Abstract
Fundo
de alto risco papilomavírus humano (HPV) é um vírus oncogênico que causa câncer de orofaringe, e tem um resultado favorável após o tratamento. Ao contrário do câncer de orofaringe, a prevalência eo papel do HPV de alto risco na etiologia do carcinoma de células escamosas da hipofaringe (HPSCC) é incerto.
Objectivo
O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito e significado prognóstico de HPV de alto risco em pacientes com HPSCC.
Métodos
o estudo incluiu 64 indivíduos com HPSCC submetidos à cirurgia radical com ou sem terapia adjuvante à base de radiação. sítios primários foram o seio piriforme em 42 pacientes, parede posterior da faringe em 19 pacientes, e na área pós-cricóide em 3 pacientes. HPV de alto risco de hibridização in situ foi realizado para detectar a infecção pelo HPV.
Resultados
A taxa positiva de HPV de alto risco de hibridização in situ foi de 10,9% (7/64). Houve uma diferença significativa na fração de HPV de alto risco positiva entre o câncer piriforme sinusal (16,7%), câncer de parede posterior da faringe (0%) e câncer área pós-cricóide (0%) (p = 0,042). O exame de laringoscopia revelou uma aparência granulomatosa e exofítica em 85,7% (6/7) dos pacientes com câncer de seio piriforme HPV-positivos de alto risco, mas em apenas 31,4% (11/35) dos pacientes com piriforme HPV-negativos de alto risco cancro do seio (p = 0,012). foram encontradas correlações significativas entre o HPV positivo de alto risco e idade mais jovem (p = 0,050) e o status não-fumantes (p = 0,017). pacientes HPV-positivos tiveram uma sobrevida significativamente melhor livre de doença (p = 0,026) e sobrevivência específica da doença (p = 0,047) do que os pacientes HPV-negativos.
Conclusões
HPV de alto risco infecção é significativamente relacionada com a piriforme câncer do seio em pacientes com HPSCC
Citation:. Joo YH, Lee YS, Cho KJ, Parque JO, Nam IC, Kim CS, et al. (2013) Características e Implicações prognósticos de alto risco cancros HPV-Associated Hipofaríngeas. PLoS ONE 8 (11): e78718. doi: 10.1371 /journal.pone.0078718
editor: Amanda Ewart Toland, Ohio State University Medical Center, Estados Unidos da América
Recebido: 22 de julho de 2013; Aceito: 18 de setembro de 2013; Publicação: 11 de novembro de 2013
Direitos de autor: © 2013 Joo et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. Nenhuma corrente fontes de financiamento externas deste estudo
Conflito de interesses:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
carcinoma de células escamosas da hipofaringe (HPSCC) é o mais agressivo. malignidade da região de cabeça e pescoço que ocorre no trato aerodigestivo; 70-80% dos casos são encontrados numa fase avançada III e IV, por causa das características agressivas do tumor, com uma frequência elevada de metástases e prolongamento da submucosa nodal [1]. tabagismo e consumo excessivo de álcool são, provavelmente, os fatores de risco mais conhecidos para HPSCC. No entanto, cerca de 20% dos pacientes com esta doença não são expostas a estes factores de risco, e apenas uma pequena percentagem de indivíduos que são expostos ao tabaco desenvolver carcinoma de células escamosas (SCC), da cabeça e pescoço [2]. Recentemente, o vírus do papiloma humano (HPV) tem sido demonstrado ser de significado prognóstico, particularmente em SCC orofaríngea. Alguns estudos sugerem que o HPV, especialmente os tipos 16 e 18, pode ser responsável por um pequeno subgrupo de SCC oral e até 50% de CAA orofaríngea [3], [4]. HPV-positivo orofaríngea SCC parece ser diferente do SCC orofaríngea HPV-negativos no que diz respeito à diferenciação do tumor, factores de risco e as alterações genéticas que se encontram presentes, o que indica que o HPV-positivo orofaríngea SCC representam uma entidade de tumor separado do SCC orofaríngea HPV-negativo, que tem vias moleculares específicos associados com a sua tumorigenicidade [4], [5]. Em contraste com SCC orofaríngea, pouco se sabe sobre o significado de HPV em outros sublocais tumorais na cabeça e no pescoço. Especificamente, não está claro se as correlações encontradas no SCC orofaringe podem ser extrapolados para HPSCC. O objetivo do presente estudo foi examinar a presença de HPV nas amostras de HPSCC. Além disso, características clínicas e evolução da doença foram correlacionados com o status do HPV.
Materiais e Métodos
Ética declaração
O protocolo do estudo foi aprovado pelo Conselho de Administração do Médica Católica de Revisão Institucional Centro. consentimento informado por escrito foi obtido de todos os pacientes.
Pacientes e amostras de tumor
Os dados clínicos e patológicos de 105 pacientes que foram diagnosticados com HPSCC e submetidos à cirurgia no Departamento de Otolaryngology- HNS, The Catholic University of Korea, Seoul, Coreia, de 1996 a 2011, foram revistos retrospectivamente. Os critérios de inscrição foram como se segue: (1) pacientes previamente não foram tratados durante HPSCC; (2) pacientes tiveram SCC comprovada por biópsia; (3) pacientes receberam a cirurgia para tratamento primário; (4) a disponibilidade das amostras patológicas originais. Os pacientes que satisfazem, pelo menos, um dos seguintes critérios foram excluídos: (1) os pacientes receberam radioquimioterapia para o tratamento primário antes de ou como uma alternativa à cirurgia; (2) doentes a serem tratados para uma recorrência do tumor primário; ou (3) os pacientes com metástases distantes no tempo de apresentação inicial. Um total de 64 pacientes preencheram estes critérios e foram incluídos no estudo. O período de acompanhamento variou de 5 a 126 meses, com média de seguimento de 32,0 meses. Em nossa instituição, a escolha inicial para a terapia radical é principalmente a cirurgia, incluindo faringectomia parcial, em que a metástase linfonodal cervical é tratada pelo esvaziamento cervical. Todos os pacientes foram tratados com ressecção do tumor primário e esvaziamento cervical. Para retirada do tumor, 12 (19%) pacientes foram submetidos a faringectomia parcial com preservação da laringe, 32 (50%) pacientes foram submetidos à laringectomia parcial com faringectomia parcial, 14 (22%) pacientes foram submetidos à laringectomia total com faringectomia parcial, 5 (8%) pacientes foram submetidos faringolaringectomia total e 1 (1%) paciente foi submetido laryngopharyngoesophagectomy total. Indicações e modalidades de rádio adjuvante (quimio) terapia variou ao longo do tempo; margens positivas ou fechar encontrados na ressecção, avançado estágio T, invasão linfática, invasão perineural, múltiplos metástase nodal, ou disseminação extracapsular foram os achados que necessitavam de um tratamento adicional. Os pacientes foram submetidos a exame endoscópico hipofaringe laringoscópica ou rígido com documentação fotográfica antes da cirurgia. Os pacientes foram classificados de acordo com a edição da classificação T /N /M da Comissão Americana conjunta sobre Câncer (AJCC).
A hibridização in situ de HPV
As secções de tecido 2007 (4- um de espessura) foram preparados a partir de tecidos, embebidos em parafina e fixados em formalina e montado em 3-revestidos por aminopropylmethoxysilane lâminas. A hibridação in situ foi processado em um sistema de referência automatizada de Ventana Medical Systems (Tucson, AZ, EUA), utilizando INFORM
® HPV III Família 16 Probe (coquetel de HPV subtipos 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45 , 51, 52, 56, e 66, Ventana Medical Systems) conforme descrito anteriormente [6], [7]. Este sistema elimina a cera de parafina do tecido, submete-lo a digestão da protease e, em seguida, o tecido hibrida com uma sonda. O complexo sonda-alvo é detectado pela acção da fosfatase alcalina no tetrazólio nitroazul e cromogénio bromochloroindolyl fosfato, que produz uma cor azul escura com um contra-corante-de-rosa para as células de HPV-negativa, devido ao vermelho rápido nuclear. Avaliação do sinal de hibridização nuclear foi realizada por um patologista que havia se especializado em cabeça e pescoço patologia (YS Lee).
A análise estatística
Para determinar a significância da associação entre a alta -risco HPV e as características clinicopatológicas, teste exato de Fisher, análise de regressão logística múltipla, análise de regressão linear múltipla e análise de correlação foram realizadas, conforme o caso. A sobrevivência foi determinada utilizando o método de Kaplan-Meier. O modelo de riscos proporcionais de Cox com as estatísticas de razão de verossimilhança foi utilizado para identificar variáveis independentemente associadas com a sobrevivência. A p 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Todos os cálculos foram realizados utilizando SPSS ver software. 16.0 (SPSS, Chicago, IL, EUA)
Resultados
As características dos pacientes
A média de idade do paciente foi de 60,6 anos (variação, 43-80 anos).; havia 63 do sexo masculino e 1 do sexo feminino. O hábito de fumar foi registrado em todos os pacientes: não-fumantes (18 pacientes nunca fumaram), fumantes no passado (6 pacientes tinham parado de fumar pelo menos um ano antes da cirurgia) ou fumantes atuais (40 pacientes continuaram a fumar). O consumo de álcool também foi registrado: 28 pacientes eram não-bebedores, 10 pacientes eram bebedores moderados (1-3 drinques por semana), e 26 pacientes eram bebedores pesados (4-7 drinques por semana). O local do tumor primário original foi gravada em todos os pacientes e compreendeu o seio piriforme em 42 pacientes, parede posterior da faringe em 19 pacientes, e na área pós-cricóide em 3 pacientes. Em relação aos estágios patológicos, foram 6, 24, 20 e 14 pacientes com T1 fase, T2, T3, T4 e os cancros, respectivamente. Em relação ao estágio dos gânglios linfáticos cervicais, foram 16, 11, 35 e 2 casos em N0, N1, N2, e N3, respectivamente. No que diz respeito a diferenciação de células de tumor, não foi de 12, 41, e 11 casos de bem diferenciado (G1), moderadamente diferenciadas (G2), e pouco diferenciado (G3) HPSCC, respectivamente. envolvimento margem patológica foi observada em 15 (23%) dos 64 pacientes, e 44 pacientes receberam radioterapia pós-operatória. invasão linfática foi observada em 43 pacientes, e disseminação extracapsular de um nó no pescoço metastático foi observada em 34 pacientes.
Relação entre a positividade de HPV de alto risco e os parâmetros clínico (Tabela 1)
High- observou HPV de risco (subtipos 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56 e 66) em 7 (10,9%) de 64 pacientes HPSCC. Houve uma correlação significativa entre os resultados de HPV de alto risco positivos e local do tumor primário (p = 0,042). A taxa de resultados de testes HPV de alto risco positivos entre os 42 pacientes com câncer de seio piriforme foi de 16,7%, enquanto que para os 19 pacientes com câncer de parede posterior da faringe e 3 pacientes com câncer de área pós-cricóide foi de 0%. exame laringoscópico do tecido hipofaringe demonstrou que 6 dos 7 pacientes (85,7%) com câncer piriforme seio HPV-positivos de alto risco mostrou uma aparência granulomatosa e exofítica, mas apenas 11 dos 35 pacientes (31,4%) com HPV de alto risco cancro do seio piriforme -negative mostrou esta aparência (p = 0,012) (Fig. 1). Além disso, a idade mais jovem e status de não-fumantes foram associados a resultados positivos de HPV de alto risco em HPSCC (p = 0,050 e p = 0,017, respectivamente). No entanto, não houve relação significativa entre o sexo, consumo de álcool, estágio T, metástase em linfonodo cervical, a diferenciação das células tumorais, invasão linfática, disseminação extracapsular e HPV de alto risco. A análise multivariada mostrou que apenas o status de não-fumantes foi significativamente correlacionada com positividade de HPV de alto risco (p = 0,015). O odds ratio foi de 18,02 (95% intervalo de confiança [IC], 1,76-184,11) para não-fumantes em comparação com os fumantes atuais.
seções verticais das amostras de cancro do seio piriforme esquerdo HPV-positivos de alto risco (B ).
Relação entre a positividade de alto risco HPV e taxa de sobrevivência
A sobrevida livre de doença em 5 anos (DFS), a sobrevida específica da doença (DSS) e sobrevida global taxa (OS) em nossa coorte foram 52%, 60% e 57%, respectivamente. Os pacientes com negatividade HPV de alto risco teve um significativamente pior em 5 anos DFS (p = 0,026) e DSS (p = 0,047) em comparação com pacientes com positividade de HPV de alto risco, de acordo com as curvas de sobrevivência de Kaplan-Meier (Tabela 2. ) (Fig. 2). Por outro lado, local do tumor primário, metástase em linfonodo cervical e disseminação extracapsular foram encontrados para ser associado com 5 anos DFS, DSS, e OS por meio de análise univariada. Multivariada Cox análise de regressão confirmaram a associação significativa entre a disseminação extracapsular e 5 anos DFS (hazard ratio [HR], 4,70; IC 95%, 1,88-11,75; p = 0,001) e DSS (HR, 4,50; 95% CI, 1.63- 12,43; p = 0,004). Detalhes da análise multivariada são apresentados na Tabela 3.
Discussão
A hipofaringe se estende desde a borda superior da epiglote eo faringoepiglótica dobras do osso hióide ao borda inferior da cartilagem cricóide. É dividido em três subsites anatômica primária: os seios piriformes, a área pós-cricóide e parede posterior da faringe [8]. HPSCC é um cancro altamente agressivo, que geralmente é diagnosticado em um estágio avançado, e, consequentemente, tem um prognóstico ruim e uma baixa taxa de sobrevivência. Tratamento multidisciplinar incluindo cirurgia, radioterapia, quimioterapia e tem sido aplicada no tratamento deste tumor, e melhorou o prognóstico dos doentes [9] – [11]. Neste estudo, foi investigada a correlação entre o HPV de alto risco e seu significado prognóstico em pacientes com HPSCC que foram tratados com cirurgia radical com ou sem terapia adjuvante. Embora uma proporção ligeiramente maior de pacientes com tumores HPV-positivos de alto risco receberam radiação adjuvante (71%, em 5 de 7 pacientes) em comparação com aqueles com tumores HPV-negativos de alto risco (68%, 39 dos 57 pacientes), a taxa de DSS-5 anos aumentou drasticamente com a positividade do HPV de alto risco (100% vs 54%). tumores HPV-negativos de alto risco parecem ser mais agressivo com ou sem radioterapia adjuvante. Os pacientes com HPSCC positivo HPV-de alto risco teve um DFS 100% e DSS. No entanto, apenas pequenas pacientes com HPSCC HPV-positivo de alto risco tratados com cirurgia primária foram incluídos neste estudo. Este resultado precisa ser testado em um maior número de HPSCC paciente tratado com cirurgia ou quimioradioterapia.
Em um estudo colaborativo internacional em oito áreas geográficas, a soroprevalência contra HPV partículas semelhantes a vírus e DNA HPV para de alto risco HPV16 e HPV18 foi relativamente baixa na Coreia [12]. Embora a prevalência da infecção pelo HPV varia de acordo com os grupos etários, áreas geográficas e métodos de detecção; a prevalência global relatado de infecção pelo HPV é de 10-15% [13]. Nós relatado anteriormente que a prevalência de infecção por HPV em cânceres de boca e orofaringe foi de 6,7% e 27,3%, respectivamente [6]. Neste estudo, a taxa positiva de HPV de alto risco de hibridação in situ foi de 10,9%. Shin et al relataram que o câncer de orofaringe relacionados com o HPV tinha aumentado significativamente durante o período 1999-2009, particularmente em homens jovens, enquanto sites de HPV-relacionado, como laringe e hipofaringe, diminuiu acentuadamente em ambos os sexos [14]. Ao longo das últimas décadas, a Coreia tem experimentado um crescimento socioeconômico rápida; que tem uma das maiores taxas de crescimento no mundo. Há rápidas mudanças no estilo de vida, incluindo o comportamento sexual na Coréia, a partir de um estilo de vida asiática conservador a um estilo de vida ocidental mais aberto. Assim, uma melhor compreensão do impacto da infecção pelo HPV e cancros associados da cabeça e pescoço serão necessários, a fim de gerir esta população crescente de forma eficaz.
No presente estudo, demonstramos que HPSCC no seio piriforme eram mais propensos a ser HPV-relacionados do que em outros subsites hipofaringe. O cancro piriforme seio surge a partir da mucosa do subsítio anatómica da hipofaringe representada como análoga a uma pirâmide invertida situado lateralmente à laringe, com a base localizado superiormente e o anterior, lateral e as paredes medial estreitando inferiormente para formar o ápice com a sua ponta estendendo-se ligeiramente abaixo da cartilagem cricóide [8]. O mecanismo exato da infecção por HPV na região hipofaringe permanece incerto, mas o fácil acesso ao seio piriforme e factores micro-ambientais favoráveis podem ser as causas da alta freqüência de HPV identificados no seio piriforme. Observamos também que o estado da infecção pelo HPV estava relacionada com as características brutas característicos dos tumores. Semelhante ao câncer de orofaringe relacionados com o HPV, câncer do seio piriforme HPV-positivos mostraram uma tendência para granulomatosa e crescimento exofítico, enquanto que HPV-negativo câncer piriforme seio tendiam a demonstrar ulcerativa ou um crescimento nulo.
Há algumas limitações para este estudo. A principal limitação é que uma análise retrospectiva foi empregado. A segunda preocupação foi viés de seleção em que apenas os pacientes tratados com cirurgia primária foram incluídos. Em terceiro lugar, os pacientes com HPSCC em diferentes subsites e estágios T não foram igualmente distribuídos. Em quarto lugar, não fomos capazes de realizar o teste do tecido HPSCC para HPV utilizando ensaios baseados em PCR. Por último, o período médio de acompanhamento deste estudo foi relativamente curto. Pensou-se que havia limitações dos dados DFS e DSS. estudos randomizados futuros potenciais, avaliando resultados oncológicos seguintes diferentes modalidades de tratamento são necessários para abordar estas questões.
Em conclusão, os resultados apresentados neste estudo sugerem que a infecção por HPV de alto risco é mais provável de ser associado a seio piriforme câncer do que câncer em outros subsites em pacientes com HPSCC. Com base nos nossos resultados, acreditamos que a infecção por HPV de alto risco é um preditor significativo de redução da recorrência e sobrevivência prolongada. Uma avaliação adequada do estado de HPV de alto risco pode fornecer informações valiosas prognóstico em pacientes com HPSCC.
Reconhecimentos
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