Abstract

Fundo

Oncogênicos

BRAF

mutações foram encontradas em diversas doenças malignas e ativar RAF /MEK /ERK sinalização, um caminho crítico de desenvolvimento de neoplasias. Nós examinamos as características clínicas e evolução dos pacientes com mutante (mut)

BRAF

câncer avançado que se refere à fase 1 clínica.

Métodos

Foram revistos os registros de 80 pacientes consecutivos com

mutBRAF

malignidades avançadas e 149 com o tipo selvagem (

em peso

)

BRAF

(acompanhado por tipo de tumor) referiu-se ao Centro clínico de terapia-alvo e analisado o seu resultado .

resultados

de 80 pacientes com

mutBRAF

câncer avançado, de 56 anos teve melanoma, 10 colorretal, 11 de tireóide papilar, 2 de ovário e um câncer de esôfago. Mutações no códon 600 foram encontrados em 77 pacientes (62,

V600E

, 13,

V600K

; 1,

V600R

; 1, não declarada). A análise multivariada mostrou menos tecido mole (odds ratio (OR) = 0,39, 95% CI: 0,20-0,77, P = 0,007), pulmão (OR = 0,38, 95% CI: ,19-,73, p = 0,004) e metástases retroperitoneais ( OR = 0,34, 95% CI: ,13-,86, p = 0,024) e mais metástases cerebrais (OR = 2,05, 95% CI: 1,02-4,11, P = 0,043) em pacientes com

mutBRAF

contra

wtBRAF

. Comparando com o correspondente

wtBRAF

,

mutBRAF

pacientes com melanoma tinha tendência insignificante para maior sobrevida médio desde o diagnóstico (131 vs. 78 meses, p = 0,14), enquanto

mutBRAF

pacientes com câncer colorretal teve uma tendência insignificante para sobrevivência média mais curta do diagnóstico (48 vs. 53 meses, p = 0,22). No melanoma,

V600K

mutações em comparação com a outra

BRAF

mutações foram associados com o cérebro mais frequente (75% versus 36,3%, p = 0,02) e metástases pulmonares (91,6% vs. 47,7 %, P = 0,007), e menor tempo de diagnóstico de metástases e a morte (19 vs. 53 meses, p = 0,046 e 78 vs 322 meses, p = 0,024, respectivamente). O tratamento com agentes de direccionamento RAF /MEK (taxa de risco (HR) = 0,16, 95% CI: 0,03-0,89, p = 0,037) e qualquer redução no tamanho do tumor após o encaminhamento (HR = 0,07 CI, 95%: ,015-,35, p = 0,001) correlacionado com maior sobrevida em

mutBRAF

pacientes.

Conclusões

BRAF

parece ser uma mutação druggable que também define subgrupos de pacientes com sobreposição fenotípica, embora com diferenças que se correlacionam com histologia ou local de mutação

Citation:. El-Osta H, Falchook G, Tsimberidou A, Hong D, Naing A, Kim K, et al. (2011)

BRAF

Mutações em cancros avançados: características clínicas e resultados. PLoS ONE 6 (10): e25806. doi: 10.1371 /journal.pone.0025806

editor: Hava Karsenty Avraham, Beth Israel Deaconess Medical Center, Estados Unidos da América

Recebido: 12 Março, 2011; Aceito: 12 de setembro de 2011; Publicação: 19 de outubro de 2011

Direitos de autor: © 2011 El-Osta et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Compatível com parte pela Grant Número RR024148 do Centro Nacional de Pesquisa de Recursos, um componente dos Institutos Nacionais de Saúde Roteiro para a Investigação médica. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

Conflito de interesses:. Dr Razelle Kurzrock recebeu bolsas de pesquisa comerciais da GlaxoSmithKline, AstraZeneca, Genentech e Bayer. Dr. Gerald Falchook recebeu bolsa de investigação comercial da GlaxoSmithKline. Isto não altera a adesão dos autores para todos os PLoS ONE políticas em dados e materiais de compartilhamento.

Introdução

As proteínas Ras regulam a proliferação celular, sobrevivência e diferenciação pela ativação de um número de efectores a jusante , incluindo cinase de proteína RAF. Uma vez activado, RAF estimula uma cascata de sinalização envolvendo a via /ERK MEK. BRAF, uma serina-treonina-quinase, é um de três membros da família cinase de proteína RAF (Araf, BRAF e CRAF) [1]. O

BRAF

proto-oncogene foi recentemente o foco de intensa investigação, como a sua mutação constitutivamente ativa RAF /sinalização MEK, um dos principais motores da carcinogênese em várias neoplasias, principalmente no melanoma, câncer de cólon e de tireóide papilar cancer

1. O mais comum

BRAF

mutação é uma substituição de ácido glutâmico por valina no codão 600 (V600E) [2] -. [3]

Nos últimos anos, um grande número de compostos promissores que segmentar a via de Ras /RAF /MEK ter entrado ensaios clínicos, alguns deles demonstrando actividade promissora clínica, principalmente em cancros com

BRAF

mutações [4] – [6]. Consequentemente, o teste de mutações ativadoras em

BRAF

está se tornando mais comum, especialmente se os pacientes estão a ser tratados com inibidores de BRAF, ou outros moduladores da via, tais como inibidores de MEK.

mutações oncogênicas como

BRAF

ocorrem em diversos tipos de tumores. Aqui, nós examinamos as características clínicas e resultados associados com a presença de

BRAF

mutações, com os principais objectivos sendo a delinear características clínicas e prognósticos associados com a presença de

BRAF

mutações, ou não específica

BRAF

mutações têm um curso clínico distinto, de impacto, bem preditiva de uma terapia direcionada.

Métodos

Os pacientes

a partir de janeiro de 2006, nós investigamos

BRAF

estado de mutação de pacientes com tumores avançados e tecido disponível referiu-se ao Centro clínico de terapia-alvo no Departamento de Investigational Cancer Therapeutics (Fase I Clínicos Programa) da Universidade do Texas MD Anderson Cancer Center. O registro de pacientes no banco de dados, avaliação de patologia e análise de mutação foram realizadas no MD Anderson. No total, 80 pacientes consecutivos com

foram selecionados BRAF

mutações.

Para definir distinguir características de mutante (mut)

BRAF

cancros avançados, selecionamos um grupo de controle consecutivo pacientes com o tipo selvagem (wt)

BRAF

cancros avançados visto no nosso centro durante o mesmo período de tempo e combinados em uma proporção 01:02 por tipo de tumor com

mutBRAF

pacientes.

o Cancer Center Institutional Review Board MD Anderson aprovou o estudo. consentimento por escrito foi dado pelos pacientes para a sua informação a ser armazenada no banco de dados do hospital e usado para a pesquisa.

As amostras de tecido e análise mutacional

, blocos de tecido embebidos em parafina fixadas em formalina ou Arquivo o material de punção aspirativa por agulha fina obtidos a partir de procedimentos diagnósticos e /ou terapêuticos foram usadas para testar a

BRAF

mutações. Todos patologia foi confirmada centralmente no MD Anderson.

BRAF

testes de mutação foi realizado em um Laboratório de Diagnóstico Molecular Laboratory Improvement Emenda certificado clínico dentro da Divisão de Patologia e Medicina Laboratorial no MD Anderson. O DNA foi extraído a partir de secções de tumor embebidas em parafina microdissecadas e analisados ​​utilizando uma reacção em cadeia da polimerase (PCR) com base na sequenciação de ADN para

BRAF

codões 595-600 mutações do exão 15 por pyrosequencing como previamente descrito [7 ]. A substituição de ácido glutâmico por valina no codão 600 é denotado como V600E; V600K indica a substituição de lisina por valina; V600R, arginina por valina.

Sempre que possível, nós testamos para outras mutações tais como

EGFR

(exons 18 e 21) [8],

KIT

(exons 11, 13 e 17) [9],

PIK3CA

(exons 9 e 20) [10],

ARN

e

KRAS

(exão 2) [7], [11 ]. perda de PTEN foi avaliada utilizando imuno-histoquímica (mouse monoclonal PTEN anti-humana, 6H2.1 clone, DAKO®, Dinamarca) [12].

As características clínicas e avaliação do tratamento

Todas as variáveis ​​clínicas foram avaliadas pela revisão do prontuário eletrônico. A eficácia do tratamento foi avaliada a partir de tomografia computadorizada (TC) e /ou ressonância magnética (MRI) na linha de base antes do início do tratamento e depois a cada 6 a 8 semanas. Todas as radiografias foram lidas no Departamento de Radiologia da MD Anderson e revisto no Departamento de Investigational Cancer Therapeutics clínica medição tumor

.

avaliação prognóstica foi feito usando o Royal Marsden Hospital (RMH) [13] escore prognóstico da seguinte forma : 0 pontos, lactato normais desidrogenase (LDH), albumina ≥3.5 g /dL, um ≤2 sítios metastáticos; Um ponto- LDH limite superior do normal, albumina 3,5 g /dL, 2 sítios metastáticos. Os pacientes com 0-1 pontos tinha uma boa pontuação RMH, e os pacientes com 2-3 pontos tinha uma pontuação RMH pobres.

Análise Estatística

A análise estatística foi verificada pelo nosso estatístico (SW). Foram analisados ​​os seguintes co-variáveis ​​referentes às características dos pacientes: tipo de câncer, idade, sexo, raça, história pessoal de câncer, história de tabagismo ou alcoolismo, história familiar de câncer, local e número de metástases, presença de ascite, derrame pleural ou profunda trombose venosa, marcadores tumorais (CEA, CA 19-9, CA 125, CA27.29), lactato desidrogenase, albumina, hemoglobina, contagem de glóbulos brancos, contagem de plaquetas, nivel de cálcio, local de mutação, a presença de outras aberrações (

PIK3CA

,

ERN ou KRAS

,

KIT

mutação e

PTEN

perda), data do diagnóstico, doença localmente avançada, metástases à distância, o encaminhamento, a morte ou a data do último acompanhamento, informações sobre o tratamento sistémico melhor padrão para doença metastática e tratamento com a fase 1 julgamento.

a estatística descritiva foi utilizada para resumir as características do paciente. O teste exato de Fisher foi usado para testar a associação entre duas variáveis ​​categóricas. teste de Mann-Whitney foi utilizado para testar a associação entre idade e

BRAF

estado de mutação.

A sobrevida global (OS) foi medido (método de Kaplan-Meier) a partir do momento do diagnóstico, data de metástases, ou data de referência para a data da morte ou último follow-up, o que ocorrer primeiro. Pacientes vivos foram censurados na última data de follow-up. sobrevida livre de progressão (PFS) foi definido como o intervalo de tempo entre o início da terapia para a primeira observação da progressão da doença (como determinado pela Critérios de Avaliação de Resposta em Tumores Sólidos (RECIST) [36] ou morte, o que viesse primeiro. pacientes vivos e sem progressão da doença foram censurados na última data de acompanhamento. sobrevida livre de doença foi medida desde o diagnóstico aos primeiros metástases à distância. teste log-rank foi utilizado para comparar oS ou PFS entre os subgrupos. a análise multivariada com os riscos proporcionais de Cox modelo de regressão foi usado para avaliar uma associação independente entre uma característica e PFS ou oS. o “enter” método foi utilizado em que todas as variáveis ​​são inseridos no modelo sem verificar. método de regressão logística binária foi utilizada para testar para qualquer correlação independente entre um variável categórica e

BRAF

estado mutacional. o método “enter” foi usada em que todas as variáveis ​​são inseridos no modelo sem verificar. Todos os testes foram em frente e verso. Um valor p inferior a 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. A análise estatística foi realizada usando SPSS (versão 17.0; SPSS, Chicago, IL, EUA)

Resultados

As características dos pacientes

Um total de 80 pacientes com tumores avançados e

mutBRAF

foram identificados. A idade média foi de 52 anos (variação, 18-78 anos), e 43 eram homens (54%). A maioria dos doentes tinha de melanoma (n = 56, 70%), seguido pelo carcinoma papilar da tiróide (n = 11, 14%), cancro colorrectal (n = 10, 13%), e outros tipos de tumores (cancro do ovário, n = 2 , 2%; câncer de esôfago, n = 1, 1%) (refletindo padrões de referência para nossa clínica), (Tabela 1)

Os locais mais comuns das metástases eram os pulmões (n = 48, 60. %), gânglios linfáticos superficiais (n = 39, 49%), peritoneu (n = 33, 41%), fígado (n = 31, 39%), cérebro (n = 27, 34%), o tecido mole (n = 26, 33%), ossos (n = 20, 25%) e linfonodos retroperitoneais (n = 9, 11%).

Foram identificados 149 pacientes de controle com cancros avançados que testaram negativo para

BRAF

mutações no mesmo período de tempo e que foram combinados em uma base 01:02 por tipo de tumor com

mutBRAF

pacientes. Para o câncer de tireóide papilar, correspondente foi feito com uma proporção 01:01 devido a um número insuficiente de pacientes encaminhados que tinham feito testes e negativas para o

BRAF

mutação. As características detalhadas dos pacientes são apresentados na Tabela 1.

Os grupos com

mutBRAF

e

wtBRAF

foram semelhantes em termos de tempo médio desde o diagnóstico ao encaminhamento para a fase 1 clínica como calculadas pelo método de log-rank (12 vs 12,7 meses, p = 0,95). estadiamento do câncer inicial no momento do diagnóstico, também foi distribuído igualmente entre os dois grupos. Os pacientes foram tratados em um ensaio clínico se eles não responderam ao tratamento convencional. Sempre que possível, os pacientes com

mutBRAF

foram oferecidos o tratamento visando o /via MEK RAF. Os doentes tinham uma média de dois tratamentos anteriores, independentemente do status BRAF.

Tipos de

BRAF

mutações

Dos 80 pacientes com

mutBRAF

, 77 (96%) tinham mutações no códon 600 e dois (3%) no códon 601. Um (1%) paciente apresentava mutações simultâneas nos códons 599 e 600. dos 77 pacientes com códon 600

mutBRAF

, 62 (81%) tiveram

V600E

mutações (melanoma, n = 40; colorectal, n = 8; papilar cancro da tiróide, n = 11; esôfago, n = 1 e ovário, n = 2), 13 (17 %)

V600K

mutações (melanoma, n = 12; cancro colo-rectal, n = 1), 1 (1%)

V600R

mutação (melanoma, n = 1) e um de tipo não declarada (colorectal, n = 1) (Tabela 1).

BRAF

mutações e características clínicas

Análise univariada.

a idade do paciente no momento do diagnóstico foi significativamente mais jovem para pacientes com

mutBRAF

(idade mediana = 52 anos) versus

wtBRAF

doença (idade mediana = 58 anos) (p = 0,002). Os homens eram mais comumente representada em ambos

mutBRAF

e

wtBRAF

grupos, mas a proporção de mulheres tenderam no sentido de ser maior no

mutBRAF

grupo (46% vs. 33% , p = 0,06). Não houve diferenças significativas entre o

mutBRAF

e

wtBRAF

grupo para outras características, incluindo a etnia, história familiar e social pessoal, complicações, incluindo trombose, ascite e derrame pleural (Tabela 1).

os pacientes que tiveram

mutBRAF

tumores tinham envolvimento menos frequente dos pulmões (60% vs. 79%, p = 0,003), gânglios retroperitoneais (11% vs. 25%, p = 0,004 ), e dos tecidos moles (33% versus 50%; p = 0,01). Na análise de subgrupos, este padrão foi também observada em cada um dos três principais tipos de tumores; no entanto, devido ao pequeno número de pacientes na coorte não-melanoma, o significado só foi alcançado para pacientes com melanoma (dados não mostrados). Não houve diferença no envolvimento de outros sites por metástases.

Análise Multivariada.

Na análise multivariada utilizando um modelo de regressão logística, os pacientes com

mutBRAF

tiveram metástases menos freqüentes para (i) dos tecidos moles (OR = 0,39, 95% CI: 0,20-0,77, p = 0,007); (Ii) (CI OR = 0,38, 95%: 0,19-0,73, p = 0,004) do pulmão; e (ii) o retroperitôneo (OR IC = 0,34, 95%: 0,13-0,86, p = 0,024) (Tabela 2). As mulheres eram mais propensos a ter

mutBRAF que wtBRAF

(OR = 1,92, 95% CI: 1,02-3,57, p = 0,045). Os pacientes com

mutBRAF

comparação com

wtBRAF

eram mais propensos a ter metástases cerebrais (OR = 2,05 IC 95%: 1,02-4,11, p = 0,043). Pacientes com menos de 60 anos mostrou uma tendência para uma maior probabilidade de

BRAF

mutações (OR IC = 1,88, 95%: 0,99-3,70, p = 0,053). Na análise de subgrupo de melanoma, esta tendência foi estatisticamente significativa (p multivariada valor = 0,023) (Tabela 3). Os números menores de pacientes com outros tipos de câncer impediu uma análise separada para este fator. Um intervalo do diagnóstico ao metástases distantes de ≥ 2 anos foi mais propensos a ser associado a

mutBRAF

(odds ratio (OR) = 2,84, 95% de intervalo de confiança (IC): 1,18-4,14, p = 0,013) (Mesa 2). No entanto, em análises específicas de doenças, em colorretal e câncer de tireóide papilar, a proporção de doentes com um intervalo livre de doença desde o diagnóstico até metástases de mais de dois anos foi menor para os pacientes com

mutBRAF

doença, mas isso não fez atingiu significância estatística devido ao pequeno número de pacientes em cada subgrupo (dados não mostrados).

Mutações Co-existentes /Aberrações Molecular

Um subconjunto de

mutBRAF

doentes com dados disponíveis também

PTEN

perda (2/7; 29%) ou

PIK3CA

mutações (1/26; 4%) (Tabela 1). Em pacientes com

wtBRAF

, 2/20 (10%) tiveram

PTEN

perda e 4/46 (9%) tinham mutações PIK3CA. Não houve diferença nas taxas de

PTEN

perda ou

PIK3CA

mutações entre

mutBRAF

vs.

wtBRAF

grupos, mas o pequeno número de pacientes pode impedir conclusões definitivas, especialmente no grupo de PTEN.

Como esperado

KRAS Comprar e

ARN

mutações foram significativamente menos comum no

mutBRAF

grupo comparação ao

wtBRAF

grupo (

KRAS

: 0/24 (0%) vs. 13/45 (29%), p = 0,002;

ARN

: 1 /17 (6%) vs 42/108 (39%), p = 0,006). De interesse, deve-se notar que um paciente teve uma concomitante

BRAF

e

ARN

mutação.

BRAF

status e Sobrevida livre de progressão ( PFS) no tratamento padrão convencional

Foram analisados ​​PFS sobre o tratamento convencional (antes do encaminhamento para a fase 1 clínica) para a doença metastática de acordo com a

Status BRAF

. Nós escolhemos os PFS mais longas cada paciente nunca tinha conseguido em um tratamento convencional.

Quando analisado com todos os pacientes incluídos, não houve diferença no PFS mediana entre

mutBRAF

vs.

wtBRAF

doença (7,0 meses, 95% CI 5,6-8,3 vs. 7,1 meses, 95% CI 5,7-8,5; p = 0,49). No entanto, os pacientes com câncer colorretal e

mutBRAF

tiveram um PFS mediana de 7 meses (IC 95% 5,3-8,6) em comparação com 9,2 meses (IC 95% 7,4-10,9) em

wtBRAF

( p = 0,002) (Figura 1). Na análise multivariada,

mutBRAF

foi um fator prognóstico independente para PFS mais curtos (HR: 3,76, 95% CI 1,22-11,49, p = 0,02). Sobre a melhor terapêutica sistémica padrão em câncer colorretal metastático

(Um paciente com registros inadequados no tratamento prévio foi excluído).

em melanoma e câncer de tireóide papilar, não houve diferença no PFS mediana em pacientes com

mutBRAF

comparação com

wtBRAF

(4,3 meses, 95% CI 1,9-6,8 vs. 5,5 meses, 95% CI 3,5-6,7; p = 0,29; 24 meses, 95% IC 14,4-33,5 vs. 25 meses, 95% CI 0-55,4;. p = 0,65, respectivamente)

BRAF

Estado e Sobrevivência

Análise univariada

Foram analisados ​​OS desde o diagnóstico e para. tempo de metástases. O OS mediana de tempo de diagnóstico da

mutBRAF

pacientes foi de 322 meses versus 112 meses (IC95% 58,2-165,7) para

wtBRAF

pacientes (p = 0,24). O OS mediana de tempos de metástase de

mutBRAF

pacientes em comparação com

wtBRAF

foi de 99 meses (IC 95% 17,1-180,8) vs. 51 meses (IC 95% 38,7-63,2) (p = 0,58).

na doença análise de subgrupo específico, o oS médio desde o diagnóstico e para a metástase foi mais longo em pacientes com melanoma com

mutBRAF

comparação com

wtBRAF

(131 meses IC95% 52,7-209,2 vs. 78 meses, 95% CI 41,8-114,1; p = 0,14 e 35 meses IC 95% 8,7-61,2 vs. 30 meses, 95% CI 8,3-53,6; p = 0,63, respectivamente). Em contraste, no cancro colorectal, o sistema operacional médio desde o diagnóstico e para a metástase foi numericamente menor em

mutBRAF

pacientes em comparação com

wtBRAF

(48 meses IC95% 23,4-72,5 vs. 53 meses, IC 95% 0-125,2; p = 0,22 e 30 meses, 95% IC 14,5-45,4 vs. 53 meses, 95% IC 38,8-67,1; p = 0,26, respectivamente). Pequeno número de pacientes em subgrupos específicos de doença impedido conclusões mais definitivas e pode explicar a falta de significância estatística. O sistema operacional do momento do diagnóstico e metástase não diferiu entre os

mutBRAF

e

wtBRAF

pacientes com câncer de tireóide papilar. O OS mediana de tempo de diagnóstico não foi alcançado após um follow-up de 133 e 138 meses para

mutBRAF

e

wtBRAF

respectivamente. Além disso, o sistema operacional médio de metástases não foi atingido com um seguimento médio de 67 e 46 meses, respectivamente.

Além disso, analisamos o significado prognóstico da

ARN

no melanoma estratificando a nossa melanoma pacientes da seguinte forma:

mutBRAF

/

wtNRAS

,

wtBRAF /mutNRAS

, e

wtBRAF /wtNRAS

. A OS médio desde o diagnóstico em cada um dos 3 grupos foi de 131 meses (IC 95% 81,6-180,3) (

mutBRAF

/

wtNRAS

), 67 meses (IC 95% 29-105) (

wtBRAF /mutNRAS

), e 109 meses (95% CI 51,6-166,3) (

wtBRAF /wtNRAS

) .A diferença entre OS

mutBRAF

/p

ARN

e

wtBRAF /mutNRAS

foi de significância estatística limítrofe (p = 0,05). A OS mediana de tempos de metástase foi de 35 meses (IC 95% 8,5-61,5), 20 meses (IC95% 10,3-29,6) e 51 meses (IC 95% 4,8-97,1), respectivamente (p = 0,45). Estes dados sugerem que os pacientes com

mutBRAF

melanoma sobrevivem mais tempo do que aqueles com

NRAS-

doença mutante, mas que a sobrevivência de

mutBRAF

melanoma não é diferente da de melanoma pacientes com

wtBRAF

e

wtNRAS

.

A análise multivariada.

A análise multivariada em todos os 229 pacientes com base na idade, sexo,

RAS

(

KRAS

,

ARN

) mutações,

BRAF

mutações e tipo de doença foi conduzido para determinar se qualquer um desses fatores afeta a sobrevivência.

ARN

mutação e sexo masculino foram os únicos fatores independentes associados com menor OS desde o diagnóstico (taxa de risco (HR): 2,52, 95% CI 1,32-4,80, p = 0,005 e HR: 2,84, 95% CI 1,46-5,53, p = 0,002, respectivamente), enquanto que o diagnóstico de melanoma previsto um sistema operacional de tempo melhor do diagnóstico (HR: 0,15, IC de 95% 0,04-0,58, p = 0,005). O sexo masculino foi o único fator preditor pobre OS de tempos de metástase. (HR: CI 2,79, 95% 1,42-5,45, p = 0,003)

A análise multivariada específica da doença, incluindo idade, sexo,

RAS

(

KRAS

,

ARN

) mutações e

BRAF

mutações foi realizada. No melanoma, única

ARN

mutação e sexo masculino foram associados com menor OS desde o diagnóstico (HR: CI 2,64, 95% 1,28-5,41: 2,16, 95% CI 1,11-4,18, p = 0,02 e HR , p = 0,008, respectivamente). O sexo masculino foi o único fator prognóstico para mais curto OS de tempos de metástase (HR: 2,84, 95% CI 1,35-5,97, p = 0,006). No cancro colorectal, apenas a

KRAS

mutação foi identificada como um indicador independente de pobre OS desde o diagnóstico e metástase (HR: 13,56, IC 95% 1,61-113,88, p = 0,016 e HR: 5,46, 95% 1,07-27,89 IC, p = 0,04, respectivamente). Nós também detectou uma tendência para

mutBRAF

para prever pobres OS a partir do diagnóstico ou primeira vez de metástase (HR: CI 8,31, 95% 0,95-72,56, p = 0,055 e HR: 4,05, IC 95% 0,75-21,76 , p = 0,10, respectivamente).

na análise multivariada, não foi detectado nenhum fator prognóstico para carcinoma de tireóide papilar, talvez devido ao baixo número de casos.

Sobrevivência no Centro clínico de Targeted Therapy (clínica de fase I) de acordo com o

BRAF

estatuto

Foi realizada uma análise uni e multivariada para examinar os fatores que podem predizer oS de tempos de recurso ao Centro clínico de terapia-alvo ( fase I do Programa) até a morte no

mutBRAF

pacientes. Fatores incluídos foram: idade (≥60 vs. 60 anos, sexo (masculino versus feminino), tipo de tumor, RMH escore prognóstico, idade, Eastern Cooperative Oncology Group () estado de desempenho ECOG (0-1 vs. ≥2) , o tratamento com RAF /MEK agentes segmentação vs não tratados com RAF /MEK agente, qualquer diminuição do tamanho da lesão alvo vs. nenhuma diminuição após a remessa a julgamento a fase 1 de segmentação.

a análise univariada em

mutBRAF .

pacientes

na análise univariada, observou-se um sistema operacional já a partir de referência em mulheres versus homens (não alcançado em ambos os grupos, p = 0,015 e HR 2,62; IC 95% 1,14-6,01; p = 0,02), a pontuação RMH de 0-1 vs. 2-3 (não chegou vs. 5 meses, 95% CI 3-7; p 0,001 e HR 3,69; IC 95% 1,74-7,82; p = 0,001), performance status ≤1 vs. 2-4 (não chegou vs. 6 meses, 95% CI 2,1-9,9; p = 0,035 e HR 2,51, 95% CI 1,01-6,28; p = 0,048), o tratamento com RAF /MEK agentes segmentação (56 dos 80 pacientes receberam agentes de direccionamento RAF /MEK incluindo 37 com melanoma, 10 com tireóide papilar, 8 com câncer de cólon e 1 com cancro do ovário) vs. tratamento com quaisquer outros agentes ou nenhum tratamento (não chegou vs. 5 meses, 95% CI 3,4-6,6; p 0,001 e HR 0,20, IC 95% 0,095-0,43; p 0,001), o câncer de tireóide papilar vs. outros tipos de câncer (não alcançado em ambos os grupos, p = 0,018 e HR 0,09, 95% CI 0,10-0,89; p = 0,04), e qualquer redução no tamanho do tumor em qualquer fase I de ensaios clínicos vs. nenhuma diminuição (não chegou vs. 6 meses, 95% CI 4,7-7,2; p 0,001 e HR 0,09, 95% CI ,025-,32; p 0,001). (Figura 2 e Tabela 4)

(os pacientes que não tiveram medições do tumor no momento do último follow-up (N = 9) ou pacientes que não foram inscritos em um estudo fase 1 após o encaminhamento (N = 13) foram excluídos).

Ao excluir os pacientes que não se inscreveram em um estudo fase 1 após o encaminhamento (13 pacientes no total), descobrimos que

mutBRAF

pacientes tratados com agentes RAF /MEK segmentação melhorou a sobrevivência após a remessa em comparação com

mutBRAF

pacientes tratados com quaisquer outros agentes (não chegou vs. 5 meses, 95% CI 4-6; p = 0,002 e HR 0,26, 95% CI 0,10-0,66; p = 0,005) (Figura 3).

marcas Tic representam pacientes ainda vivos no último follow-up. (De 80 pacientes com

BRAF

mutações, 56 receberam um agente RAF /MEK segmentação, 11 receberam um agente voltados para os não RAF /MEK e 13 não foram inscritos em um ensaio clínico de fase 1).

a análise multivariada em

mutBRAF

pacientes.

na análise multivariada, os dois únicos fatores que previa um sistema operacional superior após o encaminhamento para a clínica de Fase I no

mutBRAF

grupo foram tratamento com quaisquer agentes RAF /MEK segmentação (HR 0,16, 95% CI, 0,03-0,89, p = 0,037) e qualquer redução no tamanho do tumor (medição RECIST) em qualquer ensaio de fase I (HR 0,07, 95% CI, 0,015 -0,35, p = 0,001) (Figura 4). De nota, os valores de FC dos seguintes fatores preditivos “melanoma vs não melanoma”, “cancro colorectal versus câncer colorretal não” e “câncer de tireóide papilar vs. não cancro papilar da tireóide” são extremamente elevados, em comparação com sua HR calculada pela análise univariada (figura 4). Esta discrepância pode ser explicada pela diferença na metodologia utilizada. Apesar de seus altos valores absolutos, isso deve ser interpretado com cautela, desde que não tem qualquer significado estatístico como demonstrado por um valor de p próximo de 1 e um intervalo de confiança de 95% que contém zero. Além disso, a sua extremamente ampla IC95% é indicativo do pobre estimativa do seu valor.

A análise univariada em

wtBRAF

pacientes.

Uma análise similar foi realizada em

wtBRAF

grupo para os 104 pacientes encaminhados. A análise univariada revelou OS superiores de referência associado com o seguinte: pontuação RMH de 0-1 em comparação com pontuação RMH de 2-3 (50 meses, 95% CI 6,4-93,3 vs. 6 meses, 95% CI 2-10,3; p 0,001 e HR 2,94; IC 95% 1,56-5,56; p = 0,001), o tratamento com RAF /MEK agentes versus tratamento com quaisquer outros agentes ou nenhum tratamento (51 meses versus 10 meses, 95% CI 7,1-12,9 focalização; p = 0,014 e HR 0,32, 95% CI 0,12-0,83; p = 0,019), sem cérebro metástases contra metástases cerebrais detectadas (15 meses, 95% CI 0-34,3 vs. 7 meses, 95% CI 3-10,3; p = 0,004 e HR 2,47, 95% CI 1,31-4,65; p = 0,005), não melanoma vs. melanoma (50 meses versus 10 meses, 95% CI 6-13,9; CI p = 0,006 e HR 2,57, 95% 1,27-5,18 ; p = 0,008) e qualquer redução no tamanho do tumor versus não redução (50 meses versus 10 meses, 95% Cl 6,2-13,8; p = 0,006 e HR 0,32, IC de 95% 0,13-0,75, p = 0,009) (Tabela 5).

Ao excluir os pacientes que não se inscreveram em um estudo fase 1 após o encaminhamento (18 pacientes no total), descobrimos que

wtBRAF

pacientes tratados com RAF /MEK segmentação agentes tem uma tendência de melhora da sobrevida após o encaminhamento em relação ao

wtBRAF

pacientes tratados com quaisquer outros agentes (51 meses versus 10 meses, 95% CI 4,7-15,9; p = 0,052 e HR 0,39, 95% CI 0,14-1,04; p = 0,06)

A análise multivariada em

wtBRAF

pacientes.

Na análise multivariada, nenhum desses fatores foi significativamente associada com uma melhor OS de referência (Figura 5) .

Características de melanoma doentes com

V600K BRAF

mutação

Além disso, investigamos o comportamento de

mutBRAF

melanoma com

V600K

substituição em comparação com outros subtipos de

BRAF

mutação. (Havia 13 pacientes com mutações V600K incluindo 12 com melanoma e um com cancro colo-rectal). No grupo de melanoma, comparamos pacientes com V600K

BRAF

mutações vs.

BRAF

mutações (a grande maioria sendo V600E)-V600K não. Descobrimos que V600K foi associada com mais cérebro (75% versus 36,3%, p = 0,02) e metástases pulmonares (91,6% versus 47,7%, p = 0,007). (O único paciente com câncer colorretal e V600K também tinha cérebro e metástases pulmonares). melanomas V600K metástase antes (tempo médio para a metástase = 19 meses, 95% IC 0-49 vs. 53 meses, 95% CI 33-72, p = 0,046), e foram associados com um sistema operacional mais curto de tempo do diagnóstico (mediana 78 meses, IC 95% 10-146 vs. 322 meses, p = 0,024) (Figura 6).

marcas Tic representam pacientes que estavam vivos e censurada no momento do último acompanhamento. (Foi excluída Um paciente para quem o momento do diagnóstico era desconhecido.)

Também comparamos o sistema operacional a partir do diagnóstico e das metástases entre melanoma V600K vs. wtBRAF melanoma e não foi estatisticamente diferente (P = 0,53 e 0,54, respectivamente).

Entre os 13 pacientes com V600K

BRAF

mutação, oito receberam RAF /MEK agentes alvo (um dos quais foi o câncer colorretal), três não receberam tratamento ( apenas o melhor cuidados paliativos) e dois receberam outros agentes de segmentação. Havia dois pacientes com doença estável de mais de quatro meses, mas há remissões parciais ou completas.

Discussão

BRAF

é um dos proteína quinase mais frequentemente mutado no cancro [14].