Abstract

Fundo

O significado prognóstico de células tumorais circulantes (CTCs) detectados em pacientes com cancro do pulmão de células não pequenas-(NSCLC) ainda é inconsistente. Nosso objetivo foi avaliar a relevância prognóstica de CTCs usando uma meta-análise.

Métodos

Foram pesquisados ​​PubMed, Web of Science e EMBASE para estudos relevantes que avaliaram a relevância prognóstica de CTCs no NSCLC. As análises estatísticas foram realizadas para calcular a incidência resumo, odds ratio, riscos relativos (RR) e intervalos de confiança de 95% (IC), utilizando fixa ou modelos de efeitos aleatórios de acordo com a heterogeneidade dos estudos incluídos.

Resultados

Um total de 20 estudos, abrangendo 1576 pacientes, preencheram os critérios de inclusão. Em estudos identificados, CTCs não se correlacionaram com a histologia (adenocarcinoma vs carcinoma de células escamosas) (odds ratio [OR] = 0,88; 95% intervalo de confiança [CI]: 0,59-1,33; Z = -0,61;

P

= 0,545). No entanto, análises combinadas mostrou que CTCs foram associados com metástases em linfonodos (OR = 2,06; IC 95%: 1,18-3,62; Z = 2,20;

P

= 0,027) e estágio do tumor (OR = 1,95; 95% CI: 1,08-3,54; Z = 2,53;

P

= 0,011). Além disso, CTCs foram significativamente associados com menor sobrevida global (risco relativo [RR] = 2,19; IC 95%: 1,53-3,12; Z = 4,32;

P Art 0,0001) e livre de progressão /livre de doença sobrevida (RR = 2,14; IC 95%: 1,36-3,38; Z = 3,28;

P Art 0,0001)

Conclusão

A presença de CTCs indica um pobre. prognóstico em pacientes com NSCLC. Além disso bem desenhados estudos prospectivos são necessários para explorar as aplicações clínicas de CTCs no cancro do pulmão

Citation:. Huang J, K Wang, Xu J, Huang J, Zhang T (2013) significado prognóstico da circulação Células Tumorais em Non-Small-Cell Lung Cancer doentes: a Meta-Analysis. PLoS ONE 8 (11): e78070. doi: 10.1371 /journal.pone.0078070

editor: Pierlorenzo Pallante, Institute of Experimental Endocrinology and Oncology “G. Salvatore ‘(IEOS), Itália |

Recebido: 27 de maio de 2013; Aceito: 16 de setembro de 2013; Publicação: 04 de novembro de 2013

Direitos de autor: © 2013 Huang et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Os autores não têm apoio ou financiamento para relatar

Conflito de interesses:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

câncer de pulmão primário é a principal causa de câncer. relacionado com a morte em todo o mundo, e cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) é responsável por 85% das mortes [1]. A frequente ocorrência de metástases à distância é a principal causa de mortalidade elevada. Embora histologia e estágio são usados ​​atualmente o fator prognóstico em NSCLC paciente follow-up, 25% a 50% dos pacientes com recorrência em estágio inicial NSCLC show de tumor [2]. Além disso, mesmo em pacientes sem metástases à distância clinicamente detectável no momento do diagnóstico inicial, micrometástases distante pode freqüentemente desenvolvem durante o diagnóstico, mesmo submetidos a cirurgia. Portanto, marcadores prognósticos e preditivos sensíveis é urgentemente necessária no pulmão oncologia clínica. Em pacientes com NSCLC, detecção de células tumorais circulantes (CTCs) podem mostrar benefícios clínicos no diagnóstico e tratamento.

CTCs são células tumorais que são eliminados a partir do tumor primário, que flui através da corrente sanguínea e circulam por todo o corpo. O primeiro relatório sobre as células tumorais metastáticas em veias de drenagem foi de Ashworth em 1869 [3]. Nos últimos anos, vários ensaios CTC novos são desenvolvidos e utilizados para a sua detecção, incluindo imunocitoquímica (ICC), reacção em cadeia da polimerase (RT-PCR), e o Sistema de CellSearch transcriptase reversa-[4] – [6]. Entre os vários métodos de detecção, o sistema de CellSearch é introduzido para uso clínico pela FDA EUA. Este sistema usa a purificação imunomagnética com anticorpos contra a molécula de adesão celular epitelial (EpCAM), a partir de sangue periférico. Em relação à especificidade do CellSearch, é a utilização de expressão EpCAM como mecanismo de detecção CTC. Consequentemente, CTCs que baixa ou ausente EpCAM expressão são fácil perder. Diversos trabalhos têm demonstrado tecnologias de detecção alternativos, com base em EpCAM ou outro antígeno com maior sensibilidade aparente do que CellSearch [7], [8], e mais estudos para maior clínica são garantidos.

Recentemente, uma análise agrupada em mama e cancro colorectal demonstrou o significado prognóstico de CTCs, e mudanças no número de CTC com a terapia padrão destacou o potencial de CTCs [9], [10]. No entanto, em pacientes com NSCLC, ainda permanece controversa quanto à incidência de CTCs e o significado clínico no cancro NSCLC. Alguns estudos têm relatado que a detecção de células tumorais no sangue é significativamente associada com menor sobrevida [11], [12]. Em contraste, outros estudos não conseguiram demonstrar essa associação entre a presença de CTCs e um pior prognóstico [13]. Portanto, para resolver o valor prognóstico de CTCs em pacientes com NSCLC, foi realizada uma meta-análise para determinar a associação do status de CTCs com os parâmetros clínico, incluindo histologia, estágio do tumor, metástases em linfonodos, e sobrevida dos pacientes.

Materiais e Métodos

Pesquisa de publicação

Realizamos uma revisão independente de citações de PubMed (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/) entre 01 de janeiro de 2000 , e 1 de Janeiro de 2013. palavras-chave estavam circulando célula tumoral (s), cancro do pulmão, ou neoplasia pulmonar. A estratégia de busca utilizados termos de texto, tais como células circulantes câncer, CTCs, células epiteliais no sangue e cancro do pulmão de células não pequenas para identificar informações relevantes também. Também realizamos pesquisas independentes, utilizando Web of Science e EMBASE, para garantir que não há artigos foram negligenciados. Além disso, os artigos relevantes foram identificados a partir de referências citadas dos artigos recuperados e artigos de revisão por uma busca manual

Os critérios de elegibilidade

Os estudos foram incluídos na meta-análise de acordo com o seguinte: (1). quando a presença do estado CTC e ou estágio da doença ou sobrevivência (sobrevivência global [oS] e /ou sobrevida livre de progressão [PFS]) dados de NSCLC foram investigados; (2) quando os investigadores forneceram informações relevantes para estimar odds ratio (OR) ou os riscos relativos (RR); e (3) quando os mesmos autores relataram uma série de resultados em várias publicações, apenas o último foi incluído na análise. Estudos que não relataram qualquer resultado clínico foram excluídos. Estudos com menos de 20 pacientes analisados, avaliações e comentários também foram excluídos

Os dados de extração

Foram registradas as seguintes informações de cada papel elegíveis:. O nome do autor, país do paciente, ano de publicação, número dos pacientes, estadiamento do tumor, os métodos de detecção de CTC, a taxa de detecção e valor de corte de CTCs. De acordo com o objetivo do estudo, foram realizados dois tipos de análise: a primeira análise determinar se o status CTC está correlacionada com os parâmetros clínico, que incluiu a histologia (adenocarcinoma vs carcinoma de células escamosas), metástase linfonodal, e estágio do câncer (T

1 + T

2 vs T

3 + T

4). A segunda análise determinar se o status CTC está associada com OS ou a sobrevivência PFS /livre de doença (DFS).

A análise estatística

Survival dados de cada estudo foram coletados de documentos originais ou calculado conforme descrito por Parmar et al [14]. As RUP agrupados e RRS com intervalos de confiança de 95% (IC) para a sobrevivência foram calculados por modelos fixos ou de efeitos aleatórios. Heterogeneidade entre os estudos foi avaliada com o teste Q do Cochran e

P valores

. Quando

P

foi inferior a 0,05, foi utilizada uma estimativa de efeitos aleatórios. Caso contrário, uma estimativa modelo de efeitos fixos foi apresentado. viés de publicação foi avaliada usando o gráfico de funil e o teste de Egger, eo método “trim-and-fill” foi avaliar o efeito do viés de publicação sobre a estimativa combinada. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando o software R /metafor versão 2.14.0.

P

valores inferiores a 0,05 foram considerados estatisticamente significativos.

Resultados

Descrição dos estudos

O presente trabalho seguiu as diretrizes para revisões sistemáticas e meta- análises (PRISMA) (Checklist S1). A busca sistemática da literatura rendeu um total de 416 registros (Figura 1). Após a triagem dos títulos, resumos e textos completos, 396 artigos foram excluídos devido a publicações irrelevantes, artigos de revisão, duplicatas e estudos sobrepostas. Finalmente, 20 publicações preencheram os critérios para análise, compreendendo 1576 pacientes [2], [11] – [13], [15] – [30]. O tamanho da amostra por estudo variou de 24 a 208 pacientes, e os estudos foram publicados entre 2002 e 2012. As principais características dos estudos incluídos estão resumidos na Tabela 1. Houve três tipos de métodos para a avaliação do estado de CTCs em amostras de sangue: RT -PCR, ICC, eo sistema CellSearch. 8 estudos utilizaram técnicas de RT-PCR para avaliar o estado CTCs e 8 estudos utilizaram técnicas de ICC. Estes estudos utilizando antigénio de células epiteliais foram variadas, incluindo o CEA, CK, ERCC1 e outro antigénio. Quatro estudos utilizaram o método CellSearch, o corte de CTCs foram fixados em ≥1 ou ≥2 por 7,5 ml de sangue.

Correlação de CTCs com os parâmetros clínico

Dez estudos foram disponíveis para investigar a relação entre o estado do CTC e histologia (adenocarcinoma vs carcinoma de células escamosas) (Figura 2). A estimativa é agrupada OR foi de 0,88 (IC 95%: 0,59-1,33; Z = -0,61;

P

= 0,545 de efeito fixo), demonstrando que a presença de CTCs não foi associada com a histologia. O viés heterogeneidade e publicação entre os estudos não foi significativamente diferente (Tabela S1). Cinco estudos avaliaram a relação entre o estado CTC e metástases em linfonodos (Figura 3). Descobrimos que a presença de CTCs foi associada a um aumento significativo do risco de metástases linfonodais em pacientes com NSCLC (agrupada OR = 1,95; IC 95%: 1,08-3,54; Z = 2,20;

P = 0,027

fixo efeito). Houve também uma associação significativa entre o estado CTC e estágio do tumor (agrupada OR = 2,15; IC 95%: 1,19-3,74; Z = 2,53;

P = 0,011

random-efeito) (Figura 4), mostrando que a presença de CTC foi associado com um aumento significativo do risco de progressão. Além disso, nenhum preconceito heterogeneidade ou publicação significativa foi indicada pelo teste de Egger.

Efeito da presença de CTCs no OS em NSCLC

A análise de sobrevida de acordo com a CTC estatuto foi realizada em 13 de 20 estudos (65%), correspondendo a 1072 pacientes. OS foi analisada em 11 (936 pacientes) estudos. Porque a heterogeneidade entre os estudos foi inferior a 0,05 (Q = 54,

P Art 0,0001), a RR combinado estimado para os estudos foi calculada usando um modelo de efeito aleatório. A RR reunidas mostrou que a presença de CTCs foi altamente correlacionada com a má OS (RR = 2,19; IC 95%: 1,53-3,12; Z = 4,32;

P Art 0,0001) (Figura 5). Além disso, utilizando técnicas de detecção varia análises mostraram resultados semelhantes sub-grupo. Meta-regressão foi realizada para explorar as potenciais fontes de heterogeneidade utilizando as seguintes co-variáveis: ano de publicação, tamanho da amostra, o estágio do tumor, e método de detecção. A análise univariada não identificou nenhuma co-variável significativamente associada com estimativas RR para OS (

P Art 0,05) (Tabela S2). No viés de publicação significativa foi detectada pelo teste de Egger.

Ela mostrou que pacientes com CTCs têm uma sobrevivência mais pobre em comparação com aqueles sem CTCs.

No que respeita à PFS /DFS, sete estudos estavam disponíveis que compreendia 634 pacientes. O RR combinado mostrou que a presença de CTC foi associado com um aumento significativo do risco de mortalidade (RR = 2,14; 95% CI: 1,36-3,38; Z = 3,28;

P

0,0001 aleatório efeito) ( A Figura 6). O teste de Egger não identificou significativa heterogeneidade ou viés de publicação.

Discussão

Nesta meta-análise, forneceram evidências de uma associação entre a presença de CTCs detectados no sangue e clínica os resultados em pacientes com NSCLC. Anteriores vários estudos em pequena escala mostrou que os resultados clínicos mostraram uma pior sobrevida em pacientes quando CTCs foram detectados. Por isso, foi necessária uma meta-análise quantitativa dos resultados do estudo. Os resultados da avaliação colectiva da literatura sobre NSCLC indicam que a presença de CTC pode ser um marcador de prognóstico.

NSCLC, em oposição a SCLC, é uma família heterogénea no que diz respeito a histologia e as características biológicas [31] . Diferentes pacientes com NSCLC e células diferentes dentro de um tumor expressam diferentes quantidades de transcritos de genes marcadores. No presente estudo, mostramos que o uso de diferentes abordagens, tais como RT-PCR, ICC, e CellSearch, confirmou que CTCs representam uma meta-risco significativo tanto para OS e PFS em NSCLC, mesmo após o ajuste para viés de publicação. Isto é consistente com relatórios prévios de meta-análise no cancro da mama, sugerindo que este marcador podem ser desenvolvidos para aplicações clínicas.

Em relação ao número detectado, estudos prévios relataram que 30% de NSCLC foi ≥1 por 7,5 CTC ml de sangue detectado por CellSearch, que 15% foi ≥ 5 CTCs, eo CTC contagem aumentou significativamente com metástases à distância do que em pacientes sem [32], [33]. Krebs et al. mostraram que o número e a alteração no número de CTC é um factor de prognóstico em pacientes com ≥IIIA fase [25]. Entre os pacientes com NSCLC, aqueles com ≥ 5 CTCs foram significativamente pior prognóstico em comparação com pacientes com 5 CTCs. No entanto, poucos estudos tinham avaliado por subclasstion de enumerar CTCs em pacientes com NSCLC. Mais estudos são necessários para avaliar os níveis relevantes prognósticos CTC de corte.

Há limitações para esta meta-análise. Em primeiro lugar, alguns dados utilizadas estimativas não ajustadas, porque nem todos os artigos publicados apresentou estimativas ajustadas, resultando em análise menos confiável do que a análise directa de variância. No entanto, as conclusões não eram susceptíveis de ser significativamente alterada se esses estudos foram ajustados. Em segundo lugar, ensaios de detecção CTC variou em nosso estudo. Em particular, os diferentes pontos finais, medição e desenho experimental, pode ter influenciado em parte a importância do resultado clínico-patológico em análises de sobrevivência. Idealmente, as medições devem ser realizadas através de grandes estudos prospectivos com base em estatísticas publicadas homogêneos.

Em conclusão, a evidência disponível suporta que CTCs estão associados com o estágio do tumor e metástases linfonodais, mas não com a histologia. Além disso, a presença dos CTC está associada a um pior resultado de uma falta de CTC e CTC estão fortemente associados com a sobrevivência reduzida. decisões Terapia pode basear-se em resultados CTC, o que pode ser útil para determinar quais os doentes que potencialmente beneficiar da terapia adjuvante. Estes necessitam de validação em coortes prospectivamente clínicos maiores.

Informações de Apoio

Tabela S1. O teste de

Egger de assimetria gráfico de funil

doi:. 10.1371 /journal.pone.0078070.s001

(DOC)

Tabela S2. .

Os resultados da análise de meta-regressão explorando fonte de heterogeneidade, com sobrevida global

doi: 10.1371 /journal.pone.0078070.s002

(DOC)

Checklist S1.

PRISMA lista

doi:. 10.1371 /journal.pone.0078070.s003

(DOC)