Abstract

Objectivo

Melhorar a respostas imunológicas, incluindo antígeno leucocitário humano (HLA) de classe I expressão em células de tumor e o reconhecimento e eliminação das células tumorais por linfócitos T citotóxicos específicos de tumor (CTL), é considerado um novo conceito de radioterapia. O presente estudo examinou pacientes submetidos à pré-operatória hyperthermo-quimioradioterapia (Hcrt) para o cancro rectal localmente avançado para avaliar a correlação entre a expressão de HLA de classe I e o resultado clínico

Materiais e Métodos

Setenta e oito. pacientes com adenocarcinoma rectal localmente avançado que receberam Hcrt pré-operatória foram inscritos. A idade média dos pacientes era de 64 anos (variação, 33-85 anos) e 4, 18, e 56 pacientes tiveram estágio clínico I, doença II e III, respectivamente. e tecidos embebidos em parafina excisada antes e depois Hcrt fixados com formalina foram submetidos a análise imuno-histoquímica com um anti-classe I de HLA-A, anticorpo B, C. HLA de classe I expressão foi graduada de acordo com a positividade das células tumorais.

Resultados

Na pré-Hcrt, o número de espécimes classificados como Grau 0 e 1 foram 19 (24%) e 58 (74 %), respectivamente. Apenas um paciente (1%) mostrou expressão de Grau 2. No entanto, 6 (8%), 27 (35%), 7 (9%), e 12 (15%) amostras de pós-Hcrt foram classificados como grau 0, 1, 2, e 3, respectivamente. Houve um aumento significativo na expressão de HLA de classe I em amostras pós-Hcrt (p 0,01). No entanto, nem pré nem pós-Hcrt expressão de HLA de classe I afetados sobrevida global ea sobrevida livre de metástases à distância no estádio clínico III pacientes. A análise univariada revelou que Post-Hcrt HLA de classe I expressão mostrou uma relação negativa significativa com LC (p 0,05). No entanto, a análise multivariada mostrou que não houve correlação entre a expressão de HLA de classe I e resultado clínico.

Conclusão

Hcrt aumentou HLA de classe I expressão em pacientes com câncer retal. No entanto, a análise multivariada não mostrou nenhuma correlação entre o nível de HLA expressão de classe I e prognóstico

Citation:. Sato H, Suzuki Y, Ide M, Katoh T, Noda S-e, Ando K, et al. (2014) HLA Classe I Expressão e sua alteração pelo pré-operatória Hyperthermo-Quimioradioterapia em pacientes com câncer retal. PLoS ONE 9 (9): e108122. doi: 10.1371 /journal.pone.0108122

editor: Torbjörn Ramqvist, Karolinska Institutet, na Suécia

Recebido: 27 Março, 2014; Aceito: 20 de agosto de 2014; Publicação: 26 de setembro de 2014

Direitos de autor: © 2014 Sato et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Data Availability:. O autores confirmam que todos os dados subjacentes às conclusões estão totalmente disponíveis sem restrições. Os dados estão disponíveis a partir da Escola de Pós-Graduação da Universidade Gunma do Comitê de Ética Medicina Institucional Data Access /para os investigadores que preencham os critérios para o acesso a dados confidenciais

Financiamento:.. Os autores não têm apoio ou financiamento para relatar

CONFLITO dE iNTERESSES:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

as evidências acumuladas suporta a importância da imunidade mediada por células para controlar o crescimento do tumor e eliminar metástases distantes [1] . antigénio de leucócitos humanos (HLA) de classe I e moléculas de linfócitos T citotóxicos específicos para o antigénio de tumor (CTL) desempenham um papel crucial na estas respostas. HLA de classe I de moléculas expressas por células tumorais apresentam antígenos derivados do tumor com o CTL, que então matar as células-alvo [2]. Muitos estudos relatam uma correlação significativa entre prognóstico clínico ea expressão de HLA de classe I pelo esôfago, pulmão não-pequenas células, cabeça e pescoço de células escamosas, e cancros da bexiga [3] – [8]. Além disso, a maioria desses relatórios concluem que os doentes com cancros de classe baixa HLA-expressando Eu tenho um pior prognóstico do que aqueles com cancros de alto expressar.

A radioterapia é uma importante forma de terapia anti-câncer, e é usado para tratar vários tipos de câncer, independentemente do estágio clínico. É geralmente aceite que a irradiação induz a morte celular através de apoptose e /ou necrose ao danificar o ADN (directa ou indirectamente). No entanto, estudos recentes sugerem que a morte celular induzida por radiação imunogénica é um conceito diferente da morte celular mais “tradicional” induzida por radiação [9] – [11]. O conceito subjacente a morte celular induzida por radiação imunogénica baseia-se na indução de anticorpos anti-tumorais respostas de CTL imunes por radioterapia com modificação dos epítopos imunogénicos no tumor HLA classe I de moléculas. Radioterapia aumenta a expressão de HLA de classe I de moléculas por células de melanoma humano e células de rim e subcutâneos em ratinhos transgénicos HLA-A2 [12]. Em contraste, Speetjens et ai. relataram que a irradiação não fez efeito expressão de HLA de classe I pelas células de cancro rectal [13]. No entanto, alguns relatórios examinaram a correlação entre a radioterapia ea expressão de HLA em células tumorais em um ambiente clínico [12], [14], [15]. alterações Além disso, com o melhor de nosso conhecimento, nenhum estudo examinou na expressão de HLA de classe I de células tumorais em um mesmo paciente, antes e após a radioterapia. pacientes com câncer retal

Nós previamente tratados com pré-operatório hyperthermo-quimioradioterapia (Hcrt ) por vários anos e relataram os resultados clínicos [16], [17]. Aqui, obteve-se amostras a partir dos mesmos pacientes a examinar (i) Expressão de HLA de classe I em células de cancro rectal, (ii) das alterações de HLA de classe expressão I induzida por Hcrt, e (iii) a relação entre a expressão da classe I de HLA e prognóstico.

Materiais e Métodos

Ética declaração

Todos os pacientes obtido o consentimento informado por escrito para participar neste estudo. Este estudo foi aprovado pelo conselho de revisão institucional de Gunma University Graduate School of Medicine, Gunma, Japão (número de aprovação IRB é 1051). O anonimato dos pacientes foi preservada.

Pacientes e espécimes

Setenta e oito pacientes com adenocarcinoma rectal localmente avançado, que foram consecutivamente tratados com Hcrt seguido por cirurgia no Hospital da Universidade Gunma entre 2003 e 2011, foram incluídos no estudo. amostras pré e pós-Hcrt estavam disponíveis para todos os pacientes.

As características do paciente e os tumores são resumidos na Tabela 1. A idade mediana dos pacientes no início do Hcrt foi de 64 anos (gama, 33-85 anos). A média ea mediana de acompanhamento períodos foram 45 e 40 meses (variação, 3-103 meses), respectivamente. Para processamento de diagnóstico, todos os pacientes foram submetidos a tomografia computadorizada (TC) do abdômen e tórax para facilitar o estadiamento de metástases regionais e à distância. estágio T foi determinada por tomografia computadorizada e ressonância magnética (MRI), imagens ponderadas em especial T2, de acordo com a Classificação TNM de tumores malignos (UICC, 7ª edição). No geral, 4, 18 e 56 pacientes foram classificados com a fase I, doença II e III, respectivamente. As amostras de 56 pacientes com doença em estágio III foram ainda examinadas para determinar a correlação entre a expressão de HLA de classe I e prognóstico.

As amostras de tecido foram excisadas por via endoscópica de tumores do reto antes Hcrt e depois cirurgicamente após Hcrt (mediana , de 10 semanas, com média de 12 semanas; alcance, 1-54 semanas). tecidos excisados ​​foram então fixadas em formalina a 10% durante 24 h e embebidas em parafina. HLA de classe I expressão foi analisada por imuno-histoquímica.

Tratamentos

Todos os 78 pacientes foram submetidos a Hcrt pré-operatório, conforme relatado anteriormente [16]. Resumidamente, a radioterapia externa (raios X; 10 MV) foi entregue usando um anteroposterior ou três ou técnica de caixa de quatro campos. O volume alvo clínico (CTV) composta do tumor primário e de todo o tecido mesorreto. A dose total de radiação foi de 40-54 Gy (mediana, 50 Gy), com fracções diárias de 2 Gy. Setenta e quatro pacientes também receberam 5-fluorouracilo (5-FU) e levofolinato, três receberam UFT e leucovorina, e um recebeu capecitabina.

tratamento de hipertermia foi realizada numa base semanal (2-6 sessões (mediana, 5 sessões), cada um com duração de 30 min), utilizando equipamento de aquecimento capacitivo e uma radiofrequência de 8 MHz (Thermotron-RF 8, Yamamoto Vinita Co. Ltd., Japão).

a cirurgia (excisão mesorreto principalmente total) foi realizada a 1-54 semanas (mediana, 10 semanas) após a conclusão do Hcrt. Setenta e cinco pacientes (96%) foram submetidos à cirurgia dentro de 17 semanas. Vários pacientes que apresentaram uma resposta clínica completa para Hcrt recusou a cirurgia; portanto, a cirurgia foi realizada em apenas 3 pacientes (4%) dos pacientes depois de mais de 34 semanas.

imunocoloração para HLA de classe I

fixado em formalina e espécimes embebidos em parafina foram usados ​​para a imuno-histoquímica análise. As secções de tecido foram desparafinadas e submetida a recuperação de antigénios com a solução de recuperação de epítopo (Target Retrieval Solution, citrato de pH 6; Dako, Glostrup, Dinamarca) a 121 ° C durante 20 min. atividade da peroxidase endógena foi bloqueada por Dako real (Dako). Um anticorpo primário contra HLA de classe I A, B da cadeia pesada, C, EMR8-5 (Hokudo, Sapporo, Japão), que não reconhece a HLA de classe I pesado complexo de cadeia-β2-microglobulina-péptido, foi diluída (1:70 ) em Diluente de Anticorpo Solução com fundo redução de componentes (Dako) e incubou-se com os cortes de tecidos a 4 ° C durante a noite [18]. As secções foram então incubadas com uma simples mancha kit MAX-PO Histofine (Nichirei, Tóquio, Japão) durante 30 min. Finalmente, as secções foram tratadas com 3, 30-diaminobenzidina (DAB, Dako) durante 1 min, e contrastadas com hematoxilina. Espécimes de linfonodo normais serviram como controlos positivos. O isotipo de imunoglobulina irrelevante (controlo negativo IgG1; Dako) foi utilizado como controle negativo

Dois autores (HS e MI, ambos cegos aos dados clínicos e patológicos) avaliou HLA de classe I positividade em um semi. forma Quantitativas. A coloração foi classificada como segue: Grau 0, 10% de células marcadas; Grau 2, 10-50% de células coradas; Grau 3, 50-90% de células coradas; Grau 4, 90% de células marcadas. A relação entre a expressão de HLA de classe I e prognóstico clínico foi avaliado dividindo-se as amostras de pós-Hcrt em dois grupos, como previamente descrito [6], [13], [19]: Graus 0-1 e 2-3 tipos. A relação entre a expressão de HLA de classe I e prognóstico clínico não foi examinado em amostras pré-Hcrt porque apenas um paciente apresentou expressão Grau 2-3 antes Hcrt.

A análise estatística

Survival foi medida em dias, a partir de dia 1 de Hcrt ao momento da morte ou final acompanhamento. A análise univariada da taxa atuarial de sobrevida global (OS), a taxa de controle local (LC), ea taxa distante livre de metástases sobrevivência (CPOS) para cada fator de correlação clínica foram analisados ​​utilizando o método de Kaplan-Meier, e as diferenças entre as curvas de sobrevida foram analisadas pelo teste de log-rank. Na análise multivariada, utilizando o modelo de riscos proporcionais de Cox foram realizados para examinar a correlação entre prognóstico e múltiplas variáveis ​​clínico-patológicas. As diferenças na expressão do HLA de classe I entre espécimes pré e pós-Hcrt foram examinadas usando o teste de Wilcoxon. As diferenças foram consideradas significativas para P 0,05. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando software SPSS, versão 21 (SPSS Inc. Japão, Tóquio, Japão).

Resultados

expressão de HLA de classe I

Figura 1 mostra HLA de classe I expressão por células de tumor rectal. O número de amostras pré-Hcrt categorizados como Grau 0, 1, 2, e 3 foi de 19 (24%), 58 (74%), 1 (1%), e 0 (0%), respectivamente. O número de amostras pós-Hcrt categorizados como Grau 0, 1, 2, e 3 foi de 6 (8%), 27 (35%), 7 (9%), e 12 (15%), respectivamente. Vinte e seis pacientes (33%) apresentaram uma resposta patológica completa (PCR) pós-Hcrt. A Tabela 2 mostra que a HLA de classe I expressão correlacionada com a idade do paciente ( 60.

vs

≤60), mas não com outro qualquer outra características do tumor ou doença em estágio

Imagens representativas mostrando HLA. expressão de classe I pelas células de câncer de reto. A, Grau 0 expressão. B, Grau 1 expressão. C, Grau 2 expressão. D, de Grau 3 expressão. Ampliação, × 200.

mudanças na expressão de HLA de classe I induzidas por Hcrt

No geral, 26 pacientes atingiram PCR após Hcrt. Alterações na expressão de HLA de classe I foram avaliados em amostras tumorais de 52 pacientes restantes. Destas, 26 (50%) apresentaram aumento da expressão de HLA de classe I, 3 (6%) apresentaram expressão reduzida e 23 (44%) não apresentaram qualquer alteração. O aumento na expressão do HLA de classe I, após Hcrt foi significativa (p 0,01) (Figura 2). Dos 26 pacientes que alcançaram pCR, 5 (19%) mostraram expressão Grau 0 pré-Hcrt e 21 (81%) mostrou um grau de expressão. Não houve correlação significativa entre o grau de HLA de classe I expressão pré-Hcrt e PCR.

Grades de expressão de HLA de classe I em amostras de um mesmo paciente. A, pré-Hcrt espécime; Grau 0. B, pós-Hcrt espécime; Grau 3. Ampliação, × 200. C, HLA expressão de classe I em amostras pré e pós-Hcrt. valor preditivo foi testado utilizando o teste de Wilcoxon.

Correlação entre a expressão de HLA de classe I e prognóstico

O cinco anos OS, LC, e CPOS para todos os 78 pacientes com grau 0 -1 pós-Hcrt HLA de classe I expressão foram de 76%, 94% e 76%, respectivamente, enquanto o sistema operacional de 5 anos, LC, e CPOS de pacientes com grau 2-3 pós-Hcrt HLA de classe I expressão foram de 79%, 74%, e 79%, respectivamente (Tabela 3). Não houve correlação significativa entre os três parâmetros de resultados e da classe I expressão Grau de HLA. O pCR induzida por Hcrt mostrou uma relação significativa com boa LC (p 0,05).

Em seguida, examinamos mais amostras de 56 pacientes com estágio III da doença para determinar a correlação entre a expressão do HLA de classe I e prognóstico. A 5 anos OS, LC, e DMFs para estágio III pacientes com grau 0-1 pós-Hcrt HLA de classe I expressão foram 70%, 100% e 70%, respectivamente, e o sistema operacional de 5 anos, LC, e CPOS para pacientes com grau 2-3 Hcrt pós-expressão de HLA de classe I foram 92%, 77%, e 85%, respectivamente (Figura 3). Pós-Hcrt HLA de classe I expressão mostrou uma relação negativa significativa com LC (p 0,05). No entanto, a análise multivariada mostrou que nenhuma das variáveis ​​correlacionadas com o prognóstico clínico (Tabela 4).

Os resultados clínicos de 56 pacientes com estágio III da doença. (A; sobrevida global, B, controle local, e C; sobrevida livre de metástases à distância). Low HLA de classe I expressão: Graus 0 e 1; alta expressão: Os graus 2 e 3.

A seguir, investigou examinou se o aumento de HLA de classe I expressão induzida por Hcrt melhorou o resultado clínico de fase III pacientes. O sistema operacional de 5 anos e CPO para o grupo de “aumento” e o grupo “constante ou diminuída” foram de 77% e 78% (p = 0,97) e 71% e 78% (p = 0,66), respectivamente. Não houve correlação significativa entre alterações na expressão de HLA de classe I e OS e CPOS. Por outro lado, o LC-5 anos para o grupo de “aumento” e o grupo “constante ou diminuída” foi de 82% e 100%, respectivamente (p = 0,04). A LC do “aumento” grupo de HLA de classe I expressão foi significativamente pior do que a de “constante ou diminuiu” grupo de expressão

Discussão

Os principais resultados do presente estudo foram os seguintes.: (i) 19 (24%) e 58 (74%) de amostras de tecido de tumor de pacientes com adenocarcinoma rectal mostrou Grau 0 ( 10%) ou de grau 1 (10-50%) a expressão de HLA de classe I, respectivamente; (Ii) pré-operatória Hcrt conduziu a um aumento significativo na expressão de HLA de classe I; e (iii) a análise multivariada não mostrou associação positiva significativa entre a expressão de classe I HLA e sobrevivência.

Speetjens et al. examinaram a expressão de moléculas de HLA de classe I em cancro rectal [13]. Eles categorizados expressão de HLA de classe I como se segue: ausente (sem expressão), (células positivas 0-50%) negativos e positivos (células de 51-100%) positivos. Eles relataram que 9,7%, 32%, e 58% das amostras foram categorizados como ausente, negativo ou positivo, respectivamente, quando coradas para o antigénio HLA de classe I usando anti-HLA anticorpo, HCA2, mas que 2,1%, 21%, e 77% estavam ausentes, negativo ou positivo, respectivamente, quando coradas para o antigénio HLA de classe I, utilizando o anticorpo anti-HLA, HC10. Apenas um paciente no presente estudo mostrou 50% de HLA de classe I positividade. Essa discrepância pode ser parcialmente explicado por três fatores. Em primeiro lugar, a classe monoclonal primário anti-HLA I anticorpos eram diferentes. Usaram HCA2 (que reage com a molécula HLA-A (não HLA-A24), HLA-B73, e HLA-C moléculas, assim como HLA-E, HLA-F e antigénios HLA-G), e HC10 (que reage com o HLA -B e HLA-C moléculas HLA-A10 e, -A28, -A29, -A30, -A31, -A32 e -A33 cadeias pesadas) como os anticorpos primários. No entanto, utilizou-se EMR8-5, que reage com a molécula HLA-A * 2402, A * 0101, A * 1101, A * 0201, A * 0207, B * 0702, B * 0801, B * 1501, B * 3501, B * 4001, B * 4002, B * 4006, B * 4403, Cw * 0102, Cw * 0801, Cw * 1202, Cw * 1502 e, tal como o anticorpo primário [18]. Em segundo lugar, a avaliação semi-quantitativa não é a maneira mais precisa para avaliar HLA de classe I expressão. Finalmente, as diferenças podem ser explicadas pela “cancro immunoediting conceito” proposto por Dunn, que descreve o processo de alteração do tumor consistia em três fases sequenciais (eliminação, de equilíbrio e de escape) para ser aceitável para o sistema imune [20]. Neste conceito, a célula do tumor em desenvolvimento tinha sido eliminado pelo sistema imunitário antes de se tornarem clinicamente aparente (eliminação), no entanto, uma célula de tumor raro não foi morto por resposta imune, e, consequentemente, estas células tumorais surgem para causar doença clinicamente aparente (equilíbrio e escapar). Portanto, câncer avançado tem tendência de baixa condição antigênica. Além disso, em comparação com o estudo de Speetjens, o presente estudo envolveu mais pacientes com adenocarcinoma rectal localmente avançado (72% dos pacientes apresentavam doença estágio III da doença). Assim, podemos ter encontrado níveis mais baixos de expressão de HLA de classe I. De acordo com o “conceito immunoediting câncer”, HLA de classe I expressão em células tumorais diminui com o avançar da fase

Alguns relatórios têm alterações induzidas por radiação examinados em HLA de classe I expressão em diferentes fases clínicas.; no entanto, tem sido demonstrado

em

vitro

[12], [14], [15], [21]. Speetjens et al., Encontraram também não há diferenças significativas na expressão de HLA de classe I em amostras tumorais de doentes tratados com ou sem irradiação [13]. Em contraste, descobrimos que a expressão de HLA de classe I em células de cancro rectal aumentou após Hcrt e esta discrepância pode ser devida à dose de radiação, o intervalo entre a radioterapia e cirurgia, ou para os diferentes métodos de análise utilizados. Speetjens et al., Tratou-se um grupo de pacientes com 25 Gy por cinco fracções dentro de 10 dias da cirurgia e, em seguida, em comparação a expressão do HLA em células tumorais de pacientes irradiados e não irradiados. Em contraste, nos pacientes tratados com 50 Gy por 25 fracções dentro de 5 semanas após a cirurgia, e a mediana do tempo entre a cirurgia e a radioterapia foi de 10 semanas. Em seguida, em comparação expressões de HLA de classe I em células de tumor a partir de amostras pré e pós-Hcrt dos mesmos pacientes. REITs et al. relataram que a irradiação conduziu a um aumento dependente da dose nos níveis de péptidos derivados de proteínas intracelulares existentes e o aumento da síntese de proteínas através da activação de mTOR. Isto resultou em um aumento na expressão de MHC de classe I. No entanto, a dose /fracção óptima e o intervalo entre a irradiação e de avaliação para o maior nível de expressão de HLA de classe I na fase clínica é desconhecida.

Por outro lado, as alterações na expressão de HLA de classe I pode por Induzida por outras do que a radiação, por exemplo, quimioterapia e /ou hipertermia factores. Gamerio et ai. relataram que a hipertermia conduziu a um aumento significativo na expressão de proteínas de classe I do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) na superfície de células de adenocarcinoma do cólon de murino que expressa CEA humano [22]. Além disso, Ohtsukasa et ai. relataram que as drogas anti-cancro (por exemplo, 5-FU, SN-38, e CDDP) induziu um aumento acentuado na expressão de MHC de classe I pelas células de linhas celulares de cancro do cólon humano (COLO 201)

em

vitro

[23]. Além disso, eles também relataram que as drogas anti-câncer induzida MHC classe I expressão em células tumorais de cólon murino

em

vivo

. Eles pensaram que esta mudança pode ser induzida pela quimioterapia induzida por produção de proteínas endógenas e /ou para o aumento do transporte de material acumulado para a membrana celular.

Estes resultados sugerem que o aumento de HLA de classe I de expressão observado na presente estudo foi aumentada através de uma combinação de radioterapia, quimioterapia, hipertermia e. Mais estudos são necessários para entender os mecanismos subjacentes aumenta na classe HLA expressão I induzida por diferentes tratamentos; No entanto, este é o primeiro relatório de mostrar que a pré-Hcrt aumenta a expressão HLA de classe I em um ambiente clínico. Este resultado sugere que a radioterapia combinação com HLA de classe I mediada por imunoterapia pode amplificar as respostas imunitárias anti-tumor fracos causados ​​pela perda de expressão de HLA de classe I, que é um importante mecanismo pelo qual as células tumorais escapar imunovigilância.

esperado que os pacientes portadores de tumores com expressão de classe alta HLA eu teria um prognóstico clínico favorável; No entanto, quando foi realizada a análise univariada, não houve associação positiva significativa entre a expressão de classe I HLA e OS ou CPOS no estágio III pacientes. Além disso, LC mostrou uma associação negativa significativa com pós-Hcrt expressão de HLA de classe I em fase III pacientes. Em contraste com os resultados aqui apresentados, a maioria dos estudos anteriores relatam que os doentes com tumores que mostram elevada expressão de HLA de classe I teve um melhor prognóstico [3] – [8]. Além disso, quando foi investigada a correlação entre as alterações induzidas por Hcrt na expressão de classe I HLA e OS, LC, e CPOS, descobrimos que LC mostrou uma correlação negativa significativa com o aumento da expressão do HLA de classe I. Existem várias razões para estas diferenças, como se segue: (i) factores cirúrgicos podem ter um forte impacto no prognóstico clínico do que a expressão de HLA de classe I induzida por Hcrt pré e o seu efeito imunológico; (Ii) os fatores imunológicos que afetam o prognóstico clínico são bastante complexos (o efeito de HLA expressão de classe I não era forte o suficiente para afetar o prognóstico clínico); e (iii) o número de fase III pacientes (56) foi insuficiente para permitir uma avaliação significativa do prognóstico clínico. . Portanto, mais estudos são necessários para estabelecer a associação entre a expressão I HLA de classe e prognóstico em pacientes com câncer retal

Em conclusão, o presente estudo sugere que Hcrt pode aumentar HLA de classe I expressão por células de câncer de reto; No entanto, a análise multivariada não mostrou uma associação entre a expressão de HLA de classe I e prognóstico.