PLOS ONE: Uso de Cell-SELEX para gerar aptâmeros de DNA como sondas molecular das células HPV-Associated Câncer Cervical

biomarcadores

Abstract

Fundo

específica da doença são uma ferramenta importante para a gestão atempada e eficaz de condições patológicas, incluindo a determinação de susceptibilidade, diagnóstico e monitorizar a eficácia das estratégias preventivas ou terapêuticas . Os aptâmeros, compreendendo ADN ou ARN de cadeia simples ou de cadeia dupla, podem servir como biomarcadores de doenças ou estados biológicos. Os aptâmeros podem ligar-se a epitopos específicos de macromoléculas, em virtude das suas estruturas tridimensionais e, tal como anticorpos, aptâmeros podem ser utilizados para direccionar epitopos específicos com base na sua forma molecular. A evolução sistemática de ligantes por enriquecimento exponencial (SELEX) é a abordagem utilizada para selecionar os aptâmeros de alta afinidade para alvos macromoleculares específicos de entre os 10

13 oligômeros compreendendo bibliotecas típicas oligômero aleatória. No presente estudo, foram utilizados ao vivo SELEX à base de células para identificar aptâmeros de DNA que reconhecem diferenças de superfície celular entre as células cancerígenas de carcinoma cervical transformou-HPV, e, linhas de células reversas não tumorigénica isogênicos.

Metodologia /Principais Conclusões

Whole-cell SELEX metodologia foi adaptada para utilização com linhas de células aderentes (o que se denominou-aderente celular SELEX (AC-SELEX)). Utilizando esta abordagem, identificou-se aptâmeros de elevada afinidade (gama nanomolar K

d) a epítopos específicos para a superfície celular de dois revertentes não tumorigénica, não tumorigénica derivadas da linha celular humana cancro cervical HeLa, e demonstrou a perda desses epitopos noutro papilomavírus humano transformado linha de células de câncer cervical (SiHa). Nós também realizada investigação preliminar dos epitopos de aptâmeros e as suas características de ligação.

Conclusões /Significado

Usando AC-SELEX geramos várias aptâmeros que têm alta afinidade e especificidade ao não tumorigénica, rever tente de células de câncer cervical de HPV transformado. Estes aptâmeros podem ser utilizados para identificar novos biomarcadores que estão relacionados com a carcinogénese. Painéis de aptâmeros, como estes podem ser úteis para prever o potencial tumorigénico e propriedades de biópsias de câncer e ajuda na gestão eficaz de condições patológicas (diagnóstico, resultado previsto, e opções de tratamento)

Citation:. Graham JC , Zarbl H (2012) Uso de Cell-SELEX para gerar DNA Aptamers como sondas molecular das células HPV-Associated câncer cervical. PLoS ONE 7 (4): e36103. doi: 10.1371 /journal.pone.0036103

editor: Eric Deutsch, Instituto Gustave Roussy, França

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