Abstract

Objetivos

MET é um receptor presente na membrana de células NSCLC e é conhecido por promover a proliferação celular, sobrevivência e migração.

MET

número de cópias do gene é uma alteração genética comum e inibição o MET surge como uma terapia-alvo promissor no NSCLC. Aqui pretendemos combinar em uma meta-análise, os dados sobre o efeito da alta

MET

número de cópias do gene na sobrevida global dos pacientes com NSCLC ressecado.

Métodos

dois investigadores independentes aplicadas estratégias de busca paralelos com os termos “MET e cancro do pulmão”, “conheceu e NSCLC”, “

MET

número de cópias do gene e prognóstico” no PubMed até janeiro de 2014. Foram selecionados os estudos que investigaram a associação de

MET

número de cópias do gene com a sobrevivência, em pacientes que receberam a cirurgia.

Resultados

Entre 1096 títulos que foram identificados na busca inicial, recuperado 9 estudos sobre coortes retrospectivos com os dados recuperáveis ​​adequadas sobre o impacto prognóstico da

MET

número de cópias do gene na sobrevida de pacientes com NSCLC. Desses, 6 utilizadas FISH e os restantes 3 utilizadas RT PCR para avaliar a

MET

número de cópias do gene no tumor primário. Calculou-se o I

2 estatística para avaliar a heterogeneidade (I

2 = 72%).

MET

número de cópias do gene previu a sobrevida global pior quando todos os estudos foram combinados em um modelo de efeitos aleatórios (HR = 1,78, 95% CI 1,22-2,60). Quando somente os estudos que tinham pelo menos 50% dos pacientes de adenocarcinoma em suas populações foram incluídos, o efeito foi significativo (cinco estudos, HR 1,55, IC 95% 1,23-1,94). Isso não era verdade quando se incluiu apenas os estudos com não mais do que 50% dos pacientes com adenocarcinoma histologia (quatro estudos de RH 2,18, 95% CI 0,97-4,90).

Conclusões

Superior

MET

número de cópias do gene no tumor primário no momento do diagnóstico prediz pior evolução em pacientes com NSCLC. Este impacto prognóstico pode ser adenocarcinoma histologia específica

Citation:. Dimou A, não L, Chae YK, Tester WJ, Syrigos KN (2014)

MET

Gene Copiar Número Prevê Pior sobrevivência global em doentes com não-pequenas células do cancro do pulmão (NSCLC); Uma revisão sistemática e meta-análise. PLoS ONE 9 (9): e107677. doi: 10.1371 /journal.pone.0107677

editor: Srikumar P. Chellappan, H. Lee Moffitt Cancer Center Research Institute, Estados Unidos da América

Recebido: 08 de março de 2014; Aceito: 19 de agosto de 2014; Publicação: 18 de setembro de 2014

Direitos de autor: © 2014 Dimou et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Data Availability:. O autores confirmam que todos os dados subjacentes às conclusões estão totalmente disponíveis sem restrições. Todos os dados que foram utilizadas neste manuscrito foram recuperados de artigos publicados que são listados nas referências e podem ser encontrados no site do Pubmed

Financiamento:.. Os autores não têm apoio ou financiamento para relatar

Conflito de interesses:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

não-pequenas células do cancro do pulmão (NSCLC) é a principal causa de morte relacionada com câncer em todo o mundo [1] . O tratamento actual para a doença metastática é em grande parte dependente da análise companheiro de tecido e consiste de terapia biológica alvo quando uma mutação condutor está presente ou quimioterapia convencional na ausência de um alvo putativo [2] – [4]. Sensibilizador mutações no domínio de tirosina cinase do receptor do factor de crescimento epidérmico (EGFR) ou translocações que envolve a quinase de linfoma anaplásico (ALK) e ROS1 prever a resposta aos inibidores da tirosina-cinase EGFR (TKI) e inibidores de ALK, respectivamente. Por outro lado, como benefício clínico de quimioterapia com dobletes platina atingiu um patamar, torna-se evidente que uma maior identificação de alvos putativos ea otimização de estratégias de terapia-alvo mantém a premissa de melhora nos resultados clínicos.

A receptor MET tem sido caracterizado como um receptor transmembranar que é activado pelo factor de Crescimento de hepatócitos (HGF). Em NSCLC MET pode estar presente no tratamento de casos naive [5], mas também pode surgir após o tratamento com TKI onde medeia a resistência secundária à inibição de EGFR [6]. O receptor MET leva a proliferação e a inibição da apoptose com a activação de jusante de PI3K /AKT e ERK [7], [8], ao mesmo tempo que promove a metástase através do sistema de factores de transcrição STAT das [9], [10]. Dada a importância do TEM na biologia do NSCLC, certos inibidores específicos MET foram sugeridos como potenciais terapias com resultados promissores iniciais. Tivantinib, um inibidor de tirosina cinase em combinação com erlotinib foi encontrada para prolongar a sobrevivência livre de progressão (SLP), quando comparado com erlotinib sozinho em um estudo de fase II em doentes com NSCLC não-escamosas [11]. Por outro lado, a combinação de erlotinib com onartuzumab, um anticorpo prolongada PFS e OS monoclonal específico MET-comparado com erlotinib isoladamente em doentes com NSCLC MET-positivos [12].

amplificação de cópias do gene é um mecanismo comum de MET sobre-expressão e pode ser detectada com a reacção inversa de cadeia de polimerase transcriptase (RT PCR) ou hibridação in situ fluorescente (FISH). Uma série de estudos têm explorado o papel prognóstico do

MET

amplificação de cópias do gene em NSCLC. Nesta revisão sistemática e meta-análise, pretendemos avaliar quantitativamente o efeito da alta vs. baixa

MET

número de cópias do gene na sobrevida global dos pacientes com NSCLC ressecados.

Métodos

Seleção

Foram incluídos estudos que avaliaram

MET

número de cópias do gene com RT PCR, peixe ou equivalente em pacientes com NSCLC submetidos a ressecções cirúrgicas. Além disso, somente os estudos que relataram a razão de risco (HR) de aumento da

MET

número de cópias do gene na sobrevivência ou fornecidos dados suficientes para calcular o HR foram incluídos. Foram excluídos os estudos não publicados na íntegra no idioma Inglês.

Estratégia de busca e estudar identificação

Entramos os termos “conheceu e câncer de pulmão”, “conheceu e NSCLC”, “

TEM

número de cópias do gene e prognóstico “no MEDLINE até janeiro de 2014. Dois autores (AD e LN) analisou os resumos da pesquisa e selecionou os estudos elegíveis para revisão publicação integral. Na segunda fase da revisão, os mesmos autores selecionaram os estudos que satisfaçam todos os critérios de elegibilidade do estudo. Além disso, incluídas na pesquisa todas as bibliografias dos estudos identificados. Em caso de desacordo, o estudo foi incluído ou excluído com base em consenso por todos os contribuintes. No caso de publicações com sobreposição de populações, somente a publicação com os dados mais completo foi incluído.

Os dados de extração

Dois autores (AD e LN) extraiu o HR para a sobrevida global com o acompanhamento 95 CI% como medida de resultado dos estudos identificados. Além disso foram coletados dados clínico-patológicas relevantes, incluindo o número de participantes, os anos de diagnóstico, o ano de publicação, os tipos histológicos, o estágio TNM, a idade média, a raça e gênero dos participantes. Notamos pacientes que foram inicialmente incluídos em estudos individuais, mas não na análise final. Revisamos a seção de métodos em todos os estudos incluídos e observou o ensaio exacto de MET avaliação do número de cópias do gene, bem como o limiar da MET detecção de elevado número de cópias do gene.

Avaliação da qualidade dos dados

Cada estudo incluiu foi dada uma pontuação de qualidade com base em uma ferramenta de avaliação da qualidade originalmente descrita no estudo de Aços et al [13]. Em resumo, todos os contribuintes avaliaram cada estudo individual em cada dos quatro domínios, incluindo a concepção científica, a descrição dos métodos, a análise dos dados e generalização dos resultados. Cada categoria recebeu uma pontuação de 0-10 e as pontuações foram adicionados a uma pontuação máxima de 40. A pontuação final foi calculado como uma porcentagem que varia de 0-100% com maiores escores, sugerindo uma melhor qualidade dos dados.

A análise estatística

a parcela florestal foi utilizado para RHs agregados a partir da análise univariada de estudos individuais em uma HR resumo do efeito da alta

MET

número de cópias do gene na sobrevivência. O teste I

2 foi usado para avaliar a heterogeneidade entre os estudos. No caso de I

2 50%, o HR resumo e do acompanhamento IC 95% foram calculados com um modelo de efeitos aleatórios enquanto foi utilizado um modelo de efeitos fixos no caso de baixa heterogeneidade, conforme definido pelo I

2 ≤50%. Nós procuramos viés de publicação, com o auxílio de um gráfico de funil. A significância estatística foi definida ao nível de 0,05. Todas as estatísticas foram realizadas com RevMan 5.2.8 baixado do site da Cochrane (https://tech.cochrane.org/revman/download).

Resultados

plot selecção Estudo

A nossa busca inicial identificou 1096 títulos. Depois de analisar os resumos correspondentes excluímos 1020 publicações por ser comentários ou relatos de casos, para a focagem de linhas celulares ou indivíduos não-humanos, não sendo relevante para o receptor MET, não sendo relevante para NSCLC, ou com base em critérios linguísticos (figura 1). Após a avaliação inicial que identificou 76 estudos para os quais realizamos a revisão de texto completo. Deste subconjunto de estudos foram selecionados 9 para ser incluído na análise de síntese após excluindo 67 para não incluir a análise de sobrevivência global, não avaliar o número de cópias do gene, não relatar a razão de risco e que contém dados de sobreposição (Figura 1). Encontramos três estudos que realizaram análise de sobrevivência de altas

MET

tumores no número de cópias do gene, mas não relataram o HR [14] – [16]. Jin et al [15] apresentaram dados sobre os 141 estágio cirurgicamente ressecado adenocarcinomas I; eles descobriram que o maior número de cópias do gene MET é associado com pior sobrevivência global (p = 0,01) e a sobrevivência livre de progressão (p 0,001), mas não houve RH relataram. Por outro lado, Tanaka et al [16] estudaram

MET

número de cópias do gene em 136 adenocarcinomas pulmonares cirurgicamente ressecados e usado tanto PathVysion eo sistema Cappuzo para definir alto e baixo

MET

de cópias do gene número. Com a metodologia anterior, os investigadores identificaram uma sobrevida global pior com maior

MET

número de cópias do gene (p = 0,03), enquanto com a última metodologia não foi encontrada associação entre o

MET

número de cópias do gene e sobrevida global (p = 0,22). Finalmente, Okuda et al [14] estudaram

MET

número de cópias do gene com RT PCR em uma população asiática de 213 pacientes e usando um ponto de corte de três

MET

cópias do gene relatou um total menor sobrevida em pacientes com maior número de cópias do gene

características do estudo

Foram identificados um total de nove estudos [17] – [25]. preencha todos os critérios de elegibilidade para ser incluído na meta-análise (tabela 1). Havia seis estudos na Ásia e três em populações não-asiáticos, quatro estudos incluíram casos diagnosticados antes de 2004 somente, três estudos avaliaram a

MET

número de cópias do gene com RT PCR, quatro com peixes e duas de prata in situ hibridação (SISH). SISH utiliza microscopia de luz em vez de fluorescência permitindo a avaliação concomitante do número de cópias do gene e a morfologia das células, enquanto, ao mesmo tempo permite a preservação de sinal para um tempo mais longo em comparação com os peixes. Análise da qualidade revelou que todos os estudos, mas um tinha índices de qualidade comparáveis. Em resumo, a maioria dos estudos descritos adequadamente os critérios de elegibilidade para o estudo populacional, incluídos dados demográficos do paciente, revelou a origem do tecido, o método descrito de

TEM

de avaliação do número de cópias do gene, o desenho do estudo, os objectivos e

MET

número de cópias do gene positividade cortada (Checklist S1). Limitações para estudar a qualidade incluídos desenho observacional, a falta de cegueira, falta de controles positivos e negativos, a falta de informações sobre casos omissos e tecido manipulação (Tabela S1). Vá et al [24] informou o rácio riscos em pacientes com histologia de células escamosas única (n = 97 para fora da coorte inicial de 180 pacientes).

A análise de sobrevida

Em seguida, quantificaram o efeito de alta resumo

TEM

número de cópias do gene na sobrevivência do paciente com a utilização de um modelo de efeitos aleatórios como mostrado no gráfico da figura 2. floresta heterogeneidade entre todos os estudos é estatisticamente significativa (I

2 = 72%, p = 0,0003) ea FC líquida e 95% CI é 1,78 (1,22-2,60), indicando uma sobrevida global pior com maior

MET

número de cópias do gene.

análise de sensibilidade

Nós tentamos explicar a heterogeneidade observada com relação a diferentes características da população em diferentes estudos. Encontramos um efeito líquido negativo de

MET

número de cópias do gene na sobrevivência em estudos com populações asiáticas (HR = 2,31 IC 95% 1,31-3,79), em estudos onde a histologia relatada foi de adenocarcinoma em mais de metade do casos (HR = 1,55 IC 95% 1,23-1,94), em estudos que utilizaram FISH (HR = 1,48 IC 95% 1,06-2,06) e em estudos nos quais os pacientes foram diagnosticados antes de 2004 (HR = 1,70 IC 95% 1,34-2,16) (mesa 2). Em contraste, não houve efeito líquido significativo estatística da

MET

número de cópias do gene na sobrevida global em estudos com populações não-asiáticos, estudos onde histologia de adenocarcinoma foi relatado em menos de metade dos casos e em estudos onde RT PCR foi utilizado para avaliar a

MET

número de cópias do gene (tabela 2).

o viés de publicação

por fim, buscou-se estimar o risco de viés de publicação com um gráfico de funil (Figura 3). Embora parece haver uma correlação entre o tamanho do estudo ea estimativa efeitos que adiciona alguma assimetria para a trama, há quatro estudos que não atingiu significância estatística.

Discussão

no presente estudo nós revisamos a literatura sobre

MET

número de cópias do gene eo potencial associação com a sobrevivência em pacientes com NSCLC cirurgicamente ressecado. Nós ainda combinados os dados disponíveis em uma meta-análise e encontrou uma razão de risco cumulativo de 1,78 indicando sobrevida global pior com maior

MET

número de cópias do gene nesta população de pacientes. Na análise de subgrupo etnia asiática, metodologia FISH, histologia de adenocarcinoma e ano de diagnóstico mais cedo do que 2004 foram indicadores de um efeito negativo do MET número de cópias do gene na sobrevivência. Foram avaliados heterogeneidade entre os diferentes estudos com o

2 Estatística I e encontrou heterogeneidade significativa quando todos os estudos foram incluídos na análise. Curiosamente, a heterogeneidade foi baixo entre os estudos, incluindo na maior parte dos casos de adenocarcinoma e entre os estudos incluindo pacientes diagnosticados antes de 2004.

O efeito negativo da maior

MET

número de cópias do gene na sobrevida global dos pacientes com NSCLC pode ser explicado por o papel de MET na biologia do cancro. Entre as diferentes vias a jusante activados por TEM, a cascata de JAK /STAT é de particular importância para a promoção da motilidade celular, a migração e metástase [26], [27]. Em nosso estudo, apenas estudos sobre pacientes que receberam cirurgia foram envolvidos. Infelizmente, um número considerável de pacientes irá recair apesar de uma ressecção R0 e, finalmente, morrer de sua doença. É possível que os pacientes, que tiveram uma recaída após uma ressecção R0, têm maiores metástases potenciais e, portanto, ocultos metastática no momento da cirurgia. Neste contexto, maior

MET

número de cópias do gene pode identificar um subgrupo de pacientes com maior potencial metastático.

Há uma série de explicações plausíveis para os resultados da análise de sensibilidade na presente meta -análise. Em primeiro lugar, os estudos que incluem pacientes diagnosticados antes de 2004 foram publicadas no início da introdução de um potencial viés de tempo de atraso na interpretação dos dados [28]. Alternativamente, quimioterapia adjuvante foi estabelecido depois de 2004 para os pacientes após a ressecção no caso de fase II, III, ou IB com fatores prognósticos adversos [29]. O uso potencial da quimioterapia adjuvante em pacientes diagnosticados após 2004 pode ter confundido o significado prognóstico da

MET

número de cópias do gene neste subconjunto de estudos e aumento da heterogeneidade. Além disso, a dupla positividade para

MET

amplificação do gene e

EGFR

mutações pode confundir os resultados após 2004, em caso de tratamento com um inibidor EGFR TKI após a progressão da doença. O efeito da dupla positividade para

MET

amplificação do gene e

EGFR

mutações podem explicar os diferentes efeitos do aumento da

MET

número de cópias do gene no prognóstico entre asiáticos e não-asiáticos populações. É possível que o efeito diferente de alta

MET

número de cópias do gene na sobrevivência em populações de pacientes com características clínico-patológicas distintas podem refletir diferenças em outras vias que modificam a via MET.

Não é claro como a biologia do receptor MET difere entre adenocarcinoma eo carcinoma de células escamosas em NSCLC. Uma possibilidade é que as alterações genéticas adicionais histotipo específica pode interferir com o efeito líquido da TEM, ou regular a expressão TEM. Krishnaswamy et al [30] relataram a presença de mutações da linha germinativa na porção de semaforina do receptor MET ocorrem preferencialmente em populações asiáticas e carcinomas de células escamosas. A presença de N375S, a mutação mais comum neste grupo de mutações reduz a afinidade do receptor MET de factor de crescimento de hepatócitos e é associada com a resistência à inibição TEM com o inibidor SU11274 TEM. É em grande parte desconhecido se tais mutações ou outras moléculas regulamento atingidas explicar a diferença observada na associação entre alta

MET

número de cópias do gene e sobrevivência.

A inibição da MET é atualmente pequena tirosina quinase viável inibidores como tivantinib ou com anticorpos monoclonais como onartuzumab. Tivantinib como mostrado no estudo MARQUEE [31], [32] prolonga a sobrevida livre de progressão, mas não sobrevida global quando combinado com erlotinib em comparação com sozinho na população não selecionada pré-tratados com não-escamosas NSCLC erlotinib. Uma análise de subgrupo em MET-positivo em pacientes imuno-histoquímica mostrou benefício tanto na sobrevida livre de progressão ea sobrevida global. De um modo semelhante, o estudo MetLung [33] em comparação onartuzumab em combinação com erlotinib em comparação com erlotinib isoladamente no MET-positivo por imuno-histoquímica população pré-tratadas de doentes com NSCLC, independentemente do tipo histológico. Tendo em conta os resultados do presente meta-análise que vai ser interessante ver se o benefício potencial da onartuzumab está presente em todos os pacientes positivos Met ou restrita a pacientes positivos MET com apenas adenocarcinoma. O estudo MetLung foi fechada prematuramente com base nos dados da análise intercalar, que não mostrou diferença na sobrevida global, que foi o resultado primário [33]. Curiosamente, foi recentemente apresentado em 2014 reunião da ASCO Annual que Crizotinibe demonstrou eficácia em pacientes com PEIXES comprovada

MET

amplificação em um ensaio de fase I [34]. Estes dois estudos gerar a hipótese de que

MET

estado de amplificação pode ser um biomarcador preditivo para melhor MET direcionados terapias em comparação com a expressão da proteína por imuno-histoquímica. Foram identificados heterogeneidade significativa quando todos os estudos identificados estão incluídos na meta-análise. As possíveis razões para a heterogeneidade pode ser populações com dados demográficos distintos, possíveis interferências de

MET

número de cópias prognóstico quimioterapia impacto e adjuvante gene, bem como variância pré-analítica e analítica em diferentes estudos. Por exemplo, o ponto de corte para alta

MET

número de cópias do gene varia entre 3 e 5, enquanto alguns estudos utilizam a hibridação in situ e outros RT PCR. Além disso, a utilização de tecido arquivado constitui um risco potencial para a perda de sinal em ensaios FISH e RT PCR. Curiosamente, descobrimos que os estudos onde a maioria dos pacientes eram da histologia de adenocarcinoma foram relativamente homogênea como eram estudos em que pacientes foram diagnosticados antes de 2004.

Há uma série de limitações nesta meta-análise. Em primeiro lugar, é uma meta-análise de estudos retrospectivos e, portanto, carrega os preconceitos do desenho retrospectivo dos estudos individuais. Em segundo lugar, o número de estudos é pequena, o aumento do erro de tipo I. Além disso, observou-se um padrão de assimetria no gráfico de funil. Assimetria em parcelas de funil está ilustrado através de uma correlação entre o tamanho da amostra e uma estimativa do efeito de resultado e que indica a presença de viés de publicação, a heterogeneidade ou alternativamente, pode ser o resultado de erro aleatório [28]. Em nossa meta-análise há uma proporção considerável de estudos que relatam resultados significativos estatísticos (quatro de nove). Se apenas um viés de publicação explica a assimetria gráfico de funil, seria de esperar mais estudos que mostram uma associação de

MET

número de cópias do gene com a sobrevida global, em sentido positivo ou negativo. Portanto, acreditamos que a heterogeneidade entre os estudos explica parcialmente a assimetria observada. Finalmente, havia três estudos que não foram envolvidos na meta-análise porque nenhuma razão de risco foi relatada [14] – [16]. No entanto, é improvável que a omissão destes estudos alterou o efeito cumulativo de alta

MET

número de cópias do gene na sobrevivência, pois ambos relatam um efeito positivo significativo na sobrevida global e ambos incluem na maior parte ou apenas pacientes com adenocarcinoma histologia.

em conclusão, aqui apresentamos uma meta-análise de nove estudos retrospectivos que analisam o efeito prognóstico da

MET

número de cópias do gene em NSCLC. Sugerimos que a sobrevida global pior observado em pacientes com maior número de cópias do gene pode ser histotipo específico e gera a hipótese de que pacientes com adenocarcinoma e alta

MET

numbermight de cópias do gene potencialmente beneficiar da quimioterapia adjuvante após a ressecção.

Informações de Suporte

Tabela S1.

doi: 10.1371 /journal.pone.0107677.s001

(XLSX)

Checklist S1.

PRISMA Checklist

doi:. 10.1371 /journal.pone.0107677.s002

(DOC)