Abstract

O câncer gástrico (GC) é uma das neoplasias malignas mais comuns em todo o mundo. No entanto, pouco se sabe sobre o processo molecular pelo qual esta doença desenvolve-se e progride. Este estudo investigou correlações entre a expressão do fator de transcrição nuclear SOX4 e vários parâmetros clínico-patológicas, bem como a sobrevida dos pacientes. Os níveis de expressão de SOX4 nuclear foram analisados ​​por imuno-histoquímica; os dados composta por tecidos gástricos de 168 pacientes com GC. Emparelhado

t

testes foram utilizados para analisar as diferenças na expressão SOX4 nuclear entre tecidos tumorais e não tumorais de cada paciente. Dois-atado Χ

2 testes foram realizados para determinar se as diferenças na expressão SOX4 nuclear e os parâmetros clínico-patológicas foram significativas. endpoints Time-to-evento para os parâmetros clínico-patológicas foram plotados utilizando o método de Kaplan-Meier, ea significância estatística foi determinada por meio de testes de log-rank univariadas. Cox modelo de riscos proporcionais foi usado para a análise multivariada para determinar a independência dos efeitos prognóstico da expressão SOX4 nuclear. Superexpressão de SOX4 nuclear foi significativamente correlacionada com profundidade de invasão (

P Art 0,0001), estado nodal (

P

= 0,0055), metástases à distância (

P

= 0,0195 ), fase (

P

= 0,0003), ea invasão vascular (

P

= 0,0383). Os pacientes que apresentaram elevados níveis de expressão de SOX4 nuclear alcançado uma taxa de sobrevivência significativamente mais pobres livre de doença, em comparação com pacientes com baixos níveis de expressão SOX4 (

P

= 0,003). A análise de regressão univariada de Cox mostrou que a superexpressão de SOX4 nuclear era um marcador de prognóstico claro para GC (

P

= 0,004). A sobre-expressão de SOX4 nuclear pode ser utilizado como um marcador para prever o resultado de doentes com GC

citação:. Fang C-G, Hseu Y-C, Lin Y-F, Hung S-T, Tai C, Uen Y-H, et al. (2012) Clínica e Associação prognóstico do Fator de Transcrição SOX4 no câncer gástrico. PLoS ONE 7 (12): e52804. doi: 10.1371 /journal.pone.0052804

editor: Anthony WI. Lo, da Universidade Chinesa de Hong Kong, Hong Kong

Recebido: 12 de setembro de 2012; Aceito: 21 de novembro de 2012; Publicação: 20 de dezembro de 2012

Direitos de autor: © 2012 fang et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho foi apoiado por duas bolsas (CMFHR10020 e CMFHR10064) de Chi Mei Medical Center (www.chimei.org.tw). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

a incidência de câncer gástrico (GC) diminuiu entre 1940 s e 1980 s no mundo ocidental, mas GC permanece extremamente difundida em todo o mundo. Ela afeta cerca de um milhão de pessoas por ano e é a segunda causa mais frequente de morte por câncer [1], [2]. A grande variação na incidência é evidente em todos os continentes [1]. Na Ásia e em partes da América do Sul, GC é o tumor maligno epitelial mais comum e é a principal causa de mortes relacionadas ao câncer. Em Taiwan, as estatísticas do governo emitidos em 2011 classificou GC como o sexto doença maligna mais frequentemente diagnosticado, resultando em mais de 2000 mortes por ano (https://www.doh.gov.tw/statistic/index.htm). avanços consideráveis ​​têm sido feitas em técnicas cirúrgicas e quimioterapia, que melhoraram o tratamento de GC, mas a taxa de cura para os casos avançados permanece baixa e a morbidade permanece elevada [3], [4]. Uma compreensão mais completa das características patogênese e biológicos da doença é necessário para melhorar ainda mais os métodos de tratamento.

Entre os marcadores prognósticos agora disponíveis para GC, o mais importante é American Joint Committee on Cancer (AJCC) estágio determinada pela profundidade da invasão, o envolvimento dos gânglios linfáticos e metástases à distância. No entanto, o prognóstico varia até mesmo entre pacientes no mesmo estágio. Assim, a busca de marcadores biológicos específicos para identificar subgrupos de pacientes que são propensos a experimentar um curso particularmente agressiva da doença está em curso [5]. Em décadas recentes, vários estudos têm sugerido que alterações genéticas podem desempenhar um papel no desenvolvimento e progressão de [6] GC. Estudos em patologia molecular pode ajudar na compreensão da patogênese da doença e também pode revelar marcadores moleculares de prognóstico úteis. Alguns marcadores prognósticos biológicos sugeridos incluem superexpressão da proteína quinase CK2, vav3, mesothelin, e do receptor do factor de crescimento epidérmico [7] – [11].

Nos seres humanos, a região determinante do sexo Y box (SRY) família, também referida como a família SOX, compreende 20 factores de transcrição altamente conservadas que desempenham papéis importantes no desenvolvimento. Estes factores de transcrição são definidos por uma sequência de assinatura de domínio conservado no grupo de alta mobilidade (HMG) de ligação a DNA (DBD) [12], [13]. SOX4 é uma proteína de 47 kDa que é codificada por um único gene exão, que é altamente conservada em vertebrados. Em ratinhos, SOX4 é especificamente expresso no ovário, testículo, glândula mamaria, e o timo e em linhas de células linfocíticas de pré-B de rato [14] e t. Além disso, SOX4 é essencial para o desenvolvimento do coração, linfócitos, e timócitos, e ratinhos SOX4-nulo morrem de defeitos cardíacos [15]. A capacidade proliferativa das células progenitoras de células-B é severamente reduzida em células de ratinhos knockout SOX4 [16].

A importância clínica de SOX4 ganhou atenção crescente nos últimos anos, com numerosos relatos sugerindo que SOX4 pode contribuir para tumoral progressão. Três estudos independentes triagem para oncogenes importantes mostrou que SOX4 é freqüentemente alterada através de inserções retrovirais [17] – [19]. O vírus da leucemia murina tipicamente SOX4 alvo, e estabilizado a mensagem SOX4 para produzir os linfomas de células B que exibiu um aumento dos níveis de mensagem SOX4 [19]. O aumento da expressão SOX4 está associada com tumores da bexiga, da próstata, do cólon e, e com tumores do pulmão de não-pequenas células-[20] – [23]. No entanto, o papel de SOX4 em tais tumores não está totalmente compreendida e os dados relatados demonstram certos contradições. Considerando SOX4 knockdown resultou na apoptose das células de carcinoma adenóides císticos ACC3, SOX4 superexpressão promovido paragem do ciclo celular e a apoptose de células de carcinoma do cólon HCT116 [24], [25]. O microRNA (miRNA) miR-335 inibiu a invasão de células metastático e deliberado, pelo menos em parte, por meio de segmentação

sox4

e seu alvo putativo

TNC

, que codifica um componente da matriz extracelular implicado na célula migração [26]. Por outro lado, quanto maior for o nível de expressão SOX4, melhor o prognóstico para pacientes com meduloblastomas e outros tipos de tumores [27]. Assim, SOX4 podem exercer diferentes efeitos sobre as células tumorais, dependendo do contexto e do mecanismo de primeira transformação; mais estudos são necessários para esclarecer esta questão.

Até o momento, o significado prognóstico dos níveis de expressão SOX4 nuclear em GC humana não foi estabelecida. Este estudo investigou as correlações entre a expressão SOX4 nuclear e os parâmetros clínico-patológicas, e avaliou a importância da SOX4 nuclear em predizer o prognóstico para pacientes com GC.

Materiais e Métodos

Declaração de Ética

o conselho de revisão institucional a Chi Mei Medical Center aprovou o protocolo de aquisição de tecidos para o estudo imuno-histoquímica e immunoblotting. consentimento informado por escrito foi obtido de cada participante antes da aquisição de tecidos.

Os participantes e amostras

O grupo de pacientes composto 168 casos GC consecutivos, de 1997 a 2004 documentar fatores patológicos e clínicos e evolução clínica. Todos os casos neste estudo receberam total de radical ou gastrectomia subtotal com linfadenectomia D2 ou D3. Completude da ressecção cirúrgica foi realizada em todos os casos, e exame anatomopatológico revelou nenhum envolvimento tumor das margens de ressecção em espécimes cirúrgicos (classificados como R0: nenhum tumor residual com base na categoria R na classificação AJCC). Nenhum dos nossos pacientes do estudo tinham recebido quimioterapia e /ou radioterapia pré-operatória. A porção não-tumor foi obtida a partir de mucosa gástrica grosseiramente normal, separado a partir do tumor, a partir de amostras gástricas ressecado. parâmetros clínico-patológicas de GCs foram determinados de acordo com a classificação AJCC. A duração de follow-up para a sobrevivência livre de doença foi definida como o período entre a data da operação e no dia de recaída, de acordo com a ficha do paciente. Para cada paciente, analisamos um par de tecidos gástricos tumorais e não tumorais para determinar a expressão SOX4 nuclear.

Análise imuno-histoquímica

expressão SOX4 Nuclear foi analisada por imuno-histoquímica. blocos de tecido embebidos em parafina foram seccionados a 5 mm e transferidas para lâminas de microscópio (Muto Puré Chemicals Co. Ltd., Tóquio, Japão). O tecido da mama foi utilizado um controlo positivo para SOX4. O controlo negativo implica a omissão do anticorpo primário e incubação com solução salina de tampão fosfato. Os cortes foram desparafinados com xileno, seguido de reidratação em álcoois graduados. secções desparafinadas foram incubadas em tampão de pH 6,0 de citrato de 40 min a 95 ° C numa placa de aquecimento para recuperar antigénios. Além disso bloqueio antigénio foi realizada utilizando uma solução de Dako REAIS Peroxidase-bloqueio (Dako North America Inc., Carpinteria, CA) durante 5 min. As lâminas foram subsequentemente incubados com o anticorpo primário: policlonal anti-SOX4 (Tempo de vida, Victoria, Canadá) durante 1 hora à temperatura ambiente, a uma diluição de 1:400. Detecção da coloração imunorreactivo foi realizada utilizando o método do complexo avidina-biotina-peroxidase de acordo com as instruções do fabricante. Foi utilizado um sistema sensível Dako REAIS EnVision Detection (Dako North America Inc., Carpinteria, CA). Após incubação com diaminobenzidina durante 5 minutos, as secções foram contrastadas com hematoxilina e montadas em Dako Faramount aquosa Meio de Montagem (Dako North America Inc., Carpinteria, CA) para a interpretação microscópica. Como um fator de transcrição, única SOX4 nuclear foi marcado. pontuação semiquantitativa da intensidade (0, nenhuma coloração; 1, coloração fraca; 2, coloração forte) e fracção de células cancerosas positivas (0, nenhuma coloração; 1, menos de metade; 2, mais de metade) foi realizadas [22]. O resultado final foi calculada para cada amostra, multiplicando a intensidade e a percentagem de imunomarcação: 0, nenhuma coloração; 1, coloração fraca; 2, coloração moderada; 4, de coloração forte. Seções com uma pontuação de 0 ou 1 exibida baixa expressão de SOX4, enquanto que aqueles que marcou 2 ou 4 foram definidos como tendo alta expressão ou superexpressão de SOX4. coleta de dados clínicos e análise imuno-histoquímica foram realizados de forma independente um do outro, em um estudo cego-investigador.

RNA Extração e cDNA síntese |

De acordo com as instruções do fabricante, o RNA total de 10 tumor e não -tumor pares de tecidos gástricos foi isolado usando um kit de extracção de ARN (Sigma, St. Louis, MO). qualidade RNA foi analisado usando Agilant 2100 Bioanalyzer. Os valores RIN de todas as 20 amostras estavam acima de 7. Síntese de ADNc foi realizada como descrito no nosso estudo anterior [28]. ADNc sintetizado foi armazenado a -20 ° C até à sua utilização.

iniciadores e sondas

Gene Taqman Os ensaios de expressão, incluindo os iniciadores e as sondas de SOX4 e β-actina, um controlo interno, foram adquiridos de Applied Biosystems. Os números de ensaio da SOX4 e β-actina foram Hs00268388_s1, e Hs99999903_m1, respectivamente.

quantitativa PCR em tempo real

Os níveis de expressão de genes alvo foram medidos usando-quantitativa por PCR em tempo real Sistema ABI Prism 7300 Sequence Detection (Applied Biosystems), como descrito em nosso estudo anterior [28]. ciclo limiar (

C

t

) é o número do ciclo fraccionai a que a fluorescência gerada pela clivagem da sonda exceder um nível fixo acima da linha de base. Para um limiar escolhido, um menor número inicial de cópia resulta em uma maior

C

t

valor. A quantidade de mRNA SOX4 em tecidos tumorais ou não-tumorais, padronizado contra a quantidade de mRNA β-actina, foi expressa como Δ

C

tumor

ou Δ

não-tumor

C

=

t

(SOX4)

C -.

C

t

(β-actina)

Cultura de células

linhas de células GC (AGS e NCI-N87) humana normal (Hs738.St/Int) e foram obtidas a partir da American Type Culture Collection (ATCC; Manassas, VA, EUA). As linhas celulares foram autenticados pelo programa de biologia celular ATCC e foram passadas por não mais do que 6 meses antes de novas células foram trazidos para fora do estado congelado ou uma nova alíquota de células foi comprado de ATCC. As células foram cultivadas em DMEM (Hs738.St/Int), F-12K (AGS), ou RPMI-1640 (NCI-N87) meio suplementado com 10% de soro fetal bovino, 100 unidades /ml de penicilina G, 100 ug /ml de estreptomicina sulfato, e 250 ng /mL de anfotericina B.

Preparação Proteína nuclear

as proteínas nucleares foram extraídas usando NE-PER Nuclear reagente de extracção (Pierce Biotechnology, Rockford, IL), de acordo com as instruções do fabricante . As amostras foram armazenadas a -80 ° C até serem usadas. A concentração de proteína foi determinada utilizando um Kit BCA Protein Assay (Pierce Biotechnology) com albumina de soro bovino como padrão.

imunotransferência

amostras de proteína desnaturada foram sujeitos a 12% de SDS-PAGE. As proteínas foram transferidas para membranas de nitrocelulose, bloqueados e borrões foram incubadas a 4 ° C durante a noite com anticorpo policlonal anti-SOX4 (1:1000 diluição). proteína de ligação a TATA foi usada como um controlo interno para a carga de proteína igual. O fracionamento celular foi confirmada por β-actina para descartar a possibilidade de contaminação. As membranas foram incubadas adicionalmente com anticorpos secundários conjugados com peroxidase (Sigma, St. Louis, MO) durante 1 h à temperatura ambiente. Eles foram, em seguida, incubadas com SuperSignal Oeste Femto Maximun Sensibilidade Substrato (Pierce Biotechnology, Inc., Rockford, IL), e exposto a um filme de raios-X médico Fuji (Fuji Photo Film Co., Tóquio, Japão). processamento de imagens foi realizada utilizando software Fuji imagem Gauge.

Análise Estatística

Emparelhados

t

testes foram utilizados para avaliar a diferença na expressão SOX4 nuclear entre os tecidos tumorais e não tumorais para cada paciente. Nós examinamos vários parâmetros clínico-patológicas: idade, sexo, profundidade de invasão, estado nodal, metástases à distância, estágio, grau de diferenciação e permeação vascular. A correlação entre a expressão SOX4 nuclear e cada parâmetro clínico-patológico foi examinada usando χ

2 de teste. Os endpoints tempo de colocação no evento para todos os parâmetros clínico-patológicas foram plotados pelo método de Kaplan-Meier, e o grau de significância foi calculado pelo teste de log-rank univariada. Parâmetros que emergiram como significativas (

P

≤0.05) na análise univariada foram inseridos como variáveis ​​no modelo de regressão de Cox multivariada, e taxa de risco (HR) e independência do impacto prognóstico poderia ser determinada de uma forma para trás passo a passo. Todos os dados foram analisados ​​usando o software SPSS versão 14 (SPSS, Chicago, IL). A

P valor

de 0,05 foi considerado significativo

Resultados

Dados básicos

Este estudo envolveu 168 pacientes com GC, 104 dos quais eram. homens e 64 mulheres (Tabela 1). A idade dos pacientes variou de 34 a 88 anos no primeiro diagnóstico (média de 64,9 anos). Com base na classificação AJCC, 45 pacientes estavam em estágio I, 45 estavam no estágio II, 54 estavam no estágio III, e 24 estavam em estágio IV. O período de seguimento para todos os pacientes variou de 0 a 136,2 meses (média de 21,4 meses). Durante o acompanhamento, 86 pacientes morreram de GC.

Expression SOX4 Nuclear foi regulada e Associated com clínico-patológicas Parâmetros em GC

Foi realizada análise imuno-histoquímica para investigar a expressão de SOX4 nuclear tecidos obtidos a partir de nossos pacientes do estudo (Figuras 1A a C). SOX4 expressão nuclear foi significativamente mais elevada nos tecidos de tumor do que em tecidos não tumorais (

P

0,001). Superexpressão de SOX4 nuclear (escores de 2 ou 4) foi observada em 90 dos 168 pacientes (53,5%). A análise por Western blot demonstrou também que a expressão de SOX4 foi substancialmente aumentada em células gástricas cancerosas e tecidos quando em comparação com as células normais e tecidos (Figura 1D). Além disso, a análise quantitativa por PCR em tempo real demonstrou que a expressão de ARNm SOX4 foi substancialmente aumentada em tecidos de tumor quando comparados com tecidos que não de tumor (Tabela 2). Como mostrado na Tabela 3, a superexpressão de SOX4 nuclear significativamente correlacionada com os seguintes parâmetros: profundidade da invasão (

P Art 0,0001), estado nodal (

P

= 0,0055), metástases à distância (

P

= 0,0195), fase (

P

= 0,0003), ea invasão vascular (

P

= 0,0383). Nenhuma associação significativa emergiu entre a superexpressão de SOX4 nuclear e idade ou sexo.

espécimes GC analisados ​​por imuno-histoquímica com um anticorpo contra SOX4. A coloração de SOX4 é observado no núcleo e é muito fraco no citoplasma. O painel A mostra uma amostra não tumor sem expressão SOX4 nuclear; O painel B mostra uma amostra de tumor com baixo nível de SOX4 nuclear expressão; O painel C mostra uma amostra de tumor com elevado nível de expressão SOX4 nuclear. Painel D: expressão da proteína nuclear foi examinada SOX4 em 3 pares de células gástricas e 5 não tumoral /tumorais de tecidos gástricos. Ampliação:. 200 ×

A superexpressão de SOX4 Nuclear como um marcador prognóstico para a GC

As correlações de resultados clínicos com expressão SOX4 nuclear são apresentados na Figura 2. A superexpressão de SOX4 nuclear foi significativamente associado com menor sobrevida livre de doença (

P

= 0,003). Pacientes com níveis de SOX4 nuclear alta expressão alcançou uma taxa de sobrevida livre de doença em 5 anos de 45,6% em comparação com 66,5% para os pacientes com baixos níveis de expressão. Além disso, de alta fase GC (fase III e IV) foi utilizado para encontrar o efeito da sobreexpressão SOX4 nuclear no prognóstico. No entanto, a associação entre a superexpressão de SOX4 nuclear e sobrevida livre de doença foi de apenas marginalmente significante (

P

= 0,102, Figura 3).

Todos os testes estatísticos foram bicaudais eo nível de significância era

P

. 0,05

Todos os testes estatísticos foram bicaudais eo nível de significância foi de

P

. 0,05

os resultados da análise univariada dos marcadores prognósticos de GC são apresentados na Tabela 4. sobrevida livre de doença foi significativamente correlacionada com cada um dos seguintes: status de nodal (

P Art 0,001), metástases à distância (

P Art 0,001), fase (

P Art 0,001), invasão vascular (

P Art 0,001), e superexpressão de SOX4 nuclear (

P

= 0,004). No entanto, a associação entre a superexpressão de SOX4 nuclear e sobrevivência não foi significativo após o controle de outros marcadores prognósticos bem conhecidos em análise multivariada (

P

= 0,186, Tabela 5). Na análise multivariada, profundidade de invasão (hazard ratio (HR) = 2.091, 95% Intervalo de Confiança (IC) = 1,073-4,077,

P

= 0,030), estado nodal (HR = 3,901, IC 95% = 1,589-9,580,

P

= 0,003), metástases distantes (HR = 15,453, IC 95% = 6,419-37,114,

P Art 0,001) e invasão vascular (HR = 1.849, 95 CI% = 1,058-3,229,

P

= 0,031) foram prognóstico independente.

Discussão

O câncer gástrico continua sendo um grande problema de saúde pública em todo o mundo [ ,,,0],1]. A ressecção cirúrgica é geralmente considerado o melhor tratamento para melhorar o prognóstico quando o diagnóstico precoce de GC é bem sucedida [29]. Infelizmente, a maioria dos casos de GC são diagnosticados tardiamente, em um estágio avançado localmente. Os pacientes com tumores avançados muitas vezes submetidos a gastrectomia radicais, o que leva a um elevado nível de morbidade e não diminui o risco de recorrência [30]. Maior conhecimento dos mecanismos moleculares subjacentes ao desenvolvimento desta neoplasia mortal é necessário se novas estratégias para prevenir e tratar GC estão a ser desenvolvidos. Em particular, a identificação de moléculas que são alterados durante o início e progressão do câncer pode fornecer ferramentas valiosas como marcadores prognósticos ou alvos terapêuticos.

A expressão de SOX4 em cancros humanos varia de acordo com o tipo de câncer. O nível SOX4 é elevado em numerosos cancros humanos, incluindo o da bexiga, da próstata, do endométrio, e no fígado, enquanto que é reduzida em pacientes com melanoma e cancro da vesícula biliar [20], [21], [31] – [34]. Nossa revisão da literatura identificou apenas um estudo que investigou a expressão de SOX4 em GC humano. Este estudo, por Shen et al., Mostraram que SOX4 foi sobre-expressa em pacientes GC [35]. No presente estudo, foram avaliados os níveis de expressão de SOX4 nuclear em tecidos gástricos obtidos de 168 pacientes com GC. Os resultados foram consistentes com os de Shen et ai. e mostraram que a expressão SOX4 nuclear foi elevada nos tecidos de tumor gástricas em relação aos tecidos gástricos não-tumorais. Os resultados immunoblotting confirmou que a expressão SOX4 nuclear foi maior em células de GC do que em células gástricas normais.

Nossos resultados também mostraram que a superexpressão de SOX4 nuclear em tecidos GC foi estreitamente relacionado com a invasão tumoral e metástase. O mecanismo pelo qual SOX4 exerce a sua actividade invasiva e metastática permanece obscura. Na primeira linha de evidência, miARN (RNAs não codificantes pequena com funções reguladoras) foram mostrados para ser associado com a invasão tumoral e metástase [36] – [38]. Os trabalhos anteriores por Tavazoie et al. mostrou que o miR-335 suprime a metástase através da regulação negativa de SOX4 [26]. Este resultado sugeriu que SOX4 está ligada à agressividade do tumor.

A segunda linha de evidência foi fornecida por estudos sobre a transição epitelial-mesenquimal (EMT), que é um passo fundamental durante a embriogênese [39]. Acumulando as evidências sugerem que a utilização de EMT inadequado pode ser um componente da invasão de muitos tumores de tecidos epiteliais. características de células são fortemente afectados durante EMT, resultando em alterações de célula-célula e as interacções célula-matriz, a motilidade celular, capacidade de invasão e [40], [41]. estudo recente de Zhang et al. mostraram que a sobre-expressão de SOX4 em células epiteliais mamárias humanas levou à aquisição de características mesenquimais, e a migração de células e reforçada invasão. Além disso, SOX4 regulada positivamente a expressão de indutores conhecidos EMT e activada a via de TGF-β contribuir para EMT. A expressão de SOX4 foi induzida por TGF-β e foi necessário para EMT-TGF-β induzida. Estes resultados mostram que SOX4 desempenha um papel importante na progressão do cancro da mama, por orquestrar EMT [42]. Estes estudos podem ser responsáveis, em parte, para a associação de sobre-expressão de SOX4 nuclear com a invasão tumoral e metástases.

previsão precisa do risco de recorrência iria ajudar a minimizar os efeitos adversos da GC e maximizar o efeito terapêutico do tratamento. Dos marcadores de prognóstico disponíveis para GC, a fase AJCC é mais importante. No entanto, o prognóstico varia até mesmo entre os pacientes na fase mesma doença; portanto, marcadores prognósticos alternativos são procurados. Poucos estudos têm investigado o valor prognóstico de proteínas SOX4. Jafarnejad et ai. mostrou que, em pacientes com melanoma, uma forte associação existente entre a expressão SOX4 reduzida e sobrevida do paciente pobre [33]. Da mesma forma, Kim et al. mostraram que a sobre-expressão da proteína SOX4 em pacientes com carcinoma hepatocelular foi associada com os resultados dos pacientes melhorados [32]. Além disso, Aaboe et ai. mostrou que uma forte associação existente entre aumento da expressão SOX4 e aumento da sobrevida do paciente em casos de câncer de bexiga [20]. Nós não encontrou relatórios publicados discutindo o significado prognóstico da SOX4 em GC humano. Os resultados deste estudo mostraram que a superexpressão SOX4 nuclear foi inversamente correlacionada com a sobrevida do paciente; esta constatação contradisse as correlações positivas relatados anteriormente. Nosso estudo foi o primeiro a mostrar que a superexpressão de SOX4 nuclear pode prever resultados mais pobres para pacientes com GC. A sobre-expressão de SOX4 nuclear parece ser um marcador útil para prever resultados em pacientes com GC que receberam a ressecção cirúrgica do tumor. Assim, pacientes com GC que apresentam superexpressão de SOX4 nuclear devem ser acompanhados cuidadosamente. Porque o nosso grupo de pacientes era pequena, estudos futuros devem incluir um grupo de pacientes maior GC para elucidar o significado prognóstico da SOX4 nuclear nesta doença.

Em resumo, este estudo forneceu evidências para o significado clínico da SOX4 sobre-expressos em pacientes com GC. Nossos resultados indicam que a segmentação SOX4 pode proporcionar uma nova modalidade terapêutica para o tratamento de GC.

Reconhecimentos

Os autores gostariam de agradecer Jung-Chin Hsu pelo seu excelente assistência técnica.