Abstract

Fundo

mutações oncogênicas são poderosos biomarcadores preditivos para terapias contra o câncer molecularmente direcionados. Para mutação pacientes de detecção que se submeter a biópsias de tumores invasivos. Alternativamente, as amostras de arquivo são usados ​​que podem não refletir o status tumor real. As células tumorais circulantes (CTC) poderia servir como uma plataforma alternativa para detectar mutações somáticas em doentes oncológicos. Buscou-se desenvolver um ensaio sensível e específico para detectar mutações no

gene EGFR

na CTC a partir de pacientes com câncer de pulmão.

Métodos

Foi desenvolvido um ensaio romance baseado em reais -tempo de reacção em cadeia da polimerase (PCR), e análise da curva de fusão para detectar activação

EGFR

mutações em fracções de células de sangue enriquecido em CTC. cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) foi escolhido como modelo de doença com contagens teria muito baixos CTC. O ensaio foi prospectivamente validado em amostras de pacientes com

EGFR

-mutant e

EGFR

tipo -wild NSCLC tratados dentro de um ensaio clínico randomizado. análises sequenciais foram conduzidos para monitorar sinais CTC durante a terapia e correlacionar a detecção de mutações no CTC com o resultado do tratamento.

Resultados

A sensibilidade do ensaio foi otimizado para permitir a detecção de um único

EGFR

sangue periférico -mutant CTC /mL. CTC foram detectados em amostras de sangue pré-tratamento de todos os 8

EGFR

-mutant pacientes com câncer de pulmão estudado. Perda de

EGFR

-mutant sinais CTC correlacionada com a resposta ao tratamento, e sua recorrência precedida recaída.

Conclusões

Apesar da baixa abundância de CTC em NSCLC mutações oncogênicas pode ser reprodutível detectado através da aplicação de uma estratégia CTC enriquecimento imparcial e PCR altamente sensível e derretendo análise da curva. Esta estratégia pode permitir que não-invasivos, diagnósticos de biomarcadores específicos e acompanhamento em pacientes submetidos a terapias direcionadas

Citation:. Breitenbuecher F, Hoffarth S, Worm K, Cortes-Incio D, Gauler TC, Köhler J, et al . (2014) Desenvolvimento de um método altamente sensível e específico para a detecção de células circulantes do tumor abrigar Somatic Mutações em não-pequenas células do pulmão pacientes com câncer. PLoS ONE 9 (1): e85350. doi: 10.1371 /journal.pone.0085350

editor: Javier S. Castresana, da Universidade de Navarra, Espanha