Abstract

Fundo

O nível sérico antígeno carcinoembrionário (SCEA) pode ser um indicador de doença. De fato, um nível SCEA elevada é um fator de prognóstico em pacientes com câncer colorretal (CRC). No entanto, os determinantes genéticos de nível SCEA na população saudável e CRC permanece obscuro. Assim, foram investigados os marcadores genéticos associados ao nível de SCEA sérica elevada nestas duas populações e suas implicações clínicas.

métodos e resultados

estudo de associação

Genome-wide (GWAS) foi realizado em um estudo de coorte com 4.346 adultos saudáveis ​​do sexo masculino usando o chip Illumina Omni 1 M. SNPs candidatos associados com níveis elevados SCEA foram validados em 194 pacientes com CCR na plataforma ABI Taqman. Oito SNPs candidatos foram validados em pacientes com CCR. O rs1047781 (FUT2 chr19-) (A /T) estava associado com níveis elevados Scea, e rs8176746 (ABO chr9-) foi associado com a metástase linfático regional nos pacientes de CRC. O nível SCEA pré-operatória foi fator de risco para a recorrência do tumor em 5 anos após a operação (OR IC = 1.427, 95%: 1.005~1.843, p = 0,006). Ele também foi um dos fatores de risco para linfonodos regionais metástase (OR IC = 2.266, 95%: 1.196~4.293, P = 0,012). O nível Scea em transportadores rs1047781-T foi mais elevada do que nas transportadoras A em pacientes com CCR sem metástases nos linfonodos (P = 0,006). O linfonodo metástases regionais em pacientes com homozigoto AA de rs8176746 foi mais comum do que nos portadores heterozigotos AG (p = 0,022). Além disso, os pacientes rs1047781-AT e TT CRC apresentaram uma sobrevida livre de doença pior do que portadores do genótipo AA (p = 0,023).

Conclusões

Encontramos SNPs candidatos associados com níveis elevados SCEA em ambos os homens saudáveis ​​e população CRC. Rs1047781 (FUT2 chr19-) pode ser o locus suscetíveis para o retorno do CRC em uma população do sul da China

Citation:. Liang Y, Tang W, Huang T, Gao Y, Tan A, Yang X, et al . (2014) variações genéticas que afectam os níveis Serum Carcinoembrionário Antigen e status de linfonodos regionais em pacientes com câncer colorretal esporádico do sul da China. PLoS ONE 9 (6): e97923. doi: 10.1371 /journal.pone.0097923

editor: Jian-Xin Gao, Xangai Jiao Tong University School of Medicine, China

Recebido: 20 de novembro de 2013; Aceito: 27 de abril de 2014; Publicação: 18 de junho de 2014

Direitos de autor: © 2014 Liang et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho foi financiado pelo Programa Geral de National Natural Science Foundation da China (30945204, 81072321, 81272853, 81360378, 81360099, 81370857, 30760243, 30460143 e 30560133), Ministério da Educação, China (Programa de New Century excelentes talentos na Universidade, NCET2009) , Programa chave e talentos da Universidade Highland Innovation Team de Guangxi (2012012D003, GJR201147-09), presidente Ciência e Tecnologia Fundo e do equipamento Programa de Guangxi (1116-1103, GKG1298003-07-01), Guangxi Natural Science Foundation (2011 GXNSFB018100, 2012GXNSFAA053152 , 2013GXNSFFA 019.002), Guangxi Nature Ciências Grant (GuiKeGong 1104003A-7), a Guangxi Departamento Provincial das Finanças e da Educação (2009GJCJ150) e Ministério da Saúde Guangxi Medicina Grant (Z201018). Esta pesquisa foi apoiada em parte pelo Ministério da Ciência no.11.G34.31.0068 Mega-subvenção da Rússia; SJ O’Brien Investigador Principal, No organismo de financiamento tido qualquer influência ou influência na concepção do estudo, coleta de dados, análise, interpretação de dados, ou a escrita do relatório

Conflito de interesses:. Os autores declararam que nenhum concorrente existem interesses.

Introdução

o câncer colorretal (CRC) é o quarto tipo de câncer mais comum em homens eo terceiro mais comum em mulheres em todo o mundo. É responsável por cerca de 1,2 milhões de novos casos de câncer e mais de 630.000 mortes por câncer por ano [1]. Incidência ea mortalidade do CRC subiu rapidamente na China desde a década de 1990 [2]. Esporádica CRC é o mais comum, que ocorre na ausência da história da família, geralmente afecta população idosa, e geralmente se apresenta como um isolado do cólon ou rectal lesão. cirurgia curativa é a aproximação mais importante do tratamento. No entanto, a sobrevida de 5 anos após a ressecção é apenas 60,8% na China. Aproximadamente 50% desses pacientes sofreria reincidência do tumor e morrer [3]. O prognóstico foi afectada por factores como o tabagismo, idade, sexo e raça, duração dos sintomas, presença de obstrução intestinal, localização do tumor, transfusão de sangue e da qualidade da intervenção cirúrgica [4].

O antígeno carcinoembrionário ( nível de ACE) pode ser elevada no soro de pessoas com doenças não neoplásicas, tumores malignos ou cancros. Assim, um nível de CEA elevado é um fator prognóstico independente em pacientes com CCR independentemente do seu do estágio e grau histológico Duke [5]. Na população saudável, os níveis séricos de CEA pode ser afetada por fatores ambientais e genéticos, tais como idade, tabagismo, drogas, doença, sexo e raça [6] – [8]. No entanto, em pacientes com CCR, mecanismos adicionais determinar o nível de CEA no soro permanecem obscuros.

Mutações do genoma associadas com o nível elevado de CEA em CRC está presente no próprio tumor, de modo que estas mutações não poderia ser servido como um marcador genético para o nível de CEA para fins de diagnóstico [9]. Portanto, este estudo foi realizado em duas fases: na primeira fase, um estudo de associação do genoma foi realizado para identificar os loci associados com o nível sérico de CEA em homens chineses saudáveis ​​de uma coorte que participaram do Fangchenggang Área Masculino Saúde e Exame Survey (FAMHES) (esta parte foi fundida com outras coortes e parcialmente publicado em outro lugar [10], [11]). Na segunda fase, a associação entre SNPs candidatos encontrados de uma fase de GWAS e níveis de CEA no pré-operatório e prognóstico de pacientes com CRC foi analisada. Com base neste projeto, nós tentamos explorar neste estudo, a associação entre os polimorfismos e o prognóstico da CRC após a operação radical por conta de loci suscetíveis associados ao nível de SCEA elevada

Métodos

A primeira fase. estudo

Um estudo de associação do genoma foi realizado para identificar os loci associados com o nível sérico de CEA em homens chineses saudáveis ​​do FAMHES coorte (o experimento e os resultados foram descritos em textos S1, Tabelas S1, S2, S3 e Figura S1).

a fase dois estudo

pacientes com câncer colorretal esporádico.

cento e noventa e quatro pacientes com carcinoma colorretal que preencheram os critérios para a inscrição foram recrutados de pacientes submetidos à ressecção curativa entre março de 2008 e fevereiro de 2012 no Departamento de Anal e Cirurgia Colorretal, 1

st Hospital Afiliado da Universidade de Medicina de Guangxi. Todos os tumores no estudo eram adenocarcinoma, e os diagnósticos patológicos foram confirmados de forma independente por dois patologistas gastrointestinais especializados. Todos os pacientes estavam ausentes de sintomas como sangramento grave, obstrução intestinal ou infecção. Nenhum deles tinha qualquer rádio-quimioterapia pré-operatória. Todos os pacientes foram tratados com protocolo de quimioterapia pós-operatória com base em NCCN Clinic Practice Guideline em Oncologia. consentimento informado por escrito foi exigido de todos os pacientes. Eles foram seguidos até 51 meses, e no final, havia 57 pacientes com recidiva tumoral (sobrevivência mediana: 48 meses; intervalo: 7~62 meses). Este estudo foi aprovado pelo comitê de ética da Universidade de Medicina de Guangxi. As características basais dos participantes foram resumidos na Tabela S4.

genotipagem de SNPs candidatos em pacientes com CCR.

Foram selecionadas nove SNPs candidatos dos 25 SNPs que atingiram significância do genoma para genotipagem em pacientes CRC : rs8176746 (chr9- ABO), rs1047781 (CHR19-FUT2), rs3760775 (CHR19-FUT6), rs441810 (chr21-FAM3B), rs12608544 (CHR19-PAD), rs3786749 (SULT2B1 chr19-), rs2071699 (FUT1 chr19-), rs507666 (chr9- ABO) e rs687289 (chr9- ABO).

o DNA foi extraído a partir das membranas mucosas do cólon usando um kit de extração de DNA (Tiangen, China). plataforma de PCR (StepOne PLUS ∧TM, cidade Applied Biosystem. Foster, CA) foi utilizado para realizar a genotipagem de alelos. genotipagem automática SNP foi executado por StepOne Além disso ∧TM sistema versão 2.2 (cidade Applied Biosystem Foster, CA.); os critérios de controlo de qualidade utilizados foram os mesmos que no que GWAS. Os detalhes da experiência são descritos no texto S1 e Table5.

Quimioterapia.

De acordo com o risco de recorrência pós-operação, alguns pacientes na fase IIand todas as fases III pacientes receberam pelo menos um ciclo de Oxalipatin, fluorouracil e leucovorina (FOLFOX regimento) como tratamento adjuvante em nosso estudo. Doentes com idade ≥ 70 anos não receberam tratamento adjuvante. Os efeitos adversos foram avaliados utilizando os Critérios Comuns de Toxicidade da National Cancer Institute versão 2.0. A quimioterapia foi parado quando houve efeitos ou grau 3 ou 4 reação alérgica adversos cardíacos ou neurocerebellar.

Siga-up.

Os pacientes em nosso estudo foram avaliados a cada seis meses após a operação. A recorrência foi determinada com base no exame físico, radiografia de tórax, ultra-sonografia abdominal ou tomografia computadorizada, colonoscopia, detecção de nível CEA e, se necessário, a análise citológica ou biópsia. A data-limite da análise foi 20 de junho de 2013; duração do follow-up foi definido como o número de meses de operação para a data de corte. A sobrevida livre de doença foi medida desde o tempo de operação para a recorrência de tumor.

análises estatísticas.

estatística não paramétrica foi utilizado na análise univariada. modelos multivariados foram construídas por análise de regressão logística. estimadores de Kaplan-Meier foram aplicados no cálculo função de sobrevivência; o teste de log-rank foi utilizado para determinar as diferenças de sobrevida dos grupos individuais. O programa v.17.0 SPSS foi utilizado para análise e um valor de P . 0,05 foi considerado estatisticamente significativo

Resultados

Fatores que afetam níveis SCEA na população

saudável

Em geral modelo de regressão linear, Idade (Beta = 0,003, P 0,0001), a quantidade total de cigarros (Beta = 0,004, P 0,001) e IMC (Beta = -0,005, P = 0,006) foi significativamente associada com o nível de CEA (Tabela 1) . R

2 deste modelo foi de 0,07 (F = 51,834, ANOVA).

Genotipagem em pacientes CRC

Os SNPs candidatos utilizados para a genotipagem de 194 pacientes de CRC com adenocarcinoma e os resultados de genotipagem foram listadas na Tabela S6.

fatores de risco para níveis elevados de CEA em pacientes com CCR

as análises univariadas revelou que o nível de CEA no pré-operatório foi significativamente diferente por status dos linfonodos regionais e distante metástases de órgãos (positivas vs. negativo: 5,36 vs 3,41 ng /ml; P = 0,011; 11,87 vs. 3,60 ng /ml; P = 0,033, respectivamente.). O nível de CEA pré-operatória, também não foi associada a fatores como idade, sexo, tabagismo, consumo de álcool, tamanho do tumor e diferenciação celular (Tabela 2).

Em pacientes sem linfonodos regionais metástase, subgrupos com rs1047781 (FUT2 chr19-) e AT alelo TT tinha um nível de CEA significativamente mais elevados do que os transportadores (AA AA: 1,73 ng /ml, a: 3,49 ng /ml e TT: 4,11 ng /ml; P = 0,006). No entanto, a diferença não foi significativa nos pacientes com CCR com linfonodo ou metástase órgão distante (AA vs. AT: P = 0,686, AA vs. TT: P = 0,202, AT vs. TT: P = 0,139, respectivamente). O teste J-T mostrou que a alélicas subgrupo TT tinham um nível mais elevado SCEA enquanto o AA teve a menor (P = 0,011). Outros SNPs candidatos não foram associados com níveis de CEA em pacientes com CCR (Tabela 3). Para rs1047781 (FUT2 chr19-), o genótipo TT alélicas foi associada com o nível mais alto SCEA, ea diferença no nível SCEA entre portadores do alelo T e homozigoto AA foi significativamente diferente (AA vs. AT: P = 0,008; AA vs. TT: P = 0,006; AT vs. TT:. P = 0,787; respectivamente) (Tabela 4)

fatores de risco para metástases tumorais em pacientes com CCR

A taxa de de metástase linfonodos regionais (NLR) no subgrupo alélicas AT foi o mais alto nos três subgrupos de rs1047781 (AA: 12,8%, AT: 19,6%, TT: 9,0%; AA vs. AT: P = 0,961, vs. AA TT: P = 0,046, vs. AT TT: P 0,001; respectivamente). As taxas de metástase órgão distante em três subgrupos alélicas de rs1047781 não foram significativamente diferentes (AA vs NO: P = 0,651; AA vs TT: P = 0,607; EM vs TT: P = 0,888, respectivamente) (Tabela 4 ). A frequência de metástases NLR foi significativamente diferente nos subgrupos alélicas de rs8176746 (CHR9-ABO) (P = 0,022).

Fatores de risco para a sobrevida livre de doença em pacientes com CCR

análise de regressão logística revelou que a idade, o nível de CEA no pré-operatório e estádio T (invasão tumoral) foram fatores de risco para linfonodos regionais metástase (Tabela 5). O nível de CEA pré-operatória também foi o fator de risco para a recorrência do tumor em 5 anos após a operação radical (Tabela 6). A probabilidade de sobrevivência foi maior no grupo de nodos linfáticos regionais negativos do que daqueles positivos para a metástase, e foi menor no grupo com um nível pré-operatória de CEA ≥5 ng /ml do que aqueles com 5 ng /ml. As diferenças foram estatisticamente significativas (Figura 1, 2). SNPs associados com o nível de CEA e metástase linfática regional, rs1047781 (FUT2 chr19-) e rs8176746 (ABO chr9-), não eram os colaboradores independentes para sobrevida livre de doença (Figura 3, 4). Utilizamos a combinação de SNPs (rs1047781 e rs8176746) como o marcador genético na análise de sobrevivência e os tempos livres da doença foi significativamente diferente entre rs1047781-AA e rs1047781 (AT + TT) portadores dos genótipos entre rs8176746 (AA + AG) As transportadoras (P = 0,023) (Figura 5). No entanto, a diferença não foi determinada pelas transportadoras rs8176746-GG

O tempo livre de tumor foi diferente entre pacientes com CCR com e sem metástases em linfonodos (

p Art 0,001)..

O tempo livre de tumor foi diferente entre pacientes com CCR com níveis de CEA pré-operatórios no 5 e ≥5 ng /ml (

p

= 0,001)

.

Com rs1047781 (chr-19 FUT2), o tempo livre de doença de pacientes com CCR agrupados por genótipos alélicas (AA, AT e TT) não foi significativamente diferente (

p

= 0,066).

Com rs8176746 (-9 chr ABO), o tempo livre de doença de pacientes com CCR agrupados por genótipos alélicas (AA e AG) não foi significativamente diferente (

p

= 0,366). Indivíduos com genótipo GG foram excluídos (n = 2).

Os indivíduos foram divididos em 2 grupos pela fabricante de genética (rs1047781 + rs8176746). O grupo 1 foi rs1047781 (AA) + rs8176746 (AA + AG) eo grupo 2 foi rs1047781 (AT + TT) + rs8176746 (AA + AG). O tempo livre de doença de subgrupos foi significativamente diferente (

p

= 0,023).

ABO genótipos e os níveis séricos de CEA

A distribuição de níveis de CEA por ABO tipo alélicas de sangue foi significativamente diferente em pessoas saudáveis ​​(BB BO AB OO AO AA, P = 1.47E-26). Embora não seja estatisticamente significativa (P = 0,458), também encontramos uma tendência similar nos pacientes de CRC (B A). (Figura 6, 7)

Os níveis de CEA de macho FAMHES assuntos agrupados por ABO grupos genótipos foram significativamente diferentes (p = 1.47E-26).

Os níveis de CEA no soro de pacientes com CRC agrupados por genótipos alélicas grupo sanguíneo foram representados por mediana e não foram significativamente diferentes (χ

2 = 3,63, p = 0,458). Geneotype AO estava ausente; A1 e A2 foram incluídos em um tipo de alelos. O tipo sanguíneo ABO foi determinado antes da operação.

Discussão

Fatores que afetam os níveis de soro de CEA na população saudável

Em apoio de um relatório anterior sobre voluntários saudáveis ​​em os Estados Unidos, descobrimos que cigarro fumar está associado com níveis de CEA [12]. Além disso, quando o tabagismo é ainda quantificada pela quantidade de cigarros (pacote por ano), uma tendência na associação entre classificação tabagismo e níveis de CEA foi estatisticamente significativa. A exposição prolongada a agentes cancerígenos de cigarros fumantes contribui para uma variedade de doenças malignas, como câncer de não-pequenas células do pulmão, cancro do pâncreas e câncer oral [13], [14]. Além disso, alguns estudos relatam que um nível elevado de CEA associado em tais malignidades [15] – [17]. Portanto, o nível de CEA elevado pode refletir o risco de tumor.

Tem sido relatado que os níveis de CEA aumentar com o envelhecimento na França e na Holanda populações [18], [19]. No entanto, a tendência para níveis mais elevados de CEA em idosos se correlaciona não é necessário com um maior risco de doenças não neoplásicas ou câncer [20]. Nossa conclusão da associação entre nível de CEA elevado e envelhecimento em homens da área de Fangchenggang apoiar a noção de que a idade é um fator independente que influencia o nível de CEA, apesar da disparidade de população e área. Curiosamente, em fumantes do sexo masculino, a contribuição de idade para níveis de CEA foi atenuada.

Nós encontramos neste estudo uma correlação negativa entre o IMC eo nível de CEA no chinês saudáveis ​​do sexo masculino. Por isso, é necessário considerar o IMC na condução GWAS nesta população. Da mesma forma, Parque JS et al. informou que o aumento do IMC está associada com menores concentrações de CEA em pacientes com CCR [21]. Estudos epidemiológicos também têm encontrado uma associação entre obesidade e cancro colorectal [22].

In vitro

estudos têm revelado que o adipócito poderia promover o crescimento de várias linhas de células de cancro do cólon [23]. Por isso, se a hipótese de que, embora o CEA é produzida pelas células epiteliais, o tecido adiposo pode afectar a secreção de CEA em outros tecidos

através

várias citocinas e adipocitocinas.

infecção por HBV está associado com o risco de carcinoma hepatocelular [24]. No entanto, não existe qualquer evidência directa de associação entre a infecção por HBV e malignidades digestivos, tais como cancro do pâncreas e cancro gastrointestinal [25]. Neste estudo, a análise estatística mostrou que não houve diferença significativa nos níveis de soro de CEA entre os grupos que são positivos ou negativos para HBsAg. Portanto, não exclui as amostras positivas para HBsAg a partir da análise GWAS. Um aumento do nível de CEA tem sido encontrada em doentes com doenças hepáticas alcoólicas ou pacientes com desordens do aparelho respiratório e /ou gastrointestinal [26] – [28]. No entanto, a associação entre os níveis de CEA álcool beber e não foi conclusivo neste estudo. Por conseguinte, o álcool-beber não é um factor na análise justificação GWAS. Tem sido relatado que os níveis de soro de CEA variar entre grupos étnicos diferentes-[29]. Para excluir fatores genéticos específicos do étnicas, nós também limitou o número de participantes Han em GWAS.

De nota, descobrimos que a idade, tabagismo e obesidade ser os fatores epidemiológicos que afetam os níveis de CEA no soro. No entanto, o poder do estilo de vida ou fatores ambientais no modelo era fraca porque o coeficiente de determinação foi apenas 0,070.

variante genética associada com o nível de CEA em populações saudáveis ​​

Foram 25 SNPs associado com níveis de CEA ao nível ampla genoma com base na análise utilizando o modelo de regressão linear múltipla. As funções biológicas desses SNPs foram listadas na Tabela S8 e genes envolvidos (exceto para rs8111500) foram

FUT1, FUT2, FUT3, FUT6, ABO, PAD, CA11, RPL18, SULT2B1,

e

FAM83E.

Os genes

FUT1, FUT2, FUT3, FUT6, PAD, CA11, RPL18, FAM83E

estão localizados em regiões 19p13.3 e 19q13, enquanto ABO está localizado em 9q34.2.

FUT1, FUT2, FUT3, FUT6

e

ABO Quais são os genes envolvidos na via de biossíntese de antígenos ABH e Lewis grupo histo-sangue. Os cinco genes codificam para glicosiltransferases que catalisam a adição por passos de unidades de monossacárido específico no processo de biossíntese

O SNP forte nível de CEA-associado foi rs1047781 em 19q13, uma mudança missense (A- . T, Ile- Phe) dentro do

gene FUT2

que codifica uma fucosil- transferase que catalisa a produção do antigénio H e determina o estado secreção dos antigénios do grupo histo-sangue ABO e Lewis. Foi relatado que o alelo T do presente SNP representa um

de facto

mutante inactivado da

FUT2

enzima e foi causalmente associada com o fenótipo não-secretor numa população japonesa [30]. Mas as evidências experimentais diretas de apoio a associação da biologia entre várias formas de ABO, Lewis antigénios do grupo histo-sangue e níveis de CEA estão ausentes. Alguns estudos têm fornecido evidências indirectas que a porção A antigénio codificado pela ABO está presente nas moléculas de CEA [31], e que os determinantes de antigénios A, B e H e de CEA partilhada as mesmas moléculas portadoras glicoproteína [32]. Assim, pode-se especular que os polimorfismos genéticos de várias glicosiltransferases de síntese de antigénios CEA pode modificar os grupos de açúcar das moléculas de CEA, conduzindo a diferentes estabilidades das moléculas de CEA em sangue, ou em alternativa, resultando em diferentes taxas de detecção por um determinado método de medição CEA .

Nós encontramos oito SNPs localizados no

ABO

gene, que codifica uma ase acetil-galactosaminyltransfer- que determina os tipos sanguíneos ABO. Com base nos dados de Seattle SNPs (http:. //pga.mbt Washington.edu), bem como a base de dados do grupo sanguíneo Antigen Mutação (. Www.ncbi nlm.nih.gov), num estudo relacionado rs507666 revelou que é um substituto para o tipo de antigénio do grupo histo-sanguíneo A1, rs687289 é um marcador para o alelo S, rs8176746 é um marcador para o alelo B e rs8176704 é um marcador para o alelo de A2 [33]. Este achado interessante pode apoiar a associação entre níveis de CEA e

ABO

gene em pacientes com CCR; este resultado é mostrado na Figura 6 e 7.

Além disso, o tipo de grupo histo-sanguíneo ABO tem sido associado a uma série de doenças caracterizadas por níveis elevados de CEA no soro, tais como a infecção por Helicobacter pylori, cancro do tracto gastro-intestinal, câncer de mama e câncer pulmonar [34], [35]. O grupo sanguíneo ABO exibindo uma SCEA alto nível poderia sugerir um alto risco para essas doenças na população portadora ABO [36], [37]. Por causa da falta de conhecimento da síntese molecular CEA, é difícil fazer uma análise mais aprofundada bioinformática, além de que, para

ABO

e

FUT

genes.

O objetivo da o nosso estudo de fase um foi encontrar loci para ser utilizado para seleccionar loci candidatos para genotipagem de SNP em pacientes de CRC. Nós inferir que SNPs foram associados com níveis elevados SCEA na população saudável e CRC da mesma região. Portanto SNPs candidatos foram determinados com base na classificação de todo o genoma

P

-valor e localização de genes relevantes para o tipo sanguíneo ABO. Rs8176746, rs376077, rs12608544, rs3786749, rs2071699, rs441810 e rs507666 foram posteriormente incluídos na genotipagem dos pacientes com CCR.

A variação genética associada com níveis séricos de CEA no CRC pacientes

A fim de estimar o heterogeneidade, fatores de confusão não-genéticas potenciais que afetam os níveis de CEA em populações saudáveis ​​foram analisadas em pacientes com CCR, em primeira e revelou que o estado de metástase ganglionar foi um contribuinte significativo. A análise mostrou que a estratificação rs1047781 (FUT2 chr19-) foi o loci associados em pacientes de CRC. Isso sugere que pode haver fatores de confusão, além de o estado de metástase ganglionar. De acordo com os resultados da análise GWAS na população saudável, o rs1047781 era um local susceptível para o nível de CEA elevados em pacientes de CRC. Na população saudável, o nível de CEA do genótipo AA foi o menor e TT foi a mais alta (dados foram ajustados para fatores de confusão). Da mesma forma, os portadores do genótipo AA apresentaram os menores níveis de CEA nos pacientes com CCR sem metástase do tumor. O alelo T (timina) a A (adenina) em rs1047781 é uma mutação sem sentido. O outro estudo em FAMHES mostrou rs1047781 para ser um local associado com níveis de vitamina B12 em pessoas saudáveis ​​[38]. No entanto, isto não foi determinada na população de CRC. Até agora, não houve nenhuma evidência convincente sobre a vitamina B12 e quaisquer outros fatores de estilo de vida que afetam CRC recorrência e sobrevivência [39]. Um

In vitro

experiência mostrou que o gene CDX2 está associada com o aumento no LES

x /a expressão e supressão da FUT2 em células cancerígenas do cólon durante induzida por bFGF EGF /epitelial-mesenquimal transição (EMT) [40]. EMT é uma alteração fenotípica crítica em células de cancro metastáticas. Observou-se que a AT e TT genótipos de rs1047781 (FUT2), e não o genótipo AA, estão associados com níveis de CEA no soro superiores. Curiosamente, os pacientes com CCR com alelo T exibiram um prognóstico diferente daqueles com o genótipo AA. Os resultados sugerem que CDX2 pode ficar inativo nos portadores do alelo T, resultando em uma diferença de expressão entre FUT2 e CEA. O veículo T alelo pode ser susceptível a metástase tumoral na fase inicial de CRC e a reincidência do tumor no futuro. Foi relatado que β1, 3- Galactosiltransferase é regulada em adenocarcinomas do cólon e causa CEA expressar com ausência de tipo 1 da cadeia [41], mas a relação entre FUT2 e CEA ainda era desconhecido. Assim, é necessária evidência laboratorial para provar se esse polimorfismo é biologicamente funcional [42].

Fatores de risco para níveis de CEA pré-operatórios e recorrência do tumor em pacientes com CCR

A idade, tabagismo, consumo de álcool e obesidade foram fatores de confusão para os níveis de CEA no soro em pessoas saudáveis. Entre os pacientes de CRC, o estado de metástase em linfonodos regionais e órgãos distantes foram os principais fatores de confusão de níveis de CEA pré-operatórios em nosso estudo. Para testar se o tamanho do tumor é um fator de confusão [43], em nosso estudo, a associação entre o tamanho do tumor e níveis pré CEA foi examinada ainda a associação não foi significativa (ver figura S2). IMC é afectada pela idade avançada mais de 20 anos de idade e que não é uma variedade independente na nossa análise [44]. Literaturas relatou que a idade, obesidade, consumo de álcool e fumar charuto foram fatores de risco independentes para o prognóstico do CRC. Idade (especialmente ≥75 anos.) É o fator de risco importante para pacientes com CCR independentemente do tipo de terapia e grau de estágio do tumor [45].

Para os pacientes que se submeteram à ressecção curativa, o prognóstico de pacientes idosos (≥ 75 anos.) também foi pior do que os mais jovens (25~75 anos) [46]. No entanto, não encontramos esta associação em nossa população. Estudos prospectivos sugerem que o consumo de cigarros está associada com a mortalidade dos CRC [47]. mecanismo proposto deste patogênese é através do dano ao DNA causado por agentes cancerígenos da fumaça do charuto [48], [49]. Obesidade e da inflamação crônica sistêmica de acompanhamento e alteração metabólica são fatores de risco para CRC [50]. Relatou-se que o género é também um factor que afecta o prognóstico potencial de CRC, mas apenas em pacientes de idade 40 anos [51]. Assim, considerou que é inclusiva e não tomá-lo como um fator de confusão na análise relevante.

variante genética associada a recorrência tumoral no CRC pacientes

As elevações dos níveis de CEA em populações saudáveis ​​e CRC pode sugerir relação biológica entre a síntese de antigénios de ABH e CEA. Embora os níveis de CEA pré-operatórios foram associados com genótipos alélicas ABO e recorrência do tumor, os tempos livres da doença de grupos com tipos sanguíneos A e O não foram significativamente diferentes em análise de sobrevivência (Figura S3). Este resultado também sugeriu que os tipos sanguíneos ABO não eram biomarcadores de predição de recorrência do tumor.

modelo de regressão logística mostrou que o nível de CEA no pré-operatório, idade e profundidade de invasão tumoral foram fatores de risco que influenciam NLR metástase. Além disso, o nível de CEA pré-operatória era um factor significativo contribuindo para o risco de recorrência do tumor em 5 anos. Por isso, é interessante explorar a associação entre SNPs SCEA relevantes e metástases em linfonodos. Como mostrado na Tabela 3, as transportadoras rs1047781-TT apresentaram menores níveis de CEA e menos metástases NLR, apoiando a associação entre níveis de CEA e prognóstico. Desde rs8176746 foi associado com a metástase de linfonodo, a combinação de rs1047781 e rs8176746 como marcadores genéticos da sobrevivência livre de doença foi aplicado para análise posterior. Como sugerido pela Figura 3, rs1047781 (AT + TT) portadores teve sobrevida livre de doença pior do que os portadores de AA. É de acordo com os níveis de CEA mais altas entre as transportadoras tipo rs1047781 mutantes.

Embora esses SNPs pode associar a recorrência tumoral no CRC, a sobrevida global dos pacientes de CRC não foi significativamente diferente em 5 anos, quando agrupados por rs1047781 ou rs8176746 (Figura S4, S5). Isto sugere que a sobrevida global dos pacientes CRC foi afetada por outros fatores isentos de recorrência do tumor. Por isso, é útil para testar se rs1047781 é um marcador de prognóstico da recorrência do tumor entre os pacientes de CRC.

A superexpressão do

CEA

gene (e

CEACAM6

) foi encontrada em uma série de doenças malignas epiteliais incluindo CRC [52], [53]. Isso poderia perturbar a diferenciação colonocyte e promover cólon carcinogênese [54]. níveis SCEA pré-operatórios mais elevados foram associados com maior risco de recorrência após CRC operações. Assim, o nível SCEA pré-operatório pode ser servido como um fator prognóstico independente [55], [56], [57]. A mutação em

CEA

gene da célula tumoral (motivo PELPK; Pro-Glu-Leu-Pro-Lys) pode induzir níveis elevados de CEA por sua depuração hepática; mutação no motivo PELK poderia alterar a estabilidade estrutural e a afinidade de ligação ao receptor de células de Kupffer no fígado [58]. Além disso, este resultados de ligação na libertação de uma série de citocinas que têm o potencial para activar endotélio sinusoidal hepática [59] – [61]. Estas observações implicam que o CEA pode ser um facilitador de metástase hepática, embora associação direta entre o nível de CEA e metástases em linfonodos está ausente.

Outro estudo identificou rs10318 (GREM1), rs6983267 (POU5F1P1, DQ515897, MYC) e rs4464148 (SMAD7) associado com o resultado clínico em pacientes com a fase II e fase III CRC tratados com quimioterapia adjuvante baseada em 5-FU [62]. GREM1, BMP2 e SMAD7 são moléculas de sinalização da via de TGF-β. A sobre-expressão de genes de sinalização de TGF-p tem sido encontrada na progressão da CRC [63]. Dada a complexidade do processo de CRC recorrência e metástase, esta descoberta sugere que há outros factores de risco genéticos. Curiosamente, foi relatado que o CEA poderiam interagir com o receptor de TGF-β e inibe a sinalização de TGF-β directamente; até mesmo melhorar a sobrevivência de células cancerosas colorretais na colonização locais em estudo com animais [64].

A terapia adjuvante de CRC

Em nosso estudo, alguns pacientes de CRC com estádio II e todos os pacientes com estágio uma. c. d. e.