Abstract

Fundo

prevenção

Cancro e terapia em pacientes HIV-1-infected irá desempenhar um papel importante no futuro. Os inibidores da transcriptase reversa não-análogos de nucleosídeos (NNRTI) Efavirenz e Nevirapina são citotóxica contra células cancerosas

in vitro

. Como outros NNRTIs não foram estudadas até agora, todos os NNRTIs utilizados clinicamente foram testados e

in vitro

concentrações tóxicas foram comparados com os níveis da droga em pacientes para prever possíveis efeitos anti-câncer

in vivo

.

Métodos

a citotoxicidade foi estudada por Anexina-V-APC /coloração com 7AAD e citometria de fluxo nas linhas celulares do cancro do pâncreas BxPC-3 e Panc-1 e confirmada por ensaios de formação de colónias. Os 50% eficazes concentrações citotóxicas (EC50) foram calculados e comparados com os níveis sanguíneos em nossos pacientes e os dados publicados.

Resultados

O

in vitro

EC50 dos diferentes drogas nas BxPC-3 de células de cancro do pâncreas foram: o efavirenz 31.5μmol /l (= 9944ng /ml), nevirapina 239μmol /l (= 63786ng /ml), etravirina 89.0μmol /l (= 38740ng /ml), Lersivirine 543μmol /l (= 168523ng /ml), delavirdina 171μmol /l (= 78072ng /ml), Rilpivirina 24.4μmol /l (= 8941ng /ml). Como efavirenz e Rilpivirina teve o maior potencial citotóxico e nevirapina é frequentemente utilizado em pacientes com HIV-1 positivos, os resultados destas três drogas foram ainda estudados em Panc-1, células de cancro do pâncreas e confirmadas com os ensaios de formação de colónias. Foram analisados ​​205 níveis sanguíneos de pacientes de Efavirenz, 127 da Rilpivirina e 31 de nevirapina. O nível médio de Efavirenz sangue foi 3587ng /ml (intervalo 162-15363ng /ml), de Rilpivirina 144ng /ml (intervalo 0-572ng /ml) e da nevirapina 4955ng /ml (intervalo 1856-8697ng /ml). Os níveis sanguíneos de nossos pacientes e de dados publicados tinham níveis de efavirenz comparáveis ​​ao

in vitro

EC50 tóxico em cerca de 1 a 5% de todos os pacientes.

Conclusão

Todos os estudada NNRTIs foram tóxicos contra as células cancerosas. A baixa percentagem de doentes a tomar Efavirenz alcançado

in vitro

níveis sanguíneos citotóxicos. Pode-se especular que, em pacientes HIV-1 positivas que têm níveis sanguíneos de efavirenz alta incidência do câncer de pâncreas pode ser reduzida. Efavirenz pode ser uma nova opção para o tratamento de câncer

Citation:. Hecht M, Erber S, Harrer T, Klinker H, Roth T, Parsch H, et al. (2015) Efavirenz tem a maior Anti-proliferativa efeito da não-nucleosídeos da transcriptase reversa inibidores contra as células do cancro do pâncreas. PLoS ONE 10 (6): e0130277. doi: 10.1371 /journal.pone.0130277

Editor do Acadêmico: Luis Menéndez-Arias, Centro de Biologia Molecular Severo Ochoa (CSIC-UAM), ESPANHA

Recebido: 03 de fevereiro de 2015; Aceito: 19 de maio de 2015; Publicação: 18 de junho de 2015

Direitos de autor: © 2015 Hecht et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel

Financiamento:. o financiamento para este trabalho foi fornecida pelo Centro Interdisciplinar de Investigação Clínica (IZKF) Erlangen: rotação de programa para os médicos (Markus Hecht). (Www.izkf.uk-erlangen.de) Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:. Markus Hecht informou pagamento para palestras da Merck e as despesas de viagem de TEVA e Merck. Thomas Harrer relatou consultoria passado da BMS e GSK, o pagamento para palestras de Gilead, Abbvie e Jannson, e as despesas de viagem de Gilead, Janssen e BMS. Hartwig Klinker receberam doações, taxas de adesão de tabuleiro e honorários por palestras da Abbvie, Boehringer, Bristol-Myers Squibb, Gilead, Glaxo-SmithKline, Hexal, Janssen-Cilag, MSD, a Roche, e ViiV Healthcare. Os outros autores declaram não haver conflitos de interesse. Esta não alterou a adesão do autor para PLOS ONE políticas em dados e materiais de compartilhamento.

Introdução

Hoje em dia, em pacientes HIV-1-infected a própria infecção pelo HIV pode ser controlado muito bem por A terapia anti-retroviral combinada. Consequentemente, a expectativa de vida desses pacientes não é substancialmente reduzido pela infecção [1]. Assim, os pacientes HIV-1-infected ficar mais velho e, consequentemente, a prevenção e terapia de comorbidades irá desempenhar um papel maior no futuro. Como um terço de todas as mortes em pacientes HIV-1-infected estão relacionadas com o cancro, a profilaxia de cancro e terapia é de primordial importância [2]. Neste contexto, os dados sobre os efeitos anti-cancro da medicação anti-retroviral tornar-se cada vez mais importante. Os inibidores de transcriptase reversa não nucleósidos (NNRTI) efavirenz (EFV) e nevirapina (NVP) são tóxicas contra uma ampla variedade de células cancerosas in

in vitro

[3-10] e têm apenas uma toxicidade menor contra o tecido normal células [3]. Um tratamento eficaz do cancro com NNRTIs também foi comprovada em ratos [4, 9]. Como estes NNRTI são muito bem tolerado no tratamento de HIV, são também promissora para o tratamento do cancro. Ainda não há nenhuma explicação científica completamente satisfatória do mecanismo de acção. Uma explicação para o modo de operação é a inibição de uma transcriptase reversa endógena em células cancerosas [4-8], outra é a interacção com o sistema de canabinóides [3]. Além disso, o estresse oxidativo nas mitocôndrias é discutido como mecanismo de ação [11-13]. Durante os últimos anos uma nova geração de NNRTIs foi desenvolvido, nomeadamente Rilpivirina (RPV), etravirina (ETR) e Lersivirine (LSV) (Figura 1). Até agora, estes fármacos não têm sido testados quanto aos efeitos anti-cancro. Consequentemente, neste EFV estudo, NVP, RPV, ETR, LSV e Delavirdine (DLV) foram investigadas para efeitos tóxicos contra as células cancerosas

in vitro

. Outro fator crucial é, se o

in vitro

concentrações tóxicas pode ser alcançado

in vivo

. Assim, o

in vitro

concentrações de drogas tóxicas foram comparados com os níveis sanguíneos em nossos pacientes e os dados publicados. Quando as concentrações de tóxicos sobre as células cancerosas pode ser alcançado

in vivo

, isso pode dar a oportunidade de tratar o HIV e câncer com uma droga. Isto também pode reduzir a incidência de cancros em doentes HIV-1-infectados. Além disso, Efavirenz tem uma tolerabilidade favorável a longo prazo em pacientes HIV-1-infected. Então, ele pode se tornar uma opção para o tratamento do câncer paliativos. Demonstrou-se que é tóxica contra uma ampla variedade de células cancerosas [3-10]. Neste estudo foram escolhidas linhas celulares de cancro pancreático, como para pacientes com câncer pancreático metastático ainda existem poucos e bastante tóxicos esquemas de tratamento.

Materiais e Métodos

cultura celular

Todas as linhas celulares foram cultivadas a 37 ° C em 5% de CO

2 incubadora. Todas as linhas celulares foram cultivadas em Dulbecco Modified Eagle Médium (PAN Biotech GmbH, Aidenbach, Alemanha) suplementado com 10% de soro fetal de bovino a 1% de penicilina /estreptomicina. A linha celular BxPC-3 foi obtido a partir da fonte comercial ATCC (20.2.1997, Wesel, Alemanha). A linha de células Panc-1 foi obtido a partir da Colecção Europeia de Culturas de Células (31.1.1997, Salisbury, Wiltshire, Reino Unido).

Drugs

O efavirenz (EFV), nevirapina (NVP), rilpivirina (RPV), etravirina (ETR), Lersivirine (LSV) Delavirdine ahd (DLV) (Sequoia Research Products Limited, Pangbourne, UK) foram dissolvidos em DMSO como soluções de reserva /l 10 mmol. A toxicidade contra células cancerosas foi testado numa gama de concentração de um a 1000 umol /L.

A citometria de fluxo

apoptose e necrose foi detectada pela anexina-V-APC (Anexina-V-aloficocianina ) e 7AAD (7-Aminoactinomycin) ensaio (BD Pharmingen, Franklin Lakes, EUA). Resumidamente, as células foram suspensas em solução de Ringer e coradas com anexina-V-APC (diluição de 1:40) e 7AAD (diluição de 1:40) durante 30 min a 4 ° C. Cada executar 10.000 células foram analisadas. Utilizou-se um fluxo Gallios citómetro (Citómetro Gallios 1.1 Software Beckmann Coulter, Krefeld, Alemanha). Os resultados foram analisados ​​com análise de citometria de fluxo Kaluza 1,1 (Beckmann Coulter, Krefeld, Alemanha). As experiências foram realizadas três vezes, com três repetições por série.

Colony ensaio de formação de

As diferentes drogas foram adicionados 24 horas após a semeadura de células. Meio contendo o fármaco foi retirado após um período de incubação de 72h. As culturas foram incubadas durante três semanas a 37 ° C. As colónias foram coradas com azul de metileno e aglomerados contendo 50 ou mais células foram pontuadas como uma colônia. As análises foram feitas assistida por computador para avaliar o número de colónias [14]. Os resultados foram calculados como a sobrevivência fracção (SF). Os experimentos foram realizados três vezes com três poços por experiência.

Os pacientes

Todos os EFV e NVP níveis sanguíneos medidos entre 2009 e 2014 no Laboratório Central do Hospital Universitário Erlangen e todos os níveis da droga RPV medida entre 2013 e 2015 no laboratório do Hospital Universitário de Würzburg foram analisados ​​retrospectivamente. Foi aprovado pela Comissão de Ética da Faculdade de Medicina da Friedrich-Alexander-Universidade de Erlangen-Nürnberg (Número: 3376) e do Comité da Faculdade de Medicina da Julius-Maximilian-Universidade de Würzburg Ética (Número: F-204 ). O consentimento informado foi obtido de todos os pacientes em forma escrita. Os níveis de sangue foram determinados em amostras de sangue extraído recentemente por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC). registros de pacientes foram anónimos.

Estatísticas

Gráficos foram plotados usando TechPlot 7 (SFTek, Braunschweig, Alemanha). Ilustrações foram montados para a fracção de células mortas no ensaio anexina-V-APC /AAD ea fração de sobrevivência no ensaio de formação de colónia. Todos os dados foram ajustados de acordo com:

O p0 parâmetros e p1 foram calculados por aproximação dos mínimos quadrados. A concentração efetiva 50% (EC50) foi calculada a partir dos valores da função embutidos.

Resultados

High potencial tóxico do Efavirenz e Rilpivirina contra as células cancerosas

Os dados publicados relatam um tóxico efeito de EFV e NVP contra células cancerosas, ao passo que o EFV é tóxico a concentrações mais baixas do que NVP [4, 5, 7]. Como uma nova geração de NNRTI tem sido desenvolvido, a questão levantada se estas drogas também são tóxicas contra o cancro. Assim, na sequência da NNRTIs EFV, NVP, RPV, ETR, LSV e DLV foram estudados os efeitos tóxicos contra BxPC-3 células de câncer pancreático

in vitro

(Fig 1). As células foram tratadas com os diferentes drogas durante 72h. O potencial destes fármacos para induzir a apoptose e necrose foi analisado por coloração com anexina-V-APC /7AAD e citometria de fluxo. Anexina-V-APC /7AAD dupla células negativas foram considerados como células viáveis,-Anexina-V APC-positiva /7AAD-negativas células foram considerados como células apoptóticas e células de anexina-V-APC /7AAD duplo-positivos foram considerados como células necróticas [15] (Fig 2A e 2B). Uma função foi ajustada para os dados da quantidade total de células mortas e a 50% de concentração eficaz (EC50) foi calculada (figura 2C-2H). Todos os NNRTIs são tóxicos contra as células cancerosas, enquanto que em doses mais baixas apoptose e em doses mais elevadas de necrose é o tipo principal de morte. Mas as concentrações tóxicas dos fármacos diferentes diferem amplamente. RPV e EFV são tóxicos já em baixas concentrações (EC50: RPV 24.4μmol /l, EFV 31.5μmol /L). ETR só é tóxico a concentrações três vezes mais elevada (EC50: 89.0μmol /L). NVP, DLV e LSV não se tornar tóxico até seis vezes as doses tóxicas de EFV ou RPV (EC50: NVP 239μmol /l, DLV 171μmol /l, LSV 543μmol /l). A toxicidade do EFV surge abruptamente quando um limite de dose é excedida. Em contraste, a toxicidade de RPV aumenta lentamente com o aumento das concentrações da droga. Estes resultados foram confirmados em Panc-1, células de cancro do pâncreas para os agentes mais tóxicos e EFV RPV. Além disso, para o menos tóxico, mas in vivo frequentemente utilizados NVP foi testado. Nesta linha celular EFV tinha uma toxicidade mais elevada (EC50: 49.0μmol /l) de NVP e RPV (EC50: 296μmol /L e 294μmol /l) (figura 2J-2L). Assim, apenas EFV tem uma toxicidade em baixa concentração, contra ambas as linhas de células do cancro do pâncreas.

A fracção de células apoptóticas e necróticas após tratamento com diferentes concentrações em diferentes NNRTIs foi medida por Anexina-V-APC coloração /7AAD e fluxo citometria. Um exemplo de propagação nas parcelas de FACS é mostrada para não tratado (a) e com uma concentração tóxica de EFV células tratadas (b). Uma curva foi ajustada através dos pontos de dados da fracção total de células mortas e o EC50 foi calculada para cada droga. A linha celular de cancro pancreático BxPC-3 foi tratada durante 72 h com RPV (c) EFV, (d) de NVP, (e), (f) ETR, (g) LSV e (h) DLV. A linha de células do câncer de pâncreas Panc-1 foi tratada durante 72 horas com (j) EFV, (k) NVP e (l) RPV.

Como confirmação destes resultados, a toxicidade de EFV, NVP e RPV foi estudada com ensaios de formação de colónia de BxPC-3 células de câncer de pâncreas (Fig 3). Na formação de colónias ensaios, a fracção de sobrevivência (EC50) de EFV (40μmol /l) e RPV (16.2μmol /l) foram menores do que a EC50 de NVP (121μmol /l). Isto corresponde à coloração de anexina-V-APC /7AAD. EFV e RPV são claramente tóxica contra BxPC 3 células de câncer de pâncreas em concentrações mais baixas em comparação com outros NNRTIs

in vitro

.

ensaios de formação de colónias foram realizadas com (a) EFV, (b) NVP e (c) de RPV. A linha celular de cancro pancreático BxPC-3 foi tratada durante 72 horas com cada um dos medicamentos. A fracção de sobrevivência (SF) foi analisada e normalizado em relação ao controlo. Os gráficos foram montados e foi calculado o EC50.

In vitro

concentrações tóxicas de Efavirenz contra tumor pode ser alcançado em um baixo percentual de pacientes

Estes resultados levantam a questão de saber se o EFV ou RPV pode ser utilizado como droga anti-cancro em pacientes. O ponto chave desta questão é, se o

in vitro

concentrações de drogas tóxicas pode ser alcançado

in vivo

. Consequentemente analisamos os níveis da droga no sangue de pacientes HIV-1-infected.

No Laboratório Central dos níveis sanguíneos Hospital Universitário Erlangen de EFV e NVP são analisados ​​no diagnóstico de rotina. No total, foram determinados os níveis sanguíneos de 205 EFV e 31 níveis sanguíneos de NVP entre 2009 e 2014 usando cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). Além disso, 127 níveis sanguíneos de RPV foram analisadas com HPLC no laboratório do Hospital Universitário de Würzburg entre 2013 e 2015. Os níveis séricos de efavirenz foram medidos em amostras de sangue geralmente obtidos de 8 a 13 horas depois de tomar a droga, enquanto RPV e NVP níveis séricos medições foram realizados em vários pontos de tempo após a ingestão.

O nível EFV significativo nos nossos pacientes foi 3587ng /ml (equivalente 11.4μmol /L). A mediana foi 2055ng /ml (equivalente 6.51μmol /l) com um alcance total de 162 para 15363ng /ml (equivalente 0,513 para 48.7μmol /l) (Fig 4A). Quando estes níveis sanguíneos são comparados com os

In vitro

doses tóxicas, 3 níveis (1,5%) foram acima do EC50 tóxico in vitro de 31.5μmol /l (Anexina-V-APC /7AAD coloração, BxPC-3 ). Pode-se concluir que as concentrações

in vitro of the anti-cancro eficaz de EFV estão perto das doses in vivo e pode ser alcançado em um baixo percentual de pacientes.

Os níveis sanguíneos de (a ) EFV, (b) de NVP e (c) RPV determinada por HPLC (barras). Estas concentrações in vivo são comparados com a função de ajuste da toxicidade in vitro contra células BxPC-3 de cancro pancreático na coloração de anexina-V-APC /DAA (linha a cheio).

O nível médio de NVP foi 4955ng /ml (equivalente 18.6μmol /L). A mediana foi 4992ng /ml (equivalente 18.7μmol /l), com uma gama completa de 1856 a 8697ng /ml (equivalente a 6,95 32.6μmol /l) (Fig 4b). Todos estes níveis sanguíneos foram muito abaixo da

in vitro

concentrações tóxicas (CE50) para a apoptose /necrose.

O nível RPV média foi de 144ng /ml (equivalente 0.39μmol /l). A mediana foi 128ng /ml (equivalente 0.35μmol /L) com um intervalo total de 0 a 572ng /ml (equivalente a 0 1.56μmol /l) (Fig 4C). Quando estes níveis sanguíneos são comparados com o

in vitro

concentrações tóxicas, nenhuma atingiu o EC50 para a apoptose /necrose. Assim, as concentrações de NVP e RPV no sangue do paciente são muito mais baixos do que a concentração citotóxica contra células cancerosas in

in vitro

. Apenas pacientes individuais tendo EFV chegar ao

in vitro

EC50 tóxico.

Discussão

Os efeitos citotóxicos de EFV e NVP contra linhas celulares de cancro e cancros em modelos animais têm sido relatados vários vezes. No entanto, a actividade anti-cancro de NVP é aproximadamente dez vezes mais baixo do que o de uma EFV [3-10]. Durante os últimos anos, novas NNRTIs têm sido desenvolvidos e aplicados na prática clínica. Uma actividade anti-célula do cancro da outra NNRTIs DLV, ETR, RPV ou LSV não foi estudado até agora. Poderíamos mostram que todos os NNRTIs são tóxicas contra as células cancerosas com uma ampla gama de concentrações tóxicas. RPV e EFV são tóxicos contra as células cancerosas do pâncreas em concentrações mais baixas. Encontramos EC50s de EFV (31.5μmol /l e 49.0μmol /l) que são comparáveis ​​às concentrações publicados que mostram a atividade das células anti-câncer

in vitro

(intervalo 10-60μmol /l) [3-5, 7, 11-13]. Em células BxPC-3 as concentrações inferiores tóxicos NNRTI induzida apoptose e maior concentração de necrose, enquanto nas células os Panc-1 foi encontrado nenhum aumento da apoptose. Além disso, as células Panc-1 era muito mais resistente ao tratamento com NNRTI. Para além de várias pequenas diferenças das duas linhas de células, BxPC-3 de tipo selvagem portos K-ras, enquanto que em Panc-1 K-RAS é mutado [16]. Esta poderia ser uma razão para a diferente sensibilidade ao tratamento NNRTI e deve ser considerado em estudos futuros enfocando o mecanismo de ação.

A toxicidade de NNRTIs contra as células cancerosas promove a ideia de usar essas drogas em pacientes HIV-1- pacientes infectados para prevenir ou mesmo tratar o câncer. Mas o fator crucial é, se o

in vitro

concentrações tóxicas pode ser alcançado

in vivo

. Em nossos pacientes, a

in vitro

EC50 tóxica de EFV foi alcançado em 1,5% de todas as amostras quantificados, enquanto que nenhum dos pacientes que tomam RPV ou NVP atingiu o

in vitro

EC50 tóxico. Na Tabela 1 publicados níveis sanguíneos NNRTI em pacientes são comparados com os

in vitro

concentrações tóxicas contra células cancerosas. Se um estudo continha mais grupos de pacientes, foi escolhido o grupo com a dose mais elevada. Mesmo sem aumentar a dose comum, uma baixa percentagem de pacientes que tomam EFV atingiu o

in vitro

tóxico EC50 (2,4-5,2%). Estes resultados são comparáveis ​​com os resultados em nossos pacientes (1,5%). Nenhum dos pacientes, que receberam outros NNRTIs, atingiu o respectivo EC50. Em um estudo a dose foi aumentada para EFV 800mg devido a uma combinação com o indutor do citocromo P450 rifampicina. Consequentemente 14,3% destes pacientes conseguiu a

in vitro

EC50 tóxico. Como a rifampicina reduz as concentrações EFV por indução do citocromo P450, EFV 800mg sem rifampicina pode mesmo conduzir a concentrações sanguíneas EFV mais elevadas [17]. Além disso, a média das concentrações de sangue de todos os pacientes foi comparado com o valor de EC50 dos diferentes fármacos. O

in vitro

EC50 de EFV foi aproximadamente três vezes maior do que os níveis medidos em pacientes, o que é comparável com o resultado de nossos pacientes (aumento por um fator de 2.8). Entre os outros NNRTIs maiores diferenças do

in vitro

EC50 tóxicos e níveis de sangue do paciente foram encontrados (Tabela 1). Todos estes níveis sanguíneos foram quantificadas aproximadamente 12 h após a ingestão do fármaco. Assim, os níveis de medicamento inicial foram maiores do que os valores medidos, porque a concentração sanguínea máxima é alcançada após cerca de 3h a ingestão de drogas [18]. Neste contexto, também tem de ser considerado que o tempo de tratamento da linha de células

In vitro

foi 72h. Um tratamento contínuo

in vivo

pode até ser mais tóxico contra as células cancerosas.

Neste estudo o efeito tóxico dos diferentes NNRTIs foi estudada exclusivamente em duas linhas celulares de cancro do pâncreas. No entanto, EFV é tóxica contra uma grande variedade de diferentes linhas de células de cancro in

in vitro

incluindo o carcinoma colorectal, cabeça e pescoço carcinoma de células escamosas, o glioblastoma, o cancro linfático, o carcinoma renal, carcinoma da próstata, melanoma, carcinoma do pulmão de células pequenas e carcinoma de tireóide [3-5, 7].

Mas tem que ser esclarecido, que este estudo só compara o

in vitro

toxicidade para os níveis sanguíneos de pacientes HIV-1 positivos. A EC50 é um valor estabelecido para comparar a toxicidade. Mas isso não prova que, se as concentrações sanguíneas estão subindo até o nível do

in vitro

EC50, será observado um efeito anticancerígeno. Como não existe nenhum ensaio clínico até agora, os resultados deste estudo comparável apoiar o uso de EFV em futuros ensaios clínicos com NNRTIs em pacientes com câncer.

Existem diferentes teorias sobre o mecanismo de toxicidade do NNRTI contra as células cancerosas. Uma teoria é a inibição de uma transcriptase reversa endógena, que só é activada nas células cancerosas e essencial para a sua malignidade [4-9]. Neste contexto, a comparação do potencial anti-retroviral do NNRTIs diferente em tipo selvagem de HIV-1 isolados com o potencial citotóxico contra as células cancerosas é altamente interessante. RPV inibe HI-vírus em concentrações mais baixas, seguidos de EFV, ETR, DLV, NVP e LSV [34-36]. Isto reflecte a ordem do potencial tóxico contra BxPC-3 de células de cancro do pâncreas, que foi detectado neste estudo. Estas descoberta suporta a teoria de que o alvo é uma transcriptase reversa endógena em células cancerosas, que é muito semelhante à transcriptase reversa do vírus HIV. Por outro lado, as grandes diferenças das concentrações tóxicas contra células cancerosas e a toxicidade de diferentes RPV, mas não EFV, nas duas linhas de células de cancro do pâncreas, argumenta contra esta teoria e suporta diferentes mecanismos de acção. Além disso, em experimentos de clonagem publicados anteriormente a suspeita de transcriptase reversa de células cancerosas ORF2 não foi inibida por NNRTIs, que argumenta contra essa teoria [37, 38].

Outro grupo de pesquisa estudou a toxicidade do fígado de EFV e descobriu que causas EFV o stress oxidativo e o dano mitocondrial, o que leva a apoptose em células do fígado [11-13]. Tal como as células cancerosas e consumir mais energia do que contêm mais mitocôndrias do tecido normal, a toxicidade mitocondrial de EFV também pode ser um passo importante no mecanismo [39].

Como mencionado na introdução expectativa de vida do HIV-1-infectados pacientes é prolongada e câncer se torna mais freqüente no envelhecimento pacientes HIV-1-infected. Em grandes estudos epidemiológicos pacientes em HAART tiveram um risco reduzido também de cancros não definindo-AIDS, que pode ser um indício para uma atividade anti-câncer de algumas drogas usadas em HAART [40, 41]. Em uma análise da incidência de câncer de pacientes sem HAART não diferiram entre pacientes em HAART baseada HAART ou inibidor da protease com base NNRTI [42]. Apenas este estudo não fez distinção entre os pacientes que tomam EFV e os pacientes em NVP, que foi muito menos eficaz em nossa análise. Mas existem dados epidemiológicos sobre regressões de lesões cervicais pré-cancerosas em mulheres infectadas pelo HIV quando a terapia anti-retroviral foi iniciada [43, 44].

Os cálculos de dose neste estudo mostraram que o

in vitro

concentrações tóxicas de EFV contra células cancerosas pode ser alcançado

in vivo

em um baixo percentual de pacientes sem aumentar a dose padrão de EFV 600mg por dia. Até agora, não existe apenas um ensaio clínico em que NNRTIs foram usadas para tratar o câncer em pacientes HIV-negativos [45]. Cinquenta e três pacientes com câncer de próstata metastático resistente à castração foram tratados com 600 mg uma vez por dia EFV. O PSA total (Antígeno Prostático Específico) taxa de progressão em três meses foi de 72%. Curiosamente, o subgrupo de pacientes com níveis plasmáticos acima EFV 3000ng /ml, apenas teve uma taxa de progressão de PSA de 28%. Estes constatação apoia o nosso resultado, que uma baixa percentagem de pacientes que tomam EFV atingir níveis sanguíneos anti-cancro eficazes. Também na cancros da tiróide uma atividade anti-câncer de NNRTIs tem sido descrita em pacientes HIV-negativos [46, 47]. Além disso existem relatos de casos sobre a regressão de linfomas sob NNRTI HAART base e um caso de uma sobrevivência a longo prazo de um paciente com câncer de pulmão de pequenas células [48-50].

Estes dados confirmam a ideia , que EFV poderia ser usado como droga citotóxica contra o câncer também

in vivo

. Em pacientes com VIH-1 infectados tendo EFV uma redução da incidência de cancros pancreáticos podem ser alcançados. Além disso, o efavirenz pode levar a uma progressão retardada ou mesmo encolhimento do tumor em pacientes com cancros.

Conclusão

O efavirenz é o único NNRTI que tem o potencial de ser utilizado para o tratamento do cancro. Pode-se especular que, em doentes com níveis sanguíneos de efavirenz alta incidência do câncer de pâncreas pode ser reduzida. Efavirenz pode ser uma nova opção no tratamento de cancro.