Abstract

Fundo

As crescentes evidências de estudos recentes revelou a associação de microRNA-21 (mir- 21) com resultados em vários tipos de câncer, mas resultados inconsistentes foram relatados, o que racionalizou um resumo e análise de dados disponíveis para investigar o papel prognóstico do mir-21.

Materiais e Métodos

Elegível estudos foram identificados através de várias estratégias de pesquisa e avaliados quanto à qualidade. Os dados foram extraídos de estudos em termos de características de base e estatísticas fundamentais, tais como taxa de risco (HR), intervalo de confiança de 95% (CI) e

valor P

, que foram utilizados para calcular o tamanho do efeito combinado.

Resultados

25 estudos foram incluídos na meta-análise para avaliar o papel prognóstico do miR-21 em tumores malignos. Elevada mir-21 foi demonstrada de prever moderadamente baixa sobrevida global (OS) (HR = 1,903, IC 95%: 1,713-2,113,

P

= 0,000) e sobrevida livre de doença (DFS) (HR = CI 1.574, 95%: 1,139-2,175,

P

= 0,006) pelo modelo de efeito fixo e aleatório, respectivamente. É importante salientar, análise de subgrupo revelou associação significativa entre o aumento do nível de miR-21 no tecido canceroso e status de sobrevivência pior. Além disso, a sobre-expressão de miR-21 foi um fator prognóstico independente para o câncer de pulmão de não pequenas células (CPNPC) e pacientes com câncer pancreático, sendo os HR reunidas 2.153 (95% CI: 1,693-2,739,

P

= CI 0.000) e 1.976 (95%: 1,639-2,384,

P

= 0,000)

Conclusões

a sobre-expressão de miR-21, especialmente em canceroso. tecidos, foi efetivamente preditivo de pior prognóstico em vários carcinomas. Non-invasive circulante miR-21, no entanto, exibiram a capacidade para discriminar modesta resultados. Principais preocupações sobre mir-21 padronização de ensaio e selecção de amostras devem ser plenamente tratadas antes de sua aplicação prática no manejo do câncer de

Citation:. Zhu W, Xu B (2014) MicroRNA-21 Identificado como preditor de câncer resultado: uma meta-análise. PLoS ONE 9 (8): e103373. doi: 10.1371 /journal.pone.0103373

editor: Domenico Coppola, H. Lee Moffitt Cancer Center Research Institute, Estados Unidos da América

Recebido: 25 de fevereiro de 2014; Aceito: 29 de junho de 2014; Publicação: 06 de agosto de 2014

Direitos de autor: © 2014 Zhu, Xu. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho foi apoiada pela National Natural Science Foundation subvenção [81372830], Fundo Beijing esperança Run especial [LC2013L09] e Capital característica clínica Fundo de Investigação Aplicada [Z141107002514010]. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

MicroRNAs (miRNAs) representam uma classe evolutivamente conservadas de pequenas moléculas de RNA endógeno não codificadoras que são cerca de 18-25 nucleótidos de comprimento e modular a expressão de genes transcricionalmente-pós de uma maneira específica da sequência [1] – [ ,,,0],3]. Estas pequenas reguladores de função principalmente através de emparelhamento com sítios complementares no interior da região não traduzida a 3 ‘(UTR) do ARN alvo mensageiro (ARNm), que conduzem a uma supressão ou a degradação de ARNm de translação [4] – [6]. Estima-se que miARN pode potencialmente regulam-se a 30% de todos os genes humanos codificadores de proteínas [7]. Desde a identificação inicial de miARNs em 1993 [4], o progresso dramático foi feito em revelar o seu papel nos processos biológicos vitais, tais como a proliferação celular, diferenciação, apoptose e controlo do ciclo celular [8], [9]. Durante a última década, os estudos de perfil identificaram miRNAs que são expressos de maneira aberrante em uma variedade de cancros humanos, e sua associação com o câncer levou a classificação funcional de miRNAs em oncogênicos (oncomirs) e miRNAs supressores de tumor. Oncomirs geralmente inibir a expressão de genes supressores de tumores e /ou genes que estão envolvidos na apoptose e diferenciação celular [10], [11], entre os quais o miR-21 tem sido o mais amplamente explorado um em neoplasias humanas de origens diversas.

as evidências sobre o papel pró-neoplásica de miR-21 a partir de estudos fundamentais e clínicos são encorajadores. Quando altamente expressos, foi observada miR-21 para promover a proliferação celular, sobrevivência, migração e invasão em várias linhas celulares de cancro [12] – [14]. Enquanto isso, knock-down de miR-21 por oligonucleótidos anti-sentido provocou diminuição notável na sobrevivência de células de cancro no crescimento in vitro e tumoral in vivo num modelo de xenoenxerto de murinos, que foi acompanhada por expressão abatido de proteína anti-apoptótica de Bcl-2 e Enhanced apoptose [15] – [20]. Desde o primeiro relatório sobre a sua super-expressão em glioblastoma em 2005 [16], miR-21 foi encontrado sobre-regulada em uma ampla gama de malignidades [21] – [24], o que indicou a sua função de diagnóstico de pacientes com cancro distintivas de indivíduos saudáveis. Mais importante ainda, estudos recentes investigando sua associação com cancro resultados revelaram o valor prognóstico de miR-21, com a sua elevada expressão predizer o estado pior sobrevida em malignidades, incluindo o cancro da mama, cancro do pulmão, cancro do pâncreas, cancro colorectal, e assim por diante [25] – [31]. No entanto, o consenso não foi atingido quanto à fiabilidade de miR-21 como um biomarcador de prognóstico no cancro devido a alguns resultados opostos [32] – [35]. Considerando a fraqueza de um estudo individual, é necessária a realização de uma meta-análise para resolver a inconsistência da literatura resumindo sistematicamente resultados disponíveis.

No presente estudo, foi realizada uma meta-análise para avaliar o prognóstico significância de miR-21 em cancro. Desde provas inconsistentes existia sobre a associação de miR-21 com pâncreas e sobrevivência NSCLC, realizamos subgrupo específico do cancro analisa a esclarecer a correlação de miR-21 com estas duas doenças malignas. Como para o cancro colorectal no entanto, a grande maioria dos estudos disponíveis demonstraram que miR-21 sobre-expressão poderia prever a sobrevivência pobre em câncer colorretal, o que tornou menos necessária para voltar a provar a constatação anterior em nosso estudo. Além disso, as implicações para futuras pesquisas e viabilidade de aplicação na prática clínica também foram exploradas.

Materiais e Métodos

A meta-análise foi realizada seguindo as diretrizes da Meta-análise de estudos observacionais no grupo Epidemiologia (ALCE) [36].

estratégia de busca e estudo selecção

MEDLINE, Embase e Cochrane bancos de dados eletrônicos da biblioteca foram sistematicamente procurado para identificar estudos relevantes publicados entre 1966 e 19 de dezembro de 2013 utilizando os seguintes três conjuntos de palavras-chave e sua combinação: “microRNA 21”, “câncer ou carcinoma OU tumor ou neoplasia ou tumor maligno” e “prognóstico ou sobrevivência, mortalidade ou morte ou recaída ou recidiva ou metástase ou resultado”. Os títulos e resumos das publicações foram cuidadosamente revistos. Além disso, uma pesquisa manual foi realizada usando referências de literatura relevante para identificar os estudos elegíveis.

Estudos elegíveis participantes inscritos com diagnóstico de um certo tipo de tumor sólido, que mede a expressão de miR-21 em tecidos cancerosos ou sistema circulatório e investigou a associação entre nível de expressão de miR-21 e estado de sobrevivência. Os artigos foram excluídos se fossem artigos de não-inglês, artigos de revisão, cartas, análises económicas, ou estudos de laboratório. Outros critérios de exclusão incluíram estudos que analisam um conjunto de miRNAs em conjunto, estudos dividem os pacientes de acordo com a não-dicotômica miR-21 níveis de expressão e estudos que faltam informações-chave, tais como taxa de risco (HR), intervalo de confiança de 95% (CI) e

P

valor. Quando foram identificadas várias publicações sobre um estudo, só aqueles que representam o mais recente de referência e relatar os resultados foram incluídos.

Avaliação da qualidade

Depois de uma lista de verificação de revisão crítica da Cochrane Centre Dutch proposto por alces, que sistematicamente avaliada a qualidade de todos os estudos incluídos [36]. Principais itens a serem avaliados são os seguintes: (i) descrição clara da população do estudo e origem do país, (ii) descrição clara do tipo de doença, (iii) descrição clara do desenho do estudo, (iv) definição clara dos resultados do cancro, ( v) explicação clara de medida de miR-21, (vi) definição clara do valor de corte de miR-21 e (vii) A duração suficiente de follow-up. Se um estudo não conseguiu especificar informações sobre qualquer aspecto mencionado acima, seria excluída de modo a não comprometer a qualidade da meta-análise.

Extração de dados e conversão

Os dados foram extraídos de todos os estudos elegíveis em duplicata por dois avaliadores independentes. O desacordo foi resolvido por consulta com um terceiro revisor. Os dados foram coletados no que diz respeito aos seguintes aspectos: (i) detalhes da publicação: o sobrenome do primeiro autor, ano de publicação e estudo de design; (Ii) as características de base de população do estudo: país, tamanho da amostra, local e estadiamento do câncer; (Iii) espécime miR-21 ensaio, método e valor de corte de mir-21 e (iv) HR do aumento miR-21 para a sobrevida global (OS), a sobrevida livre de recidiva (RFS) ou sobrevida livre de doença ( DFS), bem como o seu IC de 95% e

P valor

. Na maioria dos casos, diretamente derivada RH e IC 95% a partir do artigo original, com uma HR de 1 sendo associado com risco elevado de mortalidade ou de reincidência. Se HR e 95% CI estavam ausentes, o número total de mortes ou recorrências observadas e o tamanho da amostra em cada grupo foram extraídos para calcular HR como descrito anteriormente [37]. Se apenas as curvas de Kaplan-Meier estavam disponíveis, os dados foram extraídos das parcelas de sobrevivência e um FC estimada foi então calculada como descrito anteriormente [37].

A análise estatística

A heterogeneidade entre os estudos incluídos foi avaliada utilizando o teste Q de Cochran e estatística Higgins I-quadrado. Um modelo de efeito aleatório (Der Simonian e Laird método) foi adoptado como método de pooling se foi observada uma heterogeneidade substancial (

P Art 0,05), enquanto que o modelo de efeito fixo foi aplicado na ausência de heterogeneidade entre os estudos (

P Art 0,05). viés de publicação foi avaliada usando o gráfico de funil com o teste indicador de viés do Egger [38]. Análise de sensibilidade (análise de influência) foi realizada para testar a robustez do tamanho efeito combinado foi para a remoção de estudos individuais. Um estudo individual era suspeito de ter influência excessiva se a estimativa do ponto estava fora do IC 95% do tamanho combinado efeito depois de ter sido removida a análise. análise de subgrupo foi realizada com base no tipo de espécime coletado eo local do câncer. Todos os

P valores

eram de dois lados, com a

P Art 0,05 considerado estatisticamente significativo. Todas as análises foram realizadas utilizando STATA version12.0 (Stata, College Station, TX, EUA).

Resultados

triagem Literatura e estudar as características

Figura 1 apresenta o processo de triagem literatura e seleção do estudo. Depois preliminar de busca on-line, 594 artigos originais relativos a miR-21 e câncer de prognóstico foram recuperados fora do EMBASE, MEDLINE e as bases de dados Cochrane Library. 548 trabalhos foram excluídos do estudo após a triagem manual dos títulos, resumos e palavras-chave, porque eles eram artigos de revisão, cartas, estudos de laboratório, as contribuições não-Inglês ou irrelevante para a análise atual. textos completos das restantes 46 artigos foram cuidadosamente revistos e avaliados, e 22 artigos foram posteriormente removido devido a classificação não-dicotômica de miR-21 níveis de expressão ou a falta de estatísticas-chave, tais como RH, IC 95% e

P

valor. Dos 29 estudos candidatos de 24 artigos publicados, um estudo avaliou uma série de miRNAs como um todo [39], um artigo falhou em fornecer informações concretas sobre o câncer de estadiamento [40], e 2 estudos foram considerados inelegíveis devido à generalização comprometida desde o os dados foram derivados de doentes com cancro limitada a um certo estágio [41], [42]. Finalmente, 25 estudos em todos foram incluídos na meta-análise para avaliar o papel prognóstico do miR-21 em tumores malignos.

As principais características e informações básicas de estudos elegíveis foram resumidos na Tabela S1. Os estudos envolveram 3.038 pacientes dos Estados Unidos, o Reino Unido, Canadá, Itália, Noruega, Grécia, Dinamarca, China, Taiwan e Japão. Todos os estudos foram retrospectivos, que lidava com uma vasta gama de carcinomas incluindo câncer de mama, câncer colorretal, câncer de pulmão, câncer pancreático, melanoma, glioma, cancro gástrico, cancro oral, carcinoma hepatocelular, carcinoma de células renais e câncer de próstata. A maioria dos estudos examinaram a expressão de miR-21 em tecido canceroso, ainda 6 estudos alvo no soro de sangue como uma fonte de interesse. Notavelmente, em um estudo Ota e seus colegas procurado para quantificar o nível de miR-21 na medula óssea obtidas a partir de doentes com cancro da mama. A hibridação in situ (ISH) foi aplicada em dois estudos embora quantitativa PCR em tempo real (qRT-PCR), manteve-se como a forma predominante de detecção de miR-21. 15 estudos adoptada a mudança de dobragem mediana como o valor de cut-off de miR-21 de expressão, com 2 vezes, 5 vezes e a variação vezes utilizada nos outros estudos. 7 dos 25 estudos exploraram a associação de miR-21 com sobrevida livre de doença (DFS), a sobrevida livre de recidiva (RFS) ou tempo de progressão (TTP), e 18 focada em sua relação com a sobrevida global (OS) de câncer pacientes.

Mir-21 e de sobrevida global

Figura 2A exibido na parcela florestal da análise sobre mir-21 e oS. 18 Estudos em todos foram sujeitos a análise. O modelo de efeito fixo foi utilizado para calcular o tamanho do efeito combinado devido à ausência de heterogeneidade entre os estudos (I

2 = 33,0%,

P

= 0,087). Mir-21 de alta expressão foi demonstrada de prever moderadamente pobres OS independentemente do local de câncer (HR = CI 1.903, 95%: 1,713-2,113,

P

= 0,000). Depois realizou-se análises de subgrupos de acordo com os tipos de amostra recolhida para miR-21 ensaio, a saber tecido canceroso e no soro sanguíneo. Para os 14 estudos utilizando tecidos congelados ou frescos, pelo modelo de efeito fixo do HR reunidas para OS foi 1,986 (IC 95%: 1,760-2,241,

P

= 0,000), sugerindo que a sobre-expressão de mir- 21 em tecidos de câncer foi preditivo de pior evolução. Como para os 4 estudos visando soro mir-21, descobriu-se que elevados níveis de miR-21 no soro foi associada com o prognóstico indesejável, com o HR combinada para OS sendo 1.669 (95% CI: 1,351-2,062,

P

= 0,000).

Fixo (a) e aleatória modelo B) efeito (foi usado como o método pooling respectivamente. Estudos são estratificados com base no tipo de amostra: 1 para tecido canceroso e 2 para fazer circular o miR-21. * Análise sobre mir-21 e DFS após a omissão do estudo de Jiang et al.

Mir-21 e sobrevida livre de doença

Figura 2B mostram os resultados da análise de 7 estudos sobre DFS. heterogeneidade evidente foi detectada entre os sete estudos (I

2 = 66,1%,

P

= 0,007), que racionalizadas maior exploração de divulgar fatores que contribuem para essa heterogeneidade. O HR combinado foi calculada para ser (IC 95%: 1,139-2,175,

P

= 0,006) 1.574 pelo modelo aleatório, fornecendo dicas que o aumento da expressão de miR-21 foi correlacionada com reduzida DFS de pacientes com câncer.

Subgrupo e análise de sensibilidade dos estudos DFS

a fim de especificar a origem da heterogeneidade dos estudos DFS foram estratificados com base nos tipos de espécime, ainda heterogeneidade de destaque foi novamente identificada em ambos os grupos (2 estudos em que circula grupo mir-21 I

2 = 78,9%,

P

= 0,029; 5 estudos em tecido grupo mir-21 I

2 = 69,1%,

P

= 0,012) (Fig. 2B). No entanto, a heterogeneidade substancial também poderia ser atribuída aos amplos origens dos grupos de estudo, de modo que os estudos foram, em seguida, entrou em análise de subgrupo por países da população estudada (países asiáticos e não-asiáticos). Para uma extensão enorme heterogeneidade foi dissolvido dentro de três estudos não-asiáticos (I

2 = 0,0%,

P

= 0,791), em vez dos quatro estudos asiáticos (I

2 = 78,5%,

P

= 0,003), e elevou mir-21 manifestou-se como mais um indicativo de DFS encurtado em pacientes com câncer não-asiáticos (HR = 1,951, IC 95%: 1,257-3,027,

P

= 0,003) do que coortes asiáticos (HR = CI 1.445, 95%: 0.952-2.193,

P

= 0,084)

Figura S1 exibiu os resultados da análise de sensibilidade, através do qual ele foi descoberto isso. o estudo de Jiang et al [43] teve influência excessiva sobre o HR reunidas para DFS de todos os cânceres. Após a exclusão do estudo por Jiang et al, a heterogeneidade entre os estudos DFS foi significativamente diminuída (I

2 = 50,4%,

P

= 0,073) e não houve diferença entre o eminente HR pool recém-derivado (1.753, 95% CI: 1,258-2,442,

P

= 0,001) e o original (CI 1.574, 95%: 1,139-2,175,

P

= 0,006), o que implicou a resultado combinado era consideravelmente robusta (Fig. 2B).

análise específica do cancro

em seguida partimos para lançar luz sobre o papel prognóstico de miR-21 em determinados tipos de cancro. Figura 3A representou a parcela florestal da análise de estudos de câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC). Três estudos matricular 405 pacientes de EUA, China, Japão e Noruega passou por análise. Inter-estudo heterogeneidade estava ausente (I

2 = 0,0%,

P

= 0,701). Obviamente, a sobre-expressão de miR-21 foi um fator prognóstico independente para pacientes com NSCLC, com o HR pool sendo 2.153 pelo modelo de efeito fixo (IC 95%: 1,693-2,739,

P

= 0,000). Quando se tratava de câncer pancreático, 8 estudos envolvendo 831 participantes de EUA, Reino Unido, Itália, China e Japão foram colocadas para análise, que demonstrou grande homogeneidade (I

2 = 0,0%,

P

= 0,530). modelo de efeito fixo foi aplicada eo HR reunidas era 1.976. (IC 95%: 1,639-2,384,

P

= 0,000), revelando associação significativa entre o aumento do nível de miR-21 e pior status de sobrevivência do cancro do pâncreas (Fig 3B ). Além disso, os estudos sobre NSCLC e câncer pancreático foi estratificado por tipo de amostra, e descobriu-se que tanto o tumor e circulando mir-21 sobre-expressão permaneceu preditivo do resultado câncer indesejável.

modelo de efeito fixo foi usado como o método pooling. Estudos são estratificados com base no tipo de amostra:. 1 para o tecido canceroso e 2 para a circulação de miR-21

O viés de publicação

Finalmente, o viés de publicação dos estudos incluídos foi avaliada por gráfico de funil e teste de Egger, que foi resumido na Figura 4. a Figura 4D expostos os resultados do teste de Egger, que foi utilizado para fornecer evidência estatística de simetria gráfico de funil. viés de publicação não foi detectada na análise global de 25 estudos inscritos (

P

= 0,055). Para os estudos OS dezoito teste de Egger não revelaram qualquer evidência de viés de publicação (

P

= 0,150), enquanto que com os estudos de sete DFS viés de publicação existiu (

P

= 0,048). Resultados semelhantes foram demonstrados no gráfico de funil (Fig. 4A-C).

parcelas funil fornecido estimativa gráfica de viés para estudos globais (A), estudos OS (B) e estudos DFS (C), respectivamente. Principais estatísticas do teste de Egger estão resumidos (D).

Discussão

Na meta-análise atual, que reunidas estudos de alta qualidade global em termos de miR-21 e prognóstico do câncer, foi demonstraram que a sobre-expressão de miR-21, especialmente em tecidos cancerosos, era eficaz de previsão de baixa sobrevivência de uma variedade de cancros, tanto em termos de OS e DFS. Para NSCLC e câncer pancreático, associação significativa foi verificada entre elevada mir-21 e pior sobrevida a longo prazo.

Os estudos de definição OS como objectivo primário foram amplamente homogênea, o que fez com que seja relativamente seguro concluir que alto nível de tecido ou em circulação mir-21 foi preditiva de OS reduzida. No entanto o cuidado deve ser tomado ao se interpretar os resultados da análise dos estudos de DFS, que exibiam heterogeneidade proeminente. Na análise de subgrupo por tipos de amostra, o nível de miR-21 em tecidos cancerosos (HR = CI 1.725, 95%: 1.073-2.775,

P

= 0,024) em vez de soro sanguíneo (HR = 1.403, 95% CI: 0,769-2,558,

P

= 0,269) foi associado à diminuição do DFS em vários tipos de câncer. Para resumir, promovido mir-21 em tecidos de cancro foi relacionada a um maior risco de recaída e mortalidade, enquanto a força preditiva de circulação de miR-21 só é aplicado a OS dada a análise dos estudos disponíveis.

Uma vez que o reconhecimento inicial da associação de miR-21 com câncer em 2005 [16], mir-21 destacou-se como os miRNAs mais amplamente explorados. Estudos recentes envolvendo linhas celulares de cancro e modelos de xenotransplante implicaram o papel oncogênico de miR-21. Evidências acumuladas apoiou mir-21 como um potencial biomarcador de diagnóstico e prognóstico em vários carcinomas. Em nosso estudo de meta-análise, foi preliminarmente concluiu-se que mir-21 facilitou a previsão de sobrevivência a longo prazo em cancros, incluindo NSCLC e câncer pancreático, que validou ainda mais o valor prognóstico desta oncomir. Por uma questão de fato, a associação notável entre aberrante mir-21 expressão e baixa sobrevida poderia ser melhor iluminada por seu papel indispensável na carcinogênese e cascata metastática. Últimas descobertas lançaram luz sobre os mecanismos subjacentes oncogênicos de miR-21, que exerceu profunda influência sobre as características básicas de câncer, incluindo proliferação celular, apoptose, diferenciação, invasão e migração [8] – [11]. O gene miR-21 é localizado em 17q23.2 cromossoma no sítio frágil FRA17B comum, que é frequentemente observada para ser amplificado em numerosas doenças malignas [21]. De grande importância, o efeito oncogênico de miR-21 poderia ser explicada principalmente por suas metas de transcrição e vias de sinalização a jusante. Até agora, os alvos validados de miR-21 incluiu a morte celular programada 4 gene (PDCD4), tropomiosina 1 (TPM1), fosfatase e tensina homólogo (PTEN), proteína cromossomo condensação G (NCAPG), reticulon 4 isoformas A (RTN4) e outros genes relacionados com o cancro [12] – [15], [17], [44] – [46]. Ao todo, as vias celulares vitais que regulam a proliferação celular, apoptose e o ciclo celular, tais como Ras [47], p53 [48], de PI3K-Akt-mTOR [49], bem como genes alvo compor uma rede intrincada de miR-21 modulação .

como evidência crescente de estudos retrospectivos indicou mir-21 como um marcador tumoral promissora, uma série de análises quantitativas foram realizadas com base em estudos publicados para ajudar a determinar o seu valor diagnóstico e prognóstico. Uma meta-análise de Xia et al demonstraram que em alto nível câncer colorretal mir-21 foi moderadamente preditiva de sobrevida global desfavorável (HR = 1,76 IC 95%: 1,34-2,32,

P

= 0,000) [ ,,,0],50]. Com base nos 17 estudos, Fu et al relatados em uma revisão sistemática e meta-análise que miR-21 sobre-expressão previu a sobrevida global e livre de recidiva pior em vários tipos de câncer, incluindo cabeça e carcinoma de células escamosas do pescoço (CECP) e do sistema digestivo cancros, sendo os HR reunidas 1,69 (95% CI: 1,33-2,16,

P Art 0,001) para oS e CI 1,48 (95%: 1,03-2,11,

P Art 0,033) para DFS [51]. Resultados semelhantes foram obtidos por Wang et al em sua meta-análise sobre o significado prognóstico de circulação de miR-21 no câncer humano, que incluiu seis estudos e estimou o HR combinados para ser 2,37 (IC 95%: 1,83-3,06,

P

= 0,000) [52]. Os dados provenientes de estudos acima referidos no entanto, deve ser traduzido com cautela devido ao dramático heterogeneidade entre-estudo e capacidade de amostra pequena, o que justifica uma análise mais aprofundada para validar o papel prognóstico do mir-21. Em comparação com meta-análises anteriores, o atual envolveu cerca de 25 estudos de alta qualidade, incluindo os recém-publicados numeral, a maioria dos quais focados em câncer de pâncreas. Por uma questão de fato, as opiniões dividem-se quanto à associação da expressão de miR-21 com o resultado câncer de pâncreas e nos anos mais recentes uma extensa pesquisa translacional lançou luz sobre essa disputa. No presente trabalho, foi realizada análise de subgrupo de estudos de câncer de pâncreas, que acrescentou evidências convincentes de que o miR-21 sobre-expressão previu redução da sobrevivência, independentemente do seu tipo de amostra. Notavelmente, vamos definir e implementados critérios de inclusão e exclusão exigentes para garantir a qualidade dos estudos envolvidos e, assim, a confiabilidade dos resultados agrupados. Por exemplo, se um estudo tratadas s série de miARNs e não para avaliar cada miARN para a sua correlação com a sobrevivência de forma independente, não seria seleccionado para ser menos representativa e relevante para a investigação. Distinta da meta-análises anteriores, o presente trabalho prestado atenção substancial para os detalhes do desenho do estudo e comunicação de dados na avaliação da qualidade. Um estudo seria presumir a exibir generalização comprometida e, em seguida, rejeitada se não conseguiu especificar o estágio do câncer de seus participantes ou meramente envolveu pacientes de um certo estágio. Além disso, a fim de garantir a homogeneidade de estudos envolveram e, consequentemente, a fiabilidade do resultado reunidas dois estudos [42], [53] que medida o miR-21 expressão continuamente foram excluídos, mas ambos os estudos relataram que os níveis elevados de miR-21 estava relacionada com pior sobrevida no câncer, que era consistente com a nossa descoberta na meta-análise atual. De importância, o sistema operacional incluído e estudos DFS foram ambos colocados para análise estratificada de acordo com as fontes de miR-21. Para nosso conhecimento, nosso estudo foi o único a adoptar essa análise de subgrupo e forneceu evidência quantitativa inicial sobre o valor prognóstico de circular e tecido mir-21, respectivamente. Além disso, na presença de heterogeneidade entre os estudos DFS, realizamos mais sensibilidade e análise de subgrupo, que era, obviamente, ausente de meta-análises anteriores relevantes, para rastrear a origem da heterogeneidade. Por isso significa que cumpriu uma exploração abrangente e chegou a conclusões objetivas e imparciais.

No entanto, o presente estudo meta-análise tem várias limitações. Para começar, uma heterogeneidade substancial existia entre os estudos DFS, que foi causado principalmente por uma relativa escassez de estudos que avaliam DFS como um resultado. A divergência de estudos incorporados também provavelmente foi atribuída a diferenças na demografia dos participantes, local do câncer, duração do follow-up, tipo de amostra, método de ensaio e do valor de corte de mir-21. Na análise de subgrupo de estudos DFS, a heterogeneidade foi eliminado nos estudos não-asiáticos (I

2 = 0,0%), e descobriu-se que o aumento do mir-21 expressão foi correlacionada com DFS encurtado em pacientes com câncer não-asiáticos. A fim de minimizar a influência de confusão de heterogeneidade, modelo de efeitos aleatórios foi utilizado na partilha de tamanho do efeito. Além disso, na conclusão final da nossa análise, não conseguiu especificar a definição de miR-21 sobre-expressão devido à inconsistência nos valores de corte de mir-21 entre os estudos incluídos. Além disso, os resultados da análise dos estudos NSCLC devem ser interpretados com precaução devido ao relativamente pequeno tamanho da amostra (405 participantes). Além disso, na análise do DFS estuda a pesquisa por OTA et al, que caiu na circulando mir-21 subgrupo, medida mir-21 na medula óssea e o resultado obtido pode não se aplicar de forma adequada para que circula mir-21. Por último, mas não menos importante, o viés de publicação foi detectado nos estudos DFS, indicando que estudos com resultados positivos eram mais propensos a ser relatado e publicado o que pode introduzir sobre-estimativa do HR reunidas.

Em conjunto com descobertas anteriores, nosso estudo forneceu evidências convincentes de apoio mir-21 como um biomarcador de prognóstico promissor para o câncer. No entanto, várias considerações têm de ser entregues ao longo de sua aplicação clínica. Em primeiro lugar, deve ser dada prioridade à normalização de miR-21 procedimento de ensaio, incluindo os métodos de ensaio (qRT-PCR, ISH, IHC etc.), seleção de RNA de referência interna e, mais importante, o valor de corte de mir- 21 nível de expressão. Em grande medida, a divergência dos resultados contemporâneos sobre o valor prognóstico do mir-21 poderia ser acreditados para incoerência metodológica. A abordagem para definir o valor de corte de miR-21 expressão variou entre os diferentes estudos, que é obviamente a principal preocupação precisava ser resolvida antes da sua aplicação clínica. Determinação dos padrões globais de miR-21 expressão vai realização significativamente linha de consenso final. Além disso, no nosso estudo circulante miR-21 é indicado apenas modesta capacidade de discriminar resultados, embora tenha sido proposto activamente como um indicador não-invasivo de prognóstico para numerosas doenças malignas em anos recentes. Disputa existia em abundância relativa à eficácia autêntica da livre de células mir-21 em diferenciar os resultados. De acordo com Chen et al [54], extracelular miR-21 provavelmente originado a partir de células normais e /ou lisados ​​tumorais nos fluidos corporais, que definitivamente criados interferência com os resultados obtidos. Mais estudos são necessários para resolver essa discrepância e esclarecer o valor prognóstico de circulação de miR-21.

Em resumo, nosso estudo demonstrou que a sobre-expressão de miR-21 foi efetivamente preditivo de pior prognóstico em vários carcinomas. Aumento do nível de miR-21 em tecidos cancerosos foi associada com OS reduzida e DFS durante nível elevado de circulação mir-21 era apenas indicativos de má OS. No futuro mais estudos clínicos são necessários para confirmar o papel prognóstico de miR-21 antes da sua aplicação prática na gestão de câncer.

Informações de Apoio

Figura S1.

análises de sensibilidade dos estudos sobre mir-21 e DFS

doi:. 10.1371 /journal.pone.0103373.s001

(TIF)

Tabela S1.

Resumo das características dos estudos inscritos

doi:. 10.1371 /journal.pone.0103373.s002

(DOCX)

Checklist S1.

PRISMA 2009 Checklist

doi:. 10.1371 /journal.pone.0103373.s003

(DOC)