Abstract

Objectivo

Para avaliar as mudanças do fator nuclear kappa B (NF-kB) durante radioiodine 131 (

131I) terapia e se a inibição de NF-kB poderia aumentar

apoptose induzida por 131I em células de câncer diferenciado da tireóide (DTC) de uma forma sinergética.

Métodos

foram utilizadas três linhagens de células DTC humanos. inibição de NF-kB foi realizado utilizando um inibidor de NF-kB (Bay 11-7082) ou p65 por ARNsi transfecção. ensaio metil-tiazolil-tetrazólio foi realizada para avaliar a viabilidade celular. teste de ligação de DNA, ensaio de repórter luciferase, e Western blot foram adotados para determinar a função e expressão mudanças de NF-kB. factores anti-apoptóticos em seguida, NF-kB regulados XIAP, cIAP1, e Bcl-xL foram medidos. A apoptose foi analisada por Western blot para a caspase 3 e PARP, e por citometria de fluxo, bem. Um ensaio de captação de iodo foi realizado para determinar se a inibição de NF-kB pode influenciar a captação de iodeto radioativo.

Resultados

O ensaio metil-tiazolil-tetrazólio mostrou diminuição significativa de células viáveis ​​por terapia de combinação do que pela mono-terapias. O ensaio de ensaio e repórter de luciferase de ligação de ADN mostrou função e actividades de genes repórter de NF-kB aumentado devido a

131I, ainda supressão significativa foi conseguida através da inibição de NF-kB. Western blot mostrou

131I poderia aumentar a concentração de NF-kB nuclear, enquanto que a inibição de NF-kB reduzida concentração de NF-kB. Western blot também demonstraram significativo aumento da regulação de XIAP, cIAP1 e Bcl-xL após

terapia com 131I. E inibição da NF-kB poderia significativamente regular negativamente a esses fatores. Finalmente, o sinergismo induzida pela terapia combinada foi mostrada por melhorias significativas de caspase 3 clivada e PARP de Western blot, e de coloração Anexina V positiva, de citometria de fluxo. O ensaio de captação de iodo não mostraram alterações significativas quando NF-kB foi inibida.

Conclusão

Nós demonstramos que

131I poderia induzir ativação de NF-kB, que atenuaria

131I eficácia em células DTC. inibição de NF-kB por Bay 11-7082 ou p65 siRNA transfecção foi eficaz na supressão do NF-kB mudanças regulamentado anti-apoptóticos e na apoptose regime combinado foi alcançado sinergicamente

Citation:. Meng Z, Lou S, Tan J, K Xu, Jia Q, Zheng W (2012) fator nuclear kappa B inibição pode intensificar a apoptose de células diferenciadas cancro de tiróide induzido por

131I. PLoS ONE 7 (3): e33597. doi: 10.1371 /journal.pone.0033597

editor: Antimo Migliaccio, II Università di Napoli, Itália