Abstract

O receptor de progesterona (PGR), um receptor de hormônio esteróide sexual que se liga a progesterona é essencial para o desenvolvimento normal da mama. O polimorfismo do promotor PgR (+ 331G /A, rs10895068) está associada com o risco de cancro, possivelmente através da alteração da expressão do receptor de progesterona isoforma B. Estudos anteriores têm fornecido resultados inconsistentes. Para validar a associação entre a PGR + 331G /A polimorfismo e feminino o risco de câncer reprodutivo (mama, do endométrio e do ovário), foi realizada uma meta-análise de 19 estudos (19,978 casos e 24,525 controles) usando o software CMA Version 2. odds ratio (OR) e intervalos de confiança de 95% (IC) foram usadas para avaliar a força das associações. Os resultados globais indicam que o alelo variante e genótipos foram associados a um ligeiro aumento no risco geral de câncer reprodutivo feminino (A x L: OR = 1,063, IC 95% = 1,001-1,129; AA + AG vs. GG: OR = 1.067 , IC 95% = 1,002-1,136). Os resultados sugerem que a PGR + 331G /A polimorfismo pode estar associado a um aumento do risco de câncer feminino reprodutiva

Citation:. Chaudhary S, Panda AK, Mishra DR, Mishra SK (2013) Associação de + 331G /A PGR Polimorfismo com a susceptibilidade ao câncer reprodutor feminino: Evidências de uma meta-análise. PLoS ONE 8 (1): e53308. doi: 10.1371 /journal.pone.0053308

editor: Amanda Ewart Toland, Ohio State University Medical Center, Estados Unidos da América

Recebido: 25 de junho de 2012; Aceito: 27 de novembro de 2012; Publicação: 22 de janeiro de 2013

Direitos de autor: © 2013 Chaudhary et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. SC, AKP e DRM foram apoiados pelo Departamento de Biotecnologia, do Conselho de Pesquisa Científica e industrial e do Conselho indiano de Pesquisa médica, respectivamente. Este trabalho foi apoiado pela concessão intramural do Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biotecnologia, Governo da Índia. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

Conflito de interesses:.. Os autores declaram não haver conflito de interesse

introdução

está agora bem estabelecido que o câncer é uma doença multifatorial com uma relação orquestrada entre fatores genéticos e ambientais [1], [2]. Apesar de intenso estudo, o número de casos de cancro continua a aumentar dramaticamente a nível mundial. De acordo com a American Cancer Society, em 2012, mais de 500.000 americanos são esperados para morrer de câncer com mais de 1500 mortes por dia [3].

O receptor de progesterona (PGR) é um membro de uma grande ligando-activado família de receptores nucleares caracterizado por um domínio de ligação de ADN central, um domínio de ligação ao ligando do terminal carboxilo e activação múltipla (AF) e (If) elementos funcionais inibitórios. A PGR, que está localizado no cromossomo 11q22, e o receptor de estrogênio (ER) têm diversas funções reprodutivas associadas com o estabelecimento ea manutenção da gravidez, desenvolvimento alveolar e desenvolvimento epitélio mamário [4], [5], [6]. A progesterona, uma hormona esteróide, para se liga a PGR, causando dimerização e, assim, activar os seus genes-alvo para transcrever através dos seus elementos de resposta (PRE). A ligação e ativação são responsáveis ​​pela proliferação epitelial mamária [7]. O gene PGR é transcrito por dois promotores alternativos que se traduzem em duas isoformas, Um receptor de progesterona (PgRA) e receptor de progesterona-B (PgRB) através do qual a PGR medeia as suas funções fisiológicas [6]. A razão entre a expressão das duas isoformas é importante para a função fisiológica normal de sinalização de progesterona, que fica anulada no cancro [8]. Ambas as isoformas são idênticos, excepto para a ausência de 164 aminoácidos na extremidade N-terminal de PgRA, que estão presentes na PgRB. Isso faz com que PgRB única de PgRA por causa da presença de AF-3 para além de FA-1 e FA-2, que estão normalmente presentes em PgRA [9]. Seis sítios variáveis, quatro e cinco polimorfismo haplótipos comuns têm sido detectados no gene PGR [10]. O polimorfismo mais amplamente estudados na região promotora do gene PGR é o G para A substituição na posição 331 (receptor de progesterona, 331 G /A, rs10895068, 331 do codão de iniciação ATG). Curiosamente, um único local de ligação do GATA-5 que é adjacente ao polimorfismo + 331G /A PgR foi encontrado que leva a um aumento da actividade de transcrição de isoformas PgRB.

In vitro

sobre-expressão de GATA-5 com construção de luciferase HPGR apresentaram maior atividade transcricional com + 331AA do que com + 331GG incluído na construção luciferase contribuindo assim para tumorigênese da mama [11].

recentemente, muitos estudos têm investigado o papel da PGR + 331G /a polimorfismos na etiologia de vários tipos de câncer, ou seja, mama, ovário e cancro do endométrio. No entanto, os resultados destes estudos ainda não são conclusivos. Para esclarecer o papel de + 331G /A PGR polimorfismo em cânceres do sistema reprodutivo feminino, foi realizada uma meta-análise de todos os estudos de caso-controle elegíveis para derivar risco global de cancro associado este polimorfismo (Figura S1).

materiais e Métodos

Identificação e elegibilidade do estudo

relevante

Publicações recentes foram identificados através de uma pesquisa bibliográfica utilizando as palavras-chave “polimorfismo de receptor de progesterona”, “PGR polimorfismo” ou “polimorfismo PR”, e ” + 331G a “, ou” + 331G /a “e” câncer “no PubMed e referências cruzadas foram verificado que não estavam disponíveis no Pubmed ou Science Direct (publicado antes de Julho de 2012). Apenas os artigos escritos em Inglês foram selecionados para o estudo. Os seguintes critérios foram utilizados para a inclusão de artigos identificados para a nossa meta-análise: (a) avaliação de 331 G /A e câncer risco, (b) estudo caso-controle ou coorte de design e (c) estudos que continham freqüências genotípicas disponíveis . A principal razão de exclusão de algumas investigações foi a ausência de dados utilizáveis ​​descritos nestes estudos. Finalmente, os dados foram extraídos de estudos de caso-controle 19, totalizando para 19,978 casos e 24,525 controles para o polimorfismo + 331G /A PGR.

Os dados de extração

Dois investigadores (SC e DRM) extraídos independentemente todos os dados em conjunto e atingiu o consenso de todos os artigos que foram incluídos no estudo. Discordância entre os autores foi resolvida após discussão entre os autores. As informações a seguir foi procurado de cada artigo:. Primeiro nome do autor, ano de publicação, fonte de controle, país, etnia e números de casos e controles, freqüências genotípicas e freqüências alélicas para cada caso e controle

Meta- análise

a análise estatística para o estudo de meta-análise atual foi realizada utilizando o software V2 meta-análise abrangente (CMA) (Biostat, EUA). Meta-análise é uma ferramenta poderosa que combina resultados de estudos semelhantes independentes e derivar uma conclusão definitiva [12]. CMA V2 tem várias vantagens sobre outros programas disponíveis para calcular os meta-análises (https://www.meta-analysis.com/pages/comparisons.html). A força da associação entre a PGR + 331G /A polimorfismo eo risco de câncer foi medida por razões de odds (OR) com intervalo de confiança de 95% (IC). Foi examinada a associação entre o alelo A do PGR + 331G /A de risco polimorfismo e câncer, e fez comparações com o modelo genético dominante (AA + AG vs. GG). Um modelo de genética recessiva não foi realizada conforme os dados não estavam disponíveis para o mutante homozigoto (AA) nos casos estudados. A suposição de heterogeneidade foi avaliada com um I

2 à base de teste estatístico Q de Cochran. Um valor p significativo ( 0,10) foi utilizado para indicar a heterogeneidade entre os estudos, a combinadas ou foi calculada utilizando um modelo de efeitos aleatórios [13]. Em contraste, foi utilizado um modelo de efeito fixo [14] para o cálculo do combinado ou para homogeneidade entre os estudos. Além disso, o I

2 estatística foi utilizado para quantificar a variabilidade inter-estudo. Esta estatística variou de 0 a 100%, onde um valor de 0% não indicaram nenhuma heterogeneidade observada, e como os valores de aumento do grau de heterogeneidade aumentada (pontos de corte incluem: I

2 = 0-25%, nenhuma heterogeneidade ; I

2 = 25-50%, a heterogeneidade moderada; I

2 = 50-75%, grande heterogeneidade; I

2 = 75-100%, extrema heterogeneidade) [15]. O gráfico de funil foi empregado para examinar o viés de publicação. A análise de regressão de Egger foi usado para re-avaliação de viés de publicação, e um valor P inferior a 0,10 foi considerado significativo. parcelas funil e testes de regressão linear de Egger foram usadas para fornecer um diagnóstico do potencial viés de publicação.

Resultados

características do estudo

Para a associação entre a PGR + 331G /A polimorfismo e suscetibilidade ao câncer, os artigos foram recuperados com base nos critérios de pesquisa estabelecidos. Dezenove estudos preencheram os critérios de inclusão, cujas características são apresentadas na Tabela 1. Destes 19 estudos, 10 eram do cancro da mama estudos (BC) em que todos os pacientes eram de etnia Europeu [11], [16] – [24 ]; seis eram câncer de ovário (OC) estudos que apenas incluídos pacientes de origem europeia [10], [17], [20], [25], [26], [27] e foram câncer endometrial (CE) estudos três estudos, que incluiu pacientes de diferentes grupos étnicos [28], [29], [30].

o viés de publicação

plot funil de Begg e teste de Egger foi realizado para avaliar se houve qualquer publicação viés nos estudos incluídos em nossa meta-análise. A forma de funil não elucidar qualquer assimetria evidente em todos os modelos de comparação. Depois disso, o teste de Egger foi usado para fornecer evidência estatística da simetria gráfico de funil e não mostrou qualquer viés de publicação (Tabela 2).

Heterogeneidade teste

Q-teste e I

2 estatísticas foram usadas para testar a heterogeneidade entre os estudos. Nenhuma heterogeneidade foi observada em ambos os alelos (A vs G), bem como o modelo dominante genótipo para o cancro em geral, que foi incluído para a análise (alelo geral, A vs G: Q = 31,08, P

= 0,186 heterogeneidade , I

2 = 19,58; geral dominante modelo, AA + GG vs. GG:. Q = 25,76, P

heterogeneidade = 0,11, I

2 = 25,76)

Meta-análise resultar

A nossa meta-análise identificou uma associação leve evidente entre PGR (+ 331G /A) polimorfismo e um aumento do risco de câncer. Comparado com o alelo G de tipo selvagem, a variante geral alelo A foi associada a um risco aumentado de cancro leve (OR = 1,063, IC de 95% = 1,001-1,129, p = 0,048) [Figura 1 (I)]. Além disso, o modelo dominante (AA + AG vs GG) também mostrou uma modesta associação entre o polimorfismo e um aumento do risco de cancro (OR = 1,067, IC de 95% = 1,002-1,136, p = 0,043) [Figura 1 (II) ].

os quadrados e linhas horizontais correspondem ao CI específico do estudo OR e 95%. A área dos quadrados reflecte o peso do respectivo estudo. O diamante representa o OR reunidas e IC 95%. parcelas florestais que avaliaram a associação do alelo geral (I) e (II) modelo genético dominante, com o risco de câncer são apresentados. O cancro da mama, cancro do endométrio e do ovário denotado como a, b, e C, respectivamente.

Discussão

estudos epidemiológicos genéticos têm sugerido a relação entre diferentes SNPs e doenças. No entanto, os poderes estatísticos robustos com investigação genótipo-fenótipo são essenciais para detectar a associação leve, moderada ou forte com a doença. O hormônio progesterona medeia a sua função fisiológica através da PGR, um receptor de esteróides da classe I receptor nuclear super-família. Duas isoformas diferentes de PgR (PgRA e PgRB), que são transcritas a partir de dois promotores diferentes do mesmo gene [31], [32] são co-expressos em níveis iguais de epitélio mamário normal, [33], do ovário [34] e do endométrio células [35]. A expressão relativa das duas esta isoforma é alterada em transformação maligna. O PGR 331 L /Um polimorfismo no promotor resulta na introdução de uma caixa TATA que aumenta selectivamente a produção da isoforma PgRB, causando uma PgRA alterada: proteína PgRB [36]. A 331 G /A polimorfismo do promotor PGR tem sido extensivamente estudada por causa da sua relação em diferentes tipos de câncer, como mama, do endométrio e do ovário. No entanto, os resultados destes estudos foram ambíguas. Além de a PGR 331 L /Um polimorfismo, existem polimorfismos adicionais, tais como 44C + /T, S344T, G393G, V600L, H770H e alelo Alulns [37]. Foram avaliados o polimorfismo promotor + 331G /A PGR por duas razões: (1) a sua associação com muitos tipos de câncer, como câncer de endométrio, ovário e mama, embora haja observações conflitantes e (2) o atributo funcional + 331G /A PGR tem sido delineada e foi encontrado para jogar um papel importante no hormônio relacionado câncer.

em estudos combinados previamente publicados, Yang e seus colegas têm relatado uma associação entre PGR 331 G /a variante de risco de câncer de mama [38]. No entanto, a outra meta-análise de avaliação mais 4 estudos e não encontraram esta associação [39]. Com base na disponibilidade de mais estudos sobre PGR 331 G /Um polimorfismo e cancro dependente de hormonas femininas, fizemos uma meta-análise para determinar conclusivamente se existe uma associação entre eles. Detectamos uma associação moderada entre PGR 331 G /Um polimorfismo com o risco geral de câncer feminino. Como todos os estudos envolveram mulheres de única origem caucasiana, não realizar qualquer análise de subgrupo por etnia. A prevalência de um alelo secundário A é restrito a apenas a população europeia (5-10%) e é raro em mulheres de Africano, Asiático e descida Oriente Médio, que pode ser a razão para a associação leve, mesmo que os estudos incluídos são elevados. [40]. A não-detecção de associação entre o 331 G Um câncer PGR /polimorfismo e de mama foi consistente com o estudo anterior [39].

Um estudo de associação genômica ampla (GWAS) foram realizadas para vários tipos de câncer (mama, da próstata, colo-rectal, e do pulmão) e vários alelos de susceptibilidade foram identificados [41]. Nenhum dos GWAS identificaram a 331 L /Um polimorfismo PgR como um factor de risco para a predisposição para o cancro, apesar de este SNP funcional foi estabelecida. Em contraste, os resultados da meta-análise revelou uma associação da PGR (331 G /A) polimorfismo com uma susceptibilidade ao câncer. Corroborando com o estudo atual, discrepâncias entre o GWAS e estudos de associação de genes candidatos (CG) foram relatados para a doença diferente [42], [43], [44], [45]. Estudos CG tendem a ter maior poder estatístico do que o poder em GWAS [46].

O hormônio progesterona exerce o seu efeito fisiológico exclusivamente através da presença da PGR, conforme mostrado em modelos do rato [47], [48]. As isoformas PgR, e PgRA PgRB, exibir diferentes propriedades de transactivação com base no tipo de célula alvo e do promotor [49]. PgRB funciona como um forte ativador da transcrição dos promotores PGR-dependentes em tipos de células PgRA-inativos, mas o PgRA agonista-bound sob esta condição pode reprimir a atividade transcricional PgRB e outros receptores de esteróides como α ER [50]. De progesterona funciona como um antagonista do estrogénio (E2) induzida por proliferação de células do epitélio uterino através PgRA [48]. Tratar PRAKO

– /- ratinhos (deficientes em PgRA) com E2 e progesterona resultou numa proliferação celular dependente de progesterona, o que não foi detectado em E2 e de tipo selvagem ou ratinhos PRAKO, sugerindo que PgRB tem um papel tratado com progesterona na proliferação do endométrio uterino. Além disso, a isoforma PgRB também poderia provocar a proliferação e diferenciação normal como observado em PRAKO

– /- epitélio mamário através de progesterona. Durante endometriose, somente a isoforma PgRA é expressa e sugere-se a ausência de PgRB devido ao ciclismo inadequado da glândula do endométrio [25]; no entanto expressão PgRA no ciclismo normal é predominante durante a fase proliferativa, que se desloca para a expressão PgRB durante a fase secretário precoce [33]. A sobre-regulação e da natureza proliferativa da isoforma PgRB nos portadores do alelo + 331A pode resultar em diferentes tipos de cancro [25]. Com relação a essa postulação biológica, a + 331G /A PGR pode modular o risco de câncer. No entanto, a associação desse polimorfismo com o risco de câncer em geral era leve (OR = 1,063, p = 0,048). É importante notar que a expressão da PGR está associada com uma melhor sobrevivência livre de doença [51]. Uma alteração na razão da expressão das isoformas PgR precede alterações que podem levar ao carcinoma do endométrio [52]. O aumento na expressão PgRB devido a polimorfismo no promotor conduz a alterações na relação isoforma e está associada com um risco aumentado de desenvolvimento de cancro do endométrio [53]. Além disso, um estudo do cancro endometrial com o polimorfismo + 331G /A PGR e expressão PGR caso-controle previu que o risco de recorrência e resposta clínica ao tratamento com progesterona foi seis vezes mais prováveis ​​em mulheres com PR (+) do que com PR (-) tumores. terapia com progesterona é eficaz contra o cancro do endométrio desenvolvido, que é dependente de proliferação mediadas por estrogénio. Além disso, PR (+) cancro do endométrio foi um fator prognóstico independente na sobrevida livre de doença [54]. A constatação de que PgRB poderia contribuir para a proliferação de células pode proporcionar implicações clínicas para a gestão hormonal do endométrio e do epitélio de mamífero através da rectificação expressão relativa da PgRA: isoforma PgRB, que é essencial para as respostas dos tecidos reprodutivos apropriados. moduladores específicos de isoformas como progesterona, o que poderia diferenciar entre PgRA e PgRB isoforma, também pode ser de valor clínico.

Embora os relatórios anteriores sobre a associação da PGR (+ 331G /A) polimorfismo e câncer são inconsistentes, as meta-análise atual tem proporcionado uma conclusão definitiva. Inconsistências entre os estudos de associação CG poderia ser atribuída a pequenos tamanhos de amostra, categorização clínica inadequada e a inclusão de diferentes etnias.

Conclusão

Uma associação moderada entre PGR + 331G /A polimorfismo e reprodutivo feminino foi detectado o risco de câncer. Como os estudos de caso-controle elegíveis não pode fornecer uma relação casual, grandes e bem desenhados estudos genótipo-fenótipo de câncer diferentes são necessárias para derivar um papel definitivo deste SNP com câncer.

Informações de Apoio

Checklist S1.

PRISMA 2009 checklist.

doi:. 10.1371 /journal.pone.0053308.s001

(DOC)

Reconhecimentos

Agradecemos comunicações de saúde KWB, Inc. para a edição do manuscrito