é PTEN uma fosfatase lipídica que converte fosfatidilinositol-3, 4, 5-trifosfato (PtdInsP3) em fosfatidilinositol-4, 5-bifosfato (PtdInsP2) e sinalização dependente antagoniza fosfoinositida 3-quinase (PI3K). Nedd4-1 (células precursoras neuronais expressa, desenvolvente regulada para baixo 4-1) foi o primeiro a ligase E3 para ser implicada na ubiquitinação de PTEN. Nedd4-1 pode catalisar a mono e polyubiquitination de PTEN, levando a importação nuclear de PTEN e PTEN degradação, d, assim, regular o crescimento axonal em neurónios.
Anterior in vitro e os resultados in vivo mostram que a Nedd4-família E3 ligases Nedd4-1 e Nedd4-2 desempenhar um papel evolutivamente conservada na regulação da morfogênese axônio.
primeiro, mostramos que os níveis de proteína PTEN limites Nedd4-1 por modular a atividade dos mTORC1, um complexo de proteínas que controla a síntese de proteínas e crescimento celular.
em seguida, Nedd4 familiar E3 ligases Nedd4-1 e Nedd4-2 promover o crescimento axonal em neurônios do sistema nervoso central de mamíferos. A expressão, ubiquitinação, localização, ou a actividade de fosfatase de PTEN não é alterado.
Opostamente, PTEN regula negativamente a expressão Nedd4-1 ao nível da tradução. E isso mamíferos Nedd4-1 e Nedd4-2 regular o crescimento axonal.
Nossos dados demonstram que ligases E3 Nedd4 familiar, promover o crescimento axonal e ramificação no cérebro de mamíferos em desenvolvimento, wherePten não é um substrato relevante. Em vez disso, PTEN controla o crescimento neurite pela regulação da expressão Nedd4-1.
homeostase retinóide é fundamental para o desenvolvimento embrionário normal. fatores reguladores fundamentais que medeiam os efeitos pleiotrópicos de RA incluem várias classes de fatores de transcrição RA-vinculativas, os receptores de ácido retinóico RARa, R a R b, e RARg. SIRT1, uma NAD + nuclear deacetilase proteína dependente, é o membro mais conservada da família sirtuin de enzimas.
Em primeiro lugar, vamos mostrar que SIRT1 de? Deficiência está associada com defeitos elevados de sinalização RA e desenvolvimento em camundongos. Temos identi? Ed tanto CRABPI e CRABPII como proteínas hyper-acetilado em embrionária SIRT1 mouse null? Fibroblastos (MEFs) em uma rotulagem isótopo estável mundial por aminoácidos em cultura de células (SILAC) à base de análise de Lys acetilação.
Em seguida, examinamos se SIRT1 pode interagir fisicamente com CRABPs. Foram analisadas as localizações subcelulares de HA-CRABPII em WT e SIRT1 KO MEFs por imuno? Uorescent CRABPII coloração é um portador RA celular que transloca do citoplasma para o núcleo após a RA de ligação para ativar os receptores AR nucleares.
mostramos que acetilação RA-mediada ofCrabpii no K102 é essencial para a sua acumulação nuclear e posterior ativação da sinalização da RA. SIRT1 interage e deacetylates CRABPII, regulando a sua localização subcelular.
Por fim, a exclusão de SIRT1 leva ao aumento da diferenciação MESC induzida por RA.
Em resumo, temos mostrado que através CRABPII desacetilação, SIRT1 desempenha um papel vital na regulação da sinalização RA celular e MESC pluripotência. Este SIRT1 /CRABPII /RAR cascata de sinalização irá fornecer uma maneira de estudar interações gene-ambiente que afetam o desenvolvimento animal.