Abstract

Fundo

As consequências de recombinação homóloga com defeito (HR) não são compreendidas no cancro do ovário esporádico, nem têm o potencial papel de outros que BRCA1 e BRCA2 proteínas de RH foram claramente definidos. No entanto, é evidente que os defeitos em FC e outras vias de reparação de ADN são importantes para a eficácia das terapias actuais. Nossa hipótese é que um subconjunto de carcinomas de ovário esporádicos podem abrigar anomalias nas vias de RH, e que um perfil BRCAness (defeitos de RH ou outras vias de reparo de DNA) pode influenciar a taxa de resposta e sobrevida após o tratamento com drogas de platina. disponibilidade clínico de um perfil BRCAness em pacientes e /ou tumores deve melhorar os resultados do tratamento.

Objectivo

Para definir o perfil BRCAness de carcinoma de ovário esporádicos e determinar se BRCA1, PARP, FANCD2, PTEN, H2AX, ATM, e proteína P53 expressão correlaciona-se com a resposta ao tratamento, recorrência da doença e sobrevida livre de recorrência.

Materiais e Métodos

microarrays análise de proteínas de tecido de cancro do ovário foi utilizado para determinar a proteína Os níveis de expressão das proteínas de reparação de ADN definidas. Correlação com os parâmetros clínicos e patológicos em 186 pacientes com estágio avançado III-IV e grau 3 câncer de ovário foi analisada utilizando Qui-quadrado, o método de Kaplan-Meier, o modelo de riscos proporcionais de Cox, e função de incidência cumulativa.

Resultados

alta PARP, FANCD2 e BRCA1 expressões foram significativamente correlacionados uns com os outros; no entanto, a expressão da p53 elevada foi associada apenas com alta PARP e FANCD2. De todos os doentes, 9% recidiva no primeiro ano. Entre os pacientes recorrentes iniciais, 41% tinham altos níveis de PARP, FANCD2 e P53, em comparação com 19,5% dos pacientes sem recidiva precoce (p = 0,04). As mulheres com níveis elevados de PARP, FANCD2 e /ou P53 teve primeiro ano a incidência de câncer cumulativo de 17% em comparação com 7% para os demais grupos (p = 0,03).

Conclusões

Os pacientes com concomitantemente elevados níveis de PARP, FANCD2 e expressão da proteína P53 estão em maior risco de início de recorrência do câncer de ovário e de resistência de platina

Citation:. Wysham WZ, Mhawech-Fauceglia P, Li H, Hays L, siríaco S, Skrepnik T, et al. (2012) BRCAness Perfil de câncer de ovário esporádicos prevê recorrência da doença. PLoS ONE 7 (1): e30042. doi: 10.1371 /journal.pone.0030042

editor: Jun Li, Sun Yat-sen University Medical School, China

Recebido: 09 de maio de 2011; Aceito: 08 de dezembro de 2011; Publicação: 11 de janeiro de 2012

Direitos de autor: © 2012 Wysham et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este estudo foi apoiado pelo Sherie Hildreth cancro do ovário (SHOC) Foundation. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer de ovário é a segunda neoplasia ginecológica mais comum ea causa mais comum de morte entre as mulheres com câncer ginecológico. Cerca de 21.000 casos de cancro do ovário são diagnosticados anualmente, e cerca de 14.000 mortes por câncer de ovário ocorrem a cada ano [1]. Apesar de melhorias significativas foram feitas ao longo das últimas décadas para estender a esperança de vida média após o diagnóstico do câncer de ovário, menos de 30% dos pacientes pode ser curada com citorredução cirúrgica óptima e quimioterapia adjuvante padrão com um agente contendo platina e sobrevivência a longo prazo tem não melhorou [2].

os pacientes com mutações de BRCA1 ou BRCA2, genes envolvidos na reparação de quebras de cadeia dupla de DNA por recombinação homóloga (HR), aumentaram a sensibilidade à quimioterapia platina, melhorando assim a sua sobrevivência global resultado [3] – [5]. Adicionalmente, células com defeitos pré-existentes na via RH (BRCA 1 ou BRCA 2 mutação) pode ser alvo de uma segunda batida sob a forma de uma inibição da reparação de excisão de bases (BER), que leva à morte celular. Este conceito de letalidade sintética – a combinação de duas alterações genéticas, que por si sós não são letais, mas dá origem a um fenótipo letal – levou a um interesse em inibidores de vias Ber. Um tal inibidor da BER é o inibidor de poli-ADP ribose polimerase (PARP), o que faz com que as células deficientes em RH particularmente sensíveis a lesão do ADN induzida pela quimioterapia [6] – [8]. Enquanto as células normais podem reparar o dano e sobreviver, as células BRCA deficiente não pode ativar o sistema de RH e, portanto, eles morrem (6). inibidores de PARP têm demonstrado resultados promissores em pacientes com câncer de ovário BRCA1- ou BRCA2 positivo [9] – [11].

Apesar de apenas 10-15% das mulheres com câncer de ovário têm BRCA1 ou BRCA2 mutações germinativas, recente dados sugerem que os cancros do ovário esporádicos pode Harbor adquirida defeitos genéticos e ambientais em BRCA e em outros genes de reparação de ADN e de proteínas, tais como PTEN, RAD51, e anemia de Fanconi (FA) genes de [7], que podem contribuir para o “perfil BRCAness” . Dado o papel compartilhada que BRCA1 e BRCA2 têm com outros genes de reparação de ADN, estes defeitos de outras proteínas de reparação de ADN por si só poderia influenciar a resposta ao tratamento, as taxas de recorrência e sobrevivência global e aumentar a sensibilidade a inibidores de PARP. O desafio é definir perfis BRCAness no cancro do ovário esporádicos e correlacioná-la com o resultado clínico.

Assim, o objetivo deste estudo é definir o perfil BRCAness de câncer de ovário esporádico. Especificamente buscou-se determinar se a expressão de proteínas de reparo do DNA, incluindo PARP, FANCD2, BRCA1, PTEN, H2AX, ATM, bem como p53, correlacionada com a resposta ao tratamento, taxa de recidiva e sobrevida no câncer de ovário.

Materiais e Métodos

Ética Declaração

Todos os pacientes foram submetidos a estadiamento do câncer de ovário ou cirurgia debulking no Instituto do câncer Roswell Park, em Buffalo, Nova York. Todos os espécimes de patologia foram coletadas e analisadas em nossa instituição, e os tumores foram classificados de acordo com critérios da OMS [12]. Os prontuários dos pacientes foram revisados ​​retrospectivamente ao abrigo de um protocolo Instituto do Câncer Roswell Park Institutional Review Board aprovou que requer o consentimento escrito do paciente. A revisão incluiu o tratamento saída e hospitalar, incluindo cirurgia e quimioterapia. a sobrevivência e o tempo de progressão foram determinados geral, cada medido a partir do momento do diagnóstico (no momento da cirurgia inicial). A progressão foi definida como evidência objectiva de recorrência. A duração da sobrevivência global foi o intervalo entre o diagnóstico e morte. tempo de observação foi o intervalo entre o diagnóstico eo último contato (morte ou último follow-up). Os dados foram censurados no último follow-up para os pacientes sem evidência de recorrência, progressão ou morte.

Os anticorpos

Foram utilizados seis anticorpos monoclonais primários disponíveis comercialmente, específico para ATM (Abcam, Boston, MA), BRCA1 (laboratório Biocare, Concord, CA), FANCD2 (Epitomics, San Francisco, CA), PARP (Abcam), p53 (Novacastra, Lica Microsystems, Buffalo Grove, IL), PTEN (Millipore, Billerica, MA ), e um anticorpo policlonal para H2AX (Bethyl Laboratories, Montgomery, TX) (Tabela 1). A detecção foi realizada utilizando o método do complexo avidina-biotina peroxidase (LASB-kit, DakoCytomation, Glostrup, Dinamarca).

Tissue MicroArray Preparação

tecidos

parafina-encaixadas de 202 pacientes com cancro do ovário foram utilizados para construir microarrays de tecido tal como descrito anteriormente por Kononen et al. [13]. Resumidamente, depois cuidadosamente a escolha da região morfologicamente representante da hematoxilina-eosina (HE) secção, 0,6 mM núcleos foram perfurados a partir dos blocos embebidos em parafina individuais (blocos dadores), e transferido para o bloco receptor incluídos em parafina (bloco receptor). Para superar a heterogeneidade do tumor, biópsias foram realizadas a partir de três diferentes áreas de cada tumor. Uma parte foi corada com H E para confirmar a presença do tumor por microscopia de luz

As secções foram incubadas com anticorpos para ATM, BRCA1, FANCD2, PTEN, H2AX, PARP, e p53 (Tabela 1).. A HRP polímero marcado com enzima-biotina livre do sistema de detecção Além disso Envision (DakoCytomation) foi utilizada como um reagente secundário. O complexo de diaminobenzidina foi utilizada como um cromogénio. Como um controlo positivo, o adenocarcinoma do endométrio endometrióide foi usada para PTEN, carcinoma do ovário seroso para a p53, o carcinoma da mama para a PARP, ATM e BRCA1, amígdalas normal para FANCD2, e carcinoma de células escamosas de H2AX. Para controlos negativos, um soro normal de cabra foi utilizado em vez do anticorpo primário. O grau de reactividade imunoquímico foi classificada com base na intensidade da seguinte maneira: 0 (fundo), 1+ (luz), 2+ (moderada), 3+ (forte). lâminas de controlo negativos omitindo o anticorpo primário foram incluídos em todos os ensaios

Análises Estatísticas

As análises estatísticas foram realizadas utilizando o software estatístico SAS. (versão 9.2; SAS Institute Inc, Cary, NC). Os sete proteínas de reparo do DNA (perfil BRCAness) foram medidos no início do estudo e foram agrupados como negativo (ou nenhuma coloração luz) e (coloração moderada ou forte) positiva com base na intensidade de coloração. As associações entre o estado inicial do câncer (grau, palco, tipo histológico e presença de tumor residual) e perfil BRCAness e as associações entre p53, PARP, FANCD2 e BRCA1 foram examinadas usando o qui-quadrado e testes de tendência Cochran Armitage.

Sempre que possível, o tempo desde o diagnóstico até a progressão /recorrência nos primeiros 3 anos foi examinada. Os pacientes que morreram dentro de 3 anos foram censurados no momento da morte, e pacientes que tiveram recidiva após 3 anos ou que não tiveram recorrência também foram censurados em 3 anos. A correlação de cada intensidade de coloração proteína e concorrência de múltiplos níveis elevados de proteínas com sobrevida livre de recidiva de 3 anos foram avaliados pelo método de Kaplan-Meier (KM). Os resultados do método de Km foram, então, verificada por taxas de incidência cumulativos com o evento definido como recorrência e o risco competindo definida como a morte não-retorno usando a função cumulativa incidência [14]. idade e estado de câncer taxa de risco ajustado de recorrência de 3 anos foi estimada utilizando o modelo de riscos proporcionais de Cox. Associação entre concordância de vários níveis elevados de proteínas e status de recorrência em 6 meses e 1 ano também foram exploradas. Todos os valores p relatados são frente e verso, e um valor de p . 0,05 foi considerado estatisticamente significativo

Resultados

As características dos pacientes no início do estudo estão resumidos na Tabela 2. Um total de 186 de 202 pacientes foram estudados. A idade média da população do estudo foi de 62 anos (variando de 33 a 89) ea duração média de follow-up de recorrência foi de 22 meses (intervalo de 20 dias a 3 anos). Como esperado, a maioria dos pacientes tinha pouco diferenciado, de grau 3 cancros (161/186, 86,6%), fase III ou IV da doença (174/186, 93,5%), e histologia serosa (164/186, 88,2%). No momento da cirurgia 59 pacientes não tinham doença residual, enquanto 125 pacientes tiveram pelo menos mínima doença residual. Todos os pacientes receberam à base de platina primeira linha de quimioterapia. A sobrevida global estimado mediana para todos os pacientes foi de 40,7 meses (IC 95%, 36.8-45.0 meses). A sobrevivência entre os pacientes com ausência de tumor residual (58,1%) e presença de tumor residual (59,7%) foram semelhantes.

A expressão de proteínas de reparo de DNA em câncer epitelial de ovário

A a expressão da proteína de ATM, FANCD2, PARP, PTEN, H2AX, BRCA1 e p53 em amostras de tumor de ovário epitelial foi investigada por imunocitoquímica e suas associações com recorrência do cancro do ovário em 3 anos encontram-se resumidos na Tabela 3. PARP foi positiva em 111 (60%) dos casos, FANCD2 foi positiva em 68 casos (39%), H2AX foi positivo em 59% e p53 em 55% dos casos. Em contraste, a maioria dos tumores foram negativos para BRCA1 (87%), PTEN (em 89%) e ATM (92%). Apesar de não ser estatisticamente significativa, KM estimado sobrevivências livre de recidiva de 3 anos para pacientes com alta PARP (56,5% vs. 67,5%) e alta FANCD2 (55,5% vs. 66,9%) eram mais de 10% menor do que os seus homólogos de baixa coloração. Pacientes com níveis elevados de PARP e /ou FANCD2 eram mais propensos a também têm alta p53, 66% em ambos positivos, 53% em qualquer um positivo, e 43% em ambos negativos foram encontrados têm p53 positivo (P = 0,01, Figura 1). Globalmente, foi observada a expressão de qualquer das FANCD2 ou PARP em 35% dos espécimes. A co-expressão de PARP e FANCD2 foi demonstrada em 56 de 173 amostras (32%). Alta expressão de PARP, FANCD2 e BRCA1 foram significativamente associados uns com os outros, enquanto que nenhuma associação entre BRCA1 e p53 foi encontrado (dados não mostrados).

Associação entre PARP, FANCD2, e p53. Pacientes com PARP positivo ou FANCD2 positivo foram mais propensos a ter P53 positivo. Os pacientes positivos para ambos PARP e FANCD2 foram estatisticamente mais propensos a mancha positiva para P53.

Correlação de FANCD2 e Expressão PARP com o resultado clínico

Os pacientes foram divididos em cinco mutuamente grupos exclusivos com base na sua expressão de PARP, FANCD2, e p53 (Figura 2). As amostras coradas negativo para as três proteínas em 31 pacientes (18%), positivos para p53 sozinha em 51 pacientes (30%), e positivo para FANCD2 e PARP apenas em 19 pacientes (11%). Mais de 40% dos pacientes com PARP positiva e /ou FANCD2 tinha superexpressão da proteína p53, incluindo 37 (22%), com sobre-expressão de todas as 3 proteínas, e 32 (19%) com o p53 e PARP ou FANCD2 superexpressão. KM estimado curvas de sobrevida livre de recidiva de 3 anos para estes grupos mutuamente exclusivos de p53, PARP e FANCD2 são apresentados na Figura 3, e o impacto do perfil BRCAness na sobrevida livre de recorrência é mostrada na Tabela 4. As diferenças na sobrevivência de mais do que foi observado em 10% de 12 meses e cerca de 20% aos 24 meses entre o grupo com coloração positiva para todas as três proteínas (p53, e PARP FANCD2) e o grupo com todos os três coloração negativa. A sobrevivência tenderam em direção a ser mais curto em todos os três grupos positivos em comparação com os outros grupos, embora isso não foi estatisticamente significativo neste pequeno tamanho da amostra (Figura 3A). Nós ainda mais estimadas curvas de sobrevida livre de recidiva de 3 anos entre os pacientes com níveis elevados de todas as três proteínas (p53, PARP, FANCD2) e “outros” pacientes como mostrado na Figura 3B. Pacientes com todos os níveis elevados eram mais propensos a ter recorrência anterior no prazo de 3 anos, em comparação a todos os outros pacientes (p = 0,03). Aos 12 meses após o diagnóstico, a sobrevida livre de recorrência foi de 81% para pacientes com todos os níveis positivos de PARP, FANCD2 e p53, enquanto os demais pacientes tiveram uma taxa de sobrevida livre de recorrência de 92%. Aos 18 meses, a sobrevida livre de recorrência foi de 64% para o grupo com todas as três proteínas positivas e 81% para todos os outros, e a taxa de recorrência incidência cumulativa foi de 16,5% para os pacientes com todos os altos níveis de PARP, FANCD2 e p53 em comparação com 31,8% para os outros pacientes. Pacientes com níveis elevados concomitantes de PARP, FANCD2 e p53 foram duas vezes mais propensos a ter recorrência dentro de 3 anos, após o ajuste para idade e estado câncer no momento do diagnóstico (Tabela 4). O impacto potencial de tumor residual e outros fatores clínicos de base sobre recidiva precoce foi contabilizada usando análise multivariada. Notavelmente, a presença de tumor residual não foi associada com a recorrência da doença. No entanto, os pacientes com tumor residual após a cirurgia inicial tendem a ter PARP positivo, FANCD2, e expressão da p53 em comparação com o grupo sem tumor residual (26% vs 14%, P = 0,07).

Distribuição de cinco mutuamente grupos exclusivos de P53, PARP, e FANCD2. 37 pacientes (22%) foram positivos para todas as três proteínas.

Kaplan-Meier estimado curvas de sobrevida livre de recidiva de 3 anos. A: Não houve diferença na sobrevida livre de recorrência quando cada um dos 5 grupos mutuamente exclusivos por expressão de PARP, FANCD2 e P53 foram examinadas de forma independente. B: Os pacientes positivos para todos os três PARP, FANCD2 e P53 teve sobrevida livre de recidiva menor em comparação com os pacientes não positivos para todos os três

Neste estudo, definiu-se resistentes às doenças platina como. doença recorrente no prazo de 12 meses após a conclusão do tratamento primário, embora reconhecendo que a definição padrão mais marcaria resistência de platina como recorrência após 6 meses. Por conseguinte, a Figura 4 explora a expressão concomitante de PARP, FANCD2 e p53 em pacientes com e sem 6 meses e 12 meses de recorrência. Entre os 4 pacientes que tiveram recorrência dentro de 6 meses, 2 (50%) tinham todos os 3 positiva, enquanto 34 dos 162 (21%) sem recorrência tinham todos os 3 níveis positivos. Entre os 17 pacientes que recidiva no primeiro ano após o diagnóstico, aproximadamente, 41% (7/17) apresentavam tumores com altos níveis de todas as 3 proteínas, em comparação com 19% (29/149) com todos os 3 positivo em nenhum grupo de recorrência (P = 0,04). Portanto, recidiva precoce, que é representante da doença resistentes platina, parece estar marcada por altos níveis concomitantes de PARP, FANCD2 e p53.

Associação entre P53 positivo, PARP, e FANCD2 em pacientes com e sem recidiva precoce . Os pacientes com recidiva precoce em ambos os 6 e 12 meses após o diagnóstico eram muito mais propensos a ter altos níveis de todos os 3 proteínas (50% em 6 meses e 41,2% em 12 meses).

Discussão

recentemente, o papel dos genes de reparação de ADN e das proteínas no cancro do ovário, o conceito de BRCAness de cancros do ovário, bem como o mecanismo de letalidade sintética emergiu como essenciais para a compreensão da patogénese do cancro do ovário e vias para novos tratamentos [7], [8]. Como 20% dos carcinomas do ovário esporádicos serosos têm alto grau BRCA1 e BRCA2, o papel de RH em cancro do ovário tem sido bem estabelecida [15], [16]. No entanto, muitos cancros do ovário hereditários e esporádicos não possuem mutações de BRCA ou expressão BRCA alterada e, assim, argumentou que a perda de outras proteínas de RH pode contribuir para câncer de ovário. Na verdade, o silenciamento de epigenética FANCF através de metilação do promotor [17] e níveis reduzidos de FANCD2 [18] ter sido anteriormente detectada no cancro do ovário. Nós mais fundamentada de que a sobre-expressão de diferentes proteínas de RH podem ser responsáveis ​​por platina-resistência adquirida e, por conseguinte, pode ser utilizado como uma tela potencial para (i) a identificar os pacientes com maior risco de recorrência e (ii) identificar novos alvos terapêuticos. Para medir a BRCAness (isto é, o RH) perfil de cancros do ovário esporádicos, utilizou-se a imunocitoquímica (HIC) para examinar a expressão da proteína das proteínas de resposta a danos no ADN FANCD2, BRCA1, PARP, H2AX, e ATM, assim como PTEN e p53, supressora de tumores genes que também têm uma função na manutenção da estabilidade genômica envolvendo-se em reparação do ADN [19] -. [25], em um painel de carcinomas de ovário esporádicos

Para o nosso conhecimento, não houve nenhuma análise sistemática anterior do ATM e expressão H2AX em cancros do ovário. Aqui descobrimos que as proteínas foram expressas em 46% e 59% de nossas amostras, respectivamente, o que pode indicar a sua expressão potencialmente compensatório em células deficientes de RH.

Apoiar o papel de p53 e PTEN como supressores tumorais, a maioria dos carcinomas do ovário testadas foi positivo para a p53 (55%), como o anticorpo de tipo selvagem e detecta tanto formas mutadas de p53, e negativo para a expressão de PTEN (89%). Estes resultados são semelhantes a outros estudos com cancros avançados [21] – [22].

Curiosamente, descobrimos que 86,7% dos casos tinham ICH BRCA1 negativo. A maioria dos estudos anteriores sobre deficiência de BRCA1 em cancro do ovário esporádicos têm-se centrado na análise mutacional, estudos de metilação e expressão de genes, com apenas alguns estudos imunocitoquímicos. Um relatório recente da Skytte et al. revelou negativo BRCA ICH em apenas 20% dos cancros do ovário [26]. Estas diferenças podem ser explicadas pela utilização de diferentes anticorpos para detectar a proteína BRCA [27]. De fato, em um estudo comparativo de 84 casos com cancro da mama esporádicos com quatro anticorpos anti-BRCA diferentes, Al-Mulla et al. detectada a perda de proteína BRCA1 expressão em 83% dos casos, utilizando o mesmo anticorpo AB BRCA-1, contra o epitopo do terminal N [28]. No estudo NCIC que se correlacionou expressão da proteína BRCA1 pelo ICH com os correspondentes dados clínicos, 251 amostras de cancro do ovário foram analisados ​​utilizando um anticorpo monoclonal de ratinho de BRCA1 (MS110, Calbiochem, Alemanha) e 65% dos tumores não apresentaram coloração ou coloração muito leve [29 ]. O anticorpo utilizado no presente estudo foi diferente dos anticorpos utilizados nos estudos anteriores. Além disso, por causa do pequeno tamanho da amostra em nosso estudo e da mesma forma no estudo NCIC, a nossa pontuação agrupados os resultados de coloração de quatro categorias para negativo (sem ou fraco) e positiva (moderada ou forte) com base na intensidade de coloração. Resta, portanto, necessária para futuros estudos para delinear claramente as diretrizes para a coloração BRCA1 e pontuação em estudos desse marcador. No entanto, a perda de BRCA1 na maioria dos tumores do nosso estudo, juntamente com o aumento da expressão da PARP na maioria dos tipos de cancro (discutido abaixo) sugere que a PARP supra-regulação pode ser um mecanismo compensatório pelas células cancerosas para resistir à morte induzida por platina-terapia .

Os nossos resultados com PARP também são consistentes com estudos anteriores. Encontrámos alta expressão de PARP em 60% dos espécimes, semelhante à relatórios anteriores que sugerem coloração da proteína PARP positivo em 76% dos carcinomas do ovário [26]. coloração FANCD2 moderada foi encontrado na maioria (85%) a fase I carcinomas serosos do ovário [Pejović, dados não publicados], enquanto que nesta série, descobrimos que 40% dos carcinomas serosos avançados sobre-expressar FANCD2. Assim, a sobreexpressão de FANCD2, para além de PARP pode aumentar a capacidade de células para reparar o DNA double e quebras de cadeia simples contribuindo para a resistência de platina.

Sinergia entre PARP, FANCD2 e expressão da proteína p53 é um dos marcante resultados do nosso estudo. Os tumores com expressão elevada de PARP e /ou FANCD2 eram mais propensos a exibir a sobre-expressão de p53. O perfil proteico definido pela expressão elevada de todas as três proteínas de PARP, FANCD2, e p53 está associada com um risco elevado de recidiva. Não só foi a taxa de recorrência de três anos, duas vezes tão alta neste grupo, mas é particularmente notável que mais de metade dos doentes recorrentes dentro dos primeiros 12 meses após o tratamento primário (doença resistente a platina) tinham significativamente elevados de expressão destas três proteínas. Este sub-grupo de pacientes com particularmente difícil de tratar o cancro do ovário não foi anteriormente identificada por outra proteína ou perfis moleculares. Assim, estes resultados permitem tanto a identificação de mulheres em maior risco de recaída e sugerir potenciais alvos terapêuticos. Recentemente, resultados promissores foram relatados em um estudo de fase II clínica do inibidor PARP BSI-201 (iniparib) em combinação com gemcitabina e carboplatina em 19 pacientes com câncer de ovário resistentes platina [30].

Nosso estudo tem várias limitações . Primeiro, porém, examinamos 186 pacientes, este ainda é um tamanho de amostra limitada para todas as correlações clínicas examinadas. Em segundo lugar, os pacientes que são portadores de BRCA1 e BRCA2 não foram identificados neste estudo. As diretrizes rígidas para estudos de prognóstico usando imunocitoquímica, utilizando critérios padronizados ainda estão sendo desenvolvidos. Também examinámos apenas um subconjunto das proteínas de reparação de ADN, enquanto que a inclusão de outras proteínas envolvidas na AR, tais como ATR, CHK2 ou RAD51, e estudos funcionais de formação RAD51 focos para avaliar a sensibilidade destas células para PARP (e FANCD2) inibição são atualmente em andamento.

Finalmente, enquanto nós acreditamos que os resultados mais importantes do estudo são: (i) identificação de um perfil BRCAness que não está associado a BRCA1 e (ii) associação desse tipo de câncer de ovário triple-positivo ( FANCD2 + /PARP + /P53 +) com recorrência muito precoce de câncer de ovário e, portanto, resistência de platina. Esses pacientes podem se beneficiar da dupla inibição da FANCD2 e PARP e /ou pequenas moléculas alvo p53 mutante. De facto, a inibição da via /BRCA FA em cancros esporádicos por diferentes compostos, incluindo circumin, foi mostrado para sensibilizar cancros a agentes de platina [31]. Assim, o tratamento combinado de inibidores da via de FA /BRCA inibidores de PARP e já em ensaios clínicos podem ser um tratamento eficaz para pacientes com recidiva que foram identificados para sobre-expressar FANCD2 e PARP.