Abstract
receptores de somatostatina (TSMs) são expressos em células de câncer de tireóide, mas a sua importância biológica não é bem compreendida. O objetivo deste estudo foi avaliar SSTs no cancro da tiróide bem diferenciado (WDTC) e pouco diferenciado (PDTC) por meio de imagens e ferramentas moleculares e sua relação com a eficácia do tratamento análogo de somatostatina. Trinta e nove casos de carcinoma de tireóide foram avaliados (20 PDTC e 19 WDTC). Depreotida cintilografia e os níveis de mRNA de sst-subtipos, incluindo a variante truncada sst5TMD4, foram realizados. scans -depreotida foram positivos no tumor recorrente no pescoço em 6 de 11 (54%) PDTC, e naqueles com metástases pulmonares em 5/11 casos (45,4%); sst5TMD4 estava presente em 18/20 (90%) de PDTC, sendo o subtipo SST-expressa com maior densidade, com um aumento de 20 vezes em relação ao sst2. Em WDTC, sst2 foi o mais representado, enquanto sst5TMD4 não foi encontrado; sst2 foi significativamente aumentada em comparação com PDTC em WDTC. Cinco -depreotida PDTC positivo receberam octreotida durante 3-6 meses num estudo piloto com nenhuma alteração no tamanho das lesões em três deles, e um aumento significativo na pulmonar e lesões cervicais nos outros 2. Todos os pacientes tratados com PDTC octreotida mostrou alta expressão de sst5TMD4. análise da curva ROC demonstrou que apenas sst5TMD4 discrimina entre PDTC e WDTC. Conclui-se que é sobre-expresso em sst5TMD4 PDTC e pode estar envolvido na falta de resposta ao tratamento com análogo de somatostatina
citação:.-Puig Domingo M, Luque RM, Reverter JL, López-Sánchez LM, Gahete MD, Culler MD, et ai. (2014) A truncado de isoformas de somatostatina Receptor5 (sst5TMD4) está associada com pouco diferenciada do cancro de tiróide. PLoS ONE 9 (1): e85527. doi: 10.1371 /journal.pone.0085527
editor: Miguel López, da Universidade de Santiago de Compostela School of Medicine – CIMUS, Espanha |
Recebido: 13 Setembro, 2013; Aceito: 28 de novembro de 2013; Publicação: 21 de janeiro de 2014
Direitos de autor: © 2014 Puig-Domingo et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. M. Puig-Domingo, JP Castaño, RM Luque e I. Halperin já recebeu honorários de palestras da Novartis e Ipsen. M. Puig-Domingo recebeu honorários por participação em conselhos consultivos da Genzyme. Este trabalho foi financiado pelos seguintes subsídios: BIO-0139, CTS-5051, PI-036-2012, BFU2010-19300, CIBERobn, (a R.M. Luque e J. P. Castaño); programa “Sara Borrell” CD11 /00276 (a M.D. Gahete) e do programa “Juan de la Cierva” JCI-2.009-05.675 (a L. M. López-Sánchez). Este trabalho foi parcialmente financiado pela Novartis Oncology Espanha (com M. Puig-Domingo e I. Halperin). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
Conflito de interesses:. M. Puig-Domingo, J. P. Castaño, R.M. Luque e I. Halperin já recebeu honorários de palestras da Novartis e Ipsen. M. Puig-Domingo recebeu honorários por participação em conselhos consultivos da Genzyme. Este trabalho foi financiado pelos seguintes subsídios: BIO-0139, CTS-5051, PI-036-2012, BFU2010-19300, CIBERobn, (a R.M. Luque e J. P. Castaño); programa “Sara Borrell” CD11 /00276 (a M.D. Gahete) e do programa “Juan de la Cierva” JCI-2.009-05.675 (a L. M. López-Sánchez). Este trabalho foi parcialmente financiado pela Novartis Oncology Espanha (com M. Puig-Domingo e I. Halperin). Isto não altera a adesão dos autores para todas as políticas de PLoS One sobre os dados e materiais de compartilhamento.
Introdução
O câncer de tireóide em sua papilar e folicular formas bem diferenciadas (WDTC) têm um excelente prognóstico com taxas muito elevadas de cura após tratamento cirúrgico seguido por iodo radioactivo [1], [2]. No entanto, o tratamento de doentes com cancro da tiróide -tijolos pouco diferenciado (PDTC) com iodo radioactivo (RAI) é controverso e difícil, com nenhum tratamento eficaz disponível até o aparecimento recente de inibidores multi-alvo de tirosina-quinase [3]. é geralmente aceite que PDTC ocorre tanto
de novo
ou o progresso de um WDTC pré-existente através de um processo de várias etapas de alterações genéticas e epigenéticas. Novas vias e alvos moleculares estão sob investigação para descobrir o processo de desdiferenciação de células de cancro da tiróide [4].
A somatostatina é um péptido ubíqua a partir do tracto gastrointestinal, sistema nervoso central, que exerce muitas funções biológicas em ambos os sistemas endócrino e não tecidos -endocrine por ligação aos seus subtipos de receptores cinco (sst1-5) [5]. A expressão de receptores de somatostatina (TSMs) em tumores provenientes de diferentes tecidos, tem sido a base da utilização de análogos da somatostatina como uma opção de bio-terapêutico conduzindo assim a estabilização do crescimento do tumor e aumentando o tempo de sobrevivência dos pacientes, em alguns tipos de cancro [6], [7 ]. Estudos recentes e antigos indicam a presença de SST em amostras de diferentes condições patológicas da glândula tireóide, incluindo câncer de tireóide não-medular [8], [9]
A família de receptores sst foi completamente caracterizado, e classicamente, 5 subtipos foram identificados com diferentes implicações biológicas no ciclo celular [8]. subtipos sst 2 e 5 estão envolvidos no controlo da secreção da hormona, bem como o crescimento celular, enquanto SST1, 3 e 4 estão principalmente implicados nas funções não-hormonais [10] – [12]. tratamentos análogo da somatostatina utilizados na prática clínica envolve a ligação de sst2 e 5 com uma afinidade diferente [13], [14], com sst2 tendo a afinidade de ligação para as mais utilizadas compostos, octreotida e lanreotida [15] máxima, enquanto pasireotídeo é um novo composto segmentação sst5 com uma afinidade mais elevada [16], [17]. Recentemente, duas novas variantes sst5 humanos funcionais foram identificados, o chamado sst5TMD4 e sst5TMD5, gerados através de splicing não-canônico, e exibindo únicos /características funcionais moleculares [18], [19]. Curiosamente, sst5TMD4 tem sido detectada em doentes com adenomas secretores de GH e do cancro da mama [19] – [21]. sst5TMD4 expressão tem sido associada a resposta fraca ao tratamento de octreotida em acromegalia. No entanto, seu significado funcional não é bem descrito em outros tipos de tumores.
Aqui, realizamos um estudo retrospectivo em nível molecular para explorar o potencial associação de sst subtipos fenótipo e, particularmente, sst5TMD4, em WDTC e PDTC pacientes, o seu uso potencial como um marcador biológico e suas implicações terapêuticas.
Materiais e Métodos
o estudo foi realizado de acordo com os princípios da Declaração de Helsinki, (revisão de Edimburgo de 2000) e foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Hospital Clinic de Barcelona (Comité Ético de Investigação Clínica, CEIC), Barcelona, Espanha. A natureza do estudo foi explicado aos pacientes, e consentimento informado por escrito foi obtido em cada caso.
Os pacientes
O grupo de estudo consistiu em 39 pacientes (29 mulheres /10 homens) de dois hospitais universitários. Entre estes 39 indivíduos, 20 pacientes tiveram PDTC (tabela 1), com idade média 57 ± 13 anos (12 mulheres /8 homens); a partir de 20 casos esses PDTC, 18 eram tumores papilares e 2 eram de origem folicular. Todos tiveram a doença ativa (estágio IV da classificação TNM), com um follow-up que varia de 6 a 21 anos e 9 deles morreram durante o acompanhamento. As concentrações de tiroglobulina nestes pacientes variou 4-29595 ng /ml. Todos os pacientes foram tratados com um protocolo terapêutico semelhante seguindo recomendações internacionais [1], [2]. Esses pacientes portadores de PDTC necessário várias cirurgias, quando indicada e mais de uma dose da RAI; radioiodoterapia não foi utilizado quando a captação RAI tornou-se negativa, apesar de progressão da doença. PDTC pacientes foram tratados com tiroxina em doses supressivas enquanto os casos bem diferenciadas recebeu tiroxina a uma dose de segmentação TSH um valor normal-baixa ( 2 mIU /mL). Todos os casos PDTC mostrou capacidade negativa prendendo RAI durante a sua evolução e todos tiveram recidiva loco-regional pescoço e /ou metástases extracervical, tanto no sistema nervoso central, ossos, pulmão ou mediastino detectados por diferentes procedimentos de imagem, incluindo ultra-sonografia, tomografia computadorizada, ressonância magnética, e
18F-FDG-PET scan. A fim de participar de um estudo piloto no qual octreotide somatostatina analógico seria administrado, em 11 dos estes 20 pacientes, um
cintilografia com 99mTc-depreotida foi realizada para avaliação da presença sst no tecido do tumor primário residual e metástases. Cinco dos 11 pacientes nos quais o
cintilografia 99mTc–depreotida mostraram uma imagem positiva do tumor primário residual e /ou tecido metastático e doença progressiva por critérios RECIST receberam tratamento com a longa duração de acção somatostatina octreótido análogo em doses de 30 mg IM /mês por um período de 3-6 meses durante 2007 e 2008 (Tabela 1)
os restantes 19 dos 39 pacientes incluídos no estudo constituíram o grupo controle.; todos tinham tumores bem diferenciados, sendo livre de doença no momento do estudo e aparentemente curados após o primeiro e único tratamento realizado no momento do diagnóstico, que consiste em Tireoidectomia total seguida de 100 mCi de RAI dada 3 meses após a cirurgia. A média de idade desse grupo foi de 48 ± 8 anos (10 homens e 10 mulheres).
Técnicas de imagem
cintilografias 99mTc-depreotida foram realizadas em 11 a 20 pacientes tendo um PDTC ( tabela 1). Depreotida é uma ligação a somatostatina SSTR 2, 3, 5 e em superfícies celulares, de forma mais eficiente do que os compostos radiomarcados octreótido análogo. Todos os pacientes estavam em terapia de supressão hormonal com tiroxina, quando foram realizados os procedimentos de imagem.
99mTc–depreotida foi preparado a partir de um kit disponível comercialmente (NeoSpect®; Amersham Saúde, Buckinghamshire, Reino Unido). A dose injectada-iv por paciente foi de 740 MBq (50 ug de péptido) de
99mTc-depreotida. cintigrafia foi adquirido com uma câmara gama double-cabeça e um colimador de alta resolução.
imagens 99mTc–depreotida foram obtidos em 1 h e 3 h após a injecção. foram realizadas aquisições planares de corpo total e de fóton único tomografia computadorizada de emissão (SPECT) da cabeça, pescoço, tórax e abdômen. A fim de avaliar a atividade do tumor hypermetabolic,
18F-FDG-PET scans foram adicionalmente obtido em 1 h após a injeção intravenosa de 370 MBq de 18F-FDG usando um scanner dedicado PET full-anel, com um campo axial de vista de 15,2 cm e uma resolução máxima de 3,8 mm transaxially e 4,0 mm axial.
a expressão de SST em tecido de cancro da tiróide e glândula tireóide normal
Determinação de expressão TSM pelo quantitativo em tempo real RT-PCR (qrtRT -PCR) foi realizada em amostras de tumor embebidas em parafina de todos os pacientes e WDTC PDTC. Em pacientes PDTC, foram obtidas amostras no momento da reintervenção cirúrgica para o avanço do estado da doença a partir de tecido tumoral da recorrência cervical em todos os casos. Além disso, as amostras de glândula tiróide normal (n = 7), obtida a partir do tumor do Biobank alemães Trias hospitalares e de um conjunto de amostras de glândula tiróide normal, obtida da Universidade de Cordova também foram incluídos no estudo. Especificamente, as amostras de tumor e da tiróide normal (4 secções de 5 mm de espessura) foram processados para uma recuperação de RNA total utilizando o Kit RNeasy FFPE, com o tratamento DNAAS (Qiagen, Barcelona, Espanha). Detalhes da quantificação de ARN, transcrição reversa (RT; 1 ug de ARN total) e qrtRT-PCR para todos os subtipos de sst-tenham sido previamente reportados em pormenor 18,22. Deve notar-se que uma curva padrão específico para cada transcrito foi analisados com cada conjunto de amostras para estimar o número de cópias. total de amostras de RNA que não foram sujeitos a transcrição reversa foram executados para controlar a contaminação de ADN genómico e /ou técnico (background). Para controlar variações na quantidade de RNA usada na reacção de RT e a eficiência da reacção RT, o nível de expressão (número de cópias) de 3 genes de manutenção (desidrogenase de gliceraldeído-3-fosfato – GAPDH, β-actina e 18S) foi determinada para cada amostra como anteriormente relatado (19,20). GeNorm® 3,3 aplicação básica visual para o Microsoft Excel (https://medgen.ugent.be/jvdesomp/genorm) [23] foi usado para avaliar a estabilidade dos genes housekeeping. As médias geométricas dos números de cópias para GAPDH e β-actina dentro de cada amostra foram utilizados como um factor de normalização final (NF). Os resultados foram, em seguida, relatado como número de cópias sst menos fundo dividido pela NF correspondente.
A resposta ao tratamento octreotide
Um subgrupo de pacientes PTDP refratários ao tratamento com iodo radioactivo, doença progressiva por critérios radiológicos e -depreotida positiva scans receberam tratamento octreotide por 3-6 meses em um protocolo compassivo piloto aceita pelos pacientes e da comissão de ética do hospital (Tabela 1). A eficácia foi avaliada por meio dos critérios RECIST (https://www.recist.com/index.html) e de acordo com TSMs subtipos.
análise estatística e receiver operating characteristic (ROC) curvas de expressão SSTs
Os dados categóricos foram descritos por meio de frequências e porcentagens. Para as variáveis quantitativas, medidas de tendência central e de dispersão (média e desvio padrão) são fornecidos.
A análise bivariada das principais variáveis foi realizada utilizando 2 × 2 tabelas de contingência com testes c2 para avaliar as diferenças significativas em frequências para categórica variáveis. O teste t paramétrico foi utilizado para comparar os dados quantitativos. Nestas variáveis quantitativas não distribuídos normalmente eo teste U da não-paramétrico de Mann Whitney foi utilizado quando indicado.
Todas as análises foram realizadas utilizando o Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) versão 17.0 (SPSS ®, Chicago, IL, EUA). Considerou-se p 0,05 como sendo estatisticamente significativo
ROC (Receiver Operating Characteristic) foi realizada para avaliação da sensibilidade e especificidade do teste de diagnóstico.. Foi usado como uma ferramenta para medir o quão bem a expressão de SSTs pode distinguir entre os dois grupos de diagnóstico (pacientes com doença ativa /pacientes livres da doença). A análise estatística das curvas ROC foi realizada através do cálculo da área sob a curva (AUC) de cada receptor, e compará-los com a AUC da linha de referência por meio do teste t de Student.
Resultados
SSTS identificação do câncer de tireóide pouco diferenciado por
imaging 99mTc-depreotida
nos 11 pacientes (5 homens e 6 mulheres) do grupo PDTC em que um
99mTc-depreotida foi realizada, 9 apresentaram recorrência loco-regional cervical e todas as metástases apresentados de tamanho da diferença nos pulmões ou ossos identificados quer por tomografia computadorizada e /ou ressonância magnética e /ou cintilografia óssea.
cintilografia 99mTc–depreotida foi positivo no pescoço em 6 destes 11 doentes (54%), e no pulmão imagens positivos foram encontrados em 11/05 (45,4%) (Figura 1). Estes 6 casos com imagens do pulmão negativos teve micrometástases, como evidenciado por tomografia computadorizada. No único paciente com metástases ósseas em que
99mTc-depreotida cintilografia foi realizada, a imagem foi negativa.
18F-FDG-PET scan foi positivo em 8/11 no pulmão e no pescoço em 5/11 (tabela 1).
A resposta ao tratamento com análogo da somatostatina
Cinco pacientes nos quais
99mTc–depreotida imagens de cintigrafia positivos foram encontrados tanto no pescoço e /ou o pulmão foram tratados com a de acção prolongada de somatostatina octreótido analógico em doses de 30 mg durante um período de 3-6 meses numa estudo piloto. A resposta ao tratamento foi avaliada por meio de tomografia computadorizada de pulmão e de imagem ultra-sonografia cervical de acordo com os critérios RECIST. Em 3 doentes, nenhuma mudança no tamanho das lesões foi encontrado. Nos restantes 2 pacientes, havia um aumento significativo nas lesões pulmonares em um e no outro um aumento importante no tamanho das lesões cervicais com sinais de necrose intratumoral em uma das lesões. O tratamento foi bem tolerado em todos os casos, sem complicação metabólica específica; embora, um paciente apresentou desconforto abdominal que desapareceu após redução temporal da dose de octreotida. Todos os tratamentos foram paradas como não aparente modificação da evolução da doença e foram encontradas em 2 pacientes evidência de progressão parecia plausível. Devido aos resultados deste primeiro conjunto de tratamentos, não houve novos casos PDTC foram incluídos no estudo piloto.
A expressão de SST em, tecido de câncer de tireóide pouco diferenciado bem diferenciado e tecido normal da tireóide
amostras residuais de tecido de cancro primário e metástases do subgrupo de pacientes com exames de imagem e
99m-Depreotida cintilografia além de 9 pacientes adicionais (total = 20; Tabela 1) rolamento PDTC foram recuperados para estudos SSTs expressão. As amostras de 19 pacientes com WDTC livre condição de doença no follow-up também foram incluídos no estudo e, adicionalmente, amostras de 7 glândulas normais da tireóide e de uma piscina de tiróides normais. Uma quantidade variável de ARNm para cada um dos cinco subtipos sst-se encontrado com nenhuma diferença significativa entre idade e sexo (dados não mostrados) dentro do WDTC e grupos PDTC, bem como entre o tecido normal da tiróide. Teor médio de mRNA de sst-subtipos em WDTC e PDTC é mostrado na Figura 2. Em WDTC, sst2 foi o SST-subtipo dominante representado, seguido por SST1 sst5 sst3 = sst4, enquanto que a expressão de sst5TMD4 e sst5TMD5 não foram encontrados em amostras WDTC. No grupo de PDTC, o SST-subtipo mais representada era de longe sst5TMD4, que foi encontrada para mostrar um vezes de aumento 23 na expressão, em comparação com o próximo sst-subtipo mais expresso que foi sst2, seguido por SST1 sst3 sst4 sst5. Expressão de sst5TMD5 não foi detectada em PDTC. Em 2 dos 20 pacientes (10%) com PDTC, sst5TMD4 não foi detectada. Ao comparar os níveis de ARNm do subtipo SST-WDTC entre PDTC e verificou-se que a expressão foi mais elevada no sst2 WDTC em comparação com PDTC (317 ± 80
vs 158 ± 42, respectivamente;. P = 0,08). Além disso, a expressão de sst1 e sst5 tendeu a ser aumentada no grupo de PDTC em comparação com os pacientes WDTC (173 ± 98 vs 24 ± 4 para 202 ± sst1 e 62 vs 114 ± 18 para sst5; p = 0,16 e 0,12, respectivamente). Não há diferenças ou tendência à diferença foram encontrados nos níveis de sst3 ou sst4 entre PDTC e WDTC expressão. Finalmente, todos os 5 pacientes nos quais o tratamento octreotide foi realizada mostrou níveis de sst5TMD4 alta expressão (média = 2.286 ± 896).
mRNA número de canônico (sst1-5) e truncado (sst5TMD4) copiar receptores de somatostatina foi medida por qrtRT-PCR em uma bateria de cânceres bem diferenciados da tiróide (WDTC) e cancros da tiróide pouco diferenciadas (PDTC). Os valores do nível de ARNm absolutos foram ajustados por um factor de normalização (NF), obtido como as médias geométricas dos números de cópias para GAPDH e β-actina. Os valores representam média ± SEM (n = 19-20 pacientes). Asteriscos (***, p 0,001) indicam valores significativamente divergentes WDTC
Em relação ao estudo realizado em tecido normal da tireóide, os resultados indicam claramente que os níveis de sst5TMD4 expressão é bastante baixa no. as amostras normais (20 ± 7 cópias de sst5TMD4 /50 ng de ARN total), que suporta os relatados previamente nosso grupo [18].
curvas
ROC foram utilizadas para estimar o desempenho dos diferentes níveis de expressão TSMs para distinguir entre os dois grupos de diagnóstico (pacientes com doença ativa /pacientes livres da doença; Figura 3). Quanto mais perto a curva ROC é para o canto superior esquerdo do gráfico (isto é, maior sensibilidade e especificidade), quanto maior for a precisão global do marcador utilizado. Embora a expressão do sst1-sst5 canónica teve uma menor capacidade para distinguir entre os dois grupos de diagnóstico (curvas ROC semelhantes à linha de referência), a curva ROC dos níveis de expressão sst5TMD4 truncado foi significativamente diferente da linha de referência (área sob a curva = 0,957; p 0,0001). Com efeito, um ponto de corte de 5 cópias do sst5TMD4, que coincide aproximadamente com a média da expressão dos pacientes livres de doença, produziram uma sensibilidade de 90% e uma especificidade de 84%. Uma pontuação óptimo maior do que ou igual a 8,5 de cópias tiveram 90% de sensibilidade e especificidade. Por conseguinte, os nossos resultados indicam claramente que a expressão da variante truncada sst5TMD4 é o único marcador que possa ser utilizada de um modo sensível e específico.
Discussão
RAI-refractário PDTC é encontrado em cerca de 5-10% de todos os cancros da tiróide derivados de células foliculares [1], [2]. Estes pacientes têm um prognóstico pobre, como não há tratamentos eficazes estão disponíveis, actualmente, 24,25 e, portanto, a busca de novos alvos de tratamento, principalmente para a fase III e IV casos, está actualmente em curso [3], [4].
somatostatina regula muitas funções fisiológicas na maior parte dos órgãos de espécies de mamíferos e não mamíferos através dos seus receptores sst1-5 [10]. Além disso, a somatostatina e os seus análogos mostram acções antiproliferativas, que os tornam úteis como coadjuvantes especialmente para o tratamento de tumores neuroendócrinos [7], para além da sua utilidade na acromegalia [26]. Em acromegalia, de acção prolongada análogos de somatostatina estão associadas com uma diminuição de cerca de 20% no tamanho de adenomas após 6-12 meses de tratamento em um terço dos casos [27]. Além disso, as terapias receptor do peptídeo radiomarcado alvo são outra opção potencial para alguns tumores que carregam SST [28]. A presença de SST tem sido relatada em tecido normal da tireóide e em carcinoma da tiróide [8]. Além disso, em linhas celulares de carcinoma da tiróide, a somatostatina é capaz de inibir a proliferação celular, mesmo em linhas de células de carcinoma da tiróide anaplásico [8]. avaliação quantitativa da expressão SSTs no câncer da tireóide mostrou algumas discrepâncias, com alguns autores relatando a expressão de sst1, 3 e 5 e outros exclusivamente sst5 usando técnicas de imunocitoquímica [8], [10]. Mesmo com estas discrepâncias, a expressão de SST, tanto folicular e tecido de cancro da tiróide origem folicular foi recentemente confirmada por outros laboratórios [9], [11], [12], [29] – [31].
durante a última década, a presença de SST no câncer de tireóide também tem sido explorado pela cintilografia da tireóide, principalmente usando octreotide radiomarcado e depreotida, mas também com outros compostos diferentes [32], [33], facilitando a localização de tecido metastático que não foram detectados com a RAI digitalizar. Depreotida tem uma elevada afinidade para sst2, 3 e 5, permitindo assim uma eficiente aquisição de imagens em tecidos que expressam estes receptores. Nos nossos pacientes PDTC, -depreotida cintilografia mostrou imagens positivos em cerca de 40-50% deles no tecido cervical recorrente e /ou as metástases extracervical, estes últimos principalmente no pulmão. Assim, decidimos realizar um estudo piloto tratamento de 5 PDTC depreotida pacientes positivos que têm grandes metástases com o octreotide somatostatina analógico, em uma tentativa de estabilizar ou diminuir o crescimento do tumor com o resultado de qualquer nenhuma melhoria ou até mesmo um crescimento aparentemente rápida em dois dos casos. Como consequência, o tratamento com octreotida foi retirado em todos os pacientes e novos pacientes não foram incluídos. No único estudo piloto anterior semelhante publicados até agora, Kolhfuerst
et al.
[13] encontraram resultados semelhantes e concluiu que não havia nenhuma indicação de somatostatina análogos tratamento em pacientes com PDTC avançado.
Mais tarde, em 2009, depois de estes pacientes foram estudados e tratados, o nosso grupo [18] identificou duas novas variantes truncadas funcionais de sst5 com 5 e 4 domínios transmembrana. Importante, utilizando o modelo de acromegalia, demonstrou-se que a presença dessas variantes sst foram etiologicamente associada a uma falta de resposta a inibição da hormona de crescimento, bem como para os efeitos antiproliferativos de tratamento análogo da somatostatina [20]. Com base nestes resultados, a hipótese de que pacientes com PDTC poderia expressar sst5TMD4 e, como resultado, eles podem não responder ao tratamento octreotide. Por isso investigado posteriormente de um modo retrospectivo a presença de tais variantes truncadas de sst5, e demonstraram pela primeira vez a sua expressão em tecido exclusivo PDTC como nenhuma presença foi encontrado em amostras de tecido normal e WDTC tiróide. Esta descoberta sugere que sst5TMD4 pode aparecer no câncer de tireóide como o processo de desdiferenciação progride, embora o mecanismo final de sua expressão anômala é actualmente desconhecida. Assim, a detecção de sst5TMD4 pode ser utilizado como um marcador adicional de mau prognóstico. Este conceito é apoiado pelas curvas ROC As análises indicando que identifica com precisão sst5TMD4 PDTC, com uma sensibilidade de 90% e uma especificidade de 84%. A este respeito, sst5TMD4 também foi recentemente encontrada no cancro da mama pouco diferenciado [21] onde também está associado a um prognóstico pobre. Além disso, a expressão de sst5TMD4 na linha celular de cancro da mama MCF-7 aumenta características de malignidade tais como capacidade de invasão e proliferação. Acredita-se que este comportamento maligno biológica potenciada estar relacionado com o aumento na actividade de cinases fosforiladas extracelulares reguladas por sinais 1 e 2, os níveis de P-Akt, e ciclina D3 e Arp2 /3 expressão complexo [34]. Além disso, a expressão sst2, que está associada a uma boa resposta a análogos de somatostatina, verificou-se ser regulada para baixo em comparação com PDTC em WDTC. Curiosamente, sst5TDM4 foi mostrado para interagir fisicamente com sst2, alterando os seus mecanismos de transdução de sinal e, como consequência, bloqueando os seus efeitos antiproliferativos mediados. Eliminação de sinalização sst2 também resulta na disfunção de um loop autócrino inibidora de realimentação, que pode modificar o fenótipo celular e aumentar a proliferação de células [23], [35]. Isto poderia explicar em parte a aparente aumento no tamanho do tumor em dois dos nossos pacientes tratados com octreótido, como a sua ligação a sst5TMD4 teria estimulado ainda mais a supressão da actividade funcional sst2
.
Embora a concepção da parte de terapêutica o presente estudo pode ter algumas limitações, principalmente a ausência de um grupo controle, como era um estudo piloto, os achados moleculares de amostras de PDTC estudaram retrospectivamente parecem explicar a aparente falta de resposta do tratamento octreotide e apoiou a decisão clínica de parar o inclusão de mais pacientes no estudo piloto. Assim, no que diz respeito às implicações terapêuticas de nossos resultados, acreditamos que as conclusões do Kolhfuerst
et al
. [13] permanecem válidos. Não há informação clínica e agora molecular suficiente para afirmar que avançou cancro da tiróide desdiferenciado tem características biológicas (ou seja, alta sst5TMD4 e baixa sst2) que podem explicar a falta de efeito ou mesmo possíveis efeitos deletérios do tratamento análogo da somatostatina em tais pacientes, ou pelo menos em aquelas que expressam sst5TMD4 nos seus tumores. Como a heterogeneidade molecular dos tumores da tiróide é cada vez mais evidente, mais pesquisas sobre a variante sst5TMD4 pode abrir o caminho para entender melhor suas funções moleculares e potencial uso como uma ferramenta de diagnóstico ou até mesmo terapêutico no cancro da tiróide.
Agradecimentos
Os autores agradecem Montserrat Gilabert (Novartis Oncology, Espanha), pelo seu apoio a este trabalho.