Abstract
Fundo
mutações oncogênicas do
PIK3CA
,
RAS
(
KRAS
,
ARN
), e
BRAF
foram identificados em várias doenças malignas, e activar as PI3K /AKT /mTOR e RAS /RAF /MEK vias, respectivamente. Ambos os caminhos são fatores críticos de tumorigênese.
Métodos
Os tecidos tumorais de 504 pacientes com diversos tipos de câncer que se refere ao Centro Clínico de terapia-alvo no MD Anderson Cancer Center a partir de outubro de 2008, foram analisadas para
PIK3CA
,
RAS
(
KRAS
,
ARN
), e
BRAF
mutações utilizando sequenciamento de DNA baseada em reação em cadeia da polimerase.
resultados
PIK3CA
mutações foram encontradas em 54 (11%) dos 504 pacientes testados;
KRAS
em 69 (19%) de 367;
ARN
em 19 (8%) de 225; e
BRAF
em 31 (9%) de 361 pacientes.
PIK3CA
mutações foram mais frequentes em cervical escamosa (5/14, 36%), útero (28/07, 25%), peito (29/06, 21%) e colorretal (18/105 , 17%);
KRAS
no pâncreas (5/9, 56%), colo-rectal (49/97, 51%), e os cancros uterinos (20/03, 15%);
ARN
no melanoma (12/40, 30%) e câncer uterino (2/11, 18%);
BRAF
no melanoma (23/52, 44%) e câncer colorretal (5/88, 6%). Independente da histologia,
KRAS
mutações foram encontradas em 38% dos pacientes com
PIK3CA
mutações em comparação com 16% dos pacientes com o tipo selvagem (wt)
PIK3CA
(p = 0,001). No total,
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações foram encontradas em 47% dos pacientes com
PIK3CA
mutações vs. 24% dos pacientes em peso
PIK3CA
(p = 0,001).
PIK3CA
mutações foram encontradas em 28% dos pacientes com
KRAS
mutações em comparação com 10%, com peso
KRAS
(p = 0,001) e em 20% dos pacientes com
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações em comparação com 8%, com peso
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou peso
BRAF
(p = 0,001).
Conclusões
PIK3CA
,
RAS
(
KRAS
,
ARN
), e
BRAF
mutações são frequentes nos tumores diferentes. Em uma ampla variedade de tumores,
PIK3CA
mutações coexistir com
RAS
(
KRAS
,
ARN
) e
BRAF
mutações .
Citation: Janku F, Lee JJ, Tsimberidou AM, Hong DS, Naing A, Falchook GS, et al. (2011)
PIK3CA
Mutações Coexist frequentes com
RAS Comprar e
BRAF
Mutações em doentes com cancros avançados. PLoS ONE 6 (7): e22769. doi: 10.1371 /journal.pone.0022769
editor: Mikhail V. Blagosklonny, Roswell Park Cancer Institute, Estados Unidos da América
Recebido: 18 de maio de 2011; Aceito: 29 de junho de 2011; Publicação: 29 de julho de 2011
Direitos de autor: © 2011 Janku et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. Este estudo foi apoiado em parte por Grant Número RR024148 do Centro Nacional de Pesquisa de Recursos, um componente do NIH Roteiro para a Investigação médica (https://nihroadmap.nih.gov/clinicalresearch/overview-translational.asp). Não houve financiamento externo adicional recebida para este estudo. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
recentemente, grandes descobertas na biologia molecular dos cancros humanos, juntamente com uma maior compreensão das mutações oncogênicas e vias de sinalização celular levaram à aplicação bem sucedida de novas terapias direcionadas em vários tipos de câncer. [1], [2], [3], [4] Estes incluem o uso de inibidores da quinase KIT em
KIT
-mutant tumores estromais gastrointestinais (GIST), inibidores da cinase abl em
BCR-ABL
leucemia mielóide crónica -positivo (CML), inibidores da tirosina quinase EGFR em
EGFR
-mutant cancros do pulmão, e inibidores de BRAF em
BRAF
melanomas -mutant. [2], [3], [4], [5 ] parece plausível que os cancros mais comuns têm sido difíceis de tratar, em parte porque eles são heterogêneos, com cada subgrupo de pacientes com anormalidades moleculares diferentes. Identificar subtipos moleculares relevantes dentro cancros heterogêneos é crucial para o futuro alvo progresso terapêutico. [6], [7]
sinais chave que são supostamente ativados em diferentes tipos de tumores estão no fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K) /AKT /mTOR e RAS /RAF /MEK vias, que regulam a proliferação e crescimento das células, a apoptose, autofagia, invasão e migração de sinalização. [8], [9] a ativação é frequentemente mediada por mutações na subunidade p110α de
PI3K, PIK3CA
, com a maioria das mutações ( 80%) que ocorre quer no exão 9, que codifica para o domínio helicoidal, ou exão 20, que codifica para o domínio de cinase [8] estudos pré-clínicos sugerem que
PIK3CA
mutações poderia prever a resposta aos inibidores de PI3K, embora mutações concomitantes em
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
pode mediar resistência. [10]
Apesar de vários estudos pré-clínicos sugerem que aberrações no /AKT /mTOR ea via da MAP quinase podem coexistir PI3K, apenas estudos limitados em doentes têm sido realizadas, e principalmente concentradas em câncer colorretal. [8], [10], [11] Nós, portanto, investigou o
PIK3CA, RAS
(
KRAS Comprar e
ARN
) e
BRAF
estado de mutação de um grande grupo de pacientes (N = 504) com cancros avançados que se refere ao Centro clínico de terapia-alvo (CCTT) da Universidade do Texas MD Anderson Cancer Center (MD Anderson). Nós demonstramos que em todos os tipos de tumores, os pacientes muitas vezes concomitantemente abrigar
PIK3CA
mutações e
RAS
/
BRAF
mutações. Estas descobertas no cenário clínico tem implicações importantes para a concepção dos ensaios clínicos e tratamentos com PI3K /AKT /mTOR e BRAF ou inibidores de MEK.
Métodos
Os pacientes
investigou o
PIK3CA
,
RAS
(
KRAS
,
ARN
),
BRAF
estado de mutação dos pacientes com tumores avançados e tecido disponível referiu-se ao MD Anderson CCTT (clínica de fase I) a partir de outubro de 2008. o registro de pacientes no banco de dados, avaliação de patologia e análise de mutação foram realizadas no MD Anderson. Os pacientes elegíveis eram os referidos para a Fase I de ensaios clínicos de agentes terapêuticos alvo que tinham uma quantidade suficiente de tecido tumoral disponível para
PIK3CA
e, se possível, para as análises outra mutação. O estudo foi realizado sob a égide do Protocolo de impacto, que foi aprovado pela The University of Texas MD Anderson Cancer Center Institutional Review Board I.
As amostras de tecido e mutação analisa
PIK3CA
,
RAS
(
KRAS
,
ARN
),
BRAF
mutações foram investigados em, blocos de tecido embebidos em parafina fixadas em formalina de arquivamento ou material de punção aspirativa por agulha fina obtido a partir de diagnóstico e /ou procedimentos terapêuticos. Todos os histológicos foram centralmente revisados no MD Anderson. teste de mutação foi realizado no Laboratório de Diagnóstico Molecular Laboratory Improvement Emenda certificado clínico dentro da Divisão de Patologia e Medicina Laboratorial no MD Anderson. O DNA foi extraído a partir de secções de tumor embebidas em parafina microdissecadas e analisadas utilizando um método de sequenciação de ADN baseado em reacção em cadeia da polimerase para
PIK3CA
mutações nos codões [C] 532-554 do exão 9 (domínio helicoidal) e c1011-1062 do exão 20 (domínio de cinase). Isto incluiu a região de mutação Hot Spot da
PIK3CA
proto-oncogene indicado por seqüenciamento Sanger, na sequência de amplificação de 276 pb e 198 pb amplicons, respectivamente; utilizando primers desenhados pela Molecular Laboratório de Diagnóstico MD Anderson. Sempre que possível, além de
PIK3CA
, análise de mutação foi feito para
KRAS Comprar e
ARN
c12, c13 e mutações C61 de exons 1-2; e
BRAF
códon 595-600 mutações de exon 15 por pyrosequencing como descrito anteriormente [12].
A análise estatística
O teste exato de Fisher foi usado para avaliar a associação entre categórica variáveis e estado de mutação. Todos os testes foram em frente e verso, e um valor de P inferior a 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando o programa SPSS 17 software de computador (SPSS Chicago, IL).
Resultados
Os pacientes
Foram analisados um total de 504 pacientes com diversos cancros avançados para a presença de
PIK3CA
mutações. Destes 504 pacientes, 367 (73%) pacientes foram também testados para
KRAS
mutações, 225 (45%) para a presença de
NRAS
mutações, e 361 (72%) de
BRAF
mutações. Duas cento e noventa (58%) eram mulheres e 214 (42%) eram homens. A idade média foi de 57 anos (variação de 13 a 91 anos). Cento e cinco (21%) pacientes tinham câncer colorretal, 62 (12%) cancros do ovário, 55 (11%) melanomas, 34 (7%) câncer de células escamosas de cabeça e pescoço, 29 (6%) de mama cancros, 28 (6%) dos cancros uterinos, 26 (5%) sarcomas, 22 (4%) cancros do pulmão de células não pequenas (NSCLC), 16 (3%) cancros da tiróide, 15 (3%) cancros de células não-escamosas dos cânceres renais cabeça e pescoço, 14 (3%) cancros cervicais de células escamosas, 12 (2%) adenocarcinomas de esôfago e estômago, 11 (2%) cancros pancreáticos, 8 (2%) adenocarcinomas do colo do útero, 8 (2%) e 59 (11%) tinham outros tipos de tumores. As características dos pacientes estão listadas na Tabela 1.
mutações PIK3CA
PIK3CA
mutações proto-oncogene foram detectados em 54 (11%) dos 504 pacientes.
PIK3CA
estado de mutação não foi significativamente associada com a idade, sexo ou raça. Em tipos de tumores com mais de 10 pacientes testados,
PIK3CA
mutações eram mais comuns no cancro cervical de células escamosas, em 5 (36%) dos 14 pacientes. As mutações também estavam presentes em 7 (25%) de 28 pacientes com câncer de útero, 6 (21%) de 29 pacientes com câncer de mama, 18 (17%) dos 105 pacientes com cancro colo-rectal, 5 (15%) de 34 pacientes com câncer de células escamosas de cabeça e pescoço, 7 (11%) de 62 pacientes com câncer de ovário, 1 (9%) de 11 pacientes com câncer de pâncreas, 1 (6%) de 16 pacientes com câncer de tireóide, 1 (5%) de 22 pacientes com NSCLC, e em 1 (2%) de 55 pacientes com melanoma (Figura 1A). Entre entidades de doença com mais de 10 pacientes testados, nenhum
PIK3CA
mutações foram encontradas em sarcomas e adenocarcinomas do estômago e do esôfago.
A.
PIK3CA
mutações. B.
KRAS
mutações. C.
ARN
mutações. D.
BRAF
mutações.
As mutações no exon 9 de codificação para o domínio helicoidal (E545K, E542K, E545G, E545K /D549H, Q546K) foram encontrados em 28 pacientes. Exão 20 mutações que codificam para o domínio de cinase (H1047R, H1047L, G1049R, M1043V, M1043I) foram encontradas em 26 pacientes. As mutações mais frequentes foram H1047R (uma mutação no codão de 1047
PIK3CA que altera o aminoácido codificado de histidina para arginina) e E545K (uma mutação no codão 545 de
PIK3CA que altera o ácido codificado amino do ácido glutâmico para lisina), cada um ocorrendo em 16 (30%) de 54 pacientes com
PIK3CA
mutações (Figura 2A). Em tipos de tumores com pelo menos 5
PIK3CA
mutações identificadas, análise de frequência de mutações no domínio helicoidal contra quinase foi levada a cabo. A predominância de domínio helicoidal
PIK3CA
mutações foi observado em portadores de carcinoma cervical (100% vs. 0%), colorretal (67% vs. 33%) e câncer de células escamosas de cabeça e pescoço (60% vs. 40%), enquanto
PIK3CA
mutações no domínio quinase foram predominantes em pacientes com uterina (86% vs. 14%), de mama (83% vs. 17%), e do ovário (71% vs. 29%; p = 0,002)
A..
PIK3CA
mutações (n = 54). B.
KRAS
mutações (n = 69). C.
ARN
mutações (n = 19). D.
BRAF
mutações (n = 31).
Foram analisados frequências de
PIK3CA
mutações em diferentes tipos de doença em que foram identificadas mutações específicas em pelo menos 5 amostras de tumor. No cancro colorectal, a mutação mais prevalente foi E545K (8/18, 44%); no câncer uterino, H1047R (4/7, 57%); no câncer de ovário, H1047R (3/7, 43%), em H1047R cancro da mama (4/6, 67%), em E545K câncer cervical (4/5, 80%), e no câncer de células escamosas de cabeça e pescoço E542K (2/5, 40%). O pequeno número de pacientes em cada subgrupo se opõe a realização de uma análise estatística mais pormenorizada.
mutações KRAS
KRAS
mutações proto-oncogenes foram detectados em 69 (19%) de 367 pacientes testados.
em tipos de tumores com mais de 10 pacientes testados,
KRAS
mutações eram mais frequente no cancro colorectal, em 49 (51%) dos 97 testados pacientes.
KRAS
mutações também estavam presentes em 3 (15%) dos 20 pacientes testados com câncer uterino, em 5 (11%) dos 46 testados pacientes com câncer de ovário, 2 (9%) de 22 pacientes avaliados com NSCLC , 1 (6%) de 17 pacientes testados com cancro da mama, um (5%) dos 22 testados pacientes com melanoma e em 1 (4%) de 28 testados pacientes com cancro das células escamosas da cabeça e pescoço (Figura 1B). Entre entidades de doença com mais de 10 pacientes testados, nenhum
KRAS
mutações foram encontradas em sarcomas e adenocarcinomas do estômago e do esôfago.
KRAS
estado de mutação não foi significativamente associada com a idade, sexo ou raça.
As mutações no c12 foram encontrados em 53 pacientes, mutações c13 em 10 pacientes, e mutações C61 em 6 pacientes. A mutação mais frequente foi G12D (uma mutação no códon 12 do
KRAS
que muda o aminoácido codificado de glicina para asparagina) detectada em 21 pacientes (Figura 2B). Foram analisadas as frequências de específico
KRAS
mutações em diferentes tipos de doenças, com mutações identificadas em pelo menos 5 amostras de tumor. No cancro colorectal, a mutação mais prevalente foi G12D (15/49, 31%); em Q61H do cancro do ovário (05/02, 40%), e em G12V do cancro do pâncreas (05/02, 40%) e G12R (05/02, 40%). O pequeno número de pacientes em cada subgrupo se opõe a realização de uma análise estatística mais definitiva.
mutações de ARN
ARN
mutações proto-oncogenes foram encontrados em 19 (8%) dos 225 pacientes analisados. Em tipos de tumores com mais de 10 pacientes testados,
ARN
mutações foram mais freqüentes em pacientes com melanoma, em 12 (30%) dos 40 testados pacientes. As mutações também estavam presentes em 2 (18%) de 11 pacientes testados com câncer uterino e em 2 (6%) dos 31 testados doentes com cancro colorectal (Figura 1C). Entre entidades de doença com mais de 10 pacientes testados, nenhum
de ARN
mutações foram encontradas no câncer de ovário, e carcinoma de células escamosas da cabeça e pescoço.
ARN
estado de mutação não foi significativamente associada com a idade, sexo ou raça.
As mutações em C61 foram encontrados em 18 pacientes, e 1 paciente teve uma mutação c13. A mutação mais frequente foi Q61R (uma mutação no códon 61 do
ARN
que muda o aminoácido codificado de glutamina para arginina) detectada em 10 pacientes (Figura 2c).
mutações BRAF
BRAF
mutações proto-oncogene foram detectados em 31 (9%) de 361 pacientes testados. Em tipos de tumores com mais de 10 pacientes testados,
BRAF
mutações foram mais freqüentes em pacientes com melanoma, em 23 (44%) de 52 pacientes testados. As mutações também estavam presentes em 1 (8%) de 12 pacientes testados com câncer de tireóide, em 5 (6%) dos 88 testados doentes com cancro colorectal, e em 2 (5%) de 43 testados pacientes com câncer de ovário (Figura 1D) . Entre entidades de doença com mais de 10 pacientes testados, nenhum
BRAF
mutações foram encontradas em cancros de células escamosas de cabeça e pescoço, os cancros uterinos, cancros da mama, NSCLC, sarcomas e adenocarcinomas do estômago e do esôfago.
BRAF
estado de mutação não foi significativamente associada com a idade, sexo ou raça.
Todas as mutações estavam em c600. A mutação mais frequente foi V600E (uma mutação no códon 600 do
BRAF
que muda o ácido amino codificação de valina para ácido glutâmico) em 26 pacientes (Figura 2D).
PIK3CA simultânea e RAS (KRAS, ARN) ou BRAF mutações
ou
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações eram mais comum em pacientes com mutante
PIK3CA
do que naqueles com o tipo selvagem (wt)
PIK3CA
(p = 0,001) (Figura 3A). Estas mutações foram encontradas em 24 (47%) dos 51 pacientes com mutante
PIK3CA
, que também foram testados para a
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações, mas apenas em 94 (24%) de 385 pacientes com peso
PIK3CA
, que também foram testados para a
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações (Tabela 2). Associações similares entre a proporção de
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações no mutante
PIK3CA Comprar e
wtPIK3CA
, embora nem sempre estatisticamente significativo, foram encontradas em sub-análise específica da doença no câncer colorretal (14/18 [78%] vs. 42/86 [49%]; p = 0,04), câncer de ovário (5 /7 [71%] versus 2/43 [5%]; p 0,001), e todos os cancros colo-rectal testadas, excluindo (10/33 [30%] vs 52/299 [17%]; p = 0,1) ( Figura 3B-D) .Nós também analisada a frequência de
PIK3CA
mutações em pacientes com mutante
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
em comparação com pacientes sem
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações. Os pacientes com
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações apresentaram maior frequência de
PIK3CA
mutações (24 de 118 pacientes, 20%) em comparação com aqueles sem
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações (27 de 318 pacientes, 8%;. p = 0,001)
de tipo selvagem
RAS
(
KRAS, as ARN
) ou
BRAF
(barra azul) e mutante
RAS
(
KRAS, as ARN
) ou
BRAF
(barra vermelha) em: A. Todos os tipos de tumor (testado, n = 436); B. Todos os cancros excluindo cancros colo (testado, n = 332); cânceres colorretais C. (testado, n = 104); cancros D. ovarianos (testado, n = 50).
Ao analisar
KRAS
sozinho, estas mutações foram detectadas em 19 (38%) de 50 pacientes com
PIK3CA
mutações, que também foram testadas para o
KRAS
. Em pacientes com
wtPIK3CA
,
KRAS
mutações foram encontradas em 50 (16%) dos 317 pacientes testados para ambos os oncogenes (Tabela 2). A diferença foi estatisticamente significativa (p = 0,001) (Figura 4A). Associações similares entre a proporção de
KRAS
mutações em pacientes com mutante
PIK3CA Comprar e peso
PIK3CA
, embora nem sempre estatisticamente significativa talvez por causa de um número menor de pacientes, foram encontrados na sub-análise específica da doença no cancro colo-rectal (13/18 [72%] vs 36/79 [46%]; p = 0,07), do cancro do ovário (4/7 [57%] versus 1/39 [3%] ; p = 0,001), e todos os cancros colo-rectal testadas, excluindo (6/32 [19%] vs 14/238 [6%]; p = 0,02) (Figura 4B-D). Analisamos também a frequência de
PIK3CA
mutações em pacientes com mutante
KRAS
vs. pacientes
wtKRAS
. Os pacientes com
KRAS
mutações apresentaram maior frequência de
PIK3CA
mutações em comparação com aqueles
wtKRAS
(19/69 [28%] vs. 31/298 [10%] ; p = 0,001). Por fim, analisamos as associações entre exon 9
PIK3CA Comprar e
KRAS
mutações e entre exon 20
PIK3CA Comprar e
KRAS
mutações. Exon 9
PIK3CA
mutações foram fortemente associada com
KRAS
mutações (12/62 [19%] no
KRAS mutante
vs. 16/283 [6%] em peso
KRAS
; p = 0,001), enquanto que a associação entre o exão 20
PIK3CA
e
KRAS
mutações não alcançou significância estatística (7/57 [12%] no
KRAS mutante
vs. 15/282 [5%] em peso
KRAS
; p = 0,07). Além disso, foram analisadas as associações entre exon 9
PIK3CA
e
KRAS
mutações e entre o exão 20
PIK3CA
e
KRAS
mutações no colo e ovário cancros , que foram os dois maiores subgrupos de doença. No cancro colorectal, exon 9
PIK3CA
mutações mostrou tendência de aumento da frequência em pacientes com
KRAS
mutações (9/45; 20%) em comparação com pacientes com peso
KRAS
(3/46; 6%) (p = 0,07), enquanto que a frequência do exão 20
PIK3CA
mutações não diferiram significativamente (4/40 [10%] no
KRAS mutante
vs. 2/45 [4%] em peso
KRAS
; p = 0,4). No câncer de ovário, houve uma forte associação entre o exão 20
PIK3CA
e
KRAS
mutações (3/4 [75%] no
KRAS mutante
vs. 2/40 [5%] em peso
KRAS
; p = 0,003), enquanto que a associação entre o exão 9
PIK3CA
e
KRAS
mutações não alcançou significância estatística (1/2 [50%] no
KRAS mutante
vs. 1/39 [3%] em peso
KRAS
; p = 0,1). No entanto, o número de pacientes nestes subgrupos foram pequenas, sugerindo cautela na interpretação desses resultados.
de tipo selvagem
KRAS
(barra azul) e mutante
KRAS
(barra vermelha ) em: A. Todos os tipos de tumor (testado, n = 367); B. Todos os cancros excluindo cancros colo (testado, n = 270); cânceres colorretais C. (testado, n = 97); cancros D. ovarianos (testado, n = 46).
Não houve diferença significativa na prevalência de
ARN
mutações entre
wtPIK3CA Comprar e mutante
grupos PIK3CA
, no entanto, o pequeno número de pacientes testados no mutante
PIK3CA
grupo se opõe a tirar conclusões definitivas.
a proporção de
BRAF
mutações foi semelhante (8-9%) em ambos os
wtPIK3CA Comprar e mutantes
grupos PIK3CA
. número de pacientes baixos no mutante
PIK3CA
grupo tornou problemático para chegar a conclusões definitivas.
Discussão
Através tipos de tumor, que demonstrou uma maior prevalência de
RAS
(
KRAS
,
ARN
) ou
BRAF
mutações (47%) e
KRAS
mutações (38%) em pacientes com mutante
PIK3CA
comparação com aqueles com
wtPIK3CA
(mutante
RAS
ou
BRAF
presente em 24%, p = 0,001; mutante
KRAS
presentes em 16%, P = 0,001). A maioria dos estudos publicados anteriormente que investigam simultânea
PIK3CA
, e
RAS
ou
BRAF
mutações concentrou-se em cancro colo-rectal [11], [13], [14], [15. ], [16] Alguns estudos sugeriram que
PIK3CA
mutações estão associados com
KRAS
mutações, [11], [13], [15] enquanto outros não relatar isso. [16] [17] Um grande estudo retrospectivo que analisou 1.022 amostras de DNA de tumores de pacientes com câncer colorretal tratados com cetuximab em várias instituições europeias associação entre exon 9 revelados
PIK3CA Comprar e
KRAS
mutações (14,7% em
KRAS mutante
vs. 6,8% em peso
KRAS
; p = 0,0006), mas não entre o exão 20
PIK3CA Comprar e
KRAS
mutações ( 3,8% em
KRAS mutante
vs. 2,3% em peso
KRAS
;. p = 0,27) [11] de acordo com este artigo, quando analisados todos os histologia, também encontramos uma forte associação entre o exão 9
PIK3CA Comprar e
KRAS
mutações (19% em
KRAS mutante
vs. 6% em peso
KRAS
; p = 0,001) no entanto, a frequência do exão 20
PIK3CA
mutações também mostrou uma tendência no sentido de ser mais comum em pacientes com
KRAS
mutações em comparação com peso
KRAS
(12% em
KRAS mutante
vs. 5% em peso
KRAS
), ainda não atingiu significância estatística (p = 0,07). Em uma sub-análise específica da doença no colo-rectal e do cancro do ovário, notamos uma tendência para uma associação entre o exão 9
PIK3CA
e
KRAS
mutações no câncer colorretal (20% em
KRAS
mutante vs. 6% em peso
KRAS
; p = 0,07) e uma associação estatisticamente significativa entre o exão 20
PIK3CA
e
KRAS
mutações no câncer de ovário (75% em
KRAS mutante
vs. 5% em peso
KRAS
; p = 0,003). No entanto, o número de pacientes são baixos em colorectal, e análises de subgrupo câncer de ovário, sugerindo que estudos confirmatórios adicionais serão necessários.
Uma associação entre a
PIK3CA
e
RAS
ou
BRAF
mutações tem implicações para a terapia do cancro. modelos pré-clínicos sugerem que xenoenxertos com
PIK3CA
mutações são sensíveis ao inibidor PI3K PX-866 a menos que tenham
RAS
mutações. [10] resultados quase idênticos foram notificados de pré-clínica e da linha de células derivadas experiências clínicas iniciais com o everolimus inibidor de mTOR. [18] observações semelhantes foram relatados a partir de experiências clínicas iniciais, quando
RAS
ou
BRAF
mutações em pacientes com mutante
PIK3CA
foram associado à resistência à PI3K /AKT /mTOR em vários tipos de câncer, exceto para câncer de ovário. [19], [20] Estes dados sugerem que
PIK3CA
mutações pode prever uma resposta aos inibidores /AKT /mTOR PI3K em apenas uma porção de pacientes. Em pacientes com simultânea
PIK3CA
e
RAS
ou
BRAF
mutações, PI3K /AKT /mTOR inibição pode não ser suficiente para alcançar um efeito significativo antitumoral, e desde
RAS
ou
BRAF
mutações são comuns em pacientes com mutante
PIK3CA
é aconselhável para determinar o estado mutacional de
RAS Comprar e
BRAF
além de
Status PIK3CA
. De interesse especial, os ensaios clínicos que combinam MEK e inibidores da via PI3K /AKT /mTOR estão em um estágio inicial de desenvolvimento clínico. [21] Para além disso, alguns estudos pré-clínicos sugerem que a inibição da PI3K pode reduzir a migração e adesão de células tumorais e, consequentemente, inibir a metástase em vez do tumor primário, que pode ter implicações importantes para o tratamento; no entanto, estas observações devem ser confirmados em experimentos adicionais. [22], [23]
No que diz respeito a aberrações individuais, mutações oncogênicas em duas regiões de ponto de acesso (exons 9 e 20) do
PIK3CA
foram identificados em várias doenças malignas, incluindo os tumores comuns, tais como cancro da mama, do pulmão, colo-rectal, do ovário e uterino [11], [24], [25], [26], [27], [28], [29. ] neste estudo,
PIK3CA
mutações foram identificadas em 11% dos diversos tipos de tumores. Os tumores com uma elevada prevalência de
PIK3CA
mutações foram cervical epidermóide (36%), do útero (25%), da mama (21%), colo-rectal (17%), de células escamosas da cabeça e pescoço (15%) , e cancros do ovário (11%). Estes dados são semelhantes aos publicados anteriormente, exceto para o cancro do colo do útero, que mostrou ter uma prevalência de
PIK3CA
mutações que variam de 8% (8/98) no banco de dados COSMIC a 16% (2/12) . publicada por Miyake et al [29], [30] colorrectal e escamosas cancros cervicais foram encontrados a ter um E545K predominante (exão 9) mutação (44%, 80%, respectivamente); uterinos, ováricos, cancros da mama, e uma H1047R predominante (exão 20) mutação (57%, 43%, 67%, respectivamente); e cancro de células escamosas de cabeça e pescoço, uma mutação E542K (exão 9) (40%). Estas diferenças podem ter importância clínica como alguns dados pré-clínicos gerada uma hipótese que quando o exão 20 mutações estão presentes no domínio de cinase, que pode ser mais sensível a PI3K /AKT /inibidores de mTOR que o exão 9 mutações no domínio helicoidal [18].
KRAS
mutações ocorrem em diferentes tipos de tumores, e são particularmente importantes em colorrectal, pancreático, e NSCLC carcinogénese. [11], [31], [32], [33], [34 ]
KRAS
mutações prever a falta de benefício terapêutico de anticorpos monoclonais anti-EGFR em colorrectal, mas não de forma convincente, no cancro do pulmão. [35], [36], [37] RAS funcional pode também ser potencialmente importante para a regulação do citoesqueleto de actina, que foi sugerido como sendo um factor crítico da transformação oncogénica. [38] no nosso estudo, uma prevalência elevada de
KRAS
mutações foi encontrado no pâncreas (56%), colo-rectal (51% ), uterino (15%), e do ovário (11%) cancros, que é semelhante às descobertas previamente publicados e os dados da base de dados cósmicos. [11], [29] cancros colorrectais foram encontrados para ter uma mutação G12D predominante (31% ); cancros pancreáticos, G12V e G12R mutações (40% cada); e cancros do ovário, as mutações Q61H (40%). Estas distinções pode ser clinicamente importante porque alguns dados pré-clínicos sugerem que diferentes mutações pode ativar diferentes vias. Ihle et al. [39] demonstraram que uma mutação G12D ativa tanto PI3K /AKT /mTOR e MAPK vias, enquanto que uma mutação G12C causa de sinalização RAL robusto.
ARN
mutações têm sido principalmente descrita em melanomas e leucemias e seu significado prognóstico tem sido pouco clara, com alguns dados sugerindo uma associação entre mutante
ARN
e pior prognóstico em pacientes com melanoma. [40], [41], [42] em nosso estudo, não era uma alta prevalência de
ARN
mutações no melanoma (44%) e câncer de útero (15%). A prevalência de
ARN
mutações foi maior do que o relatado em outros estudos ou no banco de dados COSMIC (14-20%). [29], [43]
BRAF
mutações foram relatadas principalmente no melanoma, colo-rectal, da tiróide papilar, e cancro do ovário. [44], [45] no cancro colo-rectal que são associados com um mau prognóstico, no entanto, ao contrário
KRAS
mutações,
BRAF
mutações podem não ser preditivos de falta de benefício cetuximab. [46] Em melanoma, o significado prognóstico da
BRAF
mutações é menos óbvia, embora os pacientes com
BRAF
melanoma mutante parece para responder muito bem ao
inibidores de BRAF
. [4], [42], [47] No câncer de tireóide papilar,
BRAF
mutações foram encontradas para upregulate genes microenviromental, o que potencialmente aumenta a agressividade do tumor . [48] de acordo com dados publicados anteriormente, nosso estudo mostrou uma alta prevalência de
BRAF
mutações no melanoma (44%) e, em menor grau, na tireóide, colo-rectal e cancro do ovário (8% , 6%, e 5%, respectivamente). Embora a prevalência de
BRAF
mutações no cancro da tiróide foi muito menor do que os 51% anteriormente publicada, esta discrepância pode ser explicada pela presença de histologia outra, em seguida, papilar. [49]
Em conclusão , estudamos a prevalência de
PIK3CA
,
RAS
(
KRAS
,
ARN
), e
BRAF
mutações em diversos amostras de tumor e identificou uma alta freqüência de coexistindo
PIK3CA
e
BRAF
ou
RAS
mutações. activação simultânea de PI3K /AKT /mTOR e RAS /RAF /vias MEK pode estar associado com resistência a PI3K /AKT /inibidores de mTOR. [10], [18] Estes resultados são particularmente importantes devido a muitos PI3K /AKT /mTOR e RAS /RAF /MEK agentes alvejando atualmente passando por testes clínicos e sugerir que a caracterização molecular e pacientes com combinações destes medicamentos direcionados correspondentes terão de ser investigada em profundidade.
Reconhecimentos
Agradecemos Ms. Joann Aaron para revisão científica e edição deste artigo.