Sumário
Purpose
neutrófilos associados a tumores (TAN) têm sido relatados em uma variedade de doenças malignas. Realizamos uma meta-análise de up-to-date para avaliar o papel prognóstico do TAN no câncer.
Método
Pubmed, Embase e web de bases de dados científicos foram pesquisados para estudos publicados até abril 2013. rácios Pooled de risco (HR) e seus intervalos de confiança de 95% (IC) foram calculados. O impacto de neutrófilos localização e anticorpo primário também foram avaliados.
Resultados
Um total de 3946 doentes com diversos tumores sólidos de 20 estudos foram incluídos. Alta densidade de neutrófilos intratumorais foram independentemente associados com a sobrevivência desfavorável; os RHs pool estavam 1,68 (95% CI: 1,36-2,07, eu
2 = 55,8%,
p Art 0,001) para a sobrevida livre de recorrência (RFS) de sobrevivência /livre de doença (DFS) , 3,36 (IC 95%: 2,08-5,42, eu
2 = 0%,
p Art 0,001) para a sobrevivência específica ao câncer (CSS) e CI 1,66 (95%: 1,37-2,01, I
2 = 70,5%,
p Art 0,001) para a sobrevida global (OS). neutrófilos peritumoral e estromais não foram estatisticamente significativamente associada com a sobrevivência. Quando agrupados por anticorpo primário, os RHs pool estavam (IC 95%: 1,47-2,22, eu
2 = 67,7%,
p Art 0,001) 1,80 para CD66b, e CI 1,44 (95%: 0,90-2,30, eu
2 = 45,9%,
p
= 0,125) para o CD15, sugerindo que CD66b positiva TAN pode ter um melhor valor prognóstico que CD15.
Conclusão
altos níveis de neutrófilos intratumorais estão associados com a sobrevivência específica do cancro recorrência-livre e, em geral desfavorável
Citation:. Shen M, Hu P, Donskov F, Wang G, Liu Q, Du J (2014 ) Tumor-Associated neutrófilos como um novo fator de prognóstico no câncer: uma revisão sistemática e meta-análise. PLoS ONE 9 (6): e98259. doi: 10.1371 /journal.pone.0098259
editor: William B. Coleman, University of North Carolina School of Medicine, Estados Unidos da América
Recebido: 06 de fevereiro de 2014; Aceito: 30 de abril de 2014; Publicação: 06 de junho de 2014
Direitos de autor: © 2014 Shen et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. O trabalho foi apoiado pelo plano de desenvolvimento científico e tecnológico Provincial de Shandong (2012GG0021836), Provincial Natural Science Foundation de Shandong (ZR2013HZ001). FD recebeu bolsa de investigação do Fundo de Investigação em Saúde da Central Dinamarca Região eo dinamarquês Cancer Society. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
para além de células de cancro, uma lesão tumoral contém um número de células recrutadas que contribuem para a imagem de marca do cancro, criando o microambiente do tumor [1]. As células estromais, vasos sanguíneos e células inflamatórias que se infiltram são os principais componentes do microambiente do tumor [2]. Estas células permitir e sustentar a maioria das marcas do câncer através de comunicações recíprocas com células cancerosas neoplásicas [3]. Um infiltrado de leucócitos, compreendendo mastócitos, células T, células assassinas naturais (NK), as células T-reguladoras (T-regs), células supressoras mielóides derivadas (MDSC), macrófagos associados a tumores (TAM) e neutrófilos associados a tumores (TAN ) são os participantes-chave do microambiente do tumor, onde eles podem promover ou inibir a formação e desenvolvimento do cancro [4] [5].
granulócitos neutrófilos são os mais abundantes leucócitos circulantes e representam a primeira linha de defesa imunitária contra a invasão patógenos. O papel e as características de TAN em câncer são mal definidos e tem sido considerado negligenciável, até recentemente, por causa de sua vida curta e fenótipo totalmente diferenciada [4]. O primeiro relato de neutrófilos de sangue periférico associadas com a sobrevivência de 5 anos curta nos seres humanos, foi publicado em 1970 [6]. O primeiro estudo para identificar a presença de TAN pelo uso de imuno-histoquímica (IHQ) como um fator de prognóstico independente em seres humanos e incorporar TAN em um modelo de risco prognóstico baseado em características clinicopatológicas estabelecidos foi publicado em 2006 [7].
recentemente, o papel prognóstico do TAN tem sido associada com mau resultado clínico em vários cancros humanos, principalmente no carcinoma de células renais (RCC) [7], [8], melanoma [9], o cancro colorectal (CRC) [10 ], carcinoma hepatocelular (HCC) [11] – [14], colangiocarcinoma intra-hepático (TPI) [15], gástrica [16], carcinoma pancreático ductal (PDC) [17] e de cabeça e pescoço câncer (HNC) [18]. No entanto, outros estudos demonstraram nenhuma relação entre TAN e prognóstico desfavorável [19] – [22]. Embora atraente, estes achados são limitados pelo desenho retrospectivo ou um único tipo de tumor. Na verdade, o nível-1 evidência geral apoiar um excesso de mortalidade em pacientes com altos níveis de TAN é inexistente. Por isso, foi realizada a primeira meta-análise para avaliar o efeito da TAN em pacientes com câncer.
Materiais e Métodos
identificação Pesquisa
PubMed, Embase e Web of Science foram usadas para procurar os artigos originais que analisam o valor prognóstico da TAN no câncer humano, por meio de palavras-chave variavelmente combinados: ‘neutrófilos’, ‘se infiltram no tumor neutrófilos’, ‘neutrófilos associado a tumor’, ‘neutrófilos’, ‘câncer ‘,’ carcinoma ‘,’ tumor ‘,’ prognóstico ‘,’ prognóstico ‘, e’ evolução clínica ‘. Última pesquisa foi atualizada em 25 de abril de 2013, e nenhuma data limite inferior foi utilizado. Nós também procurou referências das bibliografias de todos os estudos elegíveis e revisões sistemáticas relevantes. Ao mesmo tempo, entramos em contato com os autores dos artigos elegíveis, sempre que os dados essenciais não estavam disponíveis a partir de literaturas originais.
Os critérios de elegibilidade
Os critérios de inclusão e exclusão foram feitas antes de qualquer meta-análise dos dados . Estudos tinha que seguir os seguintes critérios: (1) Ensaios teve de lidar com câncer humano; (2) medir a expressão de neutrófilos no tecido do tumor; (3) avaliar a associação entre TAN ea evolução dos pacientes com detalhes suficientes para permitir o cálculo das taxas de risco (HR) de cada resultado e seus intervalos de confiança de 95% (IC); (4) TAN foi dicotomizada como “alto” e “baixo” valor ou valor de corte equivalente; (5) publicado como um trabalho completo em Inglês. Quando parte ou a totalidade dos pacientes foram envolvidos em mais de uma publicação, somente o estudo mais completo ou mais informativo foi incluído nesta análise.
Os dados de extração
Todos os documentos potencialmente relevantes foram revistos e extraídos independentemente por dois investigadores (MX. S. e PP. H.), e as divergências foram resolvidas por discussão e as partes controversas foram julgadas por um terceiro pesquisador (JJ. D). A fim de garantir a qualidade da meta-análise, seguimos as orientações fornecidas pelos itens de relatório preferido para revisões sistemáticas e meta-análises (PRISMA) Declaração [23]. Informações obtidas a partir das pesquisas incluídas autor, ano de publicação, país de população, tamanho da amostra, histologia, estágio, o anticorpo primário, os neutrófilos localização, critérios de corte, valor de corte, tempo de seguimento, RH e análise de sobrevivência
a análise estatística
Para a agregação quantitativa dos resultados de sobrevivência, nós medimos o valor prognóstico da TAN pelos RHs e os associados ICs de 95%. Um HR extraído 1 indicaram pior resultado para o alto nível de TAN. O resultado foi considerado estatisticamente significativo apenas quando os IC 95% não se sobrepõem a 1. Em ensaios avaliadas, se horas e ICs de 95% não foram nem informados diretamente, nem fornecido pelos autores após o pedido, eles foram estimados sempre que possível, de acordo com a Tierney de métodos [24] (N = 7).
Foi utilizado o I
2 estatísticas para detectar a heterogeneidade entre os diferentes subgrupos. estimativas combinadas do valor prognóstico da TAN foram calculados usando o modelo de efeito aleatório dependendo heterogeneidade evidente com I
2 50%; caso contrário, foi utilizado o modelo de efeito fixo. Avaliação de viés de publicação foi realizada utilizando um esquema de funil com o teste de Begg e a análise guarnição-e-enchimento. Uma análise de sensibilidade também foi realizado para testar o impacto dos resultados a partir destes estudos elegíveis. Todos os testes estatísticos foram bilaterais e as diferenças em
p Art 0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Stata Statistical Software (versão 12.0 Stata Corp., College Station, TX, EUA) foi utilizado para todas as análises em nossa análise.
Resultados
Identificação de estudos relevantes
Totalmente foram identificados 3962 estudos potencialmente relevantes após pesquisas iniciais. Com base em títulos e resumos de triagem 3923 estudos foram excluídos, e os restantes 39 foram avaliados em texto completo. Depois de analisar as bibliografias desses 39 estudos, foram adicionados 5 estudos para a meta-análise. Dos estudos candidatos 44, 9 estudos não estavam diretamente relacionadas aos resultados específicos; 2 estudos não forneceu dados suficientes para calcular os dados de sobrevivência; 9 Os estudos foram relacionadas com infiltrantes tumorais macrófagos, eosinófilos ou neutrófilos em vez de linfócitos; apenas 1 estudo relatou dados de sobreposição; 2 estudos não avaliaram a expressão de TAN como variáveis dicotômicas; 1 estudo de carcinoma sobre bronquioloalveolar foi excluído porque neutrófilos foram medidos em lavado broncoalveolar em vez de tecido tumoral. Consequentemente, 20 artigos com um número total de 3946 pacientes foram aceitos para a nossa meta-análise (Fig. 1).
Características dos estudos incluídos
As características dos estudos acumulados são listados na Tabela 1. na nossa análise, os neutrófilos foram ainda classificadas em três grupos de acordo com as localizações de neutrófilos no interior dos compartimentos tumorais: intratumoral (em ninhos de tumor), peritumoral (uma área de estroma adjacented para ninhos de tumor foi denotada como peritumoral, se a célula menos um tumor foi observada no campo de vista), e do estroma (uma área foi denotada como estromal se não há células tumorais foram observadas no campo de tecido peritumoral estroma de vista) [25]. O tamanho da amostra a que se refere o número de pacientes avaliados para TAN
Estudos elegíveis incluídos 5 estudos para HCC (n = 1.044) e ICC (n = 123) [11] -. [15], 4 estudos para HNC (n = 360) [18], [21], [22], [26], 2 estudos para o cancro do pulmão de células não pequenas-(NSCLC, n = 967) [20], [27], 2 estudos para RCC (n = 206) [7], [8], 2 estudos para carcinoma gástrico (n = 388) [16], [19], 2 estudos para CRC (n = 359) [10], [28] e 1 estudo de carcinoma cervical (CC, n = 101) [29], melanoma (n = 186) [9] e PDC (n = 212) [17], respectivamente.
Os resultados clínicos foram avaliados em cada estude. 16 estudos, incluindo 3353 pacientes tiveram sobrevida global (OS) como o objectivo primário [7] – [12], [14] – [22], [27]. Todos de 16 estudos avaliaram neutrófilos intratumorais; 2 estudos avaliaram neutrófilos peritumoral; e 2 estudos avaliaram neutrófilos estromais. Um estudo avaliou várias localizações de neutrófilos no compartimento tumor e tinha vários pontos de extremidade de sobrevivência foi incluído nas análises repetidas vezes [30].
10 estudos, incluindo 2139 pacientes relataram dados sobre a sobrevida livre de recorrência (RFS) /sobrevida livre de doença (DFS) [8], [9], [11] – [14], [17], [20], [26], [29]. Todos os 10 estudos avaliaram neutrófilos intratumorais, 3 estudos avaliaram neutrófilos peritumoral, e 3 estudos avaliaram neutrófilos estromais. Além disso, 3 estudos [8], [9], [28] incluindo 437 pacientes tiveram sobrevida específica por câncer (CSS) como um ponto final.
Em relação ao método para identificar TAN, 17 estudos utilizados IHC para detectar a expressão do TAN. O anticorpo monoclonal contra CD66b foi utilizado em 15 estudos, e o anticorpo monoclonal contra o CD15 foi utilizada em 2 estudos. Hematoxilina-eosina (H E) mancha foi utilizado em 3 estudos. Os neutrófilos foram avaliados usando estereologia (5 estudos), a quantificação computadorizada automática (4 estudos) e métodos semi-quantitativos (11 estudos). A expressão de TAN foi dicotomizada em níveis altos e baixos ou grupos presentes e ausentes, e os valores de corte para 20 ensaios foram listadas na Tabela 1. Um total de 15 estudos utilizaram a mediana ou níveis médios como valores de corte, 2 estudos utilizaram valores de corte fixa e 3 estudos não mencionou a informação detalhada sobre critérios de exclusão. RHs
Meta-análise
Entre os 20 estudos, 9 estudos apresentados e 95% CIs para ambos os classificadores não ajustadas e ajustadas. Quando ambos os RHs não ajustadas e ajustadas foram extraídos dos documentos originais, os RHs ajustados foram incluídos em nossa análise. Esta análise foi denotada como a análise de associação máxima ajustada [31], que principalmente discutido abaixo. Inversamente, se os RHs não ajustados foram incluídos na meta-análise, esta análise foi indicado como análise bruta (não ajustados) [31]. Todas as HRs reunidas foram calculados apresentados na Tabela 2. No entanto, não houve diferença óbvia nos HRs reunidas entre a análise de associação máximo ajustado e a análise bruta.
Os neutrófilos foram divididos em vias intratumoral, peritumoral, e estromal em todos os estudos, com a sobrevivência análises avaliando oS, CSS, RFS e DFS. Para análises quantitativas, foram calculados os RHs reunidas para todos os ensaios disponíveis agrupados por OS, RFS /DFS, e CSS. Meta-análise avaliando OS como o ponto final foram realizadas em 16 estudos, o HR agrupada de neutrófilos intratumorais foi de 1,66 (IC 95%: 1,37-2,01, eu
2 = 70,5%) (Fig. 2 A), indicando que a alta densidades de neutrófilos intratumorais foram independentemente associados com baixa sobrevida em vários tipos de câncer. Altas densidades de neutrófilos apresentadas em outras áreas dos compartimentos de tumor não tinham estatisticamente significativamente associação com OS; os RHs combinadas foram 1,66 (95% CI: 0,64-4,32, eu
2 = 87,2%) para peritumoral e 1,10 (95% CI: 0,76-1,61, eu
2 = 56,8%) para estromais neutrófilos, respectivamente ( tabela 2).
(a) Forrest trama para avaliar o efeito global de TAN no oS em todos os pacientes com câncer. (B) enredo Forrest para avaliar o efeito global de TAN em RFS /DFS em todos os pacientes com câncer.
Altos níveis de neutrófilos intratumorais foram significativamente associados com curta RFS /DFS (HR = CI 1,68, 95% : 1,36-2,07, eu
2 = 55,8%), enquanto peritumoral (HR = 1,80, 95% CI: 0,96-3,37, eu
2 = 73,5%) e do estroma (HR = 1,27, 95% CI : 0,75-2,16, eu
2 = 76,8%) não foram (Fig 2B).. Elevadas densidades neutrófilos intratumorais também foram significativamente associados com a má CSS (HR = 3,36 IC 95%: 2,08-5,42, eu
2 = 0%) (Tabela 2)
Em seguida, a fim de ainda mais. investigar o papel prognóstico de neutrófilos intratumorais em diferentes tipos de cânceres, agrupamos estudos elegíveis por tipos de câncer. Em HCC e ICC, dados demonstraram altos neutrófilos intratumorais como um indicador de prognóstico de prognóstico desfavorável em comparação com aqueles com níveis baixos, o HR reunidas = 1,80 para OS (95% CI: 1,33-2,43, eu
2 = 57,7%), e (IC 95%: 1,33-1,88, eu
2 = 36,9%) HR = 1,58 para a RFS /DFS (Fig 3A.). Alta densidade de TAN foi associada a curto OS em HNC (HR = 1,69, 95% CI: 1,10-2,60, eu
2 = 0%) (Figura 3B.), Em NSCLC (HR = 1,16 CI, 95%: 1,00-1,35, eu
2 = 0%) (Fig 3C), no CCR (HR = 2,69, 95% CI:.. 1,89-3,83, eu
2 = 0%) (Figura 3D), mas não em carcinoma gástrico (HR = 1,20 IC 95%: 0,50-2,89, eu
2 = 84,6%) (Figura 3E.). Devido à limitação do número de estudos elegíveis, a análises de subgrupos de melanoma, CC, PDC, e CRC foram não realizado.
horas de pacientes de carcinoma hepatocelular são relatados como (A). Horas de pacientes HNC são relatados como (B). Horas de doentes com NSCLC são relatados como (C). Horas de pacientes com CCR são relatados como (D). Horas de pacientes com carcinoma gástrico são reportados como (E).
Para avaliar o efeito do anticorpo primário, os estudos foram agrupados de acordo com o anticorpo primário utilizado. O HR conjunta dos estudos que avaliam OS para neutrófilos intratumorais era (IC 95%: 1,47-2,22, eu
2 = 67,7%) 1,80 para CD66b, e 1,44 (95% CI: 0,90-2,30, eu
2 = 45,9%) para o CD15 (Tabela 2).
a heterogeneidade foi observada entre os 16 ensaios indepedent que tiveram oS como o ponto final (I
2 = 70,5% para intratumral, eu
2 = 87,2 % para peritmoral, e eu
2 = 56,8% para os neutrófilos do estroma), bem como 10 ensaios independentes que tinham RFS /DFS como o ponto final (I
2 = 55,8% para intratumral, eu
2 = 73,5% para peritmoral, e eu
2 = 76,8% para os neutrófilos do estroma). Em análises de subgrupos de tipos de tumor, a heterogeneidade foi visto em HCC e ICC (I
2 = 57,7%) e carcinoma gástrico (I
2 = 84,6%) avaliar OS para neutrófilos intratumorais enquanto nenhuma heterogeneidade foi observada em outros subgrupos .
o viés de publicação e análise de sensibilidade
o viés de publicação foi avaliado por um gráfico de funil com o teste de Begg ea análise guarnição-and-fill. Entre envolveu 16 estudos que avaliaram OS para neutrófilos intratumorais, o
valor p
foi 0,260 para o teste de Begg. E a análise guarnição-and-fill imputada 5 estudos, que não iria alterar os resultados. Estes métodos sugerem que nenhum viés de publicação foram observadas no subgrupo avaliar OS para neutrófilos intratumorais. Além disso, nossos dados indicam que nenhum viés de publicação foram observadas entre os 10 estudos que avaliaram a RFS /DFS e neutrófilos intratumorais (
p
= 0,152 para o teste de Begg, a análise guarnição-and-fill imputada 2 estudos, que não alterariam os resultados).
a análise de sensibilidade investiga a influência de um único estudo sobre a estimativa meta-análise global, que calcula os RHs agrupados omitindo um estudo em cada turno. Os resultados da análise de sensibilidade mostrar se os estudos são convincentes e estável. Em nossa análise, demonstrou que todos os dados que avaliam o papel prognóstico dos níveis de neutrófilos intratumorais em todos os pacientes com câncer eram estáveis com o OS como o ponto final (Fig. 4A), também RFS /DFS como o ponto final (Fig. 4B).
análise (A) Sensibilidade de estudos avaliaram neutrófilos intratumorais expressão no OS. (B) Análise de sensibilidade dos estudos avaliaram neutrófilos intratumorais expressão no RFS /DFS.
Discussão
Para o nosso conhecimento, esta é a primeira meta-análise para analisar elevados níveis de neutrófilos intratumorais como um fator prognóstico independente para breve RFS /DFS, CSS e OS em pacientes com câncer. Heterogeneidade os resultados dos pacientes para cirurgia ou intervenção médica tem sido um desafio para muitos anos. Esta meta-análise enfatiza uma componente significativa de que a heterogeneidade do veio de diferenças no nível de neutrófilos de infiltração dentro do microambiente do tumor. O fato de que diferentes tipos histológicos de câncer todos compartilham em comum a infiltração de neutrófilos pode apontar para TAN como um novo fator prognóstico no câncer que deverá ser melhor avaliado.
A implicação da meta-análise é que o risco de recorrência ou morte é aumentada de pelo menos 66%, se forem detectados níveis elevados de neutrófilos intratumorais. Assim, pacientes com neutrófilos intratumorais deve ter um acompanhamento mais próximo. neutrófilos intratumorais também pode servir como um novo fator de estratificação em ensaios randomizados. Além disso, a incorporação de neutrófilos intratumorais em modelos prognósticos correntes com base em características clinicopatológicas estabelecidos e validados continua a ser uma prioridade.
As respostas inflamatórias desempenham um papel importante em diferentes fases do desenvolvimento do tumor, invasão e metástase. No entanto, o papel dos neutrófilos no microambiente tumoral tem sido considerada desprezível, até recentemente, [4], em contraste com a TAM bem caracterizada [30]. No entanto, dentro últimos anos novos dados têm enfatizado um papel importante de TAN em pacientes com câncer. Estas observações clínicas são fortemente apoiados por estudos funcionais que mostram que as células cancerosas e /ou outras células dentro do microambiente do tumor modular neutrófilos para infiltrar o tecido tumoral e para adquirir as actividades promotoras de tumor, tais como a angiogénese [32], a migração, invasão, metástase, mutagénese ou imunossupressão [33]. Os neutrófilos conversa cruzada com células tumorais através da produção de citocinas e outras moléculas de [34], e através da interacção com outras células no microambiente tumoral [35]. É importante salientar, no bem estabelecida câncer humano invasiva o papel prognóstico negativo de TAN tem sido surpreendentemente consistente e clara [36]. A presente meta-análise acrescenta a esta prova e devem pedir mais investigação nesta área.
Em nossa análise, reunidas 20 estudos, incluindo 3946 pacientes e observou altas densidades de neutrófilos intratumorais estatisticamente associados com OS desfavorável. Este era evidente para todos os cancros combinados e para todos os subtipos de cânceres, exceto carcinoma gástrico. Os resultados conflitantes em carcinoma gástrico enfatizar a importância da utilização de moderna IHC nas avaliações de neutrófilos intratumorais. Embora o resultado em NSCLC foi o valor limítrofe com IC 95% de 1,0-1,35, muitas metanálises iria considerar esta estatisticamente significativa [37] [38]. Mais pesquisas são necessárias para validar os resultados como o número de estudos em cada tipo de câncer era pequena. Além disso, altos níveis de neutrófilos intratumorais foram significativamente associados com curta RFS /DFS e CSS especialmente no HCC. No entanto, as HRs de dados agregados de neutrófilos peritumorais e estromais não foram estatisticamente significativas. Estes resultados podem sugerir que os neutrófilos infiltrados nos ninhos tumorais foram o indicador mais preciso do resultado ruim no câncer humano. No entanto, os resultados obtidos nos peritumorais e estromais compartimentos devem ser interpretados com cautela como o número de estudos que avaliam os neutrófilos em várias localizações do compartimento do tumor foi baixa (n = 4) e horas para os neutrófilos peritumoral tinha aproximadamente o mesmo nível de gama (RH 1.66- 1,8) como para as avaliações de neutrófilos intratumorais. Isso pode refletir a importância da atividade de neutrófilos nos ninhos tumorais e da fronteira tumor migração onde as comunicações recíprocas entre as células tumorais e neutrófilos infiltrantes pode ser antecipada a ser elevada e isso deve ser mais estudada. No entanto, avaliações sistemáticas de neutrófilos nos diferentes compartimentos, ou seja, intratumoral, peritumoral e estromal e a correlação desses subconjuntos de células com outras características clínicas e evolução clínica são complicados e tecnicamente desafiador. Tem sido sugerido que uma simples estimativa do número total de neutrófilos em relação ao número total de células T CD8
+ linfócitos na área do tumor global é mais fácil e mais rápido e clinicamente traduzível em termos de significado prognóstico [29].
Foi avaliado o impacto do anticorpo primário. Os dados indicaram que CD66b positiva TAN poderia ter melhor valor prognóstico do que CD15. No entanto, no subgrupo que tinha SO como o ponto final, os dados devem ser interpretados com cautela como o número de estudos que avaliam os neutrófilos intratumorais com o anticorpo CD15 era pequeno (N = 2). Leucócitos expressar diversos marcadores da superfície celular, mas é restrito para CD66b neutrófilos activados [39] [40]. Enquanto o CD15, também chamado de sialil Lewis x (sLex), é expressa sobre a superfície de leucócitos [41], principalmente em neutrófilos, eosnophils, e parte de monócitos, e não reflecte o estado de activação de neutrófilos. Além disso, o CD15 demonstrou-se ser expressa em células tumorais, ocasionalmente, [42], [43]. Nenhum estudo avaliou ambos os anticorpos em paralelo.
Os métodos de avaliação da TAN foram variados no presente estudo. métodos semiquantitativos são fáceis e rápidos, mas subjetiva e inter-observador podem existir variações. avaliações de estereologia são objetivos e reprodutível, mas trabalhoso, complicado e requer treinamento especializado. análise de imagem digital (DIA) é um método, de alto rendimento emergente para avaliações quantitativas automatizadas de secções imunomarcadas mas ainda pode ser sensível à variação de processamento de tecidos, protocolos IHC, coloração inespecífica, e definição da região de interesse. No entanto, para a relevância clínica e aplicabilidade das avaliações TAN métodos mais eficientes são necessários. Recentemente, um estudo comparativo demonstrou protocolos DIA para fornecer resultados rápidos, robustos, e potencialmente clinicamente aplicáveis com informações de prognóstico comparável ao método de estereologia consideravelmente complicado [44].
Várias fontes de heterogeneidade deve ser considerada no presente estudo . A heterogeneidade estatística pode, devido às diferenças nos tipos de carcinomas, o método e avaliação de coloração, o anticorpo primário, localização de neutrófilos, o método de avaliação, critérios de corte, valor de corte, as variáveis utilizadas para correspondência e ajuste. Apesar de todos os preconceitos potenciais mencionados, os dados eram estáveis e convincente, como demonstrado pela análise de sensibilidade e análise guarnição-and-fill.
Nós não estimar os RHs agrupados em todos os dados com ajuste como as horas de algumas negativas resultados não foram relatados em gradual regressão de Cox analisa porque eles não estavam na equação. Os valores-limite foram diferentes em cada estudo. 14 estudos utilizou a mediana ou níveis médios como valores de corte, e apenas 1 estudo utilizou valor fixo de corte. Ela enfatiza a importância de se confirmar um valor “padronizado” cut-off para estudos futuros. Além disso, diferentes anticorpos e métodos para a coloração de avaliação primário pode resultar em diferentes resultados. Portanto, para melhorar a qualidade das pesquisas são necessárias, futuros protocolos padronizados.
Nosso estudo tem limitações. Em primeiro lugar, todas as literaturas eligibly nesta meta-análise foram publicados em Inglês. Isto pode representar sob estudos negativos na meta-análise [45]. Em segundo lugar, vários elementos podem afetar os RHs agrupados, tais como as diferenças no país de população, características dos pacientes, tempo de seguimento, os critérios de corte, valor de corte e as variáveis utilizadas para correspondência e ajuste. Em terceiro lugar, houve algumas pequenas diferenças entre o HR exata e os dados extrapolados, de acordo com o método de Tierney [24].
Conclusão
Em resumo, a meta-análise demonstrou altos níveis de neutrófilos intratumorais foram significativamente associados com a sobrevivência desfavorável e recorrência no câncer humano, especialmente em HCC e ICC, HNC, NSCLC e RCC. Além disso, o anticorpo primário CD66b pode ser uma escolha melhor para avaliar o papel prognóstico de TAN em vez de CD15 uma vez que o antigénio CD66b-positivo é atribuído a neutrófilos activados. Mais pesquisas para compreender o mecanismo e funcionalidade de TAN em câncer são incentivados.
Informações de Apoio
Checklist S1.
PRISMA Checklist
doi:. 10.1371 /journal.pone.0098259.s001
(DOC)
Reconhecimentos
Os autores gostariam de agradecer a todos os investigadores do estudos primários e todos os membros da nossa equipe. Além disso, agradecemos FD, Hanne Krogh Jensen, e Andreas Carus por nos fornecer os dados não publicados.