Abstract

Introdução

Até o momento, um estudo de microscopia eletrônica dos vasos linfáticos coleta não tenha sido conduzidos para examinar os estágios iniciais de linfedema. No entanto, esses estudos histológicos poderia ser útil para elucidar o mecanismo de início de linfedema. O objetivo deste estudo foi o de esclarecer as mudanças que ocorrem na coleta de vasos linfáticos após linfadenectomia.

Métodos

O estudo foi realizado em 114 amostras de 37 pacientes que desenvolveram linfedema dos membros inferiores após o recebimento tratamento cirúrgico para cânceres ginecológicos e que consultou a Universidade de Tóquio Hospital e hospitais afiliados a partir de abril de 2009 a março de 2011. os vasos linfáticos que não eram necessárias para lymphatico cirurgia anastomose venosa foram aparadas e, posteriormente, analisados ​​usando microscopia eletrônica e microscopia de luz.

resultados

com base nos achados de necropsia, as alterações histoquímicas nos vasos linfáticos coleta foram definidos da seguinte forma: normal, ectasis, contração, e tipo esclerose (NECST). No tipo ectasia, um aumento na pressão endolinfática foi acompanhada por um achatamento das células endoteliais dos vasos linfáticos. No tipo de contracção, as células de músculo liso foram transformados em células sintéticas e promoveu o crescimento das fibras de colagénio. No tipo de esclerose, elementos fibrosos representaram a maioria dos componentes, os vasos linfáticos perderam o seu transporte e habilidades de concentração, e o lúmen ou foi estreitada ou completamente obstruído.

Conclusões

O aumento da pressão dentro dos vasos linfáticos que recolhem após linfadenectomia foi acompanhada por alterações histológicas que começaram antes do início do linfedema

Citation:. Mihara M, Hara H, Hayashi Y, Narushima M, Yamamoto T, Todokoro T, et al . (2012) Patológicas Passos de câncer relacionado ao Linfedema: alterações histológicas em vasos coletores linfáticos pós-linfadenectomia. PLoS ONE 7 (7): e41126. doi: 10.1371 /journal.pone.0041126

editor: Arin Greene, do Hospital Infantil de Boston, Estados Unidos da América

Recebido: 02 de janeiro de 2012; Aceite: 19 de junho de 2012; Publicação: 24 de julho de 2012

Direitos de autor: © Mihara et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. A concessão foi fornecida por um programa japonês financiamento para pesquisadores líderes mundiais de próxima geração (programa de NEXT, LS039). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

linfedema de membro, que se desenvolve após linfadenectomia para o tratamento do cancro, é um aumento do volume do membro doente causada pelo acúmulo subcutânea de um líquido rico em proteínas [1], [2]. Uma vez que os fluidos linfáticos já não pode ser transportado, a pressão nos vasos linfáticos de recolha nos membros gradualmente aumenta, o fluxo da linfa retarda [3] – [5], e o linfedema eventualmente se desenvolve. Quando a duração da doença é prolongado, o linfedema pode desenvolver em lymphangiosarcoma. A expectativa de vida de um paciente com essa condição é limitada a alguns meses a 2 anos [6], [7].

Atualmente, o mecanismo subjacente ao aparecimento de linfedema é desconhecida, e um tratamento ainda não foi ser estabelecidos para prevenir o aparecimento da doença. No entanto, uma vez que o linfedema se estabeleceu, fisioterapia complexa é dito ser o padrão de ouro para o seu tratamento [8] – [11]. Além disso, os tratamentos cirúrgicos, como anastomose linfático venoso (LVA) [12], [13] e transplante de linfonodo [14] recentemente têm sido desenvolvidas, ampliando as opções de tratamento para os casos em que a terapia física complexa si só é insuficiente. No entanto, as indicações e contra-indicações do tratamento cirúrgico ainda não foram bem definidas [15].

Os vasos linfáticos coletivos, que desempenham um papel central no aparecimento de linfedema, mostram uma organização relativamente simples. Como as veias, os vasos linfáticos de recolha apresentar uma estrutura trilaminar, consistindo de uma membrana interna, média e exterior. A camada interna é constituída por células endoteliais; da camada média, variando as proporções de músculo liso; e a camada externa, uma matriz extracelular contendo feixes finos de fibras de colágeno e elastina. A adventícia incorporando microcirculação rica em gorduras também está presente [16].

Um estudo de microscopia eletrônica para examinar recolha de vasos linfáticos dos primeiros estágios linfedema não foi executada. Contudo, tais estudos podem ser úteis para a elucidação do mecanismo de aparecimento linfedema, o estabelecimento de um método terapêutico, e o desenvolvimento de métodos de prevenção. Neste estudo, nós investigamos as mudanças que ocorrem na coleta de vasos linfáticos após linfadenectomia através da realização de elétrons e luz (imuno) estudos microscópicos de coleta de vasos linfáticos no corpo humano.

O objetivo deste estudo foi o de esclarecer as mudanças que ocorreram em pacientes ‘coleta de vasos linfáticos após linfadenectomia até o início após o início do linfedema.

Métodos

os pacientes

a avaliação histológica (imunocoloração e eletrônica exame microscópico) de coleta de vasos linfáticos foi realizada em 114 amostras de 37 pacientes que desenvolveram linfedema dos membros inferiores após a intervenção cirúrgica para cânceres ginecológicos e que consultaram Universidade de Hospital Tóquio e Saiseikai Kawaguchi Hospital Geral de abril de 2009 a março de 2011 (Tabela 1 ). pacientes com linfedema do membro superior foram excluídos porque a taxa de progressão é diferente entre linfedemas dos membros inferiores e superiores, como consequência da gravidade. Os experimentos realizados neste estudo foram realizados com a aprovação dos comités de ética na Universidade de Tóquio e Saiseikai Hospital Kawaguchi Geral. Todos os pacientes forneceram consentimento informado por escrito. Foram examinados 28 casos de câncer cervical, 7 casos de cancro do endométrio, e 2 casos de cancro do ovário. A encenação do linfedema foi realizada de acordo com o sistema de classificação da Sociedade Internacional de Linfologia (ISL). Estágio 0 refere-se a uma condição latente ou subclínica, onde o inchaço não é evidente, apesar de transporte da linfa prejudicada. Fase I representa uma acumulação inicial de fluido que é relativamente elevado teor em proteína e que diminui com a elevação do membro. Além disso, a corrosão pode ocorrer nesta fase. Fase II significa que a elevação do membro por si só raramente reduz o inchaço dos tecidos; pitting é manifesto. No final de Fase II, o membro pode ou não pit como supervenes fibrose do tecido. Fase III engloba a elefantíase lymphostatic em que a corrosão é alterações cutâneas ausentes e tróficas, como acantose, depósitos de gordura, e crescimento de verrugas desenvolver. Estágio 0 representaram 4 casos (Número de amostras: 15); Estágio I, 5 casos (18); Fase IIa, 12 casos (36); Fase IIb, 10 casos (34); e Fase III, 6 casos (11).

O eixo horizontal mostra as fases de linfedema. O eixo vertical mostra a percentagem de cada tipo nos espécimes amostrados em cada fase da doença.

Coleta de Amostras de

Os testes foram realizados utilizando a coleta vasos linfáticos que não precisa a serem anastomosados ​​e foram aparadas durante a cirurgia de anastomose venosa linfática. Foram coletadas amostras de o membro doente, ou seja, a partir dos lados medial da coxa, joelho ou tornozelo. Além disso, no grupo de controlo normal, coleta de vasos linfáticos foram amostrados a partir de membranas intestinais aparadas durante o transplante livre de jejuno.

No tipo normal, redes microvasculares foram encontrados para nutrir as paredes em grande parte desenvolvidas dos vasos linfáticos coletores. As redes microvasculares foram gradualmente perdido com a progressão das fases da doença. Além disso, o lúmen do vaso linfático foi encontrado para ser dilatada no tipo ectasia, o que foi associado com um aumento na pressão endolinfática. Uma vez que o aumento nas células do músculo liso e fibras de colagénio são as principais causas da nebulosidade e espessamento da parede dos vasos linfáticos, eles foram encontrados para ser proeminente no tipo de contracção e o tipo de esclerose. LE:. Linfedema

classificação dos tipos de vasos coletores linfáticos Com base em achados macroscópicos intra-operatórias

Neste estudo, foram classificados os achados macroscópicos observados sob um microscópio cirúrgico em 4 tipos: os, ectasia, contração, e tipos de esclerose normais (NECST). Os pormenores da classificação com base nos achados macroscópicos são mostrados na Tabela 2. Nós classificados os tipos de recolha de vasos linfáticos encontrados em cada fase do linfedema e, em seguida, examinou as correlações entre os tipos e fases pela divisão de cada tipo por parte do número total de amostras coletados em cada estágio da doença

A primeira linha:. Os resultados de alfa coloração actina de músculo liso (αSMA). No tipo normal, de várias camadas de células musculares lisas se presentes. No tipo ectasia, a camada de células de músculo liso era moderadamente fino. No tipo de contracção, uma camada muito espessa do músculo liso estava presente directamente por baixo do endotélio, e o lúmen foi reduzida a um determinado grau. No tipo de esclerose, os lumens foram estreitados. A segunda linha: Os resultados de coloração podoplanina. O tipo normal foi positivo para a coloração podoplanina no endotélio; o tipo ectasis foi fortemente positivo; o tipo de contração, ligeiramente positivo; o tipo de esclerose, negativo.

exame histológico

Os vasos linfáticos foram coradas com hematoxilina-eosina e examinadas ao microscópio. Além disso, a imunocoloração foi realizada usando anticorpo monoclonal de rato podoplanina (Nichirei Biosciences, 413451, Tóquio, Japão) e α-SMA anticorpo monoclonal de ratinho (DakoCytomation, M0851), a fim de determinar a expressão dos correspondentes marcadores histológicos vasculares. Podoplanina, uma membrana podócito glomerular mucoproteína, foi mostrado para localizar ao endotélio dos vasos linfáticos [17].

Processamento de Amostras para Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV)

Os vasos linfáticos foram corrigidos no glutaraldeído a 2,5% em solução salina tamponada com fosfato a 4 ° C durante uma semana, e, em seguida, lavado em tampão fosfato para remover a solução fixadora. Em seguida, as amostras foram pós-fixadas em 1% de OsO

4 e lavadas em tampão fosfato. Posteriormente, as amostras foram desidratadas em concentrações em série crescente de etanol (50-100%). O etanol foi, em seguida, substituído com soluções mistas de etanol a 100% e acetato de 3-metilbutilo. ponto crítico de secagem das amostras foi subsequentemente realizada utilizando um JCPD-5 (JEOL, Tóquio, Japão). As amostras foram colocadas em blocos de amostra e sujeitos a um revestimento condutor (Pt) com um sistema de revestimento de gravura de precisão (Modelo 682; Gatan, CA, EUA). As amostras foram examinadas com um microscópio eletrônico de JSM-7001F (JEOL, Tóquio, Japão).

microscopia eletrônica de varredura (MEV) descobertas. (A) as células endoteliais dos vasos linfáticos salientes para dentro do lúmen linfáticos no tipo normal. Barra = 10 uM. (B) linfangiectasia em seus estágios iniciais. As células endoteliais dos vasos linfáticos são ligeiramente achatadas. Barra = 5 uM. (C) Meio-stage lymphangiectasia. As células endoteliais dos vasos linfáticos são marcadamente achatada. Barra = 10 uM. Lu; Lumen, CE; células do endotélio, o SSM; células musculares lisas sintéticas, CSM; As células musculares lisas contrácteis, CF; fibras de colágeno.

(a) DESMOSSOMOS no tipo normal. Em uma estrutura tridimensional, que aderem às células endoteliais dos vasos linfáticos adjacentes. Barra = 2 um. (A ‘) imagem ampliada. Barra = 2 um. (B) desmososmas de células endoteliais dos vasos linfáticos no tipo ectasis. As adesões célula-a-célula foram gradualmente solto e desmontada, de modo que as células aderem apenas em pontos. Barra = 10 uM. (B ‘) imagem ampliada. Barra = 2 um. células endoteliais (c) linfática na coleta de vasos linfáticos no tipo de esclerose. Os desmossomos são desmontados e as fibras de colágeno sob o endotélio dos vasos linfáticos estão expostos no lúmen do vaso linfático (seta amarela). Barra = 5 uM. (C ‘) As fibras de colagénio expostas no lúmen do vaso linfático (microscopia electrónica, SEM). células endoteliais dos vasos linfáticos estão ausentes, e fascículos de fibras de colágeno são expostos no lúmen do vaso linfático. Barra = 1 um. CE; células do endotélio, o SSM; células musculares lisas sintéticas, CSM; As células musculares lisas contrácteis, CF; fibras de colágeno.

Processamento de Amostras para Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM)

As amostras foram processadas da mesma maneira como os de SEM da etapa de fixação através dos passos de desidratação envolvendo etanol. Depois o etanol foi substituído com óxido de propileno (PO), as amostras foram infiltrados com resina epóxi [uma mistura de Epon812, anidrido succínico dodecenilo, anidrido nádico de metilo, e 2,4,6-tri (dimetilaminometil) fenol], utilizando uma série de soluções mistas de PO e resina epóxi e, em seguida, resina epóxi sozinho. As amostras foram polimerizados durante 3 dias (35 ° C a 60 ° C). As amostras foram seccionados em 80 nm, e os cortes ultrafinos resultantes foram preparadas usando coloração convencional com acetato de uranilo e citrato de chumbo. As secções foram então examinadas com um microscópio eletrônico JEM-1011 (JEOL, Tóquio, Japão).

(a) Tipo Normal. Eles estão presentes na camada média dos vasos linfáticos de recolha, como células do músculo liso contrácteis. As células musculares lisas sintéticos são apenas parcialmente presente. Barra = 10 uM. (B) as alterações nas células do músculo liso no tipo de contração. As células musculares lisas sintéticos migrou directamente abaixo das células endoteliais e proliferaram. Barra = 5 uM. (C) células de músculo liso estimuladas sintéticos de fibra de colagénio hiperplasia directamente debaixo das células endoteliais dos vasos linfáticos. Barra = 2 um. (D) as células de músculo liso sintéticos. Um aumento em grânulos de glicogénio no interior das células é evidente. (E) A periferia das células musculares lisas sintéticos. grânulos secretores estão presentes em grandes números. Barra = 500 nm. CE; células do endotélio, o SSM; células musculares lisas sintéticas, CSM; As células musculares lisas contrácteis, CF; fibras de colágeno, GG; grânulos de glicogênio (setas verdes), SG; grânulos de secreção.

Resultados

Uma forte associação foi encontrada entre a nossa proposta de classificação para os tipos de coleta de vasos linfáticos em cada fase do linfedema (NECST) e a classificação encenação de linfedema ( Figura 1). Com o avançar da fase de linfedema, um menor número de tipos normais foram encontrados entre as amostras coletadas. Nenhum tipo normal foi amostrado na fase III, a fase mais grave da doença. Em contraste, o tipo de esclerose aumentada gradualmente em número com a progressão da doença e foi recolhido a uma principalmente na fase III. O tipo ectasia foi comumente encontrados em casos ligeiros, tais como nos estádios I e II da doença, enquanto que o tipo contracção verificou-se ser comum em casos graves, tais como em fases II e III. Assim, a coleta de vasos linfáticos gradualmente transformada de um tipo para outro.

(a) As fibras de colágeno no tipo normal. Contrácteis células musculares lisas e fibras de colagénio foram misturados em conjunto na camada média. Barra = 10 uM. fibras (b) de colágeno no tipo ectasis. A dilatação do vaso linfático foi acompanhado por um alongamento das fibras de colagénio, fazendo com que o aspecto ligeiramente engrossada. Barra = 10 uM. fibras (c) de colágeno no tipo de contração. Uma vez que as fibras de colágeno foram alongadas, tornaram-se várias camadas e tortuoso (linha pontilhada), em associação com a hipertrofia das paredes dos vasos linfáticos coletores. Barra = 5 uM. CE; células do endotélio, sesm; células de músculo liso, sySM sintéticos; células musculares lisas sintéticas, CSM; As células musculares lisas contrácteis, CF; fibras de colágeno.

(a) tipo normal. Barra = 100 um. (A ‘) Tipo de ectasia. O lúmen do vaso linfático estava dilatado e totalmente coberto com células endoteliais dos vasos linfáticos. Barra = 10 uM. tipo (b) esclerose. Barra = 100 um. (B ‘) A parede do vaso linfático foi espessada por causa da hiperplasia do músculo liso e fibras de colagénio. O lúmen do vaso linfático foi reduzida e, como o formato de uma pinhole. Barra = 10 uM.

O aparecimento dos vasos linfáticos associados com cada etapa do linfedema é mostrado na Figura 2. No tipo normal, redes microvasculares enrolamento em torno das paredes linfáticos foram encontrados para nutrir a recolha vasos linfáticos. As redes microvasculares foram gradualmente perdido com a progressão das fases da doença. Além disso, o lúmen do vaso linfático foi encontrado para ser dilatada no tipo ectasia, o que foi associado com um aumento na pressão endolinfática. Os aumentos em células do músculo liso e fibras de colagénio foram encontradas como sendo os principais causas da nebulosidade e espessamento da parede dos vasos linfáticos e foram observados para ser proeminente no tipo de contracção e o tipo de esclerose. Como o linfedema progrediu, os vasos linfáticos se tornou mais difícil, perdeu elasticidade, e pareceu perder a capacidade de mover peristalticamente para transportar o fluido linfático.

Achados Luz microscópicas

Para examinar as células endoteliais linfáticas, nós manchado pela podoplanina proteína endotelial (Figura 3). O tipo normal foi encontrado para ser positivo para a coloração podoplanina numa camada do endotélio dos vasos linfáticos de recolha. O tipo ectasia foi encontrado para ser fortemente positivo; o tipo de contração, ligeiramente positivo; o tipo de esclerose, negativo. Nós também utilizado coloração α-SMA para examinar as células musculares lisas. No tipo normal, de várias camadas de células musculares lisas se presentes numa disposição circular nas camadas mediais dos vasos linfáticos de recolha. No tipo ectasia, como uma adaptação à dilatação dos vasos linfáticos, a camada de células de músculo liso na camada medial estava moderadamente fino, em alguns casos. Tal como o tipo normal, de várias camadas de células musculares lisas se presentes. No tipo de contracção, uma camada muito espessa do músculo liso estava presente directamente por baixo do endotélio dos vasos linfáticos, e um aumento do tamanho da camada de músculo liso foi acompanhada por um estreitamento do lúmen dos vasos linfáticos. No tipo da esclerose múltipla, os lúmens foram estreitado, de tal maneira que eles tinham a forma de furos. Em alguns casos, eles estavam completamente obstruída.

Electron achados microscópicos

Em termos das células endoteliais dos vasos linfáticos, os do tipo normal foram encontrados para se projetam para o lúmen do vaso linfático ( Figura 4a). Em contraste, as células endoteliais do tipo ectasia foram encontrados para ser lisa e não sobressair para dentro do lúmen (Figura 4 b, c). Esta condição é conhecida como “linfagiectasia.” As adesões focais (desmossomas) entre as células endoteliais aderiram fortemente e amplamente no tipo normal mas foram enfraquecidos e aderiu apenas parcialmente no tipo ectasia (Figura 5 a, b). No tipo da esclerose múltipla, a adesão entre as células endoteliais dos vasos linfáticos foi completamente desmontado, e as fibras de colagénio por baixo das células endoteliais dos vasos linfáticos foram expostos nos vasos linfáticos lúmen (Figura 5C).

Em termos de lisa as células musculares, as do tipo normal estavam presentes na camada média das recolhem vasos linfáticos como células musculares lisas contrácteis, que são um tipo habitual de células do músculo liso diferenciadas (Figura 6a). As células musculares lisas sintéticos, que têm aumentado as taxas de proliferação, migração e produção de matriz extracelular [18], também estavam presentes em pequenas quantidades na camada medial do tipo normal. Além disso, as células do músculo liso sintéticos tinha folículos presentes no citoplasma. No tipo de contracção, as células musculares lisas sintéticos migrou directamente abaixo das células endoteliais dos vasos linfáticos e tinham proliferado (Figura 6b). Além disso, estas células de músculo também promoveu a hiperplasia das fibras de colagénio directamente por baixo das células endoteliais dos vasos linfáticos (Figura 6c, D, E). Além disso, as células do músculo liso sintéticos proliferaram na camada média, estavam presentes entre as células do músculo liso contrácteis, e promoveu a proliferação de fibras de colagénio. grânulos de glicogénio e grânulos de secreção foram aumentados em abundância no interior das células do músculo liso sintéticos.

Em termos das fibras de colagénio, os do tipo normal estavam presentes na camada média (Figura 7a). Por outro lado, no tipo de contracção, as células musculares lisas sintéticas directamente tinha migrado para dentro do lúmen debaixo das células endoteliais dos vasos linfáticos (Figura 7B). Isto levou à formação de uma camada de espessura de fibras de colagénio no lúmen. A espessa camada de fibras de colágeno se tornou tortuoso e estratificada em associação com as alterações nos vasos linfáticos que recolhem, que passaram da fase de expansão para a fase de contração e, finalmente, para o estágio de fibrose (Figura 7c). No tipo da esclerose múltipla, da parede do vaso linfático foi espessada por causa da hiperplasia dos músculos lisos e fibras de colagénio. Além disso, o lúmen do vaso linfático foi reduzida e em forma de pinhole (Figura 8).

Discussão

Este estudo revelou que a progressão da doença em linfedema do membro é acompanhada por 1) o desenvolvimento de um alisamento das células endoteliais na recolha de vasos linfáticos, 2) uma desmontagem de adesões focais (desmossomas), 3) um crescimento e transformação das células do músculo liso, 4) um espessamento da membrana basal, e 5) uma proliferação de fibras de colágeno. Este é o primeiro estudo a relatar as alterações nas células endoteliais e membrana basal dos vasos linfáticos de recolha, a transformação de células de músculo liso, proliferação e de fibras de colagénio, durante o linfedema.

Até à data, apenas um pequeno número de relatórios examinaram as mudanças que afectam os tecidos normais e recolhendo vasos linfáticos no linfedema de membro, de modo que as alterações patológicas no linfedema permanecem desconhecidos. Em 1999, em um estudo utilizando microscopia eletrônica, Koshima

et al.

Relataram ter encontrado atrofia das células do músculo liso na coleta vasos linfáticos de pacientes com linfedema terminais [19]. Em um estudo usando análise de imunomarcação, Ogata

et al.

Relataram a possibilidade de a transformação de células de músculo liso na coleta de vasos linfáticos [20]. O nosso relatório é o primeiro sobre as mudanças progressivas que ocorrem na coleta de vasos linfáticos em linfedema leve ou moderada após linfadenectomia.

O lúmen de um canal linfático coleta é normalmente coberto por uma camada de células endoteliais. As células endoteliais são completamente envolvido pela membrana basal, que é rodeado por células musculares lisas e os elementos fibrosos. Um grande número de vasos de nutrientes e os nervos não mielinizadas penetrar no vaso linfático a partir do lado da adventícia e até os músculos lisos directamente por baixo do endotélio. Além disso, um certo número de válvulas tricúspide estão presentes e formar um fluxo de uma forma dirigida para o ângulo venoso [21], [22].

Recentemente, contracções espontâneas lentas foram encontrados para ocorrer nos vasos linfáticos em uma frequência de 2-4 vezes por minuto; e estas contracções activas foram encontrados para servir como a força motriz para o transporte linfático [23] – [25]. As condições que facilitam a ocorrência de contracções activos incluem um teor muito elevado de músculo liso na parede de vasos linfáticos, a presença de grandes quantidades de mitocôndrias e de glicogênio grânulos em torno do núcleo, e a penetração de vasos de alimentação para a camada de músculo liso directamente por baixo da endotélio. As funções dos vasos linfáticos que recolhem estão relacionados com o transporte e as capacidades de concentração. Neste estudo, temos classificados as mudanças na coleta de vasos linfáticos em 4 tipos diferentes.

O tipo normal consiste de vasos linfáticos que recolhem saudáveis. Os vasos linfáticos de recolha são divididos em 3 camadas, e células endoteliais linfáticas rodear de todo o perímetro do lúmen do vaso linfático. fibras de colágeno e músculos lisos estão presentes na camada média.

O tipo ectasis é uma condição que se encontra logo após linfadenectomia. Na recolha de vasos linfáticos que perderam sua abertura a jusante após linfadenectomia, a pressão endolinfática aumenta acentuadamente, eo fluxo linfático torna-se lenta. Histologicamente, o aumento da pressão endolinfática foi acompanhada por uma dilatação no lúmen dos vasos linfáticos e de recolha por um achatamento das células endoteliais dos vasos linfáticos. Os anexos intercelulares (DESMOSSOMOS) entre as células endoteliais também mudou gradualmente de forte para fraco. Eventualmente, estes anexos intercelulares será perdida, e os elementos fibrosos vai ficar exposta no lúmen do canal linfático recolha. Além disso, os músculos lisos na camada média passou por uma transformação, com diferenciação gradualmente células musculares lisas transformando-se em células musculares lisas sintéticos. Como a parede de vasos linfáticos dilatados, as fibras de colágeno se tornar fina e alongada.

No tipo de contração, o aumento constante na pressão endolinfática leva a compensatória alterações histológicas que afetam principalmente as células musculares lisas. Devido à elevação sustentada da pressão endolinfática, as células endoteliais dos vasos linfáticos permanecer liso. Em termos de células do músculo liso, algumas das células do músculo liso transformadas sintéticos migrou directamente abaixo das células endoteliais, promovendo a proliferação de fibras de colagénio. Isto resultou na formação de fibras de colagénio espessas que se misturam com as células do músculo liso na camada média. Por conseguinte, as células musculares lisas contráctil teria dificuldade para contrair devido a impedimento pelas fibras de colagénio espessas, resultando num declínio funcional nos vasos linfáticos de recolha. O mesmo aplica-se para as células de músculo liso sintéticas, uma vez que as quantidades crescentes de células do músculo liso e as fibras de colagénio foram acompanhadas por um aumento na quantidade de fibras elásticas entre as células do músculo liso

o tipo de esclerose., O anexos intercelulares entre as células endoteliais linfáticas foram perdidos, fazendo com que o fluido linfático fluir dentro dos vasos linfáticos que recolhem a vazar para fora. A pressão nos vasos linfáticos de recolha é mantida em níveis elevados em alguns casos mas é baixa nos outros devido à fuga do fluido linfático. Este tipo é caracterizado por um aumento marcado das células musculares lisas e fibras de colágeno. No entanto, como a celulite desenvolvidos, a quantidade de células do músculo liso nos vasos linfáticos recolhem diminuíram, e os elementos fibrosos tornar os componentes principais. Como consequência, tanto a capacidade de transporte ea capacidade de concentração tornar-se perdido. Os vasos linfáticos foi lúmen seja acentuadamente estreitada ou completamente obstruído, provocando um agravamento do linfedema.

em resposta ao stress exógeno devido ao aumento da pressão endolinfática, células do músculo liso na recolha de vasos linfáticos passam por uma transformação de “contrácteis” células musculares lisas especializados em funções contrácteis para células de músculo liso “sintéticos”, que desempenham um papel importante na remodelação da estrutura tridimensional das paredes dos vasos linfáticos de recolha. As células musculares lisas que se submetem a transformação irão proliferar e migrar de novo e vai produzir factores de crescimento, bem como enzimas que degradam substratos na matriz extracelular. Tais funções musculares lisas são considerados importantes no mecanismo de cura contra os danos dos vasos linfáticos. No entanto, se este processo torna-se continua e crónica, que tende a levar para a patogénese de doenças tais como o endurecimento dos vasos linfáticos e a uma diminuição da sua força contráctil.

As células musculares lisas “sintéticos” migrar directamente por baixo do endotélio de vasos linfáticos, onde elas proliferam e promover a formação de lesões caracterizadas pelo espessamento da parede dos vasos linfáticos. Neste ponto, as alterações são reversíveis, fibrose e muitas vezes desenvolve-se quando a doença continua e se torna crónica ou quando as respostas inflamatórias consideráveis ​​ocorrem por causa de linfangite e celulite. Essas mudanças na coleta de vasos linfáticos são denominados lymphosclerosis (Figura 8).

As limitações deste estudo consistem na possibilidade de diferenças no processo da doença entre linfedema do membro superior e linfedema dos membros inferiores. Uma análise mais aprofundada desta questão será necessário no futuro. Além disso, a associação entre os achados deste estudo e a eficácia do tratamento também poderia ser usado como um tópico para um estudo mais aprofundado. Além disso, o ponto em que uma alteração é reversível ou irreversível ainda não é clara.

Este estudo revelou que 1) o aumento da pressão endolinfática que se desenvolve após um linfadenectomia é acompanhada por alterações histológicas para a recolha de vasos linfáticos e dos dois ) estas alterações ocorrem antes do início de linfedema. É importante evitar o agravamento do linfedema suprimindo as alterações degenerativas irreversíveis na recolha de vasos linfáticos, começando intervenções terapêuticas em fases relativamente iniciais, como na fase de dilatação e contracção. Os resultados deste estudo poderia levar ao esclarecimento da fisiopatologia do aparecimento de linfedema do membro após o tratamento de câncer e para o desenvolvimento de um tratamento radical.

Reconhecimentos

Somos gratos a Makiko Haragi para a preparação da ilustração neste relatório e Takashi Takaki de JEOL Co., Makoto Enomoto, Suaki Kobayashi, Masami Hashidume, Tsuyoshi Oka de Histo Ciência Laboratory Co., pelo seu apoio na análise microscópica.