Abstract

Fundo

A caixa de fator de transcrição forkhead A1 (FOXA1) é sugerido para ser importante em cancros dependentes de hormonas, embora com poucos dados para o cancro endometrial. Nós investigamos os níveis de FOXA1 no cancro endometrial primário e metastático de expressão em relação ao fenótipo clínico e alterações de transcrição relacionados ao estado FOXA1.

Métodos

A expressão de proteínas de FOXA1 foi explorada por imuno-histoquímica em 529 primária 199 e lesões metastáticas de carcinoma do endométrio. os níveis de mRNA de correspondente 158 lesões congelados primária e 42 metastáticos frescos foram analisados ​​usando Agilent Microarrays (44k) em paralelo.

Resultados

expressão da proteína Low FOXA1 em tumores primários significativamente correlacionadas com mRNA baixo FOXA1, alta idade, histologia não-endometrioid, de alta qualidade, perda de eRa e PR e pobres sobrevivência (todos os valores de p 0,05). Através de uma pesquisa Conectividade Mapa, inibidores de HDAC foram sugeridos como tratamento potencial para pacientes com baixa expressão FOXA1. Um aumento na expressão FOXA1 foi observada a partir principal para lesões metastáticas e correlacionada com a expressão CDKN2A em metástases.

Conclusão

Baixa FOXA1 está associada com a sobrevivência pobre e sugere um potencial de inibidores de HDAC em endometrial carcinoma. Uma mudança na expressão FOXA1 do ensino primário para as lesões metastáticas é observado e expressão do gene indica uma ligação entre FOXA1 e CDKN2A em lesões metastáticas

Citation:. Tangen IL, Kråkstad C, Halle MK, Werner HMJ, Øyan AM, Kusonmano K, et al. (2014) Switch no Associates FOXA1 status com cancro Endometrial progressão. PLoS ONE 9 (5): e98069. doi: 10.1371 /journal.pone.0098069

Edição: Natasha Kyprianou, da Universidade de Kentucky College of Medicine, Estados Unidos da América

Recebido: 28 Janeiro, 2014; Aceito: 18 de abril de 2014; Publicado em: 21 de maio de 2014

Direitos de autor: © 2014 Tangen et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este estudo foi apoiado por Helse Vest, da Universidade de Bergen, o Cancer Society norueguês e do Conselho de Investigação da Noruega. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

no cancro do endométrio mundo ocidental é a neoplasia maligna ginecológica mais comum, ea incidência está a aumentar [1]. cancros do endométrio, estão amplamente classificados em dois grupos. Tipo I câncer endometrial é o mais comum e é caracterizada por resultado favorável, histologia endometrioid, baixo estágio e grau e de expressão, muitas vezes intactas de receptores hormonais. Tipo II câncer endometrial está associada com mau resultado, histologia não-endometrioid, alta estágio e grau, e geralmente tem perdido expressão de receptores hormonais [2]. Os pacientes são standardly tratados cirurgicamente com a histerectomia com salpingoophorectomy bilateral com ou sem linfadenectomia. O efeito do tratamento adjuvante sistêmica é menos estudado para endometrial em relação ao câncer de ovário, embora a platina semelhante com base regimes de quimioterapia em combinação com paclitaxel, muitas vezes é usado no cenário adjuvante e doença sistêmica.

estrogênio endométrio cancros dependentes são pensados ​​para resultar de uma exposição sem oposição prolongada aos estrogénios. activação dependente de estrogénio de α receptor de estrogénio (RctE) foi relatado de conduzir a proliferação através de regulação positiva de factores de crescimento tais como o factor de crescimento epidérmico (EGF) [3], o seu receptor EGFR [4], insulina como factor de crescimento (IGF-1) [5] e favoreçam o crescimento proto-oncogenes, como c-myc [6]. Regulação da atividade ERa também é conhecido por envolver vários cofatores incluindo tanto coactivators e co-repressores. Além disso a caixa de factor de pioneiro forkhead A1 (FOXA1) foi demonstrado ser um importante regulador da actividade ERa através de facilitar a ligação de ERa [7].

FOXA1 é um membro da família do factor de transcrição forkhead Box, anteriormente conhecido como Fator Nuclear Hepatócito família (HNF). proteínas FOXA1 liga ao DNA e induzir rearranjo nucleosomal que muitas vezes resulta em uma estrutura da cromatina aberta [8], [9]. Isso facilita a ligação de factores de transcrição adicionais, incluindo ERa [7]. FOXA1 foi encontrado para ser recrutado para quase metade de todas as regiões de ligação ER [7].

A associação entre os receptores hormonais e conhecidos variáveis ​​de prognóstico, como estágio FIGO, grau histológico e sobrevivência tem sido bem documentada em carcinoma endometrial [10] – [12]. Mais conhecimento sobre os mecanismos moleculares envolvidos na sinalização estrogênio e cofatores relacionados com o estrogénio em cancros relacionados com hormonas é necessário para desenvolver novas estratégias terapêuticas. Vários estudos têm sugerido um papel para FOXA1 em cancros dependentes de hormonas diferentes [13]. expressão alta FOXA1 está correlacionada com bom prognóstico no câncer de mama positivo para o RE, mas em nível FOXA1 cancro da próstata tem sido associada com bom ou mau prognóstico, dependendo do grupo de pacientes, e tem sido proposto como um marcador dependente do contexto para a sobrevivência em cancros dependentes de hormonas [ ,,,0],14] – [17]

Além disso, a associação entre FOXA1 e ER no cancro da mama e receptor FOXA1 e andrógeno (AR) no cancro da próstata sugere que os níveis de FOXA1 expressão podem influenciar a capacidade de resposta ao tratamento anti-hormonal em dependente de hormonas. cancros. Nesta fundo, nós investigamos o nível de FOXA1 expressão no câncer de endométrio em relação ao fenótipo e biomarcadores estabelecidos, incluindo status de receptores hormonais; e, posteriormente, explorar alterações de transcrição relacionados com os níveis de proteína FOXA1 em lesões de carcinoma endometrial primários e metastáticos.

Materiais e Métodos

Ética declaração

Todas as partes do estudo foram aprovados de acordo a legislação norueguesa. O estudo foi aprovado pelo Data Inspecção norueguês, noruegueses Ciências Sociais Data Services e do Comité Regional Medical Ethics Research, REC Oeste (NSD15501; REK 052.01). Todos os participantes assinaram termo de consentimento.

série Paciente

Uma série de pacientes de base populacional, incluindo 529 pacientes com diagnóstico de câncer endometrial em Condado de Hordaland (Noruega) durante o período de 2001-2011, foi estudada . Tecidos de tumores primários foi incluído prospectivamente a partir pacientes consentiram cirurgicamente encenado de acordo com a Federação Internacional de Ginecologia e Obstetrícia (FIGO) 2009 critérios. As variáveis ​​clínico-patológicas, idade no momento do diagnóstico, estágio FIGO, tipo histológico e grau, tratamento e seguimento foram obtidos através da revisão de prontuários médicos, conforme relatado anteriormente [18]. Para 91 doentes com doença avançada ou recorrente, biópsias estavam disponíveis a partir de tecido metastático (um total de 199 lesões FFPE). tecido fresco congelado (158 primária e 42 lesões metastáticas) foi recolhido e preparado em paralelo com as embebidos em parafina tecidos fixados em formalina (FFPE), quando disponível.

Tissue microarrays

Tissue microarrays (TMA) foram preparados a partir de tecido FFPE a partir de tumores primários e metástases. A área de mais alto grau do tumor foi identificado em hematoxilina e eosina lâminas coradas. Três cilindros de tecido de tumores primários, e um cilindro de tecido de metástases (0,6 mm) foram perfurados para fora das áreas seleccionadas, e montado em um bloco de parafina receptor utilizando um instrumento de precisão feita sob encomenda (instrumentos Beecher, Silver Spring, MD, EUA). Este método para a produção de TMA foi anteriormente descrito e validado [19].

A imuno-histoquímica

uM Cinco secções espessas TMA foram desparafinados em xileno e re-hidratadas em etanol graduado série. Para a detecção FOXA1, a recuperação de antigénio foi realizado por ebulição micro-ondas durante 20 minutos em tampão de citrato (pH 6). peroxidase endógena e ligação não específica do anticorpo primário foram bloqueadas com blocos peroxidase (S2023, Dako, Dinamarca) e bloco de proteína livre de soro (X0909, Dako, Dinamarca). As lâminas foram incubadas com anticorpo primário anti-FOXA1 (ab23738, Abcam, Reino Unido), diluída 1:800, durante 30 minutos à temperatura ambiente. O anticorpo secundário, anti-murganho combinado e anti-coelho (K5007, Dako, Dinamarca), foi aplicada durante 30 minutos, seguido de 8 minutos com diaminobenzidina (DAB +, K4007, Dako, Dinamarca) antes contracoloração com hematoxilina. a coloração imuno-histoquímica de ERa foi previamente descrito para o 477 78 tumores primários e metástases. 92 tumores primários adicionais foram coradas de acordo com o método descrito anteriormente [12].

Avaliação da coloração

IHC coloração foi avaliado utilizando um sistema de semi-quantitativo, onde tanto a intensidade da coloração, e a área de tumor foram consideradas as células com coloração positiva. intensidade da coloração foi classificada de 0 (sem coloração) a 3 (de coloração forte). Proporção de células de tumor coradas foi classificada como 0, 1 ( 10%), 2 (10% a 50%) e 3 ( 50%). Um índice de marcação foi calculado como o produto de intensidade e a área de coloração. Na análise estatística, os índices de coloração para FOXA1 foram categorizados em tercis, considerando a distribuição de frequência para o marcador, o tamanho dos subgrupos e o número de eventos em cada categoria. Os dois tercis mais baixos, mostrando estimativas de sobrevivência semelhantes, foram posteriormente incorporadas. do valor de corte para ERa foi aplicado como previamente definido [12]. Para avaliar a reprodutibilidade, dois observadores independentes (ILT e CK) marcou lâminas TMA aleatórios, dando κ-valor de 0,80 para FOXA1 e 0,82 para ERa [12]. Ao avaliar várias lesões metastáticas heterogêneas formar um mesmo paciente, FOXA1 foi definido como baixo se alguma das lesões metastáticas demonstrou baixa expressão.

Microarray análise

tecidos recentemente congelados de 158 tumores primários e 42 metástases foram recolhidas em paralelo com os tecidos FFPE. Extração de RNA foi feita utilizando o RNeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, Alemanha). RNA foi hibridizado a Agilent Whole Human Genome Microarrays 44k (Cat. Nº. G4112F) de acordo com as instruções do fabricante, e as matrizes foram escaneados usando o Agilent Microarray Scanner Bundle. O software J-Express (Molmine, Bergen, Noruega) foi usado para analisar os dados. sinal de mancha mediana foi utilizada como medida de intensidade e dados de expressão foram normalizados utilizando a normalização quantil. dados de microarranjos foram depositadas no banco de dados ArrayExpress Archive, https://www.ebi.ac.uk/arrayexpress/com o Número de Acesso E-MTAB-2532. Genes diferencialmente expressos entre os grupos foram identificados por SAM (Análise Importância do Microarray) análise e foram considerados significativos se False Descoberta Rate (FDR) 0,01. Se o número de amostras não permitem o uso de SAM, FSS (Recurso subconjunto Selecção) análise foi utilizada e P 0,01 foi considerado significativo

Conectividade Mapa

Correlação entre a expressão gênica e potencial. terapêutica foi investigada utilizando o banco de dados de assinatura drogas Conectividade Mapa [20]. As assinaturas de drogas neste banco de dados é gerada por genes diferencialmente expressos em linhas de células tratadas com fármacos em relação a linhas de células não tratadas, e reflectem os genes que se presume ser alterada pela droga. Genes diferencialmente expressos em função do estado FOXA1, tanto dentro de toda a população de pacientes e no grupo negativo ERa foram a base para a análise Conectividade Mapa. ​​

A análise estatística

O pacote de software SPSS 19.0 (SPSS Inc, Chicago, IL) foi utilizado para as análises estatísticas. A significância estatística foi definida como a probabilidade de 0,05. Associação entre os grupos foi avaliada utilizando o χ

2 Teste de Pearson para as variáveis ​​categóricas. análise de sobrevida univariada foi realizada utilizando o método com data da cirurgia primária como data e hora para a morte de entrada de Kaplan-Meier (produto-limite) devido ao carcinoma endometrial como endpoint (sobrevida específica da doença). Os pacientes que morreram de outras causas foram censurados na data da morte. O teste de log-rank (Mantel-Cox) foi utilizado para comparar a sobrevivência entre os grupos. O modelo de regressão de riscos proporcionais de Cox foi utilizado para avaliar o impacto prognóstico da FOXA1 ajustado para outros marcadores de prognóstico no câncer endometrial. Devido a uma interação entre estágio FIGO e tipo histológico, a análise de Cox foi realizada no subtipo endometrioid.

Resultados

expressão Baixa FOXA1 está associada com mau prognóstico no câncer de endométrio

FOXA1 foi previamente demonstrado ser um factor para ER pioneiro no cancro da mama (Figura S1). Nós investigamos uma coleção grande e única de amostras de cancro do endométrio para elucidar um papel potencial semelhante para FOXA1 nestas doenças. a expressão da proteína de FOXA1 foi principalmente nuclear. A expressão da proteína foi observada tanto em tecidos glandulares e do estroma, mas apenas a coloração no núcleo de tecido glandular foi marcado. Ao comparar o status FOXA1 com variáveis ​​clínico-patológicas disponíveis, baixa expressão FOXA1 (índice de pontuação 0-4) foi significativamente correlacionada com idade elevada (P = 0,04), histologia não-endometrioid (P = 0,002), alto grau histológico (P = 0,003) , perda de PR (P = 0,02) e ERa (P = 0,003) (Tabela 1). expressão baixa proteína FOXA1 foi significativamente associada com a sobrevivência da doença reduzida específica (P = 0,004) (Figura 1A) e baixa expressão FOXA1 mRNA (P = 0,001) (Figura 1B). Para pacientes com tumores ERa positivos, não houve impacto da FOXA1 (Figura 2A), em contraste com o grupo negativo ERa onde a baixa expressão FOXA1 foi significativamente associada com pior evolução (Figura 2B). Em uma análise multivariada, no subgrupo endometrioid, utilizando o modelo de riscos proporcionais de Cox com a idade, estágio FIGO, grau histológico, FOXA1 e expressão ERa como variáveis, expressão FOXA1 foi encontrado para ter impacto prognóstico semelhante ao grau e status de ERa, embora sem impacto prognóstico independente (Tabela S1).

(a) curva de Kaplan-Meier mostrando sobrevivência específica da doença de acordo com o nível de proteína FOXA1. baixa expressão FOXA1 é significativamente correlacionada com a sobrevivência reduzida para pacientes com carcinoma endometrial. Esquerda e inserção direita mostra expressão nuclear de baixa e alta de FOXA1 respectivamente. (B) a expressão da proteína Baixa de FOXA1 é significativamente correlacionada com baixa expressão de mRNA FOXA1.

(A) expressão Baixa FOXA1 entre os pacientes positivos ERa não impactou significativamente a sobrevivência. (B) Entre ERa pacientes negativos expressão FOXA1 influenciou significativamente a sobrevida com pior prognóstico para pacientes com baixa FOXA1.

A expressão dos genes relacionados com a FOXA1 e expressão ERa não se sobrepõe

como para o cancro da mama, perda de ERa tem sido consistentemente associada a menor sobrevida em pacientes com câncer endometrial [2], [11], [12]. Como FOXA1 é mostrado para ser importante para interações ERa-cromatina no cancro da mama, que investigou também se relacionado FOXA1 expressão genética assemelha-se a expressão do gene regulado ERa no câncer de endométrio. análise SAM identificado 468 genes diferencialmente expressos em tumores com expressão ERa intacto em comparação com perda, ao passo que 506 genes foram diferencialmente expressos em tumores com expressão elevada em comparação com FOXA1 baixo. Apenas três genes sobrepostos foram identificados no ERa e listas de genes relacionados FOXA1 (Tabela S2 e S3).

inibidores de HDAC são sugeridos como potenciais drogas para o tratamento de cancros do endométrio com baixo FOXA1

genes diferencialmente expressa relacionadas ao estado FOXA1 foram usadas para consultar Conectividade Mapa de compostos com potencial para reverter o gene assinatura de pacientes com baixo status FOXA1. Dois inibidores de HDAC surgiu entre os cinco principais compostos classificados (Tabela 2). Estes dois inibidores de HDAC foram também os dois primeiros classificados compostos anticorrelated a baixa expressão FOXA1 dentro do ERa subgrupo negativo paciente (Tabela 2) (Tabela S4).

propagação metastática está associada a uma mudança na expressão FOXA1

As lesões metastáticas de 91 pacientes foram coradas para a expressão FOXA1 para investigar o status FOXA1 em lesões metastáticas. Ao definir FOXA1 como baixo se qualquer das lesões metastáticas demonstraram baixa expressão, nenhuma mudança significativa na expressão foi observado entre toda a população de tumores primários e as lesões metastáticas (Figura 3A). Surpreendentemente, quando se comparam os níveis FOXA1 para tumores primários a partir de pacientes com doença sistémica com os seus homólogos lesão metastática, expressão de FOXA1 verificou-se ser significativamente mais elevada nas lesões metastáticas em comparação com a lesão primária correspondente. Isto também era verdade quando todas as lesões metastáticas, independente do número de metástases por paciente, foram examinados (Figura 3B). Encontraram-se previamente que existe uma perda significativa da expressão de ERa do primário para as lesões metastáticas [12]. Ao comparar FOXA1 e expressão em ERa lesão metastática nenhuma correlação entre os níveis de expressão foi encontrado (R

2 = 0,012) (Figura 3C). O mesmo foi observado quando se comparam os níveis FOXA1 nas metástases de tumores do endométrio primários única ERa positivas (r

2 = 0,11) (Figura 3D).

(A) expressão FOXA1 é retido a partir de tumores primários de metástases, enquanto a expressão é significativamente aumentada a partir de tumores primários emparelhados para as suas metástases correspondentes. FOXA1 é definido como baixo se qualquer das lesões metastáticas dos casos individuais explorado (n = 78) demonstraram baixa expressão. (B) Olhando para todas as metástases (n = 199), há um aumento significativo na expressão do ensino primário para as lesões metastáticas. Os números indicam o número de casos investigados com o número de casos com alta expressão entre parênteses. (C) Não há correlação entre FOXA1 e expressão ERa nas metástases ea correlação entre FOXA1 e expressão ERa nas metástases apenas a partir de tumores primários positivos ERa é baixa (D).

Níveis

FOXA1 e CDKN2A são ligados em lesões metastáticas

para investigar diferenças nos efeitos de transcrição relacionados aos níveis FOXA1 em lesões primários e metastáticos nós genes aprofundadas diferencialmente expressos em função do estado FOXA1 em tumores primários em comparação com metástases (Tabela S3 e S5). A sobreposição entre os genes diferencialmente expressos foi baixa (apenas 26 genes). Interessantemente, um dos melhores classificados genes expressos diferencialmente de acordo com a expressão da proteína FOXA1 em lesões metastáticas foi CDKN2A. FOXA1 foi recentemente mostrado para controlar a expressão CDKN2A [21]. Para investigar se esta associação se limitou ao contexto metastático, investigamos uma ligação potencial entre FOXA1 e CDKN2A também em tumores primários (Figura 4). A associação significativa entre FOXA1 e CDKN2A só foi observada em lesões metastáticas.

A expressão de proteínas de FOXA1 está significativamente associado à expressão de mRNA CDKN2A em metástases, mas não em tumores primários.

Discussão

FOXA1 tem sido reconhecida como um fator de transcrição importante que modula as funções dos receptores de esteróides tais como receptor de estrogênio no câncer de mama e AR no câncer de próstata. FOXA1 como um marcador de prognóstico no câncer de mama tem sido extensivamente estudado [14], [22], e alta expressão de FOXA1 está correlacionada com melhor sobrevida específica da doença, ERa positividade e luminal subtipo A. Na expressão elevada de câncer de próstata de FOXA1 prevê pobres prognóstico, e se correlaciona com AR positividade [15]. Além disso, a recente publicação pelo The Cancer Genome Atlas (TCGA) Rede de Investigação apresentou baixa ER /FOXA1 sinalização a ser associado com pior sobrevida no câncer de endométrio [23]. Nossas descobertas que a expressão de baixo FOXA1 é significativamente associada com marcadores de pior evolução, bem como a sobrevivência pobres parecem estar em linha com os dados TCGA e descobertas no cancro da mama, mas em contraste com câncer de próstata e um estudo anterior pequeno, e potencialmente de fraca potência de 109 casos de carcinoma do endométrio que mostram nenhum impacto prognóstico significativo de expressão FOXA1 [24].

Em células cancerosas da mama FOXA1 foi demonstrado ser necessário para a resposta de estrogénio [7]. Similar ao câncer de mama, câncer de endométrio é um cancro dependente de estrogénio e tipo 1 câncer endometrial está associada a expressão de ERa. pacientes positivos ERa têm uma sobrevivência significativamente melhor do que os pacientes com perda ERa e ERa é um forte marcador prognóstico no câncer de endométrio [2]. Estudos no cancro da mama mostraram que os pacientes positivos ERa com alta expressão de FOXA1 têm uma sobrevivência significativamente melhor em comparação com pacientes com baixa expressão de FOXA1 [14], [25]. Nós não conseguimos encontrar um efeito de sobrevivência forte semelhante para FOXA1 dentro do grupo positiva ERa, mas apenas dentro do grupo negativo ERa de pacientes. Se a sobrevivência reduzida observada para o grupo negativo FOXA1 apenas foi devido à perda de ERa não seria de esperar uma associação significativa entre FOXA1 e sobrevivência dentro do grupo negativo ERa. Isso pode indicar que FOXA1 no câncer de endométrio pode ter uma função que não está ligado a ERa, eo efeito de FOXA1 poderia ser específica do órgão. FOXA1 foi previamente mostrado para regular os programas de transcrição distintos em células de diferentes linages [26], ea experiência clínica com maior risco de câncer endometrial entre as mulheres com ERa cânceres de mama positivo tratadas com tamoxifeno também suporta diferenças específicas de órgãos na regulação hormonal. Além disso apoio a este, a expressão de genes relacionados com os níveis FOXA1 não coincidir com padrão de expressão relacionada com ERa. Se FOXA1 é importante para regular a atividade ERa no câncer de endométrio, como é visto em câncer de mama, seria de esperar uma sobreposição entre os genes diferencialmente expressos. Além disso, nossos dados sugerem inibidores de HDAC como tratamento potencial para pacientes com baixa expressão FOXA1, tanto dentro de toda a população de pacientes e no grupo negativo ERa. Isto é interessante, como inibidores de PI3K e mTOR recentemente têm sido sugeridos como medicamentos promissores para os doentes com tumores negativos ERa em particular [11]. O presente achado sugere que o envolvimento FOXA1 na regulação ERa pode ser diferente no câncer de endométrio em comparação com o que é encontrado no câncer de mama. Isto parece estar de acordo com um estudo de linha celular de cancro do endométrio que demonstra que a introdução de FOXA1 suprime a proliferação e migração de [24], em contraste com ERa que leva à proliferação. O papel de FOXA1 como um factor pioneiro para ERa também foi encontrada para diferir em vários tipos de células de cancro. Recrutamento para cromatina mostrou ser dependente da FOXA1 em células de cancro da mama, no entanto, em um osteoblasto como linha celular (U2OS-ERa) FOXA1 não é expressa e ERa de ligação é independente de FOXA1 [27]. No cancro do endométrio, FOXA1 é importante para a inibição da proliferação e migração celular [24], e na próstata linhas celulares de cancro FOXA1 foi recentemente mostrado para inibir a motilidade celular e epitelial para mesenquimal (EMT) através da regulação do factor de transcrição Slug [17] . Pouco se sabe a respeito bindingpartners para FOXA1 no cancro endometrial, e mais trabalho é necessário para elucidar isso.

A nossa constatação de que aumento a expressão da proteína FOXA1 de tumores primários para metástases, poderia aparecer como contraditório com a nossa conclusão de que se associa alta FOXA1 com bom resultado em pacientes com câncer endometrial. perda de expressão ERa tem sido relacionado com o aumento do primário para as lesões metastáticas de carcinoma do endométrio [12]. A baixa correlação entre a ERa e expressão FOXA1 em lesões metastáticas, sugere que FOXA1 é menos crítica para a função ERa no câncer de endométrio em comparação com o que foi observado para o cancro da mama [28]. Em ambos os cancros da próstata e da mama foram encontrados alta expressão de FOXA1 em lesões metastáticas, porém com expressão retida da AR e ERa, respectivamente [28], [29]. Tomados em conjunto, isto sugere que o papel dos fatores pioneiras na regulação de receptores nucleares em cancros dependentes de hormonas é tecido relacionado. No cancro da mama FOXA1 parece importante para a transcrição mediada por ER, e silenciamento de FOXA1 leva à inibição da ligação do ER e actividade de transcrição [30]. Em próstata FOXA1 cancro foi encontrado para ser um factor para a AR pioneiro para alguns eventos de ligação, mas também um repressor. Mudança na expressão FOXA1 no cancro da próstata, portanto, parece conduzir a reprogramação de eventos de ligação AR [15].

A maior expressão de FOXA1 nas metástases em comparação com os seus homólogos do tumor primário, ea associação entre a expressão da proteína de FOXA1 e CDKN2A mRNA apenas em lesões metastáticas, pode indicar uma mudança no papel de FOXA1 durante a progressão do cancro endometrial. Metástases com alta expressão de FOXA1 também têm alta expressão de CDKN2A. CDKN2A é conhecido para codificar várias proteínas distintas, incluindo p16

INK4A, p15

INK4B e p14

ARF. Curiosamente FOXA1 foi recentemente mostrado para controlar p16

expressão INK4A durante a senescência celular [21]. Qual proteína codificada por CDKN2A que se expressa nas metástases é, contudo, desconhecido e precisa ser mais investigada.

FOXA1 parece ter funções específicas do tecido, que também pode mudar durante a progressão do cancro endometrial. Além disso, é provável que outros factores desconhecidos que FOXA1 é necessária para a regulação da função de ERa no cancro do endométrio. Identificar mais dessas irá melhorar a nossa compreensão da sinalização do receptor de hormônio específico do tecido e vai ser de relevância no desenvolvimento de terapias-alvo em doença maligna relacionada ERa, incluindo o cancro endometrial. Assim, FOXA1 pode adicionar informações clinicamente relevante como um biomarcador no endométrio cancros e aponta para um papel para inibidores de HDAC para o tratamento.

Informações de Apoio

Figura S1.

Ilustração esquemática de fatores envolvidos na regulação da ER mediada por transcrição (E2: estradiol).

doi: 10.1371 /journal.pone.0098069.s001

(TIF)

Tabela S1. análise

Cox de preditores de câncer endometrial sobrevida específica:. efeitos do estádio de FIGO, idade, grau histológico, FOXA1 e expressão ERa dentro do subgrupo endometrioid

doi: 10.1371 /journal.pone.0098069.s002

( DOCX)

Tabela S2.

análise SAM de ER positivo contra casos ER negativos (FDR 0,01)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0098069.s003

(XLSX)

Tabela S3.

análise SAM de FOXA1 alta contra FOXA1 casos de baixa (FDR 0,01)

doi: 10.1371 /journal.pone.0098069.s004

(XLSX)

Tabela S4.. análise

FSS de FOXA1 alta contra FOXA1 casos de baixa em amostras negativas ER (valor-p 0,01)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0098069.s005

(XLSX)

Tabela S5. análise

FSS de FOXA1 alta contra FOXA1 casos de baixa em metástases (p-value 0.01).

doi:10.1371/journal.pone.0098069.s006

(XLSX)

Acknowledgments

We agradecer Ellen Valen, Britt Edvardsen, Kadri Madissoo, Tormund S Njølstad, Gerd Lillian Hallseth, Bendik Nordanger e Hua Meu Hoang para assistência técnica.