PLOS ONE: Avaliação dos Níveis de hipóxia inducible factor em linhas celulares de cancro em cima hipóxica de indução usando uma construção repórter Novel

Sumário

hipóxia inducible factor (HIF) via de sinalização é importante para as células de tumor com fontes de oxigénio limitado, tal como é mostrado para ser envolvido no processo de proliferação e da angiogénese. Dado o seu papel central na biologia do câncer, os ensaios robustos para rastrear alterações na expressão de HIF são necessários para compreender a sua regulação em câncer, bem como desenvolver terapias que visem a sinalização HIF. Aqui nós relatamos uma construção repórter HIF romance contendo repetições em série de sites mínimos HIF de ligação a montante da sequência de codificação EYFP. Mostra-se que a construção repórter tem uma excelente razão sinal-fundo e a actividade repórter está dependente de HIF e directamente correlacionado com os níveis de proteína HIF. Utilizando esta nova construção, que os níveis de actividade de HIF ensaiada em diferentes linhas de células de cancro cultivadas em vários graus de hipóxia. Esta análise revela uma variação específica linha celular de cancro surpreendente de actividade de HIF no mesmo nível de hipóxia. Nós ainda mostrar que em duas linhas celulares de cancro do colo do útero, ME180 e HeLa, os diferentes níveis de actividade de HIF observados correlacionam-se com os níveis de pct90, um co-factor que protege contra a degradação do HIF-independente de VHL. Esta construção repórter HIF romance serve como uma ferramenta para definir rapidamente os níveis de atividade HIF e, portanto, a capacidade terapêutica de potenciais repressores HIF em cânceres individuais

Citation:. Zhou W, Dosey TL, Biechele T, Lua RT, Horwitz MS , Ruohola-Baker H (2011) Avaliação dos Níveis de hipóxia inducible factor em linhas celulares de cancro em cima hipóxica de indução usando uma construção repórter Novel. PLoS ONE 6 (11): e27460. doi: 10.1371 /journal.pone.0027460

editor: Gangjian Qin, da Universidade Northwestern, Estados Unidos da América

Recebido: 04 de maio de 2011; Aceito: 17 de outubro de 2011; Publicado: November 23, 2011

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