Em um único teste para o carcinoma hepatocelular, pacientes que adquiriram sorafenib e doxorrubicina em conjunto tinham tempos um pouco mais longos médios de sobrevivência livre de progressão e sobrevivência global do que os pacientes que receberam doxorubicina sozinha. No entanto, outro inibidor de molécula pequena quinase com uma grande afinidade de ligação para o ZAK é nilotinib, que também pára breakpoint cluster região Abelson e passa a ser em uso clínico para o tratamento da leucemia mielóide crônica.
Mesmo que as afinidades de ligação de sorafenib e nilotinib para ZAK têm sido relatados, nem agente foi testado quanto à sua capacidade de restringir a atividade ZAK. Estes agentes foram administrados por nós para células HaCaT 30 min antes do tratamento com doxorrubicina durante 24 h, para descobrir se sorafenib ou nilotinib poderia restringir as ações a jusante de ZAK. A presença clara de qualquer produto químico doxorrubicina altamente reprimida estimulou a fosforilação de p38 e JNK MAPK. Tal como em células HaCaT expostos a ZAK siRNA, a cobertura destas células para sorafenib ou nilotinib reduziu a fosforilação basal de p38 MAPK. fabricante Romidepsin
Sorafenib e nilotinib também reduziu a clivagem de caspase 3 e PARP, indicando que a doxorrubicina apoptose mediada também foi suprimida. inibidores ZAK bloquear daunorubicina induzida serviço K MAP e apoptose em células HaCaT. Daunorubicina pode ser uma antraciclina que é considerado a trabalhar por mecanismos semelhantes, como a doxorrubicina, mas mostra a atividade antitumoral menos potente. Para determinar se a inibição da ZAK resultados daunorubicina induzida apoptose e ativação de MAPK, nós pré-tratados células HaCaT com sorafenib ou nilotinib seguido de perto por daunorubicina de 24 h.
De forma semelhante aos achados com doxorrubicina, a presença clara de qualquer produto químico daunorubicina fortemente reprimida estimulou a fosforilação de JNK e p38 MAPK. Sorafenib e nilotinib também pagou a clivagem de caspase 3 e PARP, indicando que a daunorubicina apoptose mediada também foi suprimida. Doxorubicininduced apoptose é parcialmente bloqueado por inibidores de JNK ou p38 em células HaCaT. ZAK é apenas um MAP3K que tem sido comprovada para causar a fosforilação de MAPK p38 e JNK.
Para determinar se a suspensão de JNK ou p38 MAPK poderia dificultar doxorrubicina apoptose activada, utilizou-se o SB 203580, SP 600125, ou ambos em combinação com células HaCaT 30 min antes do tratamento com 25 M doxorrubicina durante 24 h. A presença de qualquer inibidor ou, talvez, uma mistura de ambos resultou em clivagem de caspase 3 e PARP, indicando que p38 MAPK e JNK participou numa medida em doxorrubicina mediada por apoptose. Na presença do produto químico pancaspase, zVAD fmk, apoptose doxorubicininduced foi totalmente inibido. inibidores ZAK siRNA e ZAK não impedem a apoptose doxorubicininduced em células HeLa. Para tentar se os inibidores ZAK iria reduzir a morte celular de uma linha celular cancerosa que pré-tratado com células HeLa sorafenib ou nilotinib seguido de doxorrubicina durante 24 h.
Em contraste com a sua capacidade para conter PARP e clivagem caspase 3 em HaCaT células, nilotinib e sorafenib fez PARP não inferior ou clivagem caspase 3 em células HeLa. Em células HeLa, doxorrubicina não conseguiu aumentar a fosforilação de JNK e p38 MAPK, provavelmente porque os níveis basais de estes já foram fosforilados SAPKs elevada na ausência de um indutor. No entanto, a fosforilação de SAPKs foi suprimida por sorafenib e nilotinib, indicando que os inibidores foram eficazes em controlar ZAK nestas células. Estes dados sugerem que o exercício endógena elevada do ZAK em células HeLa pode ser responsável pelo aumento da fosforilação basal de JNK e p38 MAPK.