Abstract

Fundo

Activina receptor 2 (

ACVR2

) é comumente mutado em microssatélites instáveis ​​(MSI) cancros do cólon, levando à perda de proteína, sinalizando a interrupção, e tumores maiores. Aqui, nós examinamos activina interrupção no cancros do cólon estável microssatélite (MSS) sinalização.

Métodos

Cinquenta e um MSS cancros do cólon de base populacional foram avaliados para ACVR1, ACVR2 e proteína pSMAD2. Consenso porções de mutação-propensa de

ACVR2

foram sequenciados em cânceres primários e todos os exons em linhas celulares de cancro do cólon. Perda de heterozigosidade (LOH) foi avaliada para

ACVR2

e

ACVR1

, e

ACVR2

metilação do promotor por PCR e bissulfito de sequenciação e instabilidade cromossômica (CIN) fenótipo específico da metilação através de análise LOH fluorescente de 3 marcadores duplicados.

ACVR2

metilação do promotor e expressão ACVR2 foram avaliados em linhas celulares de cancro do cólon através de qPCR e borrões IP-ocidentais. Re-expressão de ACVR2 após desmetilação com 5-aza-2′-desoxicitidina (5-Aza) foi determinada. Um 26 MSS cancros do cólon adicionais foram avaliados para a perda de ACVR2 e seu mecanismo, e perda ACVR2 em todos os cancros testados correlacionados com os critérios clínico-patológicos.

Resultados

De 51 MSS tumores de cólon, 7 (14% ) perdeu ACVR2, 2 (4%) ACVR1, e 5 (10%) pSMAD2 expressão. Sem somática

ACVR2

mutações foram detectados. A perda de expressão foi associada com ACVR2 LOH a

ACVR2

(p 0,001), e

ACVR2

hipermetilação do promotor (P 0,05).

ACVR2

LOH, mas não hipermetilação do promotor, correlacionada com o estado CIN. Em linhas celulares de cancro do cólon com totalmente metilado

ACVR2

promotor, perda de

ACVR2

expressão de mRNA e proteínas foi restaurado com o tratamento 5-Aza. Perda de ACVR2 foi associada a um aumento no volume de câncer de cólon primário (p 0,05).

Conclusões

Apenas uma pequena percentagem dos cancros do cólon MSS perder expressão de membros de sinalização de Activina. perda ACVR2 ocorre através de LOH e

ACVR2

hipermetilação do promotor, revelando mecanismos distintos para ACVR2 inativação em ambos os subtipos MSI e MSS de cancro do cólon

Citation:. Jung B, Gomez J, Chau E, Cabral J, Lee JK, Anselm A, et al. (2009) Activina Sinalização na microssatélites cânceres estáveis ​​Colon é interrompido por uma combinação de genéticas e epigenéticas mecanismos. PLoS ONE 4 (12): e8308. doi: 10.1371 /journal.pone.0008308

editor: Irene Oi-Lin Ng, da Universidade de Hong Kong, Hong Kong

Recebido: 18 de junho de 2009; Aceito: 20 de novembro de 2009; Publicado: 14 de Dezembro, 2009