Abstract

Purpose

Este estudo foi quantitativamente resumem publicada de dados para avaliar o significado clínico e prognóstico de quatro proteínas envolvidos no factor-1 (HIF-1α) regulação hipoxia-inducible da cascata de metástase.

Métodos

as buscas foram realizadas usando o MEDLINE, EMBASE, Biblioteca Cochrane, e Biomedicina chinesa bancos de dados sem quaisquer restrições de linguagem. Os estudos foram reunidas e foi calculada quer a razão de riscos (RR) ou odds ratio (OR). Potenciais fontes de heterogeneidade foram procuradas

via

subgrupo e análises de sensibilidade e viés de publicação também foi realizada.

Resultados

Dezessete estudos avaliaram HIF-1α, fosfatase 20 estudos avaliaram e homólogo angiotensina (PTEN), 20 estudos avaliados Survivin, e 16 estudos avaliaram CD44v6. Os nossos resultados mostraram que o aumento da expressão de HIF-1α foi ligada a uma baixa sobrevivência de 5 anos geral (RR = 1,508; 95% de intervalo de confiança (IC) 1,318-1,725; P 0,001). Diminuição da sobrevida foi fortemente influenciada pela invasão avançada tumor (OR = 3,050; IC95% 2,067-4,501; P 0,001), metástases em linfonodos (1415 pacientes; OR = 3,486, IC 95% 2,737-4,440; P 0,001), distante metástase (OR = 6,635; 95% CI 1,855-23,738; P = 0,004), invasão vascular (OR = 2,368; 95% CI 1,725-3,252; P 0,001), desdiferenciação (OR = 2,112; IC95% 1,410-3,163; tamanho de 0,001), o tumor (OR = 1,921;; P P 0,001), e uma fase superior de TNM (OR = 2,762, IC de 95% 1,941-3,942; P 0,001). Do mesmo modo, a expressão aberrante de PTEN, CD44v6, e Survivina também foram observados em tumores que se correlacionaram com pobre SO. As RUP mais elevados de morte em 5 anos foram 1.637 (95% CI = 1,452-1,845; P 0,001), 1.901 (95% CI = 1,432-2,525; P 0,001), e 1.627 (95% CI = 1,384-1,913; P 0,001), respectivamente, com um OR . 2 para os principais estratificadas meta-análises de fatores clínicos

conclusões

Nossas descobertas indicam que HIF-1α /PTEN /CD44v6 /Survivin, tal como medida por imuno-histoquímica, pode ser utilizado para prever o prognóstico e o potencial para a invasão e metástases em doentes asiáticos com cancro gástrico. O desenvolvimento de estratégias contra este subconjunto de proteínas pode levar a novas abordagens terapêuticas

Citation:. Chen J, Li T, Liu Q, Jiao H, Yang W, Liu X, et al. (2014) Significado clínico e prognóstico da HIF-1α, PTEN, CD44v6 e Survivin para o cancro gástrico: uma meta-análise. PLoS ONE 9 (3): e91842. doi: 10.1371 /journal.pone.0091842

editor: Hiromu Suzuki, Sapporo Medical University, Japão

Recebido: 17 Setembro, 2013; Aceito: 16 de fevereiro de 2014; Publicação: 19 de março de 2014

Direitos de autor: © 2014 Chen et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho é suportado pelos subsídios da National Science Foundation Natural da China (81260339 e 81301886) e Fundos de pesquisa fundamental para o University Medical Ningxia (XT2012009 e XQ2012014). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer gástrico é um dos tumores mais agressivos e tende a ser associada a disseminação peritoneal, metástase linfonodal, e metástase hematogênica. Apesar de avanços recentes em seu diagnóstico e tratamento têm oferecido aumento da sobrevida a longo prazo para os pacientes diagnosticados em estágios iniciais de câncer gástrico, o prognóstico do câncer avançado permanece sombrio, com uma taxa de sobrevida em 5 anos de apenas 10-15% [1], [2]. A maioria dos pacientes com doença avançada morrem devido a complicações induzidas por metástase, mas não do tumor primário [3]. Recentemente, uma série de passos limitantes da velocidade têm sido propostas para as células tumorais se tornam metastáticos [4]. Os processos de várias etapas consistem de perda de adesão celular, invasão local, motilidade, angiogênese, intravasation, circulação, extravasamento, homing e o nicho premetastatic, e colonização organotrópica em órgãos específicos [5]. Portanto, a identificação de novos marcadores nas etapas chave da metástase vai ajudar a prever a recorrência e sobrevivência de pacientes em estágios iniciais de câncer gástrico.

A hipoxia tem sido relatada a contribuir directamente para muitos aspectos críticos da biologia do câncer, incluindo angiogénese, a transição epitelial-mesenquimal, invasão, metástase, haste de manutenção celular, metabolismo de energia, a sinalização do factor de crescimento autócrino, e refractário para terapias específicas [6], [7]. A melhor via de resposta a hipoxia, é caracterizado principalmente mediada através de um factor de transcrição denominado hipoxia-inducible factor-1 (HIF-1α) [8]. Actualmente, o número de genes alvo, que são controladas por HIF-1α, é maior do que 1000 e pode ser dividido nas seguintes cinco categorias: factores de transcrição e modificadores de histonas; enzimas de degradação da matriz; receptor, cinases associadas ao receptor, e transportadores; alvos de microRNA; e moléculas de adesão celular e proteínas de membrana [9], [10]. Além disso, a rotina de fase 1 e fase 4 ensaios clínicos que se destinam a função de HIF-1α ou expressão ter sido concluída, incluindo um ensaio piloto de topotecano oral para o tratamento de neoplasmas sólidos avançados refractários que expressam HIF-1α e os efeitos da dutasterida sobre HIF- 1α e factor de crescimento endotelial vascular (VEGF) na próstata (Ensaio clínico: NCT00117013, NCT00880672; https://clinicaltrials.gov/). Os resultados positivos destes ensaios clínicos reforçaram ainda mais o interesse no desenvolvimento de medicamentos alvo de sinalização HIF-1α

.

Apesar do desenvolvimento clínico de terapias anti-HIF 1α, o valor prognóstico e clínica da superexpressão HIF-1α em células cancerosas gástricas permanece obscuro. É essencial para explorar se os tumores em que o HIF-1α é sobre-expresso estão associados com a sobrevivência reduzida. Como a taxa de incidência e mortalidade por câncer gástrico são extremamente mais elevada no Leste da Ásia, especialmente China, Japão e Coreia, apresentamos uma meta-análise que avalia o impacto prognóstico da um subconjunto de proteínas na sinalização HIF-1α em pacientes com câncer gástrico no subgrupo de diferente continentes. Esperamos que os nossos meta-análises irá fornecer um quadro para a regulação hipóxia da cascata de metástase e ainda descobrir o papel dos genes-alvo chave hipóxia /HIF-regulado 1a no prognóstico baseado em várias etapas de metástase. Mais importante ainda, as análises de perfis de expressão de gene sobre o prognóstico pode levar ao desenvolvimento de métodos clínicos que podem ser usadas para prever o resultado de pacientes individuais num ambiente clínico.

Métodos

A estratégia de pesquisa e critérios de selecção

A meta-análise foi realizada por meio de itens de relatórios preferidos para meta-análises declaração [11], [12]. O PubMed, EMBASE, Cochrane Library, e bases de dados de infra-estrutura chinesa Knowledge Nacional (CNKI) foram pesquisados ​​(até junho de 2013), sem restrições de linguagem. Várias combinações dos seguintes termos foram utilizados para pesquisar para estudos potencialmente relacionadas com:. “Prognóstico” e “sobrevivência” e “gástrica” ​​ou “estômago”, bem como “cancro” ou “carcinoma” ou “tumor”

os estudos foram incluídos na meta-análise, se eles se encontraram os seguintes critérios: (1) diagnosticado câncer gástrico e mucosa epitelial gástrica normal em seres humanos; (2) avaliaram proteínas usando métodos imuno-histoquímica (IHQ); (3) usado coortes asiáticos de centros médicos, e (4) tiveram um período de acompanhamento superior a 5 anos. A selecção de estudo foi baseada na associação de proteínas relacionadas com a sinalização de metástase de tumor mediada por HIF-1α e prognóstico. As referências dos artigos recuperados foram cross-procurou identificar quaisquer estudos não atendidas pela busca computadorizada literatura. Os autores de estudos elegíveis foram contatados para dados adicionais relevantes para a meta-análise. No entanto, nem todos os autores responderam.

Extração de dados e avaliação metodológica

Os dados recuperados de todas as publicações completos incluídos autor, ano de publicação, país, anticorpo utilizado para avaliação, e de corte para o diagnóstico com base na expressão de proteínas anormais. Além disso, os dados foram coletados no número de leitores, leituras cegas, número de controles e casos, profundidade de invasão, status do linfonodo, metástases à distância, estágio TNM, invasão vascular, histo-diferenciação, o tamanho do tumor, sexo e idade de pacientes com câncer gástrico. A sobrevivência global é definida como o tempo decorrido desde a cirurgia à morte dos doentes com cancro gástrico. Em todos os casos, os dados de interesse para as taxas de sobrevida em 5 anos foram extraídos de curvas de Kaplan-Meier.

Nós tentamos evitar cuidadosamente a duplicação de dados, examinando cada publicação, os nomes de todos os autores, eo diferentes centros médicos envolvidos. Quando um autor individual publicado vários artigos obtidos a partir do mesmo ou de sobreposição da população, apenas o artigo mais recente ou mais completo foi incluído na análise; caso contrário, foram analisados ​​dados independentes. Todos os dados foram extraídos independentemente por três investigadores (Chen J, Li T, e Liu XX), e quaisquer disparidades foram resolvidas por discussão.

A análise estatística

No presente estudo, foram analisados ​​três Categorias de modelos estratificada. O primeiro modelo multivariado estratificado foi realizada para confirmar se cada proteína foi expressa de forma anormal no cancro gástrico em comparação com a mucosa gástrica normal. O segundo resultado da meta-análise foi para medir o impacto da expressão da proteína aberrante na sobrevida global em 5 anos. O terceiro modelo foi usado para examinar o valor prognóstico da expressão da proteína que foi corrigido por variáveis ​​clínicas, incluindo sexo, idade, histo-diferenciação, tamanho do tumor, profundidade de invasão, invasão vascular, estado linfonodal, metástases à distância, e estágio TNM.

com base em características clínicas, as seguintes variáveis ​​foram comparados: T

1 e T

2 vs. T

3 e T

4; Fase I e Fase II, vs. estágio III e estágio IV; bem e diferenciação moderada vs. pobres e indiferenciação; tumores maiores que 5 cm de tamanho vs. tumores menos de 5 cm; e pacientes com mais de 60 anos vs. pacientes com menos de 60 anos.

Os dados foram combinados para realizar meta-análise usando STATA versão 9.0, e um valor de p bicaudal menor que 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. As estimativas de razões de risco (RR) ou odds ratio (OR) foram pesados ​​e combinados usando diferentes modelos baseados em sua extensão de heterogeneidade. A heterogeneidade entre os estudos foi quantificada usando a estatística I

2, que é geralmente considerado significativo para valores ≥50%. No caso de heterogeneidade, meta-análise foi realizada utilizando o modelo de efeitos aleatórios, depois de explorar as causas de heterogeneidade. Caso contrário, foi aplicado o modelo de efeitos fixos. Além disso, a análise de sensibilidade de uma via foi realizada para avaliar a estabilidade dos resultados, a saber, um estudo único na meta-análise foi suprimido um de cada vez para verificar a influência dos dados individuais definidos na RR reunidas (ou OR ) [13], [14]. gráfico de funil tanto de Begg e teste de Egger foram utilizados para determinar qualquer viés de publicação para cada um dos grupos de estudo em pool.

Resultados

selecção Estudo e características

Depois do rastreio de uma coleção de publicações sobre proteínas associadas com a regulação hipóxia da cascata de metástase e prognóstico, foram identificados 73 estudos que utilizaram técnicas de IHC para avaliar a expressão de quatro proteínas em nossos critérios anteriores na estratégia de procura e selecção estudo. Destes, 17 estudos avaliaram HIF-1α (a partir de Liu et ai., 2004, para Hoon Hur, et al., 2013), 20 estudos avaliaram fosfatase e tensina homólogo (PTEN) (a partir de Li et al., 2003 para Hye Seung Lee et al., 2003), 20 estudos avaliaram Survivina (a partir de Yu et al., 2002 a min a Kim et al., 2011), e 16 estudos avaliaram CD44v6 (a partir de Xin et al., 2001 a Dae-Woon Eom et ai ., 2011) (Fig. 1, Tabela 1). A idade média dos pacientes foi de 57,7 anos de idade. As principais características dos estudos incluídos são apresentados na Tabela 1 e Tabela S1, e as publicações usado para executar meta-análises são listados nas referências S1.

Avaliação e expressão de quatro proteínas específicas

Vários anticorpos foram utilizados para avaliar /CD44v6 expressão HIF-1α /PTEN /Survivina. Entre o grupo determinado como anticorpo de HIF-1α overexpressed, cinco estudos utilizaram NB-100-105 (Novus Biologicals; CA) e três estudos utilizaram o anticorpo H-206 (Santa Cruz Biotechnologies; CA) (Tabela 1). Os pontos de corte para a sobre-expressão de HIF-1α seleccionado na maioria dos estudos foi de 10% em termos de diluição do anticorpo variando de 1:50 a 1:100 (Tabela 1). A frequência mediana para o subconjunto de proteínas expressas em cancro gástrico foi de 54,1% (gama de 38,9-80,2%) de HIF-1α, 61,2% (intervalo de 40,7-3,9%) para CD44v6, 55,6% (gama de 34,5-76,3% ) para Survivina, e 43,3% (gama de 20,0-70,2%) de PTEN. A descrição dos anticorpos utilizados nos estudos incluídos é mostrada na Tabela 1.

resultados

Meta-análise

Correlação de expressão HIF-1α entre câncer gástrico e mucosa gástrica normal.

as nossas análises, combinando 8 estudos independentes, que incluiu 923 pacientes e 898 controles, revelou que a superexpressão HIF-1α foi frequentemente observada em pacientes com câncer gástrico em comparação com o tecido normal homólogo. A OR foi 272,194 (95% de intervalo de confiança (IC) 99,702-743,112, P 0,001)., Sem qualquer heterogeneidade entre os estudos (I

2 = 0,00%, diferença subgrupo P = 0,920) (Tabela 2)

Correlação de expressão HIF-1α com a sobrevida global em 5 anos.

Meta-análise sobre o valor prognóstico da expressão HIF-1α mostrou que a taxa de sobrevida global em 5 anos após o tratamento inicial foi significativamente menor nos casos de sobre-expressa o HIF-1α em 10 estudos (1333 pacientes). O RR combinada foi 1,508 (Cl 95% = 1,318-1,725; P 0,001), com baixo heterogeneidade nos dados (I

2 = 35,3%, diferença subgrupo P = 0,126) (Figura 2, Tabela 2.). Na estratificação por etnia, os resultados foram semelhantes entre os pacientes provenientes da China, Japão e Coreia (Fig. 2, Tabela 2).

A RR resumo e 95% CIs foram mostrados (análise de modelo de efeito fixo).

Correlação de expressão HIF-1α com variáveis ​​clínicas.

na estratificação variáveis ​​clínico-patológicas por a profundidade da invasão de câncer gástrico, foi observada significância estatística. Pacientes com T

3 e T

4 câncer gástrico teve maior expressão HIF-1α em 9 estudos (1188 pacientes; OR = 3,050, IC 95% = 2.067-4.501, P 0,001) do que aqueles com T

1 e

2 câncer gástrico T, com moderada heterogeneidade entre os estudos (I

2 = 53,8%, diferença subgrupo P = 0,027) (Tabela 2). Na estratificação para o status de linfonodo de câncer gástrico, os resultados mostraram que overexpressed HIF-1α foi significativamente associada com metástases em linfonodos em 11 estudos (1415 pacientes; OR = 3,486, IC 95% = 2,737 -4,440, P 0,001), com baixa heterogeneidade entre os estudos (I

2 = 31,4%, diferença subgrupo P = 0,148) (Tabela 2). Na estratificação para o status de invasão vascular, a sobre-expressão de HIF-1α mostrou uma associação significativa com a presença de invasão vascular em 6 estudos (798 pacientes; OR = 2,368, IC 95% = 1,725-3,252, P 0,001), com baixa entre heterogeneidade -Estudo (I

2 = 43,5%, diferença subgrupo P = 0,115) (Tabela 2). Ao estratificar a metástase do câncer gástrico, expressão HIF-1α foi significativamente associada com metástases à distância em 5 estudos (469 pacientes; OR = 6,635, IC 95% = 1,855-23,738, P = 0,004), embora, com evidente entre-estudo heterogeneidade (I

2 = 73,3%, diferença subgrupo P = 0,005) (Tabela 2). Na estratificação ainda mais o estágio TNM expressão, HIF-1α de pacientes com estágios III e IV câncer gástrico foi muito maior do que aqueles com a fase I e II câncer gástrico em 10 estudos (1274 pacientes; OR = 2,762, IC 95% = 1,941-3,942 , P 0,001), sem significativa heterogeneidade entre os estudos (I

2 = 48,4%, diferença subgrupo P = 0,042) (Tabela 2)

também observamos uma correlação entre overexpressed HIF-1α com. pobre diferenciação histológica em 10 estudos (1324 pacientes), porque as RUP em pool (IC 95%) eram 2.112 (1,410-3,163, P 0,001) e o tamanho do tumor foi 1,921 (1,395-2,647, P 0,001), mas não para o sexo (0,905; 0,679-1,205, P = 0,495) e idade (0,846; 0,667-1,072, P = 0,166), entre todos os pacientes asiáticos (Tabela 2)

Correlação de expressão de PTEN com o prognóstico

..

Os resultados combinados mostraram que a expressão de PTEN em pacientes asiáticos com câncer gástrico foi significativamente menor do que os controles entre 11 estudos (1498 pacientes e 1164 controles, ou = 16.930, 95% CI = 8.613-33.280, P 0,001) (Tabela 2 ). expressão de PTEN reduzida correlacionada com sobrevida global pobre em 9 estudos (1551 pacientes; RR = 1,637, IC 95% = 1,452-1,845, P 0,001) (Fig. 3 e Tabela 2). análise de subgrupo mostraram uma tendência que reduziu os níveis de PTEN foram associados com os seguintes fatores: profundidade da invasão (12 estudos, 1599 pacientes; OR = 2,604, IC 95% = 1,554-4,366, P 0,001); metástases em linfonodos (18 estudos, 2258 pacientes; OR = 2.484, 95% CI = 1.836-3.360, P 0,001); metástases à distância (9 estudos, 1393 pacientes; OR = 2,528, IC 95% = 1,703-3,751, P 0,001); estágio TNM; 12 estudos, 1513 pacientes; OR = 2,345, IC 95% = 1,601-3,435, P 0,001); diferenciação histológica (13 estudos, 1564 pacientes; OR = 1,715, IC 95% = 1,371-2,145, P 0,001); o tamanho do tumor (4 estudos, 501 pacientes, ou = 2,188, IC 95% = 1,468-3,259, P 0,001); sexo (12 estudos, 1610 pacientes, ou = 1.431, IC 95% = 1,126-1,818, P = 0,003); e idade (10 estudos, 1141 pacientes; OR = 1.494, IC 95% = 1,148-1,944, p = 0,003). (Tabela 2)

A RR resumo e 95% CIs foram mostrados (modelo de efeito fixo análise).

Correlação de expressão CD44v6 com o prognóstico.

Um resultado similar foi observado para CD44v6. As análises agrupadas de 9 estudos mostraram que a expressão CD44v6 no câncer gástrico (758 pacientes e 621 controles) foi significativamente maior em comparação com os controles (OR = 82,673, 95% CI = 44,980-151,953, P 0,001) (Tabela 3). CD44v6 superexpressão foi associada a um maior risco de morte em 5 anos em 5 estudos (767 pacientes; RR = 1,901, IC 95% = 1.432-2.525, P 0,001) (Fig. 4, Tabela 3). Dos fatores relacionados ao tumor, o aumento da profundidade da invasão (10 estudos, 932 pacientes; OR = 2.251, IC 95% = 1,415-3,582, P = 0,001), metástases em linfonodos (12 estudos, 1149 pacientes; OR = 3.027, 95 % IC = 2,313-3,962, p 0,001), metástases à distância (5 estudos, 578 pacientes; OR = 3.431; IC95% = 2.157-5.456, p 0,001), invasão vascular (6 estudos, 753 pacientes; OR = 1.926 , IC 95% = 1,170-3,171, P = 0,01), diferenciação histológica (8 estudos, 573 pacientes; OR = 1,704, IC 95% = 1,193 2,434, P = 0,003), e estágio TNM (7 estudos, 589 pacientes; OR = 3,918, IC 95% = 2,658-5,777, P .. 0.001) forneceu informações prognóstico notável (Tabela 3)

A RR resumo e 95% CIs foram mostrados (análise de modelo de efeito aleatório)

Correlação de expressão Survivina com o prognóstico

em comparação com controles normais, a sobre-expressão de Survivin foi associada a pior evolução no câncer gástrico entre os 11 estudos (863 pacientes e 839 controles Or. = 83,622, 95% CI = 46,476-150,455, P 0,001) (Tabela 3). Este resultado da estimativa reunida foi estatisticamente significativa durante 5 anos de sobrevivência global prejudicial em 6 estudos (634 pacientes; RR = 1,627, IC de 95% = 1,384-1,913, P 0,001) (Figura 5, Quadro 3.). sobrevida reduzida foi fortemente influenciado pelo tamanho do tumor (6 estudos, 701 pacientes; OR = 1,508, IC 95% = 1,110-2,048, P = 0,009), metástases à distância (4 estudos, 423 pacientes; OR = 1,901, IC 95% = 1.101 -3,280, P = 0,021), e estágio TNM (6 estudos, 520 pacientes; OR = 3,215, IC 95% = 1,624-6,364, P = 0,001) (Tabela 3)

A RR resumo e 95. % IC foram mostrados (análise de modelo de efeito fixo).

viés

análise de sensibilidade e publicação

no presente estudo, análise de sensibilidade indicou que a RR agrupada (ou OR) não foi significativamente influenciada por omitindo qualquer estudo único num determinado momento. Além disso, os resultados mostraram que não havia evidência de viés de publicação para a maioria das análises de subgrupos (Tabela 2 e 3). No entanto, os preconceitos potenciais observada para profundidade de invasão para o grupo de HIF-1α (P

viés = 0,017), o estudo de caso-controle (P

viés = 0,034) e sobrevida global (P

viés = 0,006 ) para o grupo PTEN e estudo de caso-controle (P

viés = 0,011), profundidade da invasão (P

viés = 0,027) e sobrevida global (P

viés = 0,008) para o grupo Survivin poderia ser descartada por Begg do e testes de Egger (Tabela 2 e 3).

Discussão

Quase dois terços dos casos de câncer gástrico do mundo ocorrem na Ásia (China, Japão e Coreia) [15]. A mortalidade de pacientes com câncer é em grande parte causada por metástases ao invés de seus tumores primários no momento do diagnóstico. Portanto, identificar o risco de recorrência da doença e mortalidade em pacientes com câncer gástrico é crítico para monitorar os pacientes e selecione terapias farmacológicas adequadas na prática clínica [16], [17]. No entanto, os biomarcadores úteis para predizer o prognóstico de pacientes com câncer gástrico ainda não foram bem estudados. Aqui, apresentamos um subconjunto de potenciais biomarcadores clinicamente úteis, HIF-1a /PTEN /CD44v6 /Survivin, e precisamente estimado o seu prognóstico e significado clínico-patológico.

Evidências crescentes sugerem que microambientes tumorais hipóxicas, especialmente a sobre-expressão de HIF -1, estão fortemente implicados como a marca de uma grande variedade de tumores malignos humanos [18], [19]. Quando activado pelo gene supressor de tumor novela PTEN [5], [20], HIF-1α pode transcricionalmente regular uma série de moléculas de hipoxia-responsivo que contribuem para a resistência às drogas, a transição epitelial-mesenquimal, sobrevivência, angiogénese e metástase [9] , [10], [21], [22], [23], incluindo indutores de angiogénese (por exemplo, VEGF), a proliferação de proteínas reguladoras (por exemplo, survivina), e os mediadores de metástases (por exemplo, CD44v6, MMP, E- caderina). Neste estudo, descobrimos que a sobre-expressão de HIF-1α ocorreu com uma frequência média de 54,1% no câncer gástrico. Os pacientes que expressavam níveis elevados de inibidores de HIF-1α foram associados com um pior resultado, com um risco partilhado pela sobrevivência global (RR = 1,508), que era semelhante ao obtido em um estudo publicado recentemente sobre o carcinoma hepatocelular (HR = 1,65) [24] . Além disso, a expressão aberrante de PTEN, CD44v6 e Survivin também foram observados em tumores que correlacionam com a sobrevivência geral pobre, com risco de morte aos 5 anos de 1.637, 1.901 e 1.627, respectivamente (Tabela 2 e 3). análise de subgrupo confirmou que a sobrevivência reduzida foi significativamente correlacionada com o aumento da desdiferenciação, tamanho do tumor, invasão tumoral avançada, linfonodos spread, metástases à distância, invasão vascular, e mais alto estágio TNM, indicando aumento da agressividade biológica e uma maior possibilidade de difusão sistêmica.

tumores gástricos pode desencadear o desenvolvimento substancial de novos vasos sanguíneos para o crescimento tumoral, a manutenção, e metástase [25], [26]. A elevada proliferação de células tumorais pode induzir hipóxia local, que é um forte estímulo para a HIF-1α. A perda de PTEN em cancro gástrico promove a angiogénese e invasão do tumor, aumentando a expressão de VEGF por meio do aumento do nível de proteína HIF-1α, que é um processo activo que necessita da degradação da matriz extracelular, o aumento da permeabilidade microvascular, tanto no sangue e vasos linfáticos, e a pressão do fluido intersticial (IFP) [27], que favorece a progressão do intravasamento e extravasamento de células tumorais. Isto pode oferecer uma possível explicação para a forte associação estatística observada da superexpressão HIF-1α com invasão avançado do tumor, linfonodo disseminação, invasão vascular, e metástases à distância. Estudos recentes têm demonstrado que a percentagem de células positivas para CD44 que expressam variantes exões v6 (CD44v6) em células tumorais pode ser significativamente aumentada através de transcrição HIF-1α mediada sob condições hipóxicas [28]. CD44v6, uma molécula de adesão celular, tem sido proposta a funcionar no homing de linfócitos, de ligação extracelular da matriz, a migração celular e invasão. Por conseguinte, um elevado nível de expressão do CD44v6 também pode contribuir para o fenótipo agressivo. Além disso, a regulação positiva de Survivina por HIF-1α e PTEN contribuiu para cisplatina (CDDP) resistência, indicando que a inibição destas vias pode ser uma estratégia potencial para superar a resistência a CDDP no tratamento do cancro gástrico [29].

Estas análises têm várias implicações importantes. Em primeiro lugar, mostra-se que a expressão anormal de HIF-1α /PTEN /CD44v6 /Survivina está associada a um pior resultado, o que sugere que cada uma das proteínas pode ser um alvo terapêutico útil para o desenvolvimento de drogas. Actualmente, alguns ensaios clínicos de segmentação HIF-1α /PTEN /Survivina em diferentes fases estão a ser desenvolvidas, o que provavelmente irá beneficiar populações com determinadas condições (https://www.clinicaltrials.gov) (Tabela 4). Em segundo lugar, as análises destacam a importância do desenvolvimento de vários biomarcadores para resposta ao tratamento monitoramento, usos clínicos de inibidores de HIF-1α, e na avaliação do prognóstico. Também notamos várias meta análises nova-ly-já publicado de estimar o valor prognóstico de qualquer HIF-1α ou Survivin em paciente com câncer gástrico [30], [31], [32], [33]. Entre eles, três quartos das bases de dados eletrônicas foram usadas para identificar estudos publicados antes de dezembro de 2012, com o HR 2. Uma vez que a hipoxia é susceptível de ter complexo, e mesmo oposta, efeitos durante diferentes fases de desenvolvimento do tumor [5], [8], qualquer molécula única pode não ser utilizado para prever o prognóstico independentemente cheio de pacientes. Combinações de proteínas envolvidas na regulação do HIF-1α da cascata de metástase deve fornecer maior poder prognóstico sobre si mesmos marcadores individuais. Além disso, avaliar sistematicamente os principais fatores prognósticos em câncer gástrico, tanto tumor-e relacionada ao paciente, também podem ter impactos significativos no momento do diagnóstico ou tratamento cirúrgico, incluindo a profundidade de invasão do tumor, linfonodo disseminação, invasão venosa, estádio TNM , a diferenciação, o tamanho do tumor, bem como a idade e sexo. No presente estudo, os resultados mais importantes da meta-análise de variáveis ​​clínicas entre os pacientes asiáticos mostrou uma magnitude de tamanho de efeito de OR 2, e em alguns casos 3. Como regra do polegar, um fator prognóstico com RR (ou OR) 2 é considerado de valor prático útil [34]. Portanto, acreditamos que nossos resultados vão fornecer informações mais úteis e precisas para a tomada de decisão clínica sobre câncer gástrico. Em terceiro lugar, como mostrado pelos nossos relatórios anteriores, VEGF parece ser um fator prognóstico significativo para a metástase hematogênica de câncer gástrico (RR = 2,45, P = 0,000) [34], [35]. Além disso, propusemos três outros genes, E-caderina, STAT3, e MMP-9, como biomarcadores de prognóstico de metástase de tumor. Portanto, as análises combinando resultados anteriores podem apresentar um possível eixo de acção pelo HIF-1α e sua via de sinalização oncogénica (Fig. 6), o que poderia contribuir para melhorias na avaliação do prognóstico, análise funcional e terapia-alvo de drogas na prevenção e tratamento de câncer gástrico. A partir desta perspectiva, acreditamos que a nossa meta-análise faz efectivamente presente significado positivo e novidade.

Existem também limitações que devem ser observadas com base na presente análise. Em primeiro lugar, porque esta é uma análise baseada em literatura a partir da qual os resultados predominantemente positivos foram publicados, a nossa estimativa para a associação entre o HIF-1α /PTEN /CD44v6 /Survivin e mau resultado pode ser inflado. Portanto, as discrepâncias nas conclusões de vários estudos incentivou pesquisadores a publicar seus dados, independentemente do significado dos seus resultados, o que pode limitar o viés de publicação. No presente estudo, colocamos ênfase na avaliação dos preconceitos entre os estudos e identificar potenciais fontes de heterogeneidade. Análises de subgrupos por etnia e variáveis ​​clínicas também foram realizadas. Nós exaustivamente avaliou os vieses de publicação usando testes de Begg e Egger das e não detectou qualquer desvio significativo entre a maioria dos estudos, com exceção dos vários fatores mencionados na seção “Resultados”. Em vista disso, estamos confiantes de que os resultados de nossa meta-análise são confiáveis. Além disso, não foi possível reunir as taxas de risco de morte por causa de uma falta de dados em tempo-a-morte. Nós só descobri a razão de risco de morte em pontos de tempo fixos. Embora esta medida é menos robusta, pois não considera a duração da sobrevivência até a morte, este é o único método viável dos dados disponíveis [36].

Em conclusão, nossas análises mostram que a expressão aberrante de HIF -1α, PTEN, CD44v6, e a survivina, tal como medido por IHC, pode prever o risco de sobrevivência em 5 anos e possibilidade de invasão e metástase em doentes com cancro gástrico, particularmente em doentes asiáticos. Estes dados sugerem que o desenvolvimento de estratégias contra este subconjunto de proteínas pode levar a um programa de tratamento terapêutico para o cancro gástrico razoável. No entanto, mais grande amostra e estudos populacionais não-asiáticos são obrigatórios.

Informações de Apoio

Tabela S1.

principais características da expressão de proteínas de factores de prognóstico

DOI: 10.1371. /journal.pone.0091842.s001

(DOC)

Referência S1.

Referências complementares inscritos no Metanálises

doi:. 10.1371 /journal.pone.0091842.s002

(DOC)

Checklist S1.

PRISMA 2009 Lista de verificação para os meta-análises

doi:. 10.1371 /journal.pone.0091842.s003

(DOC)

Diagrama de Fluxo S1.

PRISMA 2009 Diagrama de Fluxo de meta-análises

doi:. 10.1371 /journal.pone.0091842.s004

(DOC)