK imunoterapia pode desempenhar um papel no reforço da função imunitária de doentes com NSCLC.
Imunoterapia exerce o seu efeito sobre a resposta imune celular e requer tempo de citocinas imunitárias para alterar a carga tumoral ou a sobrevivência tempo. Em nosso estudo, também avaliamos linfócitos T atividade imunológica por Ag-NORs
in vivo
eo NSCLC marcador tumoral CEA. O aumento significativo na Ag-NOR (
P
= 0,00001) e a redução do teor de CEA (
P
= 0,0008) observada no grupo CIK contribuiu para a prevenção da recorrência de curto prazo e melhoria das respostas clínicas. Também analisamos os resultados de sobrevivência clínica, taxas de resposta clínica, imunofenótipos e marcadores tumorais, e temos a hipótese de que as células CIK lutar com células tumorais de várias formas diferentes, incluindo interações diretas celulares (Fas via /FasL, granzima B), a secreção de citocinas (IFN-γ, TNF-α, IL-2) e anticorpos, e regulamentos da resposta imune (variações de linfócitos T) [29]. Em todos os, a meta-análise avaliou uma variedade de sub-grupos de células T, e as diferenças entre as citoquinas utilizados para imunoterapia, e verificou-se que os resultados foram consistentes com os resultados terapêuticos clínicos, tais como a sobrevivência global e da resposta clínica.
em nossa análise, a terapia baseada em células CIK produziu um resultado decepcionante na febre não-infecciosa (P 0,0001) e foi observado nenhum outro efeito colateral importante. A análise conjunta mostrou que os efeitos adversos de reacções adversas gastrointestinais (
p
= 0,004) e anemia (
p
= 0,005) gerado diferenças significativas com menos episódios no grupo CIK. Assim, a imunoterapia celular CIK com quimioterapia tem provado ser um método viável e eficaz para o tratamento de NSCLC, sem efeitos colaterais graves.
limitação do estudo
Os 17 ensaios incluídos nesta meta- análise foram selecionados com um RCT para melhorar a confiabilidade estatística. Para evitar distorções na identificação e seleção de ensaios, que minimizou a possibilidade de com vista para artigos publicados em toda a medida. Apesar de termos seleccionado utilizando RCT, tanto quanto possível, existem alguns critérios importantes que não receberam uma boa nota sob a escala de Jadad, como a ocultação da alocação e da intenção de tratar, ou seja, nosso estudo pode ter um risco moderado de viés. Nós também usamos um gráfico de funil para avaliar o viés de publicação. Em nossa análise, a sobrevida global, taxa de resposta clínica e os efeitos colaterais sofridos baixo publicada viés; no entanto, a avaliação imunológica e subgrupos de células T observada uma alta viés publicado. Portanto, existem algumas limitações para o nosso estudo. Primeiro, a terapia baseada em células CIK-se uma maior preocupação para estudiosos chineses; portanto, todos os 17 estudos selecionados foram da Ásia, porque há uma falta mundial de qualquer investigação multinacional de grande amostra multicêntrico clínica sobre terapia celular CIK para NSCLC. Em segundo lugar, alguns dos documentos tiveram de ser excluídas devido à falta de um braço de controle durante o delineamento experimental; No entanto, alguns dos papéis produzidos ainda melhor prognóstico após o tratamento CIK. Em terceiro lugar, os nossos dados analisados foram selecionados a partir de artigos publicados em vez de desenhados primeira mão de registros de pacientes, potencialmente causando uma superestimação dos resultados analíticos.