Abstract
Objectivo
Este estudo teve como objetivo analisar o valor prognóstico da p16 overexpressed
INK4a em vulvar Câncer. Apesar de a p16 supressor de tumores
INK4a foi demonstrado ser de valor prognóstico em uma grande variedade de cancros e lesões pré-cancerosas, o seu papel no cancro vulvar ainda não é clara.
Métodos
todas as publicações em língua Inglês sobre a associação entre p16
INK4a e as características clinicopatológicas de câncer vulvar foram pesquisados a partir Pubmed, Embase, e web of Science, e aqueles em língua chinesa foram identificadas manualmente e on-line a partir da Infra-estrutura China National Knowledge. critérios de inclusão e exclusão estritos foram seguidos. odds ratio (OR) ou razões de risco (RR) com intervalo de confiança de 95% (IC) foram reunidos para avaliar a força da associação. viés de publicação foi estimada utilizando parcelas funil e testes de regressão do Egger.
Resultados
Um total de 17 estudos com 2309 pacientes foram incluídos. O p16
superexpressão INK4a correlacionou-se significativamente com a menor Federação Internacional de Ginecologia e Obstetrícia fase (I + II vs III + IV; OR = CI 0.60,95%: 0,41-0,86,
P
= 0,006), metástases em linfonodos negativo (negativo vs positiva; OR = 0.61,95% CI: 0,39-0,95,
P
= 0,029), idade do paciente IC 55 (OR = 0.54,95%: 0,31 -0,96,
P
= 0,034), estado papilomavírus positivo humana (OR = 0.01,95% CI: 0,00-0,11,
P Art 0,001), e maior sobrevida global (RR = 0.53,95% CI = 0,35-,80,
P
= 0,003).
Conclusão
O p16
INK4a pode estar associado a uma sobrevida maior e indica melhor prognóstico do câncer vulvar
Citation:. Cao H, Wang S, Zhang Z, Lou J (2016) Valor prognóstico da p16 overexpressed
INK4a no câncer vulvar: a Meta-Analysis. PLoS ONE 11 (3): e0152459. doi: 10.1371 /journal.pone.0152459
editor: Magdalena Grce, Rudjer Boskovic Institute, CROÁCIA
Recebido: 04 de novembro de 2015; Aceito: 15 de março de 2016; Publicação: 31 de março de 2016
Direitos de autor: © 2016 Cao et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Data Availability:. Os dados são a partir dos estudos incluídos cujos autores podem ser contatado em doi: 10,1006 /gyno.1997.4914, doi: 10,1097 /pas.0000000000000454, doi: 10.1002 /ijc.25629, doi: 10.1016 /j.ygyno.2004.07.026, doi: 10,1007 /s13277-013-0955-0, doi: Paor.2006.12.3.0153, doi: 10,1097 /01.pai.0000213118.81343.32, Int J Gynecol Pathol. 2006 Jan; 25 (1): 22-9. a partir Pubmed, Web of Science e Embase, artigos chineses de Sichuan Medical Journal (05): 405-406, Maternal and Child Care Saúde da China (22):. 3168-3170, tese de Mestrado: Universidade de Qingdao. hin J Clin Oncol Rehabil (01):. 6-8, Tese de Mestrado: China Medical University. do banco de dados CNKI
Financiamento:. Os autores não têm apoio ou financiamento para relatar
Conflito de interesses:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
o câncer de vulva é a quarta neoplasia maligna mais comum no trato genital feminino, representando 5% de todos os cânceres ginecológicos [1] .Com uma estimativa de mais de 5000 novos casos e mais de 1000 mortes nos Estados Unidos cada ano, o incidência de câncer vulvar continuar aumentando, particularmente em mulheres jovens [1,2] .O tipo histológico mais frequente de câncer vulvar é o carcinoma de células escamosas (SCC), que representa 80% -90% dos casos e pode ser dividido em dois grupos com base em se eles estão relacionados com (HPV) infecção pelo papilomavírus humano [3,4]. Um deles é o tipo associado ao HPV incluindo a verruga ou basaloide SCC, eo outro é o independente de HPV queratinizante SCC [5,6] cirurgia .Radical é a principal modalidade de tratamento para o cancro vulvar, por vezes em combinação com a radioterapia pré-cirúrgico ou pós-cirúrgico ou quimioterapia, dependendo do tamanho do tumor ou invasão, mas muitas vezes provoca tratamento excessivo em casos em fase inicial, quando os pacientes apresentam nonmetastasis de linfonodo [7]. Por esta razão, tumor marcadores biológicos são necessários para prever o comportamento clínico e o potencial metastático de cancro vulvar.
O p16
INK4a proteína é um inibidor da quinase dependente de ciclina, que pode actuar sobre cinases dependentes de ciclina (CDKs ) e, assim, inactivar o ciclo celular [8] .A perda de expressão p16INK4a parece ser um evento precoce na carcinogénese. Ao longo das últimas décadas, o valor prognóstico da p16
INK4a proteína foi avaliada em uma ampla variedade de cancros [9-14] .Entre estes, o estudo de Hellman et al [15], concluiu que a p16
expressão INK4A pode ser usado como um marcador para a positividade do HPV no carcinoma vaginal, que compartilha uma etiologia muito semelhante com cancro vulvar. No entanto, o seu papel eo efeito etiológico da sua combinação com o status do HPV no câncer vulvar permanecem de alguma forma obscura. Tringler e Dong relatou uma associação significativa entre p16
INK4a e maior sobrevida dos pacientes com câncer vulvar, enquanto Trietsch negado seu papel prognóstico independente [16-18] .Neste sentido, o presente estudo realizou uma meta-análise para explorar a prognóstico valor do p16INK4a overexpressed em câncer vulvar.
Métodos
estratégia de busca
Para identificar todos os artigos que investigaram a associação de p16
expressão INK4a e câncer vulvar, uma pesquisa bibliográfica de banco de dados PubMed, Embase, web of Science, e Infra-estrutura China National Knowledge foi realizado entre janeiro de 1991 e agosto de 2015. Todos os artigos relevantes foram recuperados utilizando os seguintes termos de busca: “p16 ou p16
INK4a” e “neoplasia vulvar ou neoplasias da vulva “. Referências das publicações recuperadas também foram rastreados para outros estudos relevantes. Para várias publicações da mesma população, somente o estudo de maior escala foi incluído. seleção do estudo foi alcançado por dois investigadores de forma independente, de acordo com os critérios de inclusão e exclusão, por despistagem do título, resumo e texto completo. Qualquer disputa foi resolvida por discussão. A língua de publicação foi restrito para Inglês e Chinês. Apenas artigos de pesquisa foram incluídos. Se um artigo relatou resultados, incluindo diferentes estudos, cada estudo foi tratado como uma comparação separada na presente meta-análise.
Os critérios de inclusão
Os seguintes critérios de inclusão foram seguidos na seleção de estudos para a corrente meta-análise: Estudos em que o diagnóstico de câncer vulvar foi comprovada por métodos histopatológicos; estudos de p16
expressão INK4a que foram baseados em tecido de cancro vulvar (a contar de uma excisão cirúrgica ou amostragem biópsia); espécimes examinados por imuno-histoquímica; e todos os estudos sobre a correlação de p16
expressão INK4a com marcadores clínico-patológicos ou com o status HPV ea associação de p16
superexpressão INK4a na sobrevida global (OS) ou sobrevida livre de doença (DFS) ou de reincidência do vulvar pacientes com câncer. Para inclusão na análise, sem limitação foi definido no número mínimo de pacientes de cada estudo. No caso de vários artigos do mesmo grupo com base em pacientes semelhantes e usando mesmos métodos de detecção, somente o maior ou o mais recente artigo foi incluído.
Os critérios de exclusão
Os critérios de exclusão foram definidos da seguinte forma:. estudos baseados em soro ou quaisquer outros tipos de amostra e estudos utilizando diferentes de imunohistoquímica métodos para examinar espécimes
Os dados de extração
Três investigadores (Hanyu Cao, Si Wang, e Zhenyu Zhang) extraídos de forma independente todos os artigos que cumpram os critérios de inclusão acima mencionados. Qualquer discrepância foi resolvida pela discussão até que um acordo foi alcançado entre os investigadores. As seguintes informações foram coletadas de cada publicação: nome do primeiro autor, ano de publicação, país do paciente, o estágio do tumor, técnica, percentagem de p16
INK4a células positivas, número de pacientes, valor de corte de superexpressão de p16
INK4a em casos e controles.
a análise estatística
odds ratio (OR) e intervalos de confiança de 95% (IC) foram reunidas para avaliar a associação entre p16
expressão INK4a e características clínicas e histopatológicos câncer vulvar incluindo grau histológico, Federação Internacional de Ginecologia e estágio Obstetrícia (FIGO), metástases em linfonodos, idade e status de HPV. razões de risco (RR) e ICs de 95% foram sintetizados para determinar a correlação entre p16
expressão INK4a e OS de 5 anos. A heterogeneidade foi examinada com
I
2 estatísticas interpretado como a proporção da variação total contribuído por variações entre-estudo. A heterogeneidade foi investigada pelo teste Q qui-quadrado do Cochran com um nível de significância de
P Restaurant 0,10 e
I
2 50% .Neste caso, o de efeitos aleatórios modelo foi usado para estimar as RUP agrupados [19] .Caso contrário, as RUP reunidas foram estimados pelo modelo de efeitos fixos. RRS foram reunidos para avaliar a associação de p16
expressão INK4a e resultados de sobrevivência de dados. O 4.1 software Engauge digitador Version (software livre baixado da https://sourceforge.net) foi usada quando os dados de sobrevivência não pode ser extraído diretamente de acordo com estudos anteriores [20]. parcelas funil de Begg e teste de regressão linear do Egger foram realizados para investigar o viés de publicação [21]. Todos os testes estatísticos foram realizados com o software Stata 12.0 (Stata Corp, TX, EUA).
Resultados
inclusão Estudo e características
Como mostrado na Figura 1, um total de 17 estudos elegíveis, compreendendo 2309 pacientes de diferentes países foram incluídos nesta meta-análise, com o número de pacientes que vão 4-1287 por estudo [16-17,22-36] .Entre eles, oito estudos lidou com o estágio FIGO , e seis estudos apresentados dados sobre linfonodo metástases. Três estudos apresentaram dados classificados de acordo com a idade do paciente (55 anos), e sete estudos relataram grau histológico. Além disso, quatro estudos relataram a associação entre p16
INK4a eo status HPV, enquanto que apenas um estudo [34] incluiu os dados do DFS e OS relativas ao estatuto HPV. dados suficientes Além disso, apenas três estudos previstos no OS relacionados com p16
expressão INK4a. Todos eles usaram o método imuno-histoquímica com diferentes valores de corte. As principais características desses estudos estão resumidos na Tabela 1.
Correlação de p16
expressão INK4a com os parâmetros clínico
Como mostrado na Figura 2, a superexpressão de p16
INK4a foi significativamente associada com o menor estágio FIGO da I-II (OR = CI 0.60,95%: 0,41-0,86,
P
= 0,006, efeito fixo; Fig 2A), nenhum linfonodo metástase (OR = 0.61,95% CI: 0,39-0,95,
P
= 0,029, efeito fixo; Fig 2B), idade do paciente IC 55 (OR = 0.54,95%: ,31-,96,
P
= 0,034, efeito fixo; Fig 2C) e status HPV-positivo (OR = 0.01,95% CI: 0,00-0,11,
P Art 0,001, efeito aleatório; Fig 2D) .No entanto, a superexpressão de p16
INK4a não se correlacionou com o grau histológico (OR = CI 0.99,95%: 0,71-1,39,
P
= 0,953, efeito fixo; Fig 2E).
Forest plot para a associação entre a expressão de p16INK4a e marcadores clínico-patológicos fase (a) FIGO. (B) LN metástase. idade (C) do paciente. (D) o status do HPV. série (E) histológica. FIGO, Federação Internacional de Ginecologia e Obstetrícia; LN, linfonodo; HPV, o papilomavírus humano.
Correlação de p16
expressão INK4a com OS
Cinco anos as taxas OS foram extraídos de três estudos e foram reunidas nesta meta-análise utilizando o método mencionado anteriormente. A superexpressão de p16
INK4a foi significativamente correlacionada com um sistema operacional mais elevado (RR = 0.53,95% CI = 0.35,0.80,
P
= 0,003, efeito fixo; Fig 3), sem heterogeneidade (
I
2 = 0,0%,
P
= 0,636).
viés de publicação
parcelas funil de Begg e teste de Egger foram usadas para avaliar se o viés de publicação existia nos estudos oS 5 anos. Nenhuma evidência óbvia de assimetria foi encontrado no gráfico de funil de OS (
P
= 0,217; Fig 4).
Discussão
P16
INK4a, como um membro da família INK4a, é conhecido, para inactivar a progressão do ciclo celular e diferenciação, por interferir com a ciclina D-CDK4 montagem /6 e, assim, bloquear a transição G1 para S [37] .A perda funcional da família INK4a foi encontrado na variável cancros humanos. Alguns estudos anteriores têm fornecido evidências indicando que p16
INK4a é um supressor tumoral potencial cuja superexpressão pode inibir o crescimento celular anormal, enquanto que a regulação baixa pode levar a tumorigênese [38]. Embora p16
INK4a foi demonstrado ser de valor prognóstico em uma ampla variedade de tipos de cancro e lesões pré-cancerosas, tais como tumores estromais gastrointestinais, cancro do pulmão de não-pequenas, osteossarcoma, cancro do colo do útero, e neoplasia intraepitelial do colo do útero, evidência de correlação com vulvar câncer está faltando [12-13,39-41].
o câncer de vulva é incomum, mas representa um determinado grupo no carcinoma do trato genital inferior no feminino. Como o tratamento para o cancro vulvar tende a ser mais conservador e individualizada ao longo da última década, a familiaridade com os fatores prognósticos parece mais essencial e é de grande valor para o diagnóstico precoce, mas ainda é um desafio por causa da evidência escassa quando comparada com outras doenças malignas ginecológicas [ ,,,0],42] .Ele foi encontrado nessa fase FIGO, metástase linfonodal, grau histológico e são os fatores prognósticos mais importantes no câncer vulvar [43-45]. A idade dos pacientes é também um factor predominante e independente na sobrevivência do cancro vulvar [46] 5-anos. Este estudo é, talvez, a primeira meta-análise que avaliaram o valor prognóstico de p16
INK4a no câncer vulvar.
A presente meta-análise utilizando RUP agrupados demonstrou que p16
INK4a superexpressão correlaciona-se significativamente com o menor estágio FIGO, linfa negativo metástase, e idade mais jovem, de acordo com a sua função bem conhecida de suprimir a invasão tumoral [47-49] .A reunidas RR OS revela que p16
INK4a superexpressão indica um melhor prognóstico para pacientes diagnosticados com câncer vulvar. Os resultados indicam que a p16
INK4a pode ser um biomarcador potencial para o diagnóstico e prognóstico de cancro vulvar. Embora as evidências mostram melhora da sobrevida do carcinoma induzido pelo HPV e p16 positivo associado com câncer de cabeça e pescoço [50], não há estudos detalhados são encontrados apresentando os dados de sobrevivência incluindo a infecção por HPV e p16
INK4a.A poucos estudos apresentaram recidiva taxa relacionada com p16 relativa carcinoma vulvar de células escamosas (VSCC) depois de pesquisas repetidas por diversas vezes, o que pode ser devido à baixa frequência de VSCC. Entre os estudos incluídos, independente taxa de HPV-positivos de p16
INK4a varia entre 0% e 41% [23,25,27,34], que está de acordo com o fato de que o câncer vulvar apresenta uma taxa de infecção de HPV geral de apenas 30% -40% [51-52] .Além disso, o resultado análise mostra que p16
INK4a superexpressão correlaciona-se significativamente com o status HPV-positivos, apoiando fortemente o papel etiológico da infecção pelo HPV no desenvolvimento de câncer vulvar. As oncoproteínas E7 e E6 codificados pelo HPV pode ser integrado no genoma do hospedeiro, a ligação às proteínas supressoras de tumor pRb e p53, respectivamente, e levando a sua desregulação, que resulta na sobre-expressão de p16
INK4A como um meio de genética controle de instabilidade [53] .Todos estes podem razoavelmente levar à especulação de que p16INK4a só é associado com carcinoma vulvar induzida por HPV.
no entanto, este estudo tem algumas limitações que devem ser levadas em consideração. Em primeiro lugar, este estudo incluiu um pequeno tamanho da amostra. Um total de 817 pacientes pode não ser capaz de fornecer evidência estatística convincente o suficiente para provar o papel da p16
INK4a no prognóstico do câncer vulvar. Além disso, estudos sobre a taxa de sobrevivência de câncer vulvar são ainda menos. Em segundo lugar, o valor de corte arbitrariamente seleccionados de p16
expressão INK4a positivo varia em diferentes estudos. Isto pode ser causada pela falta de um ponto de imunocoloração padronizado decidido por uma combinação de intensidade e os factores metodológicas variáveis em imuno-histoquímica, tais como tempo de armazenamento, o método de fixação, e anticorpos diferentes [54], o que pode resultar em um resultado impreciso. Todos os estudos foram avaliados com base em uma revisão de toda a secção histológica, enquanto alguns declarou a avaliação dos resultados de positividade por um ou dois patologistas, ao mesmo tempo, de acordo com a experiência anterior e critérios estabelecidos em neoplasia vulvar ou para colo uterino [55,56 ], que garantir a sua fiabilidade. Em terceiro lugar, os métodos de tratamento para cada paciente diferiam em certa medida pelos seus múltiplos tipos de características clínicas e histológicas, que não devem ser ignoradas. Por estas razões, mais pesquisas com uma amostra maior e mais evidências são necessários para confirmar os achados deste estudo.
Em conclusão, apesar das limitações, os resultados da presente meta-análise sugeriu que p16
INK4a superexpressão foi associada a um prognóstico favorável em pacientes com câncer vulvar. A avaliação da p16
expressão INK4a é capaz de fornecer uma melhor informação de prognóstico para pacientes com câncer vulvar.
Informações de Apoio
S1 PRISMA Checklist. PRISMA 2009 Checklist
doi:. 10.1371 /journal.pone.0152459.s001
(DOC)
Reconhecimentos
Todos os autores estavam diretamente envolvidos em todo o processo, por isso, é divulgado que todos os autores contribuíram igualmente para a pesquisa. Graças aos editores e revisores anônimos. O software utilizado na análise: 12,0 software stata (Stata Corp, College Station, TX):