Abstract

Fundo

carcinoma de células escamosas oral (CCEO) é a quarta principal causa de morte por câncer masculino em Taiwan. Exposição a agentes cancerígenos ambientais é o principal fator de risco para o desenvolvimento de CCEO. CD44, um marcador tumoral bem conhecido, desempenha um papel fundamental na diferenciação de células de tumor, invasão e metástase. Este estudo investigou polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) CD44 com fatores de risco ambientais para determinar CCEO suscetibilidade e características clínico-patológicas.

Foi usado

Metodologia /Principais Achados

em tempo real reação em cadeia da polimerase (PCR) analisar 6 SNPs de CD44 em 599 pacientes com câncer oral e 561 controles sem câncer. Nós determinamos que os portadores do polimorfismo CD44 rs187115 com o genótipo AG, GG ou AG + GG foram associados com susceptibilidade ao câncer oral. Entre 731 fumantes, CD44 polimorfismos operadoras com o hábito de mascar betel-nut teve um 10,30-37,63 vezes maior risco de ter câncer oral em comparação com CD44 do tipo selvagem transportadoras (WT) sem o hábito de mascar betel-nut. Entre 552 chewers betel-nut, polimorfismos CD44 transportadoras que fumavam tinham uma 4,23-16,11 vezes maior risco de ter câncer oral em comparação com aqueles que realizaram o WT, mas não fumar. Finalmente, observamos também que o estágio III e IV pacientes com câncer oral, apresentaram maior número de polimorfismos rs187115 CD44 com o genótipo variante (AG + GG) em comparação com o tipo selvagem (WT) portadores.

Conclusão

os nossos resultados sugerem que interações gene-ambiente entre os polimorfismos CD44 e betel de mascar quid e fumo de tabaco aumentar a susceptibilidade ao desenvolvimento de câncer oral. Os pacientes com genótipos variantes CD44 rs187115 (AG + GG) foram correlacionados com um maior risco de desenvolvimento de câncer oral, e estes pacientes podem possuir maior chemoresistance para Advanced- ao câncer bucal em estágio avançado do que as transportadoras WT fazer. O polimorfismo CD44 rs187115 tem um significado preditivo potencial na carcinogênese oral e também pode ser aplicado como fatores para predizer o estágio clínico em pacientes com tumores

Citation:. Chou YE, Hsieh MJ, Hsin CH, Chiang WL, Lai YC, Lee YH, et ai. (2014) CD44 gene polimorfismos e fatores ambientais sobre Oral Cancer Susceptibilidade em Taiwan. PLoS ONE 9 (4): e93692. doi: 10.1371 /journal.pone.0093692

editor: Patrick A. Singleton, da Universidade de Chicago, Departamento de Medicina, Estados Unidos da América

Recebido: 09 de dezembro de 2013; Aceito: 09 de março de 2014; Publicação: 03 de abril de 2014

Direitos de autor: © 2014 Chou et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este estudo foi financiado por subvenções do Conselho Nacional de Ciência, Taiwan (NSC-100-2632-B-040-001-MY3). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

Competir interesses:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

introdução

carcinoma de células escamosas oral (CCEO) é um cancro maligno comum na região da cabeça e pescoço. Não é apenas o sexto tipo de câncer mais comum em todo o mundo, mas também a quarta principal causa de morte por câncer masculino em Taiwan [1], [2]. Apesar estável evolução das técnicas de imagem proporcionando uma detecção mais precisa e estadiamento, combinado com os avanços na cirurgia, quimioterapia e radiação, o prognóstico e mortalidade de CEB manteve-se [3], [4]. exposição substância cancerígena é o principal fator de risco para o desenvolvimento de CCEO; especificamente, estudos anteriores indicaram que mascar betel-quid, o tabagismo eo consumo de álcool são os principais fatores de risco associados ao desenvolvimento de CCEO [5] – [7].

glicoproteínas CD44 são membros do receptor hialuronato e estão associadas com numerosos processos biológicos fundamentais, tais como homing de linfócitos, migração celular, inflamação, hematopoiese, a cicatrização de feridas, a apoptose, e o desenvolvimento embrionário [8]. Apesar da sua regulação em muitos processos celulares, CD44 desempenha um papel crucial na diferenciação de células de tumor, invasão e metástase [9], [10]. CD44

+ células são propostas a ser células-tronco cancerosas (CSCs), porque CD44 é um marcador bem conhecido de células da mama que inicia-câncer (BCICs) [10], [11]. CD44

+ células em camundongos enxertar em frequências mais altas e têm reforçado chemoresistance [11] – [13]. Além disso, CD44

+ células estão também envolvidas na epitelial para mesenquimal (EMT), que é um programa genético associado com a metástase [14]. Embora regulação da expressão do CD44 em cancros da cabeça e pescoço permanece incompletamente compreendida, estudos recentes demonstraram e sugeriu que a expressão aumentada de CD44 em CEB está correlacionado com o aumento da metástase, reincidência, resistência a quimioterapia e a terapia de radiação, e diminuiu a sobrevivência [13], [15] – [17].

polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) são o tipo mais comum de variação de sequência de DNA, e a expressão de certos genes podem ser afetados por suas variações genéticas [18], [19] . Estudos anteriores documentaram o impacto dos polimorfismos CD44 sobre a suscetibilidade humana câncer [20] – [24]. CD44 variantes genéticas foram identificadas como desempenhando um papel regulador importante na resposta ao stress celular a agentes quimioterápicos e afecta ainda mais a incidência do sarcoma e sobrevivência [20]. Os polimorfismos da linha germinativa em genes cólon CSC demonstraram que CD44 está envolvido na previsão de recorrência do tumor em doentes com cancro colorrectal [21]. No cancro da mama, os SNPs de CD44 são sugeridas para afetar o desenvolvimento do cancro da mama e prognóstico, aumentando a expressão de CD44 [22], [23]. Além disso, polimorfismos CD44, sozinho ou em combinação, podem actuar como marcadores para a identificação de pacientes com adenocarcinoma gástrico localizadas em um alto risco de recorrência do tumor [24]. Assim, temos a hipótese de que os polimorfismos CD44 desempenham um papel crítico no desenvolvimento do câncer oral.

Os efeitos de CD44 sobre a metástase do câncer humano e prognóstico têm sido bem documentadas, mas os efeitos de SNPs gene CD44 e cancerígenos ambientais sobre câncer bucal suscetibilidade e características clínicas permanecem pouco investigada. No presente estudo, uma investigação de caso-controle foi realizado durante 6 SNPs localizados na região do promotor ou do 3’UTR de CD44 para analisar a sua contribuição e as associações entre fatores ambientais e características clínico-patológicas de câncer bucal.

Materiais e Métodos

sujeitos e Colheita

em 2007-2012, foram recrutados 599 pacientes (577 homens e 22 mulheres, com idade média de 54,34 ± 11,28 anos) em Chung Shan Medical University Hospital, em Taichung e Changhua Hospital Christian e Show Hospital Memorial Chwan em Changhua, Taiwan como o grupo caso. Para o grupo controle, que escolheu aleatoriamente 561 indivíduos não-cancerosas (457 homens e 104 mulheres com idade média de 51,81 ± 14,71 anos) que visitou esses mesmos hospitais e, portanto, eram da mesma área geográfica. Para ambos os casos e controles, foi utilizado um questionário para obter informações sobre a exposição de mascar betel-quid, uso de tabaco e consumo de álcool. A informação médica dos casos, incluindo o estadiamento clínico TNM, o tamanho do tumor primário, comprometimento de linfonodos e grau histológico, foi obtido a partir de seus registros médicos. pacientes Oral-cancerosas foram clinicamente classificados no momento do seu diagnóstico de acordo com o sistema TNM encenação da American Joint Committee on Cancer (AJCC) manual Staging (7ª ed.). Fase I = T1N0M0; Fase II = T2N0M0; Fase III = T3N0M0, ou T1, T2 ou T3N1M0; Estágio IV = qualquer lesão T4, qualquer N2 ou lesão N3, ou qualquer lesão M1. diferenciação do tumor foi examinado por um patologista de acordo com a classificação da AJCC. amostras de sangue total recolhido de controlos e pacientes com tumores foram colocados em tubos contendo ácido etilenodiaminotetraacético (EDTA), foram imediatamente centrifugadas, e, em seguida, armazenada a -80 ° C. Este estudo foi aprovado pelo Institutional Review Boards de Show Chwan Memorial Hospital, e informado consentimento por escrito para participar no estudo foi obtido a partir de cada indivíduo.

Seleção de CD44 Polimorfismos

Um total de seis SNPs em CD44 foram selecionados a partir dos dados do Projeto Internacional HapMap para este estudo. Foram incluídos os rs1425802 SNP na região promotora. Três SNPs (rs11821102, rs10836347 e rs13347) que localizam na 3’UTR de CD44 foram selecionados neste estudo uma vez que estes SNPs foram encontrados para afetar a capacidade de ligação de certos MicroRNA em uma população chinesa [23]. Além disso, o outro SNPs (rs187115 e rs713330) foram selecionados neste estudo porque os polimorfismos do gene desses SNPs foram encontrados para associar com câncer gástrico e da mama [23], [24].

Genomic DNA Extraction

o ADN genómico foi extraído utilizando kits de DNA QIAamp mini-arterial (Qiagen, Valencia, CA, EUA) seguindo as instruções do fabricante. Dissolveu-se o ADN em tampão de TE (Tris 10 mM e EDTA 1 mM; pH 7,8) e depois quantificado por isso a medição da densidade óptica a 260 nm. A preparação final foi armazenado a -20 ° C e usado para criar modelos para a reacção em cadeia da polimerase (PCR) [25].

-PCR em tempo real

Allelic discriminação do rs1425802, rs187115 , rs713330, rs11821102, rs10836347 e rs13347 polimorfismos do gene CD44 foi avaliada com o StepOne real-Time System ABI PCR (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA), e analisados ​​com vers SDS. 3.0 Software (Applied Biosystems) utilizando o ensaio TaqMan. O volume final para cada reacção foi de 5 mL, contendo 2,5 mL TaqMan Genotipagem Master Mix, 0,125 mL TaqMan mistura de sonda, e 10 ng de ADN genómico. O PCR em tempo real incluído um passo de desnaturação inicial a 95 ° C durante 10 min, seguido de 40 ciclos a 95 ° C durante 15 s e depois a 60 ° C durante 1 minuto [26], [27].

Análise

estatística

as diferenças entre os 2 grupos foram considerados significativos se

p valores

foram 0,05. Hardy-Weinberg (HWE) foi avaliada utilizando um goodness-of-fit

Χ

2

-teste de marcadores bialélicos. O Mann-Whitney

U

-teste e exato de Fisher foram usados ​​para comparar diferenças nas distribuições das características demográficas dos pacientes entre os não-câncer (controle) e grupos de câncer oral. Os rácios ajustada odds (OR) e intervalos de confiança de 95% (IC) da associação entre freqüências genotípicas e de risco acrescido características clinicopatológicas foram estimadas usando vários modelos de regressão logística, após o controle de outras variáveis. Foram analisados ​​todos os dados com Estatística Analytic System (SAS Institute, Cary, NC, EUA) para Windows.

Resultados

A análise estatística de características demográficas é mostrada na Tabela 1. Encontramos significativamente diferente distribuições de idade (controle: 51,81 ± 14,71; câncer oral: 54,34 ± 11,28;

p

= 0,001) e sexo (controle: 457 machos e 104 fêmeas, câncer oral: 577 homens e 22 mulheres;

p

0,0001) entre os dois grupos. Foram observadas diferenças significativas nas distribuições de mascar betel-quid (

p Art 0,0001), o consumo de álcool (

p Art 0,0001), e tabagismo (

p

. 0,0001) entre controles e pacientes com tumores

distribuições genotípicas e associações entre o câncer oral e polimorfismos do gene CD44 são apresentados na Tabela 2. os alelos com a maior frequência de distribuição para o rs1425802, rs187115, rs713330 , rs11821102, rs10836347 e rs13347 genes de CD44, tanto no controle saudáveis ​​e pacientes com câncer bucal, respectivamente, foram heterozigotos para a /G, homozigotos para AA, homozigotos para T /T, homozigotos para G /G, homozigotos para C /C, e homozigóticos para C /C. Após o ajuste para diversas variáveis, não foram observadas diferenças significativas nos pacientes com tumores com rs1425802, rs713330, rs11821102, rs10836347 e polimorfismos rs13347 do gene CD44 em comparação com aqueles com o tipo selvagem (WT). No entanto, os pacientes com o CD44 rs187115 AG polimórfico e os genótipos GG apresentaram significativamente (

p Art 0,05) maior risco de 2.098- (95% de intervalo de confiança (IC) = 1,448-3,039) e 2.988- (95 % CI = 1,280-6,973), de ter CCEO em comparação com os pacientes homozigotos WT correspondentes. Além disso, um resultado semelhante também foi observada em pacientes com os genótipos GG CD44 polimórfica rs187115 AG +. Além disso, no grupo de machos, os pacientes com o CD44 rs187115 AG polimórfica e genótipos GG exibiram um aumento significativo (

P

0,01) maior risco de 1.810- (95% de intervalo de confiança (IC) = 1,217-2,693) e 3.215- (IC 95% = 1,348-7,664), de ter CCEO em comparação com os pacientes homozigotos WT correspondentes.

efeitos interativos entre fatores de risco ambientais e polimorfismos genéticos de CD44 são mostrados nas Tabelas 3 e 4. Entre 731 fumantes, indivíduos com tanto pelo menos 1 alelo G do rs1425802 ou rs187115, alelo 1 C de rs713330, um alelo a rs11821102, 1 T alelo de rs10836347 ou rs13347, ou o hábito betel-nut-mastigação, respectivamente teve 5.443 – (IC 95%: 2,919-10,148), 10.519- (IC 95%: 6,15-17,979), 11.144- (IC 95%: 6,923-17,937), 13.055- (IC 95%: 7,984-21,348), 13.455- ( IC 95%: 8,292-21,832) e 5.703 vezes (IC 95%: 3,203-10,156) maiores riscos de ter câncer oral. Indivíduos com pelo menos 1 alelo G do rs1425802 ou rs187115, 1 C alelo de rs713330, um alelo A rs11821102, um alelo T do rs10836347 ou rs13347, e quem mastigado noz de betel teve respectiva (IC 95%: 10,901-41,248) 21.205- , 37.631- (IC 95%: 18,366-77,106), 23.333- (IC 95%: 9,461-57,544), 10.295- (IC 95%: 4,400-24,087), 16.160- (IC 95%: 6,354-41,097) e 24,714 vezes (IC 95%: 12,331-49,531) maiores riscos de ter câncer oral em comparação com indivíduos com homozigotos WT que não mastigar noz de betel (Tabela 3)

Entre betel-. consumidores porca em nossa coorte, indivíduos com CD44 rs1425802 polimórfica, rs187115, rs713330, rs11821102, rs10836347 e genes rs13347 e que fumavam tinham correspondente 8.004- (95% CI: 1,530-41,854), 13.497- (IC 95%: 4,554-40,002) , 16.111- (IC 95%: 4,359-59,541), 4.228- (IC 95%: 1,328-13,463), 4.899- (IC 95%: 1,425-16,850) e 14,468 vezes (IC 95%: 3,778-55,411) maiores riscos de ter câncer oral em comparação com chewers betel-quid com o gene WT que não fumam (Tabela 4). Além disso, as pessoas que eram ou polimórfica para CD44 em 6 loci (rs1425802, rs187115, rs713330, rs11821102, rs10836347 e rs13347) ou que fumavam eram um risco 5,070-9,313 vezes (

p Art 0,05) desenvolver câncer oral, em comparação com as pessoas com o gene WT que não fumam (Tabela 4). À luz dos resultados acima, sugerimos que os polimorfismos do gene CD44 têm fortes impactos sobre a susceptibilidade ao câncer bucal em betel-nut e /ou fumar consumidores.

Para esclarecer o papel dos polimorfismos do gene CD44 no câncer oral status clínico-patológicas , como o nó de tumor metástase estágio clínico, tamanho do tumor, metástase linfonodal, metástases à distância, e diferenciação celular, a frequência de distribuição dos estados clínicos e freqüências genotípicas CD44 em pacientes com câncer bucal foram estimados. Não houve associação significativa entre rs1425802, rs713330, rs11821102, rs1836347, e polimorfismos do gene rs13347 e os status clínico-patológicas. No entanto, entre os 599 pacientes com câncer bucal, aqueles com o gene polimórfico rs187115 tinham um risco maior de desenvolver estágio III ou IV CCEO (odds ratio ajustado (OR) = 1,619; IC95% = 1,124-2,333), em comparação com os pacientes com o rs187115 WT, mas não houve diferença no tamanho do tumor, metástases em linfonodos, metástases à distância, ou diferenciação celular foi observada (Tabela 5).

Discussão

neste estudo, nós fornecemos romance informações sobre os efeitos de CD44 sobre suscetibilidade ao câncer oral, e elucidadas as interações de fatores de risco ambientais e status clínico-patológicas

.

o consumo de álcool, de mascar betel-quid e fumo de tabaco são os fatores de risco ambientais principais para o cancro oral. No presente estudo, as proporções mais elevadas de indivíduos que tinham mastigadas bétel libras, consumido álcool e fumado tabaco, não foram observadas no grupo de pacientes com tumores (76,6%, 59,4%, e 85,3%, respectivamente) em comparação com os controlos (16,6%, 38,1%, e 39,2%, respectivamente). Assim, mascar betel-quid, consumo de álcool e fumo de tabaco são indicados para serem altamente correlacionados com um risco aumentado de câncer oral. Além disso, Lu et al relata que grupo mais macho mastigado noz de areca do que o grupo do sexo feminino (9,2% vs 0,9%) em estudos de Taiwan, que deve ser um dos principais contribuintes para a maior incidência de câncer oral de machos desde mascar noz de areca é um bem reconhecido fator de risco para o cancro oral [28].

No cancro oral, expressão de CD44 foi observada a ter uma associação significativa com o tabagismo pesado e /ou consumo de álcool, prevendo, assim, prognósticos pobres. A associação estatisticamente significativa entre tabagismo e expressão de CD44 foi observada em CECs localizados na orolarynx, hipofaringe e laringe [29]. quid Areca tem sido considerado uma substância cancerígena para os seres humanos, e é um fator de risco independente para o desenvolvimento CCEO entre as pessoas que mastigam-lo em certas regiões da Ásia. O quid betel utilizado em Taiwan contém noz de areca, cal, e inflorescência piper betel ou folha [30]. No entanto, um estudo realizado por Kuo et al indicaram que a perda de expressão CD44v7-8 pode ser um fator importante para determinar o prognóstico em pacientes com tumores, ao passo que não foi observada correlação significativa entre a expressão CD44v7-8 e o consumo diário ou total de betel quids ou fumadores de cigarros por pacientes com tumores [31].

A expressão de CD44 e sua relação com o prognóstico do tumor permanece controverso. Alguns estudos indicaram que a sobre-expressão de CD44 em tumores está correlacionada com um aumento da resistência à terapia com radiação e um risco elevado de recorrência local [32] – [34], ao passo que outros têm ligado mau prognóstico para CD44 regulação negativa sobre as células tumorais, particularmente no CEB [35], [36]. Estudos recentes têm associado o aumento da expressão de CD44 com maior agressividade CCEO [15], [16], [37], [38]. No entanto, até agora, os relatórios sobre a expressão de CD44 SNP em CCEO têm sido limitados. Neste estudo, buscou-se determinar as variantes genéticas de CD44 que podem conferir um risco de CCEO em 599 pacientes e 561 controles saudáveis. Os dados da Tabela 2 mostram que aqueles com os rs187115 polimorfismo CD44 variante genótipos (AG + GG) tinham um risco mais elevado para CEB em comparação com aqueles com o genótipo WT. Embora a importância funcional do SNP rs187115 CD44 não foi testado experimentalmente, uma associação com o risco de cancro oral é proposta com base nas localizações das variantes analisadas. No entanto, em determinados genes, um SNP resultantes na codificação, promotor ou região reguladora pode ter consequências funcionais [39].

rs187115 CD44 SNP está localizado no primeiro intrão do CD44. Embora nenhum papel regulador para um intrão de CD44 tem sido proposto, Zhou et al relataram um intrão 1 de SNP CD44 semelhante no cancro da mama e indicou que pode desempenhar um papel no splicing alterado de CD44 e nível de expressão efectuada [22]. Além disso, um estudo anterior determinou que rs187115 CD44 SNP possui a maior diferença alélica em resposta crescimento celular a agentes quimioterapêuticos padrão, independentemente de p53 estátuas mutacionais em todas as 59 linhas celulares testadas [20]. No nosso estudo, os dados revelaram que rs187115 está associada com um risco mais elevado de fase III /IV, mas não com o tamanho do tumor, metástase de órgão distante e /ou nódulos linfáticos, como se mostra no Quadro 5. No entanto, a classificação da AJCC ilustra a associação entre os estágios III /IV com tumor maior, metástases à distância e comprometimento de linfonodos. Essa inconsistência pode ser resultado de que apenas 8 pacientes com metástases à distância, que podem afetar profundamente a análise estatística. Além disso, a distribuição de casos com envolvimento de gânglios linfáticos (N0) entre a fase II (T2N0M0) fase III (T3N0M0) também podem contribuir para a inconsistência acima referido.

Vários estudos têm implicado que CSCs desempenhar um papel central no câncer progressão, invasão e recorrência da doença após a terapia, ea causa da alta morbidade e, finalmente, a morte na maioria dos pacientes com câncer oral é metástases à distância [40], [41]. CSCs em epidermóide estudados foram observadas e definidas usando vários métodos, tais como, linhas de células de xenoenxertos de derivados de doentes e amostras de tumor primário [42]. CD44 é um gene CSC e foi observada a ser altamente expresso nas fases metastáticos pouco diferenciados de pacientes de cancro oral, conduzindo a invasão, malignidade, e prognóstico pobre [43]. Além disso, os CSCs orais têm sido considerados como tendo fármaco inerente e resistência à radiação que neutraliza o efeito de terapias convencionais, o que leva a recorrência do tumor [42], [44]. Um estudo anterior demonstrou que o CD44

alta subpopulação de células cancerosas orais representa um aumento na viabilidade e sobrevivência em comparação com CD44

células de baixa após o tratamento com um painel de fármacos citotóxicos, incluindo 5-FU, cisplatina, docetaxel, paclitaxel, e carboplatina, bem como radiações [45]. Em nosso estudo, pois observamos a associação significativa de rs187115 CD44 SNP funcional variante G com a susceptibilidade câncer bucal em estágio III e pacientes IV CEs e foi observado rs187115 CD44 SNP a ser associado com chemoresistance [20], foi proposto que a CSC via oral características de CD44 contribuiu para a chemoresistance do polimorfismo rs187115 no câncer oral, ea rs187115 polimorfismo CD44 SNP pode agir como um marcador para prever mau prognóstico em pacientes com tumores. Observamos também que a expressão do polimorfismo CD44 rs13347 em pacientes com câncer de mama em um estudo anterior [23] difere do que em pacientes com tumores em nosso estudo. Tem sido proposto que não é a mutação de CD44, mas os factores que promovem a carcinogénese, que controlam os padrões do CD44 desregulada na maioria dos cancros [46]. Estes factores incluem sinais mitogénicos, tais como a cascata de Ras-MAP, que controla o processamento alternativo de CD44, [47], [48] e a perda de várias subunidades do complexo cromatina remodelação SWI /SNF que conduz à perda de CD44 transcrição [49], [50]. Embora o mecanismo exato não está claro, é possível que até mesmo o CD44 expresso em tumores como mama e exposição de câncer bucal as mesmas características CSC, porque vários mecanismos de execução e vias de sinalização estão envolvidos na regulação CD44. No entanto, estudos bem desenhados são necessários para determinar o papel da via de sinalização da regulação CD44 na agressividade do tumor e CSCs.

Uma das limitações do nosso estudo é que categorizados pacientes como “sempre-usuários” e “Nunca os usuários” para a informação sobre certos factores de risco ambientais, tais como o uso de álcool, mascar noz de betel e tabaco de fumar. Portanto, a quantidade, comprimento e passado histórico de noz de betel, fumo e consumo de álcool não estavam disponíveis e uma análise detalhada não pôde ser executada. Além disso, nossa coleta de dados se baseou em relatórios de auto, e os pacientes podem ocultar ou estar relutantes em denunciar o seu uso real de tais substâncias. Assim, efeitos de confusão residuais pode ter sido causada pela má classificação de álcool, noz de betel e uso de tabaco. Outras informações, tais como o uso de nicotina medicinal e riscos familiares e hereditariedade também não estavam disponíveis, e essas limitações podem ter restringido o ajuste para possíveis fatores de confusão. Aumentar o número de amostras e respondendo por mais fatores de risco CCEO na análise pode validar com precisão estes achados em um estudo futuro.

Em conclusão, os nossos resultados sugerem que interações gene-ambiente entre o polimorfismo CD44 e betel quid mastigação e fumo de tabaco alterar a susceptibilidade ao desenvolvimento de câncer oral. Com base em uma revisão da literatura relevante, nosso estudo é o primeiro a demonstrar uma associação significativa entre o CD44 rs187115 A /G polimorfismo eo risco de câncer oral. Os pacientes que realizaram o funcional CD44 variante rs187115 G pode possuir maior chemoresistance para Advanced- ao câncer bucal em estágio avançado do que as transportadoras WT fazer, e rs187115 CD44 pode agir como um marcador para prever mau prognóstico em pacientes com tumores.