Abstract

Fundo

tratos mononucleotídicos nas regiões codificantes do

TGFBR2

e

BAX

genes são comumente mutado em cancros (MSI-alto) dos dois pontos de instabilidade de alta microssatélites. O receptor TGFBR2 desempenha um papel importante na TGFB1 (factor de crescimento transformante-β, TGF-β) via de sinalização, e BAX desempenha um papel-chave na apoptose. No entanto, um papel de

TGFBR2

ou

BAX

mutação mononucleótido no cancro colorectal como um biomarcador de prognóstico permanece incerto.

Metodologia /Principais Achados

Nós utilizamos um banco de dados de 1072 do reto e cólon em dois estudos prospectivos de coorte (Estudo de Saúde das enfermeiras e do Health Professionals Follow-up Study). Cox modelo de riscos proporcionais foi usado para calcular taxa de risco de mortalidade (HR), ajustada para características clínicas, patológicas e moleculares, incluindo o CpG ilha methylator fenótipo (CIMP), LINE-1 metilação, e

KRAS

,

BRAF Comprar e

PIK3CA

mutações. MSI-alta foi observada em 15% (162/1072) de todos os cânceres colorretais.

TGFBR2

e

BAX

mononucleotídicos mutações foram detectadas em 74% (117/159) e 30% (48/158) dos tumores MSI-alto, respectivamente. Na análise de Kaplan-Meier, bem como regressão de Cox univariada e multivariada, em comparação com estabilidade de microssatélites (MSS) /casos MSI-baixos, casos MSI-altos foram associados com a sobrevivência superiores colorectal específico do cancro [HR ajustado, 0,34; intervalo de confiança de 95% (CI), 0,20-0,57] independentemente do

TGFBR2

ou

BAX

estado de mutação. Dentre os tumores MSI-altos,

TGFBR2

mutação mononucleótido foi associada com CIMP de alta independente de outras variáveis ​​[odds ratio multivariada, 3,57; IC 95%, 1,66-7,66; p = 0,0011].

Conclusões

TGFBR2

ou

BAX

mononucleótido mutações não estão associados com o resultado sobrevida do paciente em MSI-alta câncer colorretal. Nossos dados não suportam essas mutações como biomarcadores de prognóstico (além MSI) no carcinoma colorectal

Citation:. Shima K, Morikawa T, Yamauchi M, Kuchiba A, Imamura Y, Liao X, et al. (2011)

TGFBR2

e

BAX

Mononucleotídeo Tract Mutações, a instabilidade de microssatélites, e Prognóstico em 1072 cânceres colorretais. PLoS ONE 6 (9): e25062. doi: 10.1371 /journal.pone.0025062

editor: Pierre-Antoine Defossez, Université Paris-Diderot, França |

Recebido: 19 Março, 2011; Aceito: 25 de agosto de 2011; Publicação: 20 de setembro de 2011

Direitos de autor: © 2011 Shima et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho foi apoiada por Estados Unidos National Institutes of Health (NIH) concede P01CA87969 (a sE Hankinson), P01CA55075 (com WC Willett), P50CA127003 (a CSF), K07CA122826 (para SO) e R01CA151993 (para SO), e em parte por doações do Fundo da família de Bennett e da Entertainment Industry Foundation através da National Cancer Research Alliance colorretal. O conteúdo é da exclusiva responsabilidade dos autores e não representam necessariamente a posição oficial do NCI ou NIH. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

O câncer colorretal representa um grupo de doenças heterogêneas molecularmente com diferentes conjuntos de anormalidades epigenéticas e genéticos. Alto grau de instabilidade de microssatélites (MSI-alto) é causada pela deficiência do sistema de reparo incompatível DNA, e observados em aproximadamente 15% dos cânceres colorretais. MSI teste é amplamente usado como a despistagem de pacientes com síndrome de Lynch /cancro colorectal não-poliposo hereditário (HNPCC) [1], [2], [3]. Além disso, a MSI é geralmente aceite como um marcador de prognóstico [4], e provavelmente um marcador preditivo para a resistência ao 5-fluorouracilo [5]. Desde Markowitz et ai. [6] mutações descobertas nas repetições mononucleotídicos codificação de

TGFBR2

na MSI de alta células cancerígenas do cólon, mutações similares de codificação repete mononucleotídicos em muitos outros genes (incluindo

BAX

,

MSH3

,

MSH6

,

IGF2R Comprar e

PTEN

) foram encontrados em MSI alto-cânceres colorretais [3], [7], [8], [ ,,,0],9]. Entre esses genes, mononucleótido de codificação repetições de

TGFBR2

(A)

10 e

BAX

(G)

8 têm mutações frameshift freqüentes, resultando na produção de truncado, forma inativa das proteínas [3], [10]. TGFB1 (factor de crescimento transformante-β, TGF-β) e o seu receptor TGFBR2 constituir uma via de sinalização que regula a transcrição de muitos genes, e funciona como um supressor de tumores [11], [12], [13], [14] e um regulador de resposta imune [15]. BAX promove a apoptose em geral e antagoniza o efeito da BCL2 [16], [17], [18]. Assim, a inactivação de TGFBR2 ou BAX pode contribuir para a progressão do tumor.

Vários estudos anteriores examinaram o papel prognóstico do

TGFBR2

ou

BAX

mononucleotídicos mutações no MSI-alta colorectal cancros, produzindo resultados inconclusivos devido ao poder estatístico limitado na maioria dos estudos [19], [20], [21], [22], [23], [24], [25] (Tabela 1). Todos, mas um estudo anterior [23] examinou o papel prognóstico do

TGFBR2

ou

BAX

mutação mononucleótido em menos de 100 tumores MSI-alta (o número de MSI-altos tumores variando de 16 a 98) [19], [20], [21], [22], [23], [24], [25]. Além disso, nenhum dos estudos anteriores [19], [20], [21], [22], [23], [24], [25] foi exaustivamente examinado efeito de confusão potencial de biomarcadores moleculares chave no cancro colo-rectal, incluindo o CpG ilha methylator fenótipo (CIMP), e

KRAS

,

BRAF Comprar e

PIK3CA

mutações. Assim, o papel prognóstico do

TGFBR2

ou

BAX

mutação mononucleótido em tumores MSI-alta ainda permanece incerto.

Nós realizamos um estudo para testar a hipótese de que

TGFBR2

ou

BAX

mutações mononucleotídicos no cancro colorectal foram associados com o comportamento tumoral alterada (para além MSI), utilizando um banco de dados de 1072 a fase I a IV câncer colorretal em dois estudos prospectivos de coorte. Nosso estudo representa o primeiro estudo que utilizou uma base de dados de estudos prospectivos de coorte para testar a hipótese afirmou. Este fato aumenta a generalização de nossos resultados do estudo. Além disso, porque nós simultaneamente avaliadas, patológicos e tumorais variáveis ​​moleculares clínicos, tais como o CpG ilha methylator fenótipo (CIMP), LINE-1 metilação,

KRAS

,

BRAF

e

PIK3CA

mutações, podemos avaliar o efeito de

TGFBR2

ou

BAX

mutação independente destes fatores de confusão em potencial.

Métodos

grupo de estudo

Nós utilizamos o banco de dados de dois estudos prospectivos de coorte, Estudo de Saúde das enfermeiras (N = 121,701 mulheres seguiram desde 1976) e do Health Professionals Follow-up Study (N = 51,529 homens seguiram desde 1986) [26], [27 ]. Os participantes foram enviados questionários bienais para atualizar as informações sobre fatores de risco potenciais e identificar cânceres recém-diagnosticados em si mesmos e seus parentes de primeiro grau. Foram coletadas blocos de tecido de tumor embebidas em parafina de cânceres colorretais incidente de hospitais em todo os EUA, onde os participantes com câncer colorretal submetidos à ressecção do tumor [26], [27]. As características clínicas dos casos são descritos na Tabela 2 (à esquerda, sob o título de coluna “Todos os casos”). Não houve diferença significativa nas características demográficas entre os casos com tecidos disponíveis e aqueles sem tecido disponível entre os nossos estudos de coorte [26]. A maioria dos casos foram previamente caracterizada por estados de

TGFBR2

, MSI, CIMP,

KRAS

,

BRAF

,

PIK3CA Comprar e LINE-1 metilação [28], [29], [30], [31]. No entanto, nenhum de nossos estudos anteriores analisaram o significado prognóstico da mutação mononucleótido de

TGFBR2

ou

BAX

.

BAX

mutação não foi analisado em qualquer dos nossos estudos anteriores. Assim, este estudo representa um novo estudo utilizando um recurso dos materiais e banco de dados existentes, análogas a novos estudos utilizando linhas celulares bem descritos (por exemplo, SW480 linha celular) modelos ou mouse (por exemplo,

Apc

min rato modelo).

hematoxilina e eosina secções de tecido manchadas de todos os casos de cancro colorectal foram revisadas por um patologista (SO) desconhecem outros dados. diferenciação do tumor foi classificado como bem-moderado vs. pobres ( 50% vs. ≤50% áreas glandulares). Foram excluídos os casos que foram tratados no pré-operatório. Com base na disponibilidade de acompanhamento e tecido tumoral de dados adequados, 1072 casos fase I-IV de câncer colorretal diagnosticados até 2004, foram incluídos no estudo atual (Figura 1). Os pacientes foram observados até a morte ou 30 de junho de 2009, o que viesse primeiro. A morte de um participante foi confirmada pelo Índice Nacional de morte. Voltando ao questionário revelou o consentimento informado de todos os sujeitos do estudo. O consentimento informado foi obtido de todos os sujeitos do estudo. coleta e análise de tecidos foram aprovados pelos Comitês de Seres Humanos da Harvard School of Public Health e Hospital Brigham and Women.

Com base na disponibilidade de follow-up e tumorais adequada dados moleculares entre os cânceres colorretais incidentes identificados nos enfermeiros ‘Health Study (NHS; N = 121.701) (N = 51.529 HPFS), foram incluídos um total de 1072 casos fase I-IV de câncer colorretal diagnosticados até 2004 e do Health Professionals Follow-up Study. MSI, instabilidade de microssatélites; MSS, microssatélite estável.

instabilidade de microssatélites (MSI) análise e detecção de

TGFBR2

e

BAX

mutações mononucleótido trato

O DNA foi extraído a partir de tecido embebido em parafina. análise MSI foi realizada utilizando 10 marcadores microssatélites (D2S123, D5S346, D17S250, BAT25, BAT26, BAT40, D18S55, D18S56, D18S67 e D18S487) [30]. MSI-alto foi definido como a presença de instabilidade em ≥30% dos marcadores, e MSI-baixo /microssatélite estável (MSS) como instabilidade em 0-29% de marcadores [30]. mutações do trato mononucleotídicos de

TGFBR2

e

BAX

foram examinados em tumores MSI-alta. Primers e condições de PCR para

TGFBR2

foram descritos anteriormente [28]. As sequências dos iniciadores para

BAX

foram; 5 ‘- (FAM) ATCCAGGATCGAGCAGGGCG-3′ e 5’-ACTCGCTCAGCTTCTTGGTG-3 ‘. condição de PCR foi pré-aquecer a 95 ° C durante 5 min, 45 ciclos (pelo 94-55-72 30-30-30 ° C durante seg), e extensão a 72 ° C durante 2 min. Os produtos de PCR foram sujeitos a electroforese e analisadas por ABI 3730 DNA Analyzer (Applied Biosystems, Foster City, CA).

pirossequencia�o de

KRAS

,

BRAF

e

PIK3CA

PCR e pirossequencia�o mirada

KRAS

(códons 12 e 13) [32],

BRAF

(códon 600) [33] e

PIK3CA

(exons 9 e 20) foram realizados conforme descrito anteriormente [29].

análises de metilação de ilhas CpG e lINE-1 |

de sódio e subsequente PCR em tempo real (MethyLight [ ,,,0],34]) foram previamente validado [35], e realizada para quantificar promotor metilação em oito ilhas CpG (

CACNA1G

,

CDKN2A

,

CRABP1

,

IGF2

,

MLH1

,

NEUROG1

,

RUNX3

e

SOCS1) [36], [37], [38]. CIMP de alta foi definida como a presença de ≥6 /8 marcadores metilados, CIMP-baixo como a presença de 1/8 a 5/8 marcadores metilados, e CIMP-0 como a ausência (0/8) de marcadores metilados [37 ], [39]. Linha de 1 níveis de metilação foram quantificados por PCR-pirossequencia�o [40], [41].

A análise estatística

Foi utilizado o programa SAS (Versão 9.1, SAS Institute, Cary, NC) para todos análise estatística. Todos os valores de p foram em frente e verso. Quando realizamos testes de hipóteses múltiplas (isto é, análises de correlações moleculares e interações), um valor p para significância estatística foi ajustada para p = 0,0038 (= 0,05 /13) pela correção de Bonferroni. O teste do qui-quadrado (ou teste exato de Fisher) foi realizada para as variáveis ​​categóricas. O teste t assumindo variâncias desiguais foi feito para comparar a média de idade ea média de LINE-1 nível de metilação. Para análise de sobrevivência, foi utilizado o método de Kaplan-Meier eo teste de log-rank. Para as análises de mortalidade específica por cancro colorectal, mortes como resultado de outras do que o cancro colorectal causas foram censurados. Para controlar confundimento, foi utilizado multivariada (estratificada) Cox modelo de riscos proporcionais de correspondência palco para calcular taxa de risco (HR) de morte. Para evitar confusão residual e superajuste, estágio da doença (I, II, III, IV, desconhecida) foi usada como uma variável de estratificação, utilizando a opção “estratos” no comando SAS “Proc phreg”. O modelo multivariado incluiu, inicialmente, idade ao diagnóstico (contínua), sexo, ano de diagnóstico (contínua), índice de massa corporal (IMC; 30 vs. ≥30 kg /m

2), história familiar de cancro colorectal em qualquer parente de primeiro grau (atual vs. ausente), localização do tumor (proximal versus distal), diferenciação tumoral (bem moderada vs. pobres), CIMP (alta vs. baixa /CIMP-0), lINE-1 metilação (contínua),

KRAS

,

BRAF

e

PIK3CA

. Um método de eliminação para trás com um limiar de p = 0,20 foi utilizado para limitar o número de variáveis ​​no modelo final e evitar superajuste. Para casos com falta de informações em qualquer uma das variáveis ​​categóricas [IMC (0,1%), localização do tumor (1,0%), o grau do tumor (0,6%), CIMP (2,5%),

KRAS

(0,5%),

BRAF

(0,7%) e

PIK3CA

(8,8%)], foram incluídos os casos em uma categoria maior de uma determinada covariável para evitar overfitting. Nós confirmamos que a exclusão de casos com falta de informações em qualquer um dos co-variáveis ​​não alterou substancialmente os resultados (dados não mostrados).

A análise de regressão logística multivariada foi realizada para examinar uma relação independente de cada covariável com

TGFBR2

mutação (como uma variável de desfecho). O modelo multivariada, inicialmente, incluía um semelhante, mas não o mesmo conjunto das co-variáveis ​​como o modelo inicial Cox, considerando possível relação de causa e efeito com o

TGFBR2

mutação. Especificamente, o estágio da doença e diferenciação do tumor eram prováveis ​​consequências (em vez de causas) da

TGFBR2

mutação. Assim, as variáveis ​​não foram incluídos no modelo de regressão logística. A eliminação para trás com um limiar de p = 0,10 foi usado para selecionar variáveis ​​no modelo final e evitar overfitting.

Resultados

mutações mononucleótido de

TGFBR2

e

BAX

no MSI-altos cancros colo

Entre 1072 cânceres colorretais nos dois estudos prospectivos de coorte, MSI-alta foi observada em 162 (15%) tumores.

TGFBR2

e

BAX

mutações mononucleótido trato foram detectadas em 117 (de 159, 74%) e 48 (de 158, 30%) tumores MSI-altas, respectivamente. Dentre os tumores MSI-altos,

TGFBR2

mutação foi significativamente associada com o CIMP-alta (p = 0,0010) (Tabela 2).

A análise multivariada para avaliar relações independentes com

TGFBR2

mutação

foi realizada análise de regressão logística multivariada para examinar se

TGFBR2

mutação foi independentemente associada com quaisquer variáveis ​​moleculares clínicos, patológicos e outros. Nos tumores MSI-altos,

TGFBR2

mutação foi independentemente associada com CIMP de alta ratio [multivariada de chances (OR), 3,57; intervalo de confiança de 95% (CI), 1,66-7,66; p = 0,0011].

mutações mononucleótido de

TGFBR2

e

BAX

e cancro colorectal prognóstico

Durante o acompanhamento adequado (11,6 anos de acompanhamento médio -up of casos censurados), houve 505 mortes, incluindo 302 mortes específicas do câncer colorretal. Entre todos os casos, MSI-alta foi significativamente associada à sobrevida específica para o câncer mais colorretal em comparação com MSS /MSI-baixos cancros por teste de log-rank (p 0,0001), análise de regressão univariada e multivariada Cox (HR ajustado, 0,34; 95% CI, 0,20-0,57; p 0,0001) (Tabela 3). Quando analisados ​​separadamente

TGFBR2

-mutated MSI-altos casos e

casos TGFBR2

-wildtype MSI-altos, ambos os grupos apresentaram sobrevida específica para o câncer colorretal significativamente maior em comparação com MSS casos /MSI-baixos (Figura 2, Tabela 3). Quando analisados ​​separadamente

BAX

-mutated MSI-altos casos e

BAX

-wildtype casos MSI-altos, ambos os grupos apresentaram sobrevida específica para o câncer colorretal significativamente maior em comparação com MSS casos /MSI-baixos (Figura 2, Tabela 3). Na mortalidade geral análises, embora um pouco atenuada, os resultados mostraram tendências semelhantes (Tabela 3). Entre os casos MSI-altos, a sobrevida do paciente não diferiu significativamente pelo

TGFBR2

ou

BAX

estado de mutação.

curvas de Kaplan-Meier para a sobrevida específica para o câncer colorretal (A) e sobrevida global (B), de acordo com

TGFBR2

estado de mutação mononucleótido. Independentemente do

TGFBR2

status, casos MSI-altos foram associados com maior sobrevida. Kaplan-Meier para a sobrevivência colorectal específico do cancro (C) e sobrevida global (D), de acordo com

BAX

estado de mutação mononucleótido. Independentemente do

BAX

status, casos MSI-altos foram associados com maior sobrevida. MSI, instabilidade de microssatélites; MSS, microssatélite estável.

Nós comparamos a sobrevida específica e global de cancro colorectal entre

TGFBR2

-mutated MSI-altos casos e

TGFBR2

-wildtype MSI casos -High (ou entre

BAX

-mutated casos MSI-altos e

BAX

-wild digite casos MSI-alto). Não houve diferença significativa entre os dois grupos (Tabela 1).

Discussão

Nós realizamos um estudo para examinar o significado prognóstico de mutações mononucleótido trato nas regiões codificantes dos

TGFBR2

ou

BAX

no MSI-altos de câncer colorretal. Utilizamos dois estudos prospectivos de coorte com um grande número de casos de cancro colorectal clínica e molecular bem anotado com acompanhamento adequado. Nosso resultado mostrou que os tumores MSI-altos foram associados com o comportamento tumoral indolente independentemente do

TGFBR2

ou

BAX

estado de mutação mononucleótido, independentes da CIMP e outros biomarcadores moleculares de tumores chave. No entanto, pode ser de interesse para examinar as interacções entre estas alterações moleculares e factores dietéticos e de estilo de vida, se existe uma hipótese em evolução ciência de epidemiologia molecular patológico [42], [43].

Deve notar-se que pequenos estudos são mais propensas a “viés de publicação” do que grandes estudos [44]. Este fenómeno de viés de publicação ocorre porque os estudos com resultados nulos têm uma maior probabilidade de ser não escrita e inéditos em comparação com aqueles com resultados significativos. Em comparação com pequenos estudos (por exemplo, estudos com uma amostra de 200 cancros), com dados nulos, grandes estudos com dados nulos são mais propensos publicado. Como resultado, grandes estudos são menos propensas a viés de publicação de estudos pequenos. Além disso, as pressões acadêmicas pode forçar os pesquisadores a projetar estudos pequenos que são fáceis de preencher e obter dados para publicações pressa, o que pode contribuir para a polarização [45], [46], [47]. Portanto, devemos pesar mais em estudos de grande escala quando avaliamos a literatura publicada sobre o significado prognóstico de qualquer biomarcador como

TGFBR2

ou

BAX

mutação mononucleótido. A publicação de dados nulos em estudos bem-alimentado [44], [48], [49], [50], [51], [52] são importantes porque a publicação de resultados significativos em pequenos estudos de fraca potência leva a viés de publicação.

Os dados são geralmente consistentes com alguns dos estudos anteriores [19], [22], [24], [25] (Tabela 1). Watanabe et ai. [21] utilizado estágio II e III casos que foram submetidos a quimioterapia adjuvante, e relatou que,

TGFBR2

mutação foi associada a melhora da sobrevida global em 5 anos entre os 73 tumores MSI-alta. Em outro estudo [20], entre 67 MSI-altos tumores,

BAX

mutação foi associada com mau prognóstico. Em um estudo de fraca potência por Fernández-Peralta et al. [23], entre 16 tumores MSI-elevados, tanto

TGFBR2

mutação e

BAX

mutação foram associados com melhor prognóstico. O maior estudo (N total = 1.427; 170 MSI-altos cancros) por Samowitz et al. [22] mostraram nenhum papel prognóstico da

TGFBR2

ou

BAX

mutações entre os casos MSI-altos de câncer colorretal, de acordo com o nosso estudo – o segundo maior estudo até à data e o único estudo que examinados outros biomarcadores moleculares de tumores chave, tais como CIMP, lINE-1 metilação e

KRAS

,

BRAF

e

PIK3CA

mutações.

Estudar alterações moleculares somáticas e correlatos molecular é importante na pesquisa do câncer para a medicina personalizada [53], [54], [55], [56]. O CpG ilha methylator fenótipo (CIMP) foi estabelecido como um classificador molecular epigenômico de câncer colorretal [57], [58], [59], [60], [61], [62], [63], [64] , [65], [66], [67], [68], [69], [70], [71]. No passado, Iacopetta et ai. [20] não mostrou associação significativa entre

KRAS

mutação e

TGFBR

2 mutação. Nós avaliamos a associação entre variáveis ​​moleculares de tumores (CIMP, LINE-1,

KRAS

,

BRAF

e

PIK3CA

) e

TGFBR2

mutação e fez não encontramos relação significativa entre o

TGFBR2

mutação e

KRAS

ou

BRAF

mutação. Curiosamente, verificou-se que, entre os tumores MSI-altos,

TGFBR

2 mutação foi associada com CIMP-alta, independente das características moleculares e clínicas outros. Um estudo recente [72] relatou que variantes genéticas nos genes via TGFB1 relacionados (

MAPK1

,

RUNX1

e

Runx2

) estão associados com o cancro do cólon CIMP de alta . Mais estudos são necessários para elucidar o mecanismo exato da relação entre CIMP ea via TGFB1.

Há limitações neste estudo. Por exemplo, os dados sobre o tratamento do câncer foram limitados. No entanto, é improvável que o uso de quimioterapia substancialmente diferente de acordo com a

TGFBR2

ou

BAX

estado de mutação no tumor, uma vez que esses dados eram normalmente indisponíveis para a tomada de decisão de tratamento. Como outra limitação, além de causa de mortalidade, os dados sobre as recorrências de câncer não estavam disponíveis nestes estudos de coorte. No entanto, dado seguimento médio de mais de 11 anos para os casos censurados, a sobrevida específica para o câncer colorretal pode ser um substituto razoável de resultado específico para o cancro colorectal.

Há vantagens em utilizar a base de dados dos dois prospectivo de coorte estudos, Estudo de Saúde das enfermeiras e do Health Professionals Follow-up Study, para examinar significado prognóstico de biomarcadores tumorais. As medidas antropométricas, história familiar, estadiamento do câncer, e outra clínica, patológica e dados moleculares do tumor foram coletados prospectivamente, cegos para o resultado do paciente [26]. participantes da coorte que desenvolveram câncer foram tratados em hospitais em todo os EUA e colorretal, portanto, mais representativos da população dos EUA do que os pacientes em um a alguns hospitais universitários. Não houve diferença demográfica entre os casos com tecido tumoral analisados ​​e aqueles sem tecido tumoral analisadas [26]. Finalmente, o nosso banco de dados de tumor rico permitiu-nos avaliar, simultaneamente, correlatos e controle molecular patológicas e tumorais para o potencial de confusão pelas características moleculares do tumor.

Em conclusão, nosso banco de dados grande tumor mostrou que, em comparação com MSS /MSI- casos de baixa, MSI-alta câncer colorretal está associada à sobrevida específica para o câncer mais tempo, independentemente do

TGFBR2

ou

BAX

estado de mutação mononucleótido trato. A importância de estudos em grande escala não pode ser subestimada porque, em comparação com grandes estudos, pequenos estudos são muito mais propensos a viés de publicação, o que pode induzir em erro prática clínica.

Reconhecimentos

Lamentamos profundamente agradecer ao ‘Nurses Health Study e profissionais de saúde Acompanhamento participantes do estudo de coorte que concordaram em nos fornecer informações através de questionários e amostras biológicas; hospitais e departamentos de patologia em todo os EUA para fornecer-nos generosamente com amostras de tecido. Agradecemos os seguintes registros de câncer do estado para sua ajuda: AL, AZ, AR, CA, CO, CT, DE, FL, GA, ID, IL, IN, IA, KY, LA, ME, MD, MA, MI, NE , NH, NJ, NY, NC, ND, OH, OK, OR, PA, RI, SC, TN, TX, VA, WA, WY. Agradecemos também Molecular Biology Facility Núcleo no Dana-Farber Cancer Institute para obter suporte técnico.