Abstract

Este estudo teve como objetivo determinar a correlação entre a HIF-1α e expressão de miR-27a e avaliar o efeito de inibição da expressão de HIF-1α na expressão de miR-27a e resistência a drogas em câncer gástrico ( GC). No presente estudo, Real-Time PCR e Western blot foram realizados para detectar a expressão de HIF-1α GC em tecidos e linhas celulares. Em seguida, as células OCUM-2MD3 /L-OHP foram transfectadas com HIF-1α-siRNA, um mímico de miR-27a ou pcDNA-HIF-1α, e a sobrevivência celular foi determinada através de um ensaio MTT. A expressão de HIF-1α, miR-27a, e genes relacionados-MDR foi medida através de PCR em Tempo Real e Western blot. Chip e ensaios de actividade de luciferase dupla foram realizados para avaliar a regulação da transcrição de HIF-1α e miR-27a. Os resultados revelaram que a transfecção com o HIF-1α-siRNA diminuiu marcadamente os níveis de miR-27a, resultando em inibição da drasticamente aumentada a taxa de proliferação de células-OCUM 2MD3 /L-OHP. Em comparação com células não transf ectadas, a taxa de sobrevivência foi significativamente reduzida nas células transfectadas com o HIF-1α-siRNA após o tratamento com L-OHP. A taxa de sobrevivência celular foi significativamente aumentada em OCUM-2MD3 /L-OHP células transfectadas com o imitador de miR-27a, enquanto que a sobre-expressão de HIF-1α não resultou em qualquer alteração clara na sobrevivência celular. Os resultados do ensaio de actividade de luciferase dupla demonstrado que o HIF-1α aumenta a actividade transcricional do promotor miR27a em células transfectadas com um plasmídeo repórter contendo a região promotora a montante de miR27a juntamente com pcDNA-HIF-1α. análise ChIP sugeriu que o HIF-1α liga directamente à região promotora de miR27a. A inibição do HIF-1α ou expressão miR27a diminuiu MDR1 /P-gp, PRL, e a expressão de Bcl-2 em OCUM-2MD3 /células L-OHP. Assim, descobrimos que HIF-1α está intimamente associada com MDR no GC e que HIF-1α pode suprimir MDR1 /P-gp, LRP e expressão Bcl-2 através da inibição da expressão de miR-27a

Citation:. Zhao Q, Li Y, Tan Bb, Fan Lq, Yang Pg, Tian Y (2015) HIF-1α induz resistência a múltiplas drogas em células de câncer gástrico através da indução de miR-27a. PLoS ONE 10 (8): e0132746. doi: 10.1371 /journal.pone.0132746

editor: Jin Q. Cheng, H.Lee Moffitt Cancer Center Research Institute, United States