Abstract

O álcool é um conhecido agente cancerígeno que pode ser associado com cancro colo-rectal. No entanto, a maioria dos estudos epidemiológicos avaliar o consumo de bebidas alcoólicas usando dados auto-relatados, levando ao potencial de má classificação da exposição. Biomarcadores de consumo de álcool pode proporcionar uma abordagem alternativa, complementar, que reduz o erro de classificação e incorpora as diferenças individuais no metabolismo do álcool. Portanto, avaliamos a relação entre metabólitos previamente identificados álcool relacionados com o consumo e câncer colorretal e adenoma usando dados metabolômica soro de dois estudos. Os dados sobre o cancro colorectal foram obtidos de um estudo de caso-controle de 502 adultos americanos (252 casos, 250 controles) dentro do Screening Trial próstata, pulmão, colo e cancro do ovário. Os dados sobre adenoma colorretal foram obtidos de um estudo de 197 adultos americanos (120 casos, 77 controles) a partir do cólon Marinha Estudo Adenoma de caso-controle. Modelos de regressão logística multivariada incondicionais estavam aptos para calcular odds ratio (OR) e intervalos de 95% de confiança (IC) para os metabolitos relacionados com o consumo de álcool oito identificados em uma análise prévia: glucoronidos etílico; 4-androsteno-3beta, 17beta-diol dissulfato 1; 5-alfa-androstan-3beta, 17beta-diol dissulfato; 16-hydroxypalmitate; bilirrubina (E, Z ou Z, E); ciclo (Pro-Leu); di-homo-linoleato (20: 2n6); e palmitoleato (16: 1n7). Nós não encontramos nenhuma associação clara entre estes metabolitos relacionados com o consumo de álcool e quer endpoint. No entanto, nós observamos uma associação inversa entre o ciclo (Leu-pro) e adenoma colorretal que só foi observada na maior quantil metabolito (OR

4 vs. 1º Quantile = 0,30, 95% CI: ,12-,78;

P

-trend = 0,047), mas nenhuma associação para o cancro colorectal. Em conclusão, não houve associações adversos entre os metabólitos relacionados com o consumo de álcool e câncer colorretal ou adenoma

Citation:. Troche JR, Mayne ST, Freedman ND, Shebl FM, Guertin KA, Cruz AJ, et al. (2016) o consumo de álcool-relacionados metabolitos em relação ao câncer colorretal e adenoma: Dois caso-controle estudos utilizando biomarcadores de soro. PLoS ONE 11 (3): e0150962. doi: 10.1371 /journal.pone.0150962

editor: Maria Cristina Vinci, Centro Cardiológico Monzino, ITALY

Recebido: 19 de novembro de 2015; Aceito: 21 de fevereiro de 2016; Publicação: 11 de março de 2016

Este é um artigo de acesso aberto, livre de todos os direitos autorais e pode ser livremente reproduzido, distribuído, transmitido, modificado, construído em cima, ou de outra maneira usado por qualquer pessoa para qualquer finalidade lícita. O trabalho é feito disponível sob a dedicação de domínio público da Creative Commons CC0

Data Availability:. Para proteger a privacidade dos participantes do estudo, serão disponibilizados dados mediante solicitação. Propostas para o acesso aos dados PLCO podem ser enviados para o Sistema Nacional de Acesso a Dados Cancer Cancer Institute em https://biometry.nci.nih.gov/cdas/plco/. Os pedidos serão analisadas pelos coorte principais pesquisadores e vai exigir um acordo de transferência de dados. Os interessados ​​devem entrar em contato com o Dr. Christian Abnet ([email protected])

Financiamento:. Este trabalho foi parcialmente financiado pelo Programa de Pesquisa Intramural do National Cancer Institute dos Institutos Nacionais de Saúde (http: //www.cancer.gov/research/nci-role/intramural) e os Institutos Nacionais de Saúde (https://www.nih.gov/), conceder T32 CA105666

Conflito de interesses:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Abreviaturas:. CI, intervalo de confiança; OR, Odds ratio; PLCO, próstata, pulmão, colo e Ovarian Cancer Screening Julgamento

Introdução

O câncer colorretal é o terceiro, tanto a incidência de câncer e mortalidade em os EUA [1,2], com mais de 132.000 casos incidentes estimada para 2015 [2]. O câncer colorretal é mais comum em países economicamente desenvolvidos, enquanto os países em desenvolvimento economicamente estamos vendo o rápido aumento na incidência de câncer colorretal [3]. Alguns estudos sobre o risco de câncer colorretal em migrantes de menor risco para os países de maior risco têm encontrado risco de migrantes que se aproxima da do país de acolhimento [4,5], e que seus descendentes nascidos nos Estados Unidos têm riscos mais elevados do que os migrantes estrangeiros [6]. Esses padrões diferentes pode ser devido a fatores de estilo de vida modificáveis ​​[3], incluindo a dieta, sedentarismo, obesidade, tabagismo, consumo de álcool e [7].

Consumo de bebidas alcoólicas tem sido associado com câncer colorretal em homens, e em muitas mulheres estudos [8], mas a associação é modesta. A estimativa resumo de uma meta-análise de 2010 mostrou uma associação com moderada (RR

2 a 3 doses por dia = 1,21, 95% CI: 1,13-1,28) e beber pesado (RR

≥4 doses por dia = 1,52, 95% CI 1,27-1,81) [9]. A evidência é mais forte para os bebedores pesados ​​[9-11] e não parece variar conforme o tipo de bebida alcoólica, implicando etanol como agente causador potencial [11-14]. Em estudos observacionais, o consumo de álcool tem sido associado a cada localização anatômica do câncer colorretal, incluindo o cólon proximal, cólon distal e reto [10,11,14]. Menos dados estão disponíveis em mulheres. No entanto, os dados disponíveis indicam resultados semelhantes como para os homens [8,11,14].

Consumo de bebidas alcoólicas também tem sido associada com maior risco de pólipos colorretais adenomatosos [15-19]. pólipos colorretais podem ser classificados em duas categorias: pólipos hiperplásicos, que são tipicamente benigna e pólipos adenomatosos (adenomas), que são lesões precursoras de câncer colorretal. Apesar de menos do que 10% dos adenomas evoluir para cancro colo-rectal [1], cancros colorrectais mais desenvolvem a partir de adenomas [1,20]. Como tal, estes resultados para o álcool com câncer colorretal e adenoma são gratuitos.

Os dados de consumo de álcool auto-relatados são geralmente considerados para ser exato, e a maioria dos estudos epidemiológicos confiar na auto-relatório para medir o consumo típico de álcool [21 ]. No entanto, dados auto-relatados estão sujeitos a relatórios de erro e, posteriormente, má classificação da exposição. medidas Quantidade de frequência também não capturar consumo excessivo de álcool e padrões de consumo atípicos, e isso pode subestimar o consumo total de álcool [22]. Além disso, o consumo de álcool auto-referida não pode explicar as diferenças individuais no metabolismo do álcool, tais como diferenças étnicas observadas em algumas populações asiáticas [23]. Portanto, a utilização de medidas complementares de álcool exposição para além de auto-relato pode ser útil na estimativa mais exacta exposição álcool [24]. biomarcadores álcool, incluindo metabolitos de pequenas moléculas, poderia aumentar os resultados de auto-relatório, adicionando medidas objetivas de exposição e contabilização das diferenças individuais na dosagem interno devido a diferenças individuais no metabolismo. Metabolómica, a medição de pequenas moléculas em fluidos biológicos, foi mostrado ser um método útil para investigações epidemiológicas [25,26], com estudos anteriores com êxito a identificação de biomarcadores para fumar tabaco e dieta, incluindo álcool [27,28].

neste estudo avaliou-se a associação entre as seguintes oito biomarcadores de consumo de álcool e câncer colorretal e adenoma: glicuronídeo etílico; 4-androsteno-3beta, 17beta-diol dissulfato 1; 5-alfa-androstan-3beta, 17beta-diol dissulfato; 16-hydroxypalmitate; bilirrubina (E, Z ou Z, E); ciclo (Pro-Leu); di-homo-linoleato (20: 2n6); e palmitoleato (16: 1n7). Estes metabolitos foram selecionados com base em dados de metabolômica soro anteriores gerados na próstata, pulmão, colo e Screening Trial cancro do ovário (PLCO), onde eles foram encontrados para ser associado com o consumo total de bebidas alcoólicas baseado em correlações parcial de Pearson após a correção de Bonferroni para múltiplos comparações [27]. Usando esses biomarcadores, realizamos um estudo de caso-controle de câncer colorretal no braço do PLCO intervenção (252 casos, 250 controles), bem como um estudo de caso-controle separada de adenoma colorretal (120 casos, 77 controles) na Marinha Colon Estudo Adenoma.

Materiais e Métodos

desenho do estudo e população

próstata, pulmão, colo e ovário Cancer Screening Trial (PLCO).

PLCO é um ensaio controlado randomizado de base populacional dos efeitos da triagem na mortalidade por câncer em os EUA [29,30]. Mais de 150.000 participantes foram recrutados entre Novembro de 1993 e Julho de 2001. Os participantes elegíveis foram envelhecidos 55-74 anos no momento da randomização, não tinha história prévia de câncer de PLCO, e não tinha tido uma sigmoidoscopia, colonoscopia ou enema de bário nos três anos antes da aleatorização. consentimento informado por escrito foi obtido de todos os participantes. O estudo foi aprovado pelo Instituto do Câncer Institutional Review Board Nacional (número de protocolo OH97-C-n041).

Sigmoidoscopies foram realizados no início e oferecido no final do terceiro ano anterior a dezembro de 1998, e ao final do quinto ano a partir de outubro de 1999. os participantes com testes de tela positivos foram encaminhados ao seu médico para uma avaliação mais aprofundada.

dentro do braço triagem de PLCO, um estudo caso-controle aninhado participantes selecionados que completaram fator de risco da linha de base e questionários dietéticos, consentido biospecimen uso, teve sérica basal e 6 meses ou mais de acompanhamento, não tinha história auto-relatada de câncer no início do estudo (exceto carcinoma basocelular), não tinham cancros raros durante o acompanhamento, e teve sem doença auto-referida de Crohn, colite ulcerativa, polipose familiar, síndroma de Gardner, ou polipos colorrectais. Destes, foram selecionados 255 incidentes primária casos de câncer colorretal e 254 controles para o nosso estudo. Nós ainda excluída 2 casos e 3 controles com 8 ou maiores respostas em falta no questionário dietético e 1 caso e um controle com consumo calórico extrema (≤1% ou ≥99%). Nossa amostra analítica final para PLCO consistiu de 252 casos e 250 controles.

Os dados sobre o consumo de álcool auto-reportados foram obtidos a partir do questionário base. As seguintes categorias foram escolhidos

a priori

baseado em múltiplos de uma única bebida alcoólica, que forneceu números razoáveis ​​de indivíduos em cada categoria e que são semelhantes aos de muitos estudos anteriores sobre o consumo de álcool e doenças: nenhum, 0 para 1 bebida por dia, 1 a 3 doses por dia, e 3 doses por dia

Colon Marinha Adenoma Estudo

O Colon Marinha Estudo Adenoma é um caso.. -control estudo de adenomas colorretais que se inscreveram pacientes da Cirurgia Geral e Gastroenterologia Clínica do Instituto Nacional Naval Medical em Bethesda, Maryland entre abril de 1994 e setembro de 1996. os participantes elegíveis tinham idade 18-74 anos, não tinham histórico de câncer (exceto não cancro da pele -melanoma), e residia dentro de 60 milhas de Washington DC consentimento informado foi obtido de todos os participantes. O estudo foi aprovado pelos Conselhos de Revisão Institucional do Instituto Nacional do Câncer e da National Naval Medical Center (protocolo número OH93-NC-2004).

A amostra do estudo para o Colon Marinha Estudo Adenoma tem sido descrito em detalhe noutro local [31]. Resumidamente, 244 casos de um registo clínica colonoscopia e 231 controles que receberam rotina de triagem sigmoidoscópico flexível deu consentimento informado e concordou em participar. Foram excluídos 93 casos por ter uma história de adenomas anteriores, 2 casos e 3 controles com informações dietéticas implausível, e 3 casos de relatórios polipose adenomatosa familiar. Destes, foram selecionados 129 casos e 129 controles com dados de peso e altura para o perfil metabólico em uma análise anterior [32]. Casos e controles não foram pareados sobre o estado de jejum e análises preliminares sugerem que o jejum estatuto teve efeitos substanciais sobre as concentrações do metabolito. Portanto, nós ainda excluída 6 casos e 51 controles que jejuaram antes da coleta de sangue. Em seguida, excluídos 3 casos e 1 controle com falta de dados de consumo de álcool. Nossa amostra analítica final para o Colon Marinha Adenoma estudo consistiu de 120 casos e 77 controles.

Os dados sobre o consumo de álcool auto-reportados foram obtidos durante as entrevistas pessoais em casa conduzido aproximadamente 60 a 90 dias após a triagem endoscópica. Nós categorizados consumo de álcool nas seguintes categorias: nenhum, 0-1 bebida por dia, 1 a 3 doses por dia, e 3 doses por dia. Não-bebedores que relataram nunca consumir pelo menos 12 bebidas alcoólicas em um ano permaneceram classificados como não-bebedores (

n

= 22).

Avaliação de resultados

Em PLCO, cânceres incidentes foram apurados a partir da data da randomização (estudo data de entrada) até 31 de dezembro de 2009. Sigmoidoscopies foram realizados no início e oferecido no final do terceiro ano anterior a dezembro de 1998, e no final do quinto ano a partir de outubro 1999. Os participantes com testes de tela positivos foram encaminhados ao seu médico para uma avaliação mais aprofundada. Os 255 primeiros cânceres colorretais incidentes primário diagnosticados pelo menos 6 meses após o início do estudo foram selecionadas como casos, como eram 254 incidência densidade sujeitos amostrados que estavam vivos e livre do câncer no momento que o caso foi diagnosticado e pareados por idade na randomização (intervalos de 5 anos ), sexo, raça, ano de randomização, e época de colheita de sangue.

no Colon Marinha Estudo Adenoma, casos de adenoma colorretal foram diagnosticados por sigmoidoscopia flexível colonoscopia ou rotina e foram confirmados histologicamente. Controles, selecionados entre pacientes sem adenomas colorretais no momento da sigmoidoscopia, foram frequência correspondente (1: 1). Por idade (± 5 anos) e sexo para casos que foram selecionados durante o mesmo período de tempo

avaliação Metabolito

Em PLCO, amostras de sangue, não em jejum foram coletadas no início do estudo. No Colon Marinha Estudo Adenoma, os participantes forneceram amostras de sangue na clínica visitas de acompanhamento, e não eram obrigados a jejuar, mas muitos participantes fizeram. metabolitos de soro foram ensaiadas por Metabolon Inc, como previamente descrito [33,34]. A análise e manipulação metaboloma de amostras de sangue também foi descrita em detalhe noutro local [26,27,32]. As amostras foram corridas em lotes de 30 e cegos para o status caso. Casos e controles pareados foram colocados consecutivamente dentro do lote. As amostras foram analisadas utilizando espectrometria e cromatografia gasosa-espectrometria de massa de cromatografia de massa ultra-alto desempenho em fase líquida. Os metabolitos foram identificados por comparação dos picos espectrais de massa para uma biblioteca de referência. As intensidades do espectro de massa relativas de pico para cada metabolito foram lote normalizada (valor de intensidade de pico relativa dividido pela média de lote), log-transformados (log natural), e centrado (mean≈0, deviation≈1 standard). O valor mínimo observado foi imputado para medições que não conseguiram atingir o limiar de detecção e as distribuições foram centradas. a precisão do ensaio foi previamente estudado em detalhe [26].

Um estudo metabolômica soro anterior do PLCO testadas correlações entre dieta e metabolitos usando correlações parciais de Pearson ajustados para idade, sexo, status (fumantes de fumar vs. ex /nunca fumaram), e ingestão de energia total (kcal por dia) [27]. Após a correção de Bonferroni para comparações múltiplas, oito metabólitos foram significativamente associados com total de álcool: glicuronídeo etílico; 4-androsteno-3beta, 17beta-diol dissulfato 1; 5-alfa-androstan-3beta, 17beta-diol dissulfato; 16-hydroxypalmitate; bilirrubina (E, Z ou Z, E); ciclo (Pro-Leu); di-homo-linoleato (20: 2n6); e palmitoleato (16: 1n7)., e estes foram usados ​​em nosso estudo

A análise estatística

Foi utilizada a regressão logística não condicional multivariada para estimar odds ratio (OR) e intervalos de confiança de 95% (IC ) sobre a relação entre o álcool auto-reportados e os metabolitos relacionados com o consumo de oito álcool e câncer colorretal (PLCO) e adenoma (Colon Marinha adenoma de estudos). As análises foram realizadas separadamente em cada estudo devido a diferenças no desenho do estudo, populações de estudo e métodos de recolha de dados. Todos os modelos foram ajustados para idade ao questionário dietético (PLCO) ou entrevista (Colon Marinha Adenoma Study), sexo e uso de tabaco (nunca usuário de tabaco, ex-usuário de tabaco, usuário de tabaco atual). O uso do tabaco incluídos cigarros, charutos e cachimbos.

Os oito álcool metabolitos relacionados com o consumo não foram distribuídos normalmente, em parte porque valores abaixo do limiar de detecção foi atribuído o valor mínimo observado. Cinco dos oito metabolitos (4-androsteno-3beta, 17beta-diol dissulfato de 1, 5-alfa-androstan-3beta, 17beta-diol dissulfato; 16-hydroxypalmitate; di-homo-linoleato (20: 2n6); palmitoleato (16: 1n7) ) foram classificados com base nos pontos de corte quartil entre controles. Os restantes três metabolitos não podem ser categorizados exactamente por quartis devido ao grande número de valores imputados. Etil glicuronídeo foi categorizado como uma variável binária (detectado, não detectado). Bilirrubina (E, Z ou Z, E) foi categorizada por pontos de corte quartil no cólon Marinha Estudo Adenoma, mas em PLCO foi categorizada nos seguintes grupos de percentis (≤27.5, 27,5-50,0, 50,0-75,0, 75,0

percentil). Ciclo (Leu-pro) foi categorizada de forma diferente em PLCO (≤51.4, 51,4-75,0, 75,0

percentil) do que no Colon Marinha Estudo Adenoma (≤25.4, 25,4-50,0, 50,0 para 75,0, 75,0

percentil)

também examinamos as associações bivariadas entre o consumo de álcool auto-reportados e os metabolitos relacionados com o consumo de álcool oito anteriormente encontrados para ser significativamente correlacionada com o consumo total de álcool com base. em correlações de Pearson parciais ajustados para idade, sexo, tabagismo e ingestão total de energia [27]. Para levar em conta a distribuição não-normal dos metabolitos, categorizamos os metabolitos com base em pontos de corte quartil aproximados e, em seguida reanalisada sua associação com álcool usando teste exato de Fisher. Portanto, os testes que realizamos tinha poder menor do que a análise a partir do qual foram identificados os nossos metabolitos.

Porque nós tivemos oito metabólitos identificados pela sua correlação independente com o consumo de bebida alcoólica auto-reportados, nós exploramos a sua independência e completou um redução de dados para o uso como uma exposição secundária na análise de associação. Utilizou-se uma matriz de coeficientes de correlação de Pearson para avaliar a correlação entre os metabolitos e para avaliar visualmente se um subconjunto dos metabolitos pode ser usado em substituição. A análise de componentes principais usando rotação varimax foi empregado como um método para reduzir o número de variáveis ​​de exposição. Mantivemos componentes com base no valor próprio e um critério de [35], e aquelas que cumulativamente explicado mais do que 70% da variância na matriz de covariância dos metabolitos relacionados com o consumo de álcool oito. Estes componentes significativas foram então extraídos, escalado pela divisão pela metade o intervalo interquartil, e se encaixam em um modelo completo, o ajuste para idade, sexo e uso de tabaco.

Todas as análises foram realizadas utilizando SAS Versão 9.2 TS2M3 ( SAS Inc., Cary, Carolina do Norte, EUA)

resultados

a amostra foi predominantemente do sexo masculino em ambos os PLCO (casos:. 56,4%, controles: 55,6%) e do Colon Marinha Estudo Adenoma (casos: 75,8%, controles: 74,0%) (Tabela 1). A idade média foi maior em PLCO (casos: 64,3 anos, controles: 64,3 anos) do que o Colon Marinha Estudo Adenoma (casos: 57,4 anos, controles: 57,6 anos). A proporção de usuários nunca tabaco foi semelhante entre PLCO (casos: 38,0%, controles: 42,0%) e do Colon Marinha Estudo Adenoma (casos: 46,7%, controles: 42,9%), ao passo que a proporção de fumantes atuais foi maior em PLCO ( casos: 47,6%, controles: 49,2%) do que no cólon Marinha Estudo Adenoma (casos: 10,0%, controles:. 9,1%)

Foram examinadas as associações bivariadas entre as variáveis ​​demográficas e álcool auto-referida consumo entre os controles (Tabela 2). O consumo de álcool era comum entre os controles (PLCO: 80,4%, Colon Marinha Estudo Adenoma: 80,5%) (Tabela 2). Através dos dois estudos, uma proporção similar de bebedores de controle consumido 3 bebidas por dia (PLCO: 10,8%, Colon Marinha Estudo Adenoma: 13,0%). Consumir 3 doses por dia também foi mais comum em homens do que mulheres (PLCO: 18,0% vs. 1,8%, Colon Marinha Estudo Adenoma: 15,8% vs. 5,0%). Entre os controles, em comparação com os não-bebedores de uma maior proporção de consumidores de álcool nunca foram fumantes (PLCO: 61,2% vs. 44,9%, Colon Marinha Adenoma Estudo: 61,3% vs. 40,0%).

próxima examinou associações bivariadas entre o consumo de álcool auto-reportados e os metabolitos relacionados com o consumo de oito álcool. Em PLCO, apenas cinco dos oito metabólitos foram significativamente associados positivamente com a auto-relatado o consumo de álcool: glicuronídeo etílico (

P Art 0,0010); 4-androsteno-3beta, 17beta-diol disulfate 1 (

P Art 0,0010); 5-alfa-androstan-3beta, 17beta-diol dissulfato (

P

0,0010); bilirrubina (E, Z ou Z, E) (

P

= 0,0024); e ciclo (Leu-pro) (

P

= 0,045) (S1 Tabela). Para cada um destes cinco metabolitos, uma maior proporção de não-bebedores foram distribuídos em o menor metabólito quantil, enquanto uma proporção maior de que aqueles que bebiam 3 doses por dia foram distribuídos na maior quantil metabólito. No Colon Marinha Estudo Adenoma, havia apenas 77 controles, o que limitava o poder. Nenhum dos oito metabólitos foram significativamente associados com álcool auto-relatado, no entanto, um padrão semelhante ao PLCO foi evidente para os seguintes álcool metabolitos relacionados com o consumo: 4-androsteno-3beta, 17beta-diol disulfate 1 (

P

= 0,44); 5-alfa-androstan-3beta, 17beta-diol dissulfato (

P

= 0,079); bilirrubina (E, Z ou Z, E) (

P

= 0,65); e ciclo (Leu-pro) (

P

= 0,12). Para estes quatro metabolitos, uma maior proporção de não-bebedores foram distribuídos em o menor metabólito quantil, enquanto que uma proporção maior do que aqueles que consomem . 1 a 3 doses por dia foram distribuídos na maior quantil metabólito

Devido estes novos biomarcadores estão correlacionados com o consumo de bebida alcoólica auto-reportados, avaliamos a sua independência e de realizar uma redução de dados de vetores independentes de exposição. Foram avaliados os coeficientes de correlação de Pearson entre os metabólitos relacionados com o consumo de oito álcool em uma matriz de correlação (S2 Table), com valores absolutos variando ,028-,88 em PLCO e ,026-,89 no cólon Marinha Estudo Adenoma. Em ambos PLCO eo Colon Marinha Estudo Adenoma, havia dois grupos distintos de metabolitos com coeficientes de correlação maiores que 0,50: 1) 16-hydroxypalmitate; di-homo-linoleato (20: 2n6); palmitoleato (16: 1n7); e 2) 4-androsteno-3beta, 17beta-diol dissulfato de 1 e 5-alfa-androstan-3beta, 17beta-diol dissulfato. A análise de componentes principais subsequente identificou três componentes significativos. Em PLCO, estes componentes cumulativamente explicou 74,2% da variância na matriz de covariância dos metabolitos relacionados com o consumo de oito álcool. Individualmente, os componentes 1, 2, e 3 explicou 38,3%, 23,2%, e 12,7% da variância, respectivamente. Da mesma forma, no cólon Marinha Estudo Adenoma os componentes cumulativamente explicou 75,9% da variância, com componentes 1, 2 e 3, respectivamente, explicando 40,2%, 22,5% e 13,1% da variância.

Em seguida, associações examinados com os nossos objectivos de doença. Em modelos totalmente ajustados, não encontramos nenhuma associação entre o consumo de álcool típica auto-relatados e câncer colorretal (

P

-trend = 0,25; Tabela 3) ou adenoma colorretal (

P

-trend = 0,96 ; Tabela 4). Da mesma forma, nenhum dos metabolitos relacionados com o consumo de álcool oito foram significativamente associados com o cancro colorectal, e sete não foram significativamente associados com adenoma colorretal. No entanto, um metabolito, ciclo (Leu-pro), foi significativamente associada com adenoma colorretal (

P

-trend = 0,047). Em comparação com os níveis de metabólitos relativas de ciclo (Leu-pro) entre os participantes do menor quantil, aqueles no nos segundo e terceiro quantiles não foram significativamente associados com adenoma colorretal (OR

2ª vs. 1º Quantile = 1,11, 95 CI%: 0,51-2,44; OR

3ª vs. 1º quantile = 1,05, 95% CI: 0,47-2,38), enquanto que intensidades de pico no maior quantil foram significativamente inversamente associado com o adenoma colorretal (OR

4 vs. 1º Quantile CI = 0,30, 95%. 0,12-0,78)

Finalmente, testamos para as associações com a evolução da doença, utilizando os vectores próprios não correlacionadas resultantes da análise de redução de dados. Em PLCO, nenhum dos componentes estavam associados com cancro colo-rectal (Tabela S3). No Colon Marinha Estudo Adenoma, componentes 1 e 2 não foram significativamente associados com adenoma colorretal. No entanto, o componente 3, que foi carregado fortemente a partir de ciclo (Leu-pro), foi significativamente associada com menor risco de adenoma colorretal (OR

Component CI 3 = 0,24, 95%: ,06-,94).

Discussão

Em nossa investigação da exposição ao álcool utilizando novos marcadores biológicos e de risco de câncer colorretal ou adenoma colorretal, observou-se pouca evidência para associações. Nossos resultados nulos usando esses marcadores biológicos novos diferem da maioria das evidências existentes para o uso de bebidas alcoólicas auto-relatados, mas estão de acordo com alguns estudos anteriores que também relataram nenhuma associação significativa entre o consumo total de auto-relato de álcool e cancro colorectal [36- 38] ou adenoma colorretal [39-41].

Encontramos uma associação inversa significativa entre nominalmente maior ciclo (Leu-pro) e menor risco de adenoma colorretal no cólon Marinha Estudo adenoma. Em PLCO, cerca de metade dos indivíduos do grupo controle apresentou valores abaixo do limite de detecção para este metabolito que limita a nossa capacidade de testar as diferenças através de um espectro de exposição, mas esses assuntos na categoria mais elevada estavam em significativamente não-redução do risco de câncer colorretal. Ciclo (Leu-pro), um dipéptido cíclico de leucina e prolina, é um subproduto da fermentação de bebidas alcoólicas [42], mas a aparente associação com adenoma colorretal devem ser interpretados com cautela, dado o tamanho modesto das comparações de estudo e múltiplas em a análise.

Além disso, porque esses novos biomarcadores deve ter algum grau de correlação, uma vez que eles foram selecionados com base em sua correlação independente com o consumo de bebida alcoólica auto-relatado, concluímos uma análise de correlação e análise de componentes principais. Esta análise mostrou que havia três vetores independentes de informações entre os oito metabólitos que podem representar diferentes aspectos do consumo de bebidas alcoólicas e metabolismo. Estas descobertas poderiam formar a base do trabalho futuro para melhor definir perfis metabólicos associados ao consumo de bebidas alcoólicas. Na análise de associação com estes vectores, a associação nominalmente significativo que relatou para adenoma colorretal também foi evidente no vetor mais ponderada pelo ciclo (Leu-pro), mas a redução de dados não forneceu qualquer outra introspecção adicional em nossos dados.

Nossa investigação de metabolitos relacionados com o consumo de álcool usado uma abordagem inovadora para avaliar a relação entre o consumo de álcool e câncer colorretal e adenoma. A evidência existente é baseada principalmente no consumo de álcool auto-relatados e os pontos fortes das associações relatadas são modestos [43-46]. Biomarcadores de consumo de álcool pode potencialmente fornecer certas vantagens sobre auto-relato, evitando o relatório de erros, reduzindo erros de classificação, e que engloba as diferenças individuais na dosagem interno devido a diferenças individuais no metabolismo. Por exemplo, em um estudo anterior no PLCO, metabólitos de tabaco foram encontrados para ter uma forte associação com o risco de câncer colorretal do que a exposição ao tabaco auto-relatada [28].

Além do uso de novos biomarcadores de exposição ao álcool , a nossa investigação tem outros pontos fortes. Em primeiro lugar, o estudo em PLCO foi aninhada dentro de um grande estudo prospectivo que rendeu 252 casos de cancro colorectal com os dados de biomarcadores da linha de base. Em segundo lugar, ambos os estudos incluíram informações detalhadas sobre potenciais fatores de confusão. Nosso estudo também incluiu algumas limitações. Em primeiro lugar, a plataforma metabolômica usado para o nosso estudo forneceu apenas intensidades de pico relativas, em vez de as concentrações do metabolito. Em segundo lugar, as meias-vidas dos metabolitos relacionados com o consumo de oito álcool utilizado na nossa análise são desconhecidas, bem como o prazo de exposição ao álcool, eles capturam não é clara. Temos falta de dados sobre quando o álcool foi consumido última antes da coleta da amostra, e nós não souber como estes metabolitos relacionados com o consumo de álcool são influenciados por beber vida, padrões de consumo atípicos, e consumo excessivo de álcool. No entanto, o trabalho futuro está em andamento para examinar os efeitos da ingestão de álcool controlada no Estudo de Álcool da Mulher, que tem sido descrito anteriormente [47]. Em terceiro lugar, no PLCO, apenas cinco dos oito metabólitos foram significativamente associados positivamente com o consumo de álcool auto-relatados, e nenhuma foi significativa no cólon Marinha Estudo Adenoma. Em quarto lugar, houve relativamente poucos bebedores pesados, portanto, não foram movidos para avaliar associações em níveis mais elevados de consumo de bebidas alcoólicas. Em quinto lugar, o álcool pode ter diferentes associações com diferentes subtipos de câncer colorretal, mas não examinou essas relações neste estudo.

Em resumo, nós não encontrou nenhuma evidência clara para uma associação entre metabólitos relacionados com o consumo de álcool e quer cancro colo-rectal ou adenoma colorrectal. Nossos dados não devem ser interpretados como uma refutação de estudos utilizando dados auto-relatados, porque estes novos biomarcadores representam complementares, não competindo, os métodos de avaliação do consumo de bebidas alcoólicas. A associação inversa potencial entre ciclo (Leu-pro) e adenoma que só foi observada na maior quantil metabolito devem ser avaliadas em outros conjuntos de dados.

Informações de Apoio

S1 Table. Consumo relacionados com o álcool metabolitos entre os controles por categorias de consumo de álcool em 250 adultos americanos (PLCO) e 77 adultos norte-americanos (Colon Marinha Adenoma Estudo)

* Pode não somar total devido a valores ausentes

doi:.. 10.1371 /journal.pone.0150962.s001

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S2 Table. Correlação de Pearson Matrix para o álcool metabolitos Consumo-Related em 502 adultos americanos (PLCO) e 197 adultos norte-americanos (Marinha Colon Estudo adenoma)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0150962.s002

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Tabela S3. Odds ratio ajustado e 95% Intervalos de Confiança para a associação entre componentes principais extraídos de Análise de Componentes Principais e caber em um modelo de regressão logística para o cancro colorectal em 502 adultos americanos (PLCO) e colorretal Adenoma em 197 adultos norte-americanos (Colon Marinha Adenoma Study).

Abreviaturas: CI, intervalo de confiança; OR, Odds Ratio.