Abstract

Nós previamente identificados ONC201 (TIC10) como um primeiro-in-class por via oral pequena molécula ativa com atividade antitumoral robusto que está actualmente em ensaios clínicos em cancros avançados. Aqui, nós investigamos ainda mais as características de segurança dos ONC201 em modelos pré-clínicos que revelam um excelente perfil de segurança em doses que excedem doses eficazes por 10 vezes. Estudos in vitro indicaram um relação dose-resposta notavelmente diferente quando se comparam as células tumorais e normais, onde os efeitos máximos são muito mais forte em células tumorais do que em células normais. Em mais apoio de um índice terapêutico largo, investigação de respostas de células tumorais e normais sob condições idênticas demonstraram grandes efeitos apoptóticos em células tumorais e os efeitos anti-proliferativos modestas em células normais que foram não apoptóticas e reversível. Probing o mecanismo subjacente da apoptose ONC201 indicou que não induz DR5 em células normais em condições que induzem a DR5 em células de tumor; DR5 é um receptor de TRAIL pró-apoptótica previamente ligado ao mecanismo anti-tumoral de ONC201. Os estudos de toxicologia de GLP em ratos Sprague-Dawley e cães beagle em doses terapêuticas e exageradas não revelou toxicidades limitativas da dose. Observações em ambas as espécies nas doses mais elevadas foram leves e reversível em doses acima de 10 vezes a dose terapêutica esperada. O nível observado nenhum evento adverso (NOAEL) foi ≥42 mg /kg em cães e ≥125 mg /kg em ratos, os quais correspondem ambos a uma dose humana de cerca de 1,25 g assumindo escala alométrica padrão. Estes resultados forneceram a justificativa para a dose inicial de 125 mg em ensaios clínicos de escalonamento de dose, que começou em 2015, em pacientes com câncer avançado

Citation:. Allen JE, Crowder R, El-Deiry WS (2015) First-In de classe pequena molécula ONC201 Induz DR5 e morte celular no tumor, mas não as células normais para fornecer uma ampla índice terapêutico como um agente anti-cancro. PLoS ONE 10 (11): e0143082. doi: 10.1371 /journal.pone.0143082

editor: Shi-Yong Sun, da Universidade Emory, Estados Unidos

Recebido: 12 Agosto, 2015; Aceito: 30 de outubro de 2015; Publicação: 18 de novembro de 2015

Direitos de autor: © 2015 Allen et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel

Financiamento:. WS El-Deiry é uma Cancer Society Research Professor americano. Este trabalho foi apoiado por Oncoceutics e uma bolsa Pensilvânia Departamento de Saúde atribuído a Oncoceutics

Conflito de interesses:. Joshua Allen é um funcionário e acionista da Oncoceutics, Inc., e Wafik El-Deiry é um acionista da Oncoceutics, Inc. Este não altera a adesão dos autores para todas as políticas de PLoS One sobre os dados e materiais de compartilhamento.

Introdução

ONC201, também conhecido como TIC10, é uma pequena molécula que está atualmente em fase II de ensaios clínicos em selecione indicações de câncer avançado. Em estudos pré-clínicos, ONC201 possui um perfil de eficácia câncer de mutação-agnóstico que não seja prejudicada por mutações oncogênicas comuns que impulsionam a progressão da doença e resistência terapêutica. Nós relatado anteriormente a identificação de uma nova ONC201 como primeiro-em-classe oralmente molécula pequena activo com actividade anti-cancro com base na sua capacidade para induzir a via de TRAIL pró-apoptótica [1]. A via de TRAIL é um mecanismo efector crucial na vigilância imunológica de cancro que é capaz de eliminar células tumorais por apoptose, sem danificar as células normais do hospedeiro [2]. Células imunes upregulate TRAIL na sua superfície celular, que se liga aos receptores de pró-apoptóticos, DR4 e DR5, que são expressos na superfície de células de tumor para, em última análise provocam o extrínseca ou via de morte celular intrínseco de uma forma dependente do tipo de célula [3 ].

Apesar de sua motivação original, muitas terapias direcionadas têm acabou por ser significativamente tóxicos e quimioterapia continuam a ser a pedra angular da intervenção médica em oncologia para a maioria das indicações. Os agentes quimioterapêuticos ou agentes direcionados causam uma série de efeitos secundários graves que são debilitantes e limitante da dose, tais como nefrotoxicidade, hepatotoxicidade, neuropatia periférica, fadiga, náusea, anemia, toxicidades na pele, as toxicidades GI, toxicidades pulmonares, toxicidades cardíacas, leucoencefalopatia, trombocitopenia e neutropenia entre outros [4]. Assim, existe uma necessidade não satisfeita de tratamentos com menos efeitos colaterais em oncologia [5], que é especialmente pronunciado para a população cancro paciente que são desproporcionalmente idosos, frágil, sofrem de toxicidades relacionadas com a terapia irreversíveis e /ou iria beneficiar crónica terapia que é intratável com as opções de tratamento disponíveis [6].

o nosso relatório inicial [1] indicaram que ONC201 não induz significativamente a apoptose em fibroblastos humanos normais em doses que provocam a morte celular pronunciada em células cancerosas humanas. Além disso, vários estudos de eficácia utilizadas doses de até 100 mg /kg em ratos sem incidência de mortalidade relacionada com o ONC201, alterações morfológicas macroscópicas ou histológicas, ou perda de peso corporal. As análises de imuno-histoquímica de tecidos normais em ONC201-ratinhos tratados revelou que TRAIL, que é induzido por ONC201 como parte de seu mecanismo, é regulada ao nível da proteína no cérebro, rim e baço de ratinhos normais, sem toxicidade aparente, tal como determinado por histologia e TUNEL. Estas observações sugerem que ONC201 está presente em níveis farmacologicamente activos nestes tecidos normais sem causar toxicidade aparente nas doses administradas.

Desde o nosso primeiro relatório sobre ONC201, uma série de estudos têm sido realizados para validar o perfil pré-clínico da ONC201 e facilitar a tradução clínica deste medicamento candidato único em cancros avançados. Aqui, nós relatamos estudos pré-clínicos que confirmam a capacidade de ONC201 distinguir tumor das células normais em sua citotoxicidade e validar a conservação deste recurso de segurança em outras espécies em estudos toxicológicos GLP. Esses resultados evidenciam um índice terapêutico largo para ONC201 que pode ser determinada por diferenças nos seus efeitos sobre o receptor de sinalização da morte celular entre as células tumorais e normais.

Materiais e Métodos

cultura celular e reagentes

As linhas celulares foram obtidas de ATCC e cultivadas em meios de ATCC-recomendadas numa incubadora humidificada a 5% de CO

2 e 37 ° C. ONC201 dicloridrato foi obtido a partir de Oncoceutics como previamente descrito [7]. A preparação de base livre do composto pode ser obtido a partir do NCI DTP.

análise do ciclo celular

Para a análise do ciclo celular, as células foram tripsinizadas, nos pontos de tempo indicados e fixadas em 80% de etanol a 4 ° C durante um mínimo de 30 minutos. As células fixadas foram então coradas com iodeto de propidio na presença de RNase e analisadas num citómetro de fluxo Epics Elite (Beckman Coulter). A viabilidade celular foi avaliada utilizando TiterGlo celular (Promega) em placas de 96 poços utilizando o protocolo do fabricante.

análise de citometria de fluxo

Para as experiências de TRAIL de superfície, as células aderentes foram colhidas por tripsinização breve, fixo em paraformaldeído a 4% em PBS durante 20 min, incubadas com um anticorpo anti-TRAIL (Abcam, ab2435) a 1: 250 durante a noite, lavadas e incubadas com anti-coelho AlexaFluor 488 (Invitrogen) durante 30 minutos, e analisada. As células foram fechado na dispersão para a frente e um lado para eliminar os detritos e células mortas da análise. dados TRAIL superfície é expresso como intensidade de fluorescência média em relação à de amostras de controlo, a menos que indicado em contrário. Superfície DR5 foi analisada de forma semelhante, utilizando um anticorpo de Imgenex e um protocolo semelhante.

Os estudos em animais

estudos GLP toxicológicos foram realizados em Calvert Laboratories em conformidade com os regulamentos US FDA GLP em vigor no momento da execução do estudo (Regulamentos Práticas de laboratório Bom, Título 21 do Código de regulamentos federais Parte 58. Todos os procedimentos foram realizados no âmbito de um protocolo que foi aprovado por ratos Calvert IACUC. Sprague Dawley (aproximadamente 10 semanas de idade) foram obtidos de Harlan Sprague Dawley. Beagle cães (aproximadamente 5-6 meses de idade) foram obtidos de Marshall BioResources (North Rose, NY). ONC201 dicloridrato foi formulado em solução salina tamponada com fosfato. Dosagem preparações foram armazenadas à temperatura ambiente, a seguir à preparação e utilizado dentro de 4 horas após a conclusão da preparação .

os animais foram doseados uma vez no dia 1 por meio de sonda oral. observações da mortalidade /morbilidade foram registados duas vezes por dia e, pelo menos, uma vez no dia da eutanásia programada. As observações clínicas foram avaliados antes da administração da dose e cerca de uma hora após a dose em dias de dosagem e uma vez por dia nos dias não-dosagem. Funcional de Observação da bateria foi observado antes do início do tratamento e no Dia 1, entre 1 e 2 horas após a dose. Os pesos corporais foram registados antes da dosagem no Dia 1 e nos dias 2, 7, 14 e 18. Food consumo foi registrada diariamente. Electrocardiogramas foram obtidos a partir de todos os animais antes do início do tratamento e no Dia 1, entre 2 e 4 horas pós-dose. A pressão sanguínea foi obtida a partir de todos os animais antes do início do tratamento e no Dia 1, entre 2 e 4 horas pós-dose. Sangue para avaliação da hematologia, coagulação e química clínica e urina para exame de urina foi coletada antes da dosagem e nos dias 3 ou 19. sangue para avaliação toxicocinético foi coletado de todos os animais em pontos de tempo seleccionados no dia 1. Todos os animais foram sacrificados no Dia 3 ou dia 19. tecidos selecionados foram colhidas à necropsia, selecionado órgãos pesados ​​e tecidos selecionados avaliados microscopicamente.

Resultados

O ONC201 não induzir a morte celular em células normais em doses eficazes

ensaiados os efeitos de ONC201 sobre a proliferação de fibroblastos humanos normais em cultura celular após uma incubação de 72 horas. Comparando as relações dose-resposta entre linhas de células de tumor e normais revelou um ponto de inflexão semelhante em ensaios de viabilidade celular em ~ 5 uM que subsequentemente saturado em todas as linhas celulares testadas. Curiosamente, os efeitos de ONC201 saturada a grandezas muito mais elevados em células tumorais do que as células normais (Figura 1A), isto é, houve pouca ou nenhuma toxicidade nas células normais enquanto que as células de tumor pareceu perder completamente a viabilidade nas doses mais elevadas. Esta observação está em nítido contraste com o controlo positivo, a doxorrubicina, o que resultou na morte celular massiva das células tumorais e normais. As respostas díspares para ONC201 entre células tumorais e normais indicam um largo índice terapêutico para ONC201 in vitro.

os ensaios (A) a viabilidade celular seguindo ONC201 tratamento nas concentrações indicadas, durante 72 horas (n = 3). Doxorubicina (Doxo) foi utilizado a 1 ug /mL como controlo positivo em fibroblastos normais. análise de ciclo (B) celular de células tumorais e normais após tratamento com ONC201 (5 uM) ou doxorrubicina (Doxo, 1 ug /mL) durante 72 horas (n = 3). (C) ensaio de viabilidade celular em células MRC5 após um tratamento de 72 horas com ONC201 (5 mM) ou DMSO e o período de recuperação indicado em meio completo isento de droga após este tratamento (n = 3). Os pontos de tempo são dadas como tempo depois da remoção em ONC201 após tratamento de 72 horas. (D) A viabilidade celular das células tumorais e normais após tratamento com ONC201 (5 uM, n = 3) durante 72 horas.

Para determinar se a redução modesta na viabilidade celular observada em células normais foi associado com uma redução na proliferação ou um aumento na morte de células, foram investigados os perfis do ciclo celular de células normais. Descobrimos que ONC201 tratamento não provocou quaisquer níveis significativos de morte celular em células normais, que são aumentados em células tumorais HCT116 sob as mesmas condições (Figura 1B). Mais uma vez em contraste com ONC201, o tratamento doxorrubicina geralmente resultou na morte celular ou paragem da fase S em células normais.

Com a observação de que ONC201 reduz ligeiramente a proliferação em células normais, nós próxima determinar se este foi um fenômeno reversível. Nós descobrimos que removendo ONC201 no final de um período de incubação de 72 horas resulta numa recuperação completa dependente do tempo que é evidente a 24 horas mais tarde (Fig 1C). Foi investigada a possibilidade de que a diferença entre as células tumorais e normais pode ser simplesmente uma função da taxa de proliferação. Analisar esta relação não revelou nenhuma correlação óbvia entre a capacidade de ONC201 para reduzir a viabilidade celular e a taxa de duplicação da linha de células (Fig 1D), que são historicamente correlacionada com uso de quimioterapia.

ONC201 induz TRAIL e DR5 no tumor mas não as células normais

para fornecer uma explicação molecular para a morte preferencial de tumor, mas não as células normais por ONC201, investigamos o efeito de ONC201 sobre a produção de células normais de TRAIL e DR5 que são regulados positivamente em resposta a ONC201 em células tumorais [1]. Descobrimos que ONC201 é capaz de hiperregular TRAIL superfície de células tumorais e normais, embora em menor magnitude em células normais (Fig 2A). Curiosamente, a indução de DR5 foi minimamente alterada nos fibroblastos normais em oposição a células tumorais que aumentaram a produção de receptor de morte, em resposta a ONC201 (Fig 2A).

(A) da superfície de TRAIL e DR5 expressão em HCT116 (tumor) e HFF (normal), após o tratamento com células ONC201 (5? M, 72 h, n = 3). IgG foi incluído como um controlo negativo de isotipo. Doxorubicina (Doxo) é apresentado como um controlo positivo (1 ug /ml). (B) da superfície de TRAIL e DR5 em fibroblastos normais após tratamento com ONC201 (5 uM) ou doxorrubicina (1 ug /mL, 72 h, n = 3). Os valores (eixo Y) é expressa como média intensidade de fluorescência.

Ao contrário ONC201, doxorrubicina impulsionado TRAIL superfície, bem como proteínas de DR5 em magnitudes similares em células tumorais e normais, presumivelmente através de p53 que regula ambas estes genes [8, 9], demonstrando, assim, nenhuma actividade apreciável diferencial que é indicativa do seu estreito índice terapêutico. Investigação dos efeitos dos ONC201 e doxorrubicina na fuga de superfície e DR5 em outros fibroblastos normais confirmaram essas observações (Fig 2B). Estes estudos podem explicar porque ONC201 geralmente não induz a morte celular em fibroblastos normais, que podem ser ligadas à actividade apoptótica selectiva de TRAIL, bem como a ausência de indução geral de DR5 em células normais.

estudos de toxicologia em GLP ONC201 tratados ratos Sprague Dawley

Para confirmar o perfil de segurança do ONC201 e permitir testes clínicos, estudos de toxicologia de GLP foram conduzidos em ratos Sprague Dawley machos e fêmeas com doses orais únicas de ONC201. Os ratos receberam 0, 12,5, 125, ou 225 mg /kg ONC201 por sonda oral, que representa um equivalente humano de 0, 125 mg, 1,25 g, e 2,25 g, respectivamente (Tabela 1). O grupo de ratos de baixa dose de 12,5 mg /kg corresponde a ~ 25 mg /kg em ratinhos que demonstrou eficácia em modelos pré-clínicos [1]. Há onde não há mortalidade ou toxicidades limitativas da dose nestes estudos. Não houve laboratório ou sinais clínicos de toxicidade observados com doses individuais até 125 mg /kg de ONC201 em ratos. Com uma dose de 225 mg /kg houve casos de diminuição da actividade e perturbações na marcha e postura em ratos que resolvidas dentro de um dia. Uma diminuição no ganho de peso e consumo de alimentos foi notada no dia 7, para os 225 mg /kg em ratos fêmeas do sexo masculino, mas não.

Não houve alterações significativas nos testes de sangue ou urina. parâmetros hematológicos analisados ​​incluíram contagem de glóbulos vermelhos e morfologia celular, contagem de células brancas do sangue, hemoglobina corpuscular média, concentração de hemoglobina corpuscular, volume corpuscular médio, hematócrito, hemoglobina e contagem de reticulócitos. As contagens de glóbulos brancos totais e diferenciais, incluindo neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monócitos, linfócitos e células grandes não coradas. Os parâmetros de coagulação analisados ​​incluíram o tempo de tromboplastina parcial e tempo de protrombina. química clínica soro incluídos alanina aminotransferase, albumina, albumina /globulina, fosfatase alcalina, aspartato aminotransferase, cálcio, cloreto, colesterol, creatinina, globulina, glicose, fósforo, potássio, sódio, bilirrubina total, proteínas totais, trigerclyrerides, e azoto da ureia. Análise das urinas parâmetros analisados ​​incluíram gravidade específica, pH, proteínas, glicose, cetona, urobilinogênio, nitrito, aparência /cor, bilirrubina, sangue, leucócitos e exame microscópico de elementos formados.

Também não houve conclusões de órgãos brutas significativas atribuíveis ao tratamento. ONC201-relacionada mínima-a-leve edema submucosal e /ou inflamação celular mista foi observada no estômago não glandular de ratos tratados com 225 mg /kg a dois dias após o tratamento, mas era completamente recuperados.

O bucal administração de ONC201 em 12,5 e 125 mg /kg não induziu quaisquer efeitos biologicamente relevante sobre a frequência respiratória, volume corrente ou volume minuto em ratos machos conscientes. A marginal a moderada redução transitória do volume de taxa e minuto respiratória foi observada após a administração oral de ONC201 a 225 mg /kg, que foi reversível dentro de 1 hora de administração e totalmente recuperado dentro de 2 horas após a administração.

Com base em os resultados deste estudo, o NOAEL após a administração oral de ONC201 em doses únicas de 12,5, 125 ou 225 mg /kg, a ratos Sprague-Dawley é considerado como sendo de 125 mg /kg, o que corresponde a uma dose de ~ 1,25 g em humanos assumindo escala alométrica padrão.

estudos de toxicologia GLP em ONC201 tratados cães beagle

Como uma segunda espécie, estudos GLP toxicológicos foram realizados em cães machos e fêmeas beagle com doses orais únicas de ONC201 em paralelo para os estudos com ratos. cães Beagle receberam uma única dose de 0, 4,2, 42, ou 120 mg /kg por sonda oral, que representa um equivalente humano de 0, 125 mg, 1,25 g, e 3,57 g, respectivamente. O cão coorte de dose baixa de 4,2 mg /kg corresponde a ~ 25 mg /kg em ratinhos que demonstrou eficácia em modelos pré-clínicos [1]. Há onde não há mortalidade ou toxicidades limitativas da dose nestes estudos. Não há sinais clínicos de toxicidade foram observados após uma dose única de 4,2 mg /kg ONC201. achados clínicos incluíram a diminuição da atividade, vômitos, vômito, salivação e /ou fezes moles, moles ou mucosas, e as alterações na excreção fecal com doses mais elevadas que ocorreram apenas no dia da administração da droga. Não houve efeitos definitivos relacionados ao ONC201 no grupo com peso médio ou ganho de peso corporal. A dose de 120 mg /kg em cadelas tinha estatisticamente significativamente diminuída grupo significa o consumo de alimentos em comparação com o grupo de controlo de veículo nos dias 14, 15 e 18.

Não há claras alterações histológicas relacionadas com ONC201 foram anotados no Dia 3 ou Dia 19 necropsia. Não houve ONC201 efeitos sobre o ritmo ECG ou morfologia em cães, a média de frequência cardíaca, pressão arterial, hematologia, coagulação ou parâmetros de química clínica ou morfologia dos eritrócitos, urinálise, necropsia, ou peso dos órgãos. Com base nos resultados deste estudo, o NOAEL após a administração oral de ONC201 em doses únicas de 4,2, 42 ou 120 mg /kg em cães beagle é considerado, pelo menos, 42 mg /kg, o que corresponde a uma dose de ~ 1,25 g em seres humanos assumindo escala alométrica padrão.

Discussão

ONC201 é um primeiro-in-class molécula alvo composto anticancerígeno pequena em desenvolvimento pela Oncoceutics para tratar o câncer avançado. ONC201 é um composto estável, activo por via oral, hematoencefálica barreira penetrável que demonstrou actividade anti-cancro independente de p53 como um monoagent e uma combinação de vários modelos pré-clínicos que incluem o glioblastoma, o cancro da mama, cancro do cólon, cancro do pulmão, linfoma, e outros tumores [1, 10, 11]. Os extensos estudos pré-clínicos aqui apresentados confirmam a capacidade de ONC201 para exercer o seu efeito anti-tumor sem danificar as células normais, o que é uma característica importante e original da ONC201 como uma potencial terapia contra o câncer novo.

ONC201 possui diferenças intrigantes quando comparando curvas de dose-resposta a partir do tumor contra as células normais que é distinta de outras terapias. A redução global na viabilidade das células é de aproximadamente 80% em linhas celulares tumorais, em oposição a 20% ~ em linhagens celulares normais reflecte um índice terapêutico grande. Interessantemente, tanto o tumor e as curvas de resposta à dose de células normais têm o mesmo ponto de inflexão (~ 5 M) e é saturável. No entanto, a resposta em células cancerosas é citotóxico e irreversível enquanto que a das células normais é levemente anti-proliferativa e reversível. Esta relação dose-resposta única sugere que ONC201 pode envolver um alvo molecular (s) que é /são particularmente pertinentes para células cancerosas. O alvo de ligação molecular mais proximal do ONC201 permanece uma área activa de investigação.

ONC201 provoca uma inibição transiente da proliferação de células normais, que é reversível após a eliminação do fármaco, em oposição à quimioterapia, o que induz a morte celular. Enquanto ONC201 induz TRAIL em células normais e tumorais, a indução de DR5 é observado apenas em células tumorais. Esta observação chave sugere que as células normais podem sofrer a resposta citotóxica como a ONC201 eles são naturalmente TRAIL-resistentes [12] e não aumentar a expressão de DR5 como células tumorais fazer. A quimioterapia também doxorrubicina induz a fuga DR5, presumivelmente através de p53 [3, 8, 9], mas esta ocorre, tanto do tumor e as células normais e pode explicar a morte celular observada em células normais após a exposição a doxorubicina. O mecanismo de DR5 induziu-ONC201 parece ser da transcrição com base em estudos anteriores de células de cancro do cólon humano, no entanto, o mecanismo molecular de esta indução é uma área de estudo. A ausência de indução de DR5 pode ser ligada a uma ausência de CHOP upregulation [13] ou de activação FOXO3a que ambos foram implicados no mecanismo de ONC201 [1, 14] e são ambos os reguladores de transcrição do gene de DR5 humano [13, 15]. Além disso, a falta de indução de DR5 por células normais pode ser particularmente importante para a protecção contra a citotoxicidade como um relatório recente tem encontrado que DR5 pode induzir apoptose numa TRAIL-independente em alguns contextos [16]. Uma limitação dos estudos in vitro é o tropismo diferente das linhas celulares que foram avaliados, no entanto, estas observações são consistentes em diferentes tipos de tecido representados pelas linhas celulares neste estudo com células malignas ou normais

.

A segurança perfil de ONC201 em estudos de segurança BPL é consistente com a citotoxicidade preferencial do ONC201 no tumor em relação às células normais in vitro. eventos adversos associados com doses exageradas de ONC201 são geralmente ligeiros e reversíveis. Os únicos resultados que foram observados em ambos os ratos e cães em estudos toxicológicos GLP ocorreu em doses elevadas e incluiu actividade diminuída, diminuição do consumo de alimentos (perda de peso visto apenas em ratos), e salivação. As doses NOAEL para ambas as espécies avaliados foram pelo menos 10 vezes acima da dose terapêutica de ONC201 em estudos pré-clínicos anteriores. Assim, os in vitro e in vivo de perfis ONC201 indicar um largo índice terapêutico que é incomum para a maioria dos agentes terapêuticos do cancro e implica que ONC201 é bem adaptado para servir como uma terapia crónica, e como um medicamento bem tolerado. Isto é ainda apoiado por uma falta de aparente genotoxicidade em ONC201 tratados com células [10], ONC201 também exibe uma falta de resistência que é provavelmente uma consequência de curvas de dose-resposta afiados em células tumorais que confunde a evolução da resistência à droga e eficácia em o rosto de mecanismos comuns de resistência como o PGP sobre-expressão, as células-tronco do câncer, e aberrações genéticas [14, 17].

com base nos resultados dos estudos de toxicologia GLP, a dose inicial para o primeiro-in-man ensaio clínico foi calculada como sendo de 125 mg, a qual é 1/10

th o NOAEL mais baixo de acordo com os documentos de orientação reguladoras. A introdução clínica da ONC201 a uma dose de 125 mg é promissor, uma vez que ONC201 demonstrou actividade anti-tumoral em modelos de rato com esta dose e que a existe a janela de segurança de 10 vezes acima, esta dose. Caso as características de segurança e o cronograma oral conveniente de ONC201 traduzir para a clínica, uma série de situações clínicas em oncologia pode estar disponível para ONC201 que não podem ser abordados por terapias actuais com base em suas toxicidades insuportáveis, neoplasias secundárias induzida por genotoxicidade, e /ou rápida indução de resistência.

Reconhecimentos

WS El-Deiry é um professor da pesquisa da American Cancer Society.