Abstract
Objectivo
Caspase-8 (CASP8) desempenha um papel central na via apoptótica e regulação aberrante desta via pode causar câncer. Estudos anteriores investigaram a associação entre CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo eo risco de câncer colorretal (CRC) apresentaram resultados inconclusivos. Foi realizada uma meta-análise de todos os estudos disponíveis para investigar esta associação.
Métodos
Todos os estudos publicados até outubro de 2013, sobre a associação entre CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo eo risco de CRC foram identificados através de pesquisa bases de dados electrónicas biblioteca PubMed, EMBASE e Cochrane. A associação entre CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo eo risco de CRC foi avaliada pela odds ratio (OR), juntamente com seus intervalos de confiança de 95% (IC).
Resultados
Seis estudos com 6325 casos e 6.842 controles foram incluídos na meta-análise. Observamos que a CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo foi significativamente correlacionada com o risco de CRC quando todos os estudos foram agrupados em meta-análise (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,890, IC 95% 0,821-0,964,
P
= 0,004; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,899, IC 95% 0,833-0,970,
P
= 0,006). Na análise estratificada por etnia, fonte de controle, e índice de qualidade, foi observada associação significativa em asiáticos (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,862, IC 95% ,761-,977,
P = 0,020
; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,845, IC 95% 0,749-0,953,
P
= 0,006), estudos de base populacional (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,890, IC 95% 0,813-0,975,
P
= 0,012; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,901, IC 95% 0,827-0,982,
P
= 0,018), e os estudos de alta qualidade. No entanto, na análise de subgrupo de acordo com a localização do câncer, não foi detectada nenhuma associação significativa.
Conclusões
A presente meta-análise sugere que a CASP8 é um gene candidato para CRC susceptibilidade. Os CASP8 -652 ins 6N /del polimorfismo pode desempenhar um papel protetor no desenvolvimento CRC especialmente entre os asiáticos. Outros estudos grandes e bem desenhados são necessários para confirmar esta associação
Citation:. Peng Q, Lao X, Tang W, Chen Z, Li R, Wang J, et al. (2014) CASP8 -652 6N Del polimorfismo contribui para Colorectal Cancer Susceptibilidade: Evidências de uma meta-análise. PLoS ONE 9 (2): e87925. doi: 10.1371 /journal.pone.0087925
editor: Gayle E. Woloschak, Northwestern University Feinberg School of Medicine, Estados Unidos da América
Recebido: 06 de dezembro de 2013; Aceite: 31 de dezembro de 2013; Publicação: 03 de fevereiro de 2014
Direitos de autor: © 2014 Peng et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. O trabalho descrito neste trabalho foi apoiado pelo National Natural Science Foundation (No. 81.260.302). O financiador não teve nenhum papel no desenho do estudo, recolha e análise de dados, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
o câncer colorretal (CRC) é o segundo câncer mais comumente diagnosticado com mais de 1,2 milhões de novos casos e 608,700 mortes em 2008 [1], [2]. A maior taxa de incidência de CRC é encontrada na Austrália, Europa e América do Norte. Além disso, a taxa de incidência de CRC está a aumentar rapidamente em um número de países no leste da Ásia, como a China [2]. O desenvolvimento e progressão da CRC envolve a proliferação de células epiteliais não regulamentada devido a uma série de alterações genéticas acumuladas [3]. A evidência mostra que a sobrevivência prolongada das células epiteliais colo-rectais tais geneticamente instáveis, levando, eventualmente, a sua transformação maligna final, está associada com a inibição progressiva da apoptose. Os polimorfismos genéticos para os genes que controlam ciclo celular ou a apoptose, foram encontrados para modular o risco para doenças malignas humanas [4], [5].
caspase-8 (CASP8) é um regulador chave da apoptose. É uma protease apical da via de apoptose extrínseca que desempenha um papel importante no mecanismo de defesa contra a hiper-proliferação e tumorigénese [6]. O gene humano CASP8, mapeado no cromossoma 2q33-34, é de 30 kb de comprimento e contém pelo menos 11 exões [7]. Havia pelo menos 474 polimorfismos de nucleotídeo único no gene CASP8 de acordo com o banco de dados dbSNP (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP), incluindo o CASP8 mais comumente ocorrem -652 6N ins /del polimorfismo (rs3834129 ). Foi relatado que os CASP8 -652 6N ins /del promotor variantes destruir o elemento de ligação para uma proteína estimuladora e reduzir a expressão de CASP8, resultando assim numa redução na reactividade a apoptose de linfócitos T após estimulação por células cancerosas [8]. Por isso, é biologicamente razoável supor uma relação de potencial entre os CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo e cânceres.
Durante as duas últimas décadas, vários estudos epidemiológicos moleculares avaliaram a associação entre CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo eo risco de CRC, mas os resultados permanecem controversos e inconclusivos. Para os estudos de caso-controle de associação genética que verificam polimorfismos candidatos, tamanho da amostra é um fator que influencia importante para a precisão estudo. pequeno tamanho da amostra pode ter poder suficiente para explorar um verdadeiro associações de efeito modesto [9], especialmente para doença multifatorial complexa, como CRC. Combinando dados de todos os estudos elegíveis por meta-análise tem a vantagem de aumentar o poder estatístico e reduzindo erros aleatórios e obter estimativas precisas para algumas possíveis associações genéticas. Portanto, neste estudo, foi realizada uma meta-análise quantitativa, incluindo todos os estudos elegíveis. Esta é, a nosso conhecimento, a primeira meta-análise abrangente de estudos genéticos sobre a associação entre CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo eo risco de CRC.
Materiais e Métodos
estratégia de pesquisa
Uma busca na literatura de Pubmed, Embase e Cochrane library, foi realizada utilizando as palavras-chave combinadas: ‘CASP8’, ‘Caspase8’, ‘polimorfismo’, ‘genética’, ‘câncer de cólon “,” câncer do reto’ e ‘ câncer colorretal’. A última pesquisa foi realizada em outubro de 2013, sem qualquer restrição de idioma. artigos adicionais foram identificados através das referências citadas na primeira série de artigos seleccionados. Artigos incluídos na meta-análise foram em qualquer idioma, com seres humanos, publicados na literatura primária e não tinha nenhuma sobreposição óbvia de indivíduos com outros estudos. Entre relatórios sobrepostos, apenas os estudos com mais informações sobre a origem dos casos /controles foram mantidos. O estudo foi realizado de acordo com a proposta de Meta-análise de estudos observacionais no grupo Epidemiologia (ALCE) [10]
Os critérios de seleção
Os seguintes critérios foram utilizados para incluir estudos publicados:. ( i) estudos de caso-controle que avaliaram a associação entre CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo eo risco de CRC; (Ii) os dados de genótipos suficientes foram apresentadas para calcular as odds ratio (OR) e intervalos de confiança de 95% (IC95%); (Iii) população de controlo não continha pacientes com tumores malignos. As principais razões para a exclusão dos estudos foram: (i) revisão, ou meta-análise, ou por carta, ou um comentário; (Ii) duplicado estudos ou estudos sem dados brutos que precisamos; e (iii) estudos que incidiu sobre HNPCC ou FAP. Também foram excluídos os estudos baseados na família de pedigrees com vários casos afetados por família, porque a sua análise é baseada em considerações de ligação.
Os dados de extração
Dois autores (Qiliu Peng e Xianjun Laos) de uma análise independente e extraíram os dados de todos os estudos elegíveis. Para garantir a precisão das informações extraídas, os dois autores verificou os resultados de extração de dados e chegaram a um consenso sobre todos os dados extraídos. Se diferentes resultados foram gerados, eles iriam verificar os dados novamente e ter uma discussão para chegar a um acordo. Se estes dois autores não poderia chegar a um consenso, outro autor (Weizhong Tang) foi consultado para resolver a disputa e uma decisão final foi tomada pela maioria dos votos. Dados extraídos de estudos elegíveis incluiu o primeiro autor, ano de publicação, país de origem, etnia, método de genotipagem, critérios correspondentes, fonte de controle, critérios de diagnóstico CRC, o número total de casos e controles e freqüências genotípicas de casos e controles. origens étnicas foram classificados como caucasianos e asiáticos. localização câncer foi dividido em câncer de cólon e reto e foi adicionalmente gravados para a análise estratificada.
O Índice de qualidade de avaliação
A qualidade dos estudos elegíveis foi avaliada de forma independente por dois autores (Qiliu Peng e Xianjun Lao) de acordo com um conjunto de critérios predefinidos (Tabela 1) com base na escala de Thakkinstian et ai. [11]. Os critérios revistos cobrir a representatividade dos casos, fonte de controles, apuração do CRC, o tamanho total da amostra, controle de métodos de genotipagem qualidade, e Hardy-Weinberg (HWE) na população de controlo. Discordâncias foram resolvidas por consenso. Escores variavam de 0 (mais baixo) a 10 (mais alto). Artigos com pontuação igual ou inferior a 6 foram considerados estudos “de baixa qualidade”, enquanto aqueles com pontuações superiores a 6 foram consideradas estudos “de alta qualidade”.
A análise estatística
a força da associação entre CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo eo risco de CRC foi avaliada pela odds ratio (OR) com intervalo de confiança de 95% (IC). O significado da pool ou foi determinada pelo teste de Z e um
valor de p inferior a 0,05 foi considerado significativo
. A associação de CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo eo risco de CRC foi avaliada utilizando modelos aditivos (del /del vs. ins /ins e ins /del vs. ins /ins), modelo recessivo (del /del vs. ins /del + ins /ins), e modelo dominante (del /del + ins /del vs. ins /ins). Heterogeneidade entre os estudos foi verificado por um Q-teste baseado qui-quadrado-[12]. Um
P
Q
valor inferior a 0,10 para o Q-teste indica uma presença de heterogeneidade entre os estudos, pelo que o modelo de efeitos aleatórios (o método DerSimonian e Laird) foi usado para o meta-análise [13]. Caso contrário, foi utilizado o modelo de efeitos fixos (o método de Mantel-Haenszel) [14]. Para explorar as fontes de heterogeneidade entre os estudos, realizamos análises de subgrupos e Galbraith parcelas análise. análises de subgrupos foram realizadas por etnia, localização do câncer, fonte de controle, e índice de qualidade. A análise de sensibilidade foi realizada por omissão sequencial de estudos individuais para avaliar a solidez dos resultados. viés de publicação foi avaliada usando um gráfico de funil e testes de assimetria regressão de Egger [15]. Se viés de publicação existia, o Duval e Tweedie não paramétrico “trim e preencher” método foi usado para ajustar para ele [16]. A distribuição dos genótipos na população de controlo foi testado para HWE usando um teste do qui-quadrado do goodness-of-fit. Todas as análises foram realizadas usando o software Stata, versão 12.0 (Stata Corp., College Station, TX). Todos os
P valores
eram de dois lados. Para assegurar a confiabilidade ea precisão dos resultados, dois autores introduziu os dados dos programas de software de estatística de forma independente com os mesmos resultados.
Resultados
características do estudo
Com base em os critérios de pesquisa, oito estudos relevantes para o papel de CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo no CRC susceptibilidade foram identificados. Dois desses artigos foram excluídos: um era uma carta [17], um não apresentaram dados suficientes para calcular OR e IC 95% [18]. busca manual das referências citadas nos estudos publicados não revelou quaisquer artigos adicionais. Como resultado, um total de seis estudos relevantes contendo 6,325 casos e 6.842 controlos foram incluídos na meta-análise de [8], [19], [20], [21], [22], [23] (Figura S1) . A Tabela 2 lista as principais características desses estudos. Entre estas publicações, dois foram conduzidos de descida Europeu [20], [21], e quatro foram conduzidos de origem asiática [8], [19], [22], [23]. estudos [8], [21], se basearam-hospitalar três eram estudos de base populacional [22] e três [19], [20], [23]. Dois destes estudos [19], [22] apresentou CASP8 -652 6N ins /del distribuições polimorfismo de genótipos de acordo com a localização do câncer (câncer de cólon e câncer retal). Os casos foram histologicamente ou patologicamente confirmado como CRC em quatro estudos [19], [20], [22], [23]. Os controles foram principalmente saudável ou populações e combinados com a idade eo sexo de base hospitalar. As distribuições de genótipos nos controles de todos os estudos estão de acordo com HWE.
Meta-análise
Como mostrado na Tabela 3, Descobrimos que o CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo foi significativamente correlacionada com a diminuição do risco CRC quando todos os estudos foram agrupados em meta-análise (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,890, IC 95% 0,821-0,964,
P
= 0,004; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,899, IC 95% 0,833-0,970,
P
= 0,006). Na análise de subgrupo por etnia, significativa diminuição do risco CRC foi encontrado em populações asiáticas (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,862, IC 95% 0,761-0,977,
P
= 0,020, Figura 1; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,845, IC 95% 0,749-0,953,
P
= 0,006, Figura 2), mas não em populações caucasianas. Na análise estratificada de acordo com a fonte de controle, significativa diminuição do risco CRC foi encontrado em estudos de base populacional (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,890, IC 95% 0,813-0,975,
P = 0,012
; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,901, IC 95% 0,827-0,982,
P
= 0,018), mas não em estudos baseados em hospitais. Na análise de subgrupo por índice de qualidade, significativa diminuição do risco CRC foi observada em estudos de alta qualidade (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,877, IC 95% 0,805-0,956,
P
= 0,003; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,886, IC 95% 0,817-0,961,
P
= 0,004), mas não em estudos de baixa qualidade. No entanto, na análise de subgrupo por localização câncer, associação estatisticamente significante não foi detectada em ambos os pacientes com câncer de cólon e assuntos de câncer de reto.
análise Heterogeneidade
estatística significativa foi observada heterogeneidade entre os estudos, quando todos os estudos elegíveis foram agrupados em meta-análise (dEL /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,026; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,028). Para explorar as fontes de heterogeneidade, foi realizada a primeira análise de subgrupo. Análises de subgrupos estratificados por etnia, fonte de controle, e índice de qualidade mostrou que a heterogeneidade ainda foi significativo em populações asiáticas, estudos de base populacional e estudos de alta qualidade (Tabela 3). Posteriormente, foi realizada a análise Galbraith parcelas para continuar a identificar a fonte de heterogeneidade. Galbraith análise parcelas indicaram que o estudo Sun et al. [8] foi o outlier contribuindo para a heterogeneidade no aditivo modelo del /del vs. ins /ins e modelo recessivo del /del vs. ins /del + Ins /ins nas populações em geral (Figura 3). Ao excluir o estudo por Sun et al. [8], a heterogeneidade diminuiu, obviamente, e
P
Q
valores foram superiores a 0,10 nas populações totais (DEL /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,414; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,454), asiáticos (dEL /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,153; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,182), estudos de base populacional (dEL /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,170; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,212), e de alta qualidade estudos (del /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,168; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,219). No entanto, o significado das RUP resumo para CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo em diferentes modelos de comparação na população em geral e as análises de subgrupo não foram influenciados pela omissão deste estudo [8].
A O estudo da Sun et ai. foi visto como outlier no aditivo ins modelo /del vs. ins /ins. B O estudo de Sun et ai. foi visto como outlier no modelo recessivo del /del vs. ins /del + Ins /ins.
Análise de sensibilidade
A análise de sensibilidade foi realizada por omissão sequencial de estudos individuais. Para as análises de agrupamento mais de três estudos individuais, a importância das RUP não foi influenciado excessivamente omitindo qualquer único estudo (dados não mostrados), indicando que nossos resultados foram estatisticamente robusta.
O viés de publicação
plot funil de Begg e teste de Egger foram realizados para avaliar o viés de publicação de literaturas em todos os modelos de comparação. A forma do gráfico de funil não revelou qualquer evidência de assimetria óbvia (Figura 4). Em seguida, o teste de Egger foi usado para fornecer evidência estatística de simetria gráfico de funil. Todos os valores de p dos testes de Egger foram mais de 0,05 (P = 0,561 para Del /del vs. ins /ins; P = 0,929 para ins /del vs. ins /ins; P = 0,476 para o modelo recessivo del /del vs. ins /del + ins /ins; e P = 0,912 para o modelo dominante del /del + ins /del vs. ins /ins), proporcionando a evidência estatística de simetria das parcelas do funil. Os resultados sugerem que o viés de publicação não foi evidente neste meta-análise.
Discussão
A morte celular programada, ou apoptose, é um processo normalmente protetora que permite que o corpo a eliminar prejudiciais células. mecanismos apoptóticos pode conduzir a dificuldades de proliferação celular descontrolada e resultar na patogénese de cancro humano [24]. A caspase-8, que foi codificado pelo gene CASP8, desempenha um papel central nas vias apoptóticas [25] e alterações na estrutura geneticamente determinada desta enzima pode influenciar a taxa de apoptose. Mais especificamente, um polimorfismo de deleção de seis nucleótidos (-652 del 6N) foi identificado na região do promotor do gene CASP8 e está associada com a diminuição da expressão de RNA em linfócitos, devido à alteração de um local de ligação de Sp1 [8]. Esta variante foi encontrada para diminuir a actividade apoptótica CASP8 e reactividade dos linfócitos T através da célula de cancro ex vivo modelo [8], e a actividade CASP8 diminuída pode conduzir a uma alteração da morte celular programada normal e resultar na susceptibilidade do tumor. Esta hipótese foi confirmada por nossa meta-análise.
Os resultados da meta-análise mostrou que o CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo foi associado com um risco reduzido de CRC entre a população asiática. No entanto, nenhuma associação significativa foi detectada entre a população caucasiana. Além disso, nossos dados também mostraram uma diminuição do risco CRC sob o modelo aditivo (ins /del vs. ins /ins) e modelo dominante (DEL /del + Ins /del vs. ins /ins) nas populações em geral. Ao se excluir o estudo da Sun et al. [8], que foi mostrado como um outlier no Galbraith parcelas análise, um estatisticamente significativa diminuição do risco CRC também foi encontrada em população asiática, mas não em caucasianos sob o modelo aditivo e modelo dominante. Na verdade, ele pode não ser incomum para jogar o mesmo polimorfismo papéis diferentes na suscetibilidade ao câncer entre as diferentes populações étnicas. Em caucasianos, as diferenças de origens genéticas e do ambiente em que viviam podem influenciar a associação entre o CASP8 -652 6N ins /del polimorfismo eo risco de CRC. Além disso, o número limitado de estudos também faz com que os resultados da análise por subgrupo etnia menos fiáveis. Assim, nossos resultados devem ser interpretados com cautela.
Na análise de subgrupos de acordo com a fonte de controle, estatisticamente significativa diminuição do risco CRC foi encontrado nos estudos de base populacional, mas não em estudos baseados em hospitais. A razão pode ser que os estudos baseados em hospitais têm um alto risco de produzir resultados pouco fiáveis porque os controles baseados em hospitais nem sempre pode ser verdadeiramente representativa da população em geral. Quando estratificados de acordo com a pontuação dos artigos de qualidade, estatisticamente significativa diminuição do risco CRC foi observado em estudos de alta qualidade, mas não em estudos de baixa qualidade. A possível razão para a discrepância pode ser que a existência de viés de seleção e viés de memória nos estudos de menor qualidade. Além disso, métodos de genotipagem, sem controle de qualidade em estudos de baixa qualidade também devem ser considerados quando se decifrar estes resultados inconsistentes. Portanto, um projeto metodologicamente preferível, como o uso de um estudo adequado e representativo de alta qualidade baseada na população, é de grande valor em estudos de caso-controle.
A heterogeneidade é um problema potencial na interpretação dos resultados de uma meta- análise e encontrar as fontes de heterogeneidade é um dos objetivos mais importantes da meta-análise [26]. No presente estudo, significativa heterogeneidade entre estudo nas análises agrupadas de estudos elegíveis totais foi observada em aditivo modelo del /del vs. ins /ins (
P
Q
= 0,026) e modelo recessivo del /del vs. ins /del + ins /ins (
P
Q
= 0,028). Para explorar as fontes de heterogeneidade, realizamos análises de subgrupos e Galbraith parcelas análise. Análises de subgrupos estratificados por etnia, fonte de controle, e índice de qualidade mostrou que a heterogeneidade ainda foi significativo em populações asiáticas, estudos de base populacional e estudos de alta qualidade. Galbraith parcelas análise mostrou que o estudo de Sun et ai. [8] foi o outlier nos dois modelos genéticos nas populações totais. Ao excluir o estudo Sun et al. [8], a heterogeneidade diminuiu, obviamente, e todos
P
Q
valores foram superiores a 0,10 nos dois modelos de comparação genética nas populações gerais, asiáticos, estudos de base populacional e estudos de alta qualidade. No entanto, as RUP sumárias no aditivo modelo del /del vs. ins /ins (
P
Q
= 0,026) e modelo recessivo del /del vs. ins /del + Ins /ins (
P
Q
= 0,028) na população em geral, os asiáticos, estudos de base populacional, e os estudos de alta qualidade não foram alterados material de omitindo este estudo, indicando que nossos resultados foram robusto e confiável. Os resultados indicaram que o estudo de Sun et ai. [8] foi a principal fonte de heterogeneidade na meta-análise.
Algumas limitações deste meta-análise deve ser abordada. Em primeiro lugar, na análise de subgrupo por etnia, os estudos incluídos considerado apenas asiáticos e caucasianos. Os dados relativos a outras etnias, como os africanos não foram encontrados. Assim, estudos adicionais são necessários para avaliar o efeito desse polimorfismo funcional sobre o risco de CRC em diferentes etnias, especialmente nos africanos. Em segundo lugar, nossos resultados foram baseados em estimativas não ajustadas. Não realizamos análise ajustada para outras variáveis, tais como fumar, beber, a obesidade, o consumo de carne vermelha, e assim por diante, por causa dos dados originais indisponíveis dos estudos elegíveis
.
Em conclusão, a nossa meta-análise fornecida uma estimativa mais precisa com base no tamanho de amostra maior em comparação com os estudos individuais. O nosso estudo sugere que o CASP8 é um gene candidato para CRC susceptibilidade. Os CASP8 -652 ins 6N /del polimorfismo pode desempenhar um papel protetor no desenvolvimento CRC especialmente entre os asiáticos. A fim de verificar melhor as nossas descobertas, grandes estudos epidemiológicos bem concebidos são garantidos.
Informações de Apoio
Figura S1.
Diagrama dos estudos incluídos para esta meta-análise
doi:. 10.1371 /journal.pone.0087925.s001
(TIF)
Checklist S1.
doi: 10.1371 /journal.pone.0087925.s002
(DOC)