Abstract

Mielóides células supressoras derivadas (MDSCs) expandir em hospedeiros portadores de câncer e contribuir para tumor imunitário evasão. macrófagos M2 constituem um importante componente celular da inflamação relacionada ao câncer. No entanto, a correlação entre MDSCs circulante e infiltrar macrófagos M2 em tecidos tumorais de pacientes com câncer de esôfago (ECA), e sua relação potencial com a polarização de células Th2 permanecem obscuros. No presente estudo, mostrou que o nível de MDSCs em PBMC e Arg1 no plasma estavam significativamente aumentados em pacientes com TCE, e o aumento da relação de MDSC em PBMC foi intimamente relacionado com a expressão de CD163 em tecidos de cancro. Além disso, os pacientes com TCE exibiram aumentos notáveis ​​nos níveis de mRNA de IL-4 e GATA3, bem como os níveis de proteína de IL-13 e IL-6, mas de IFN-γ e IL-12 no sangue periférico foram diminuídos. Nossos dados indicam que o aumento das citocinas Th2 estão associadas com MDSCs e M2 macrófagos polarização e promover a infiltração de CD163

macrófagos + M2 em tecidos de câncer, que promovem a formação de microambiente imunossupressora em pacientes TCE.

citação: Gao J, Wu Y, Z Su, Amoah Barnie P, Jiao Z, Q Bie, et ai. (2014) infiltração de macrófagos alternativa ativado em tecido de câncer está associado com MDSC e Th2 Polarização em Pacientes com câncer de esôfago. PLoS ONE 9 (8): e104453. doi: 10.1371 /journal.pone.0104453

editor: Jacques Zimmer, Centre de Recherche Public de la Santé (CRP-Santé), Luxemburgo

Recebido: 04 de março de 2014; Aceito: 09 de julho de 2014; Publicação: 21 de agosto de 2014

Direitos de autor: © 2014 Gao et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho foi apoiada por doações do National Science Foundation Natural da China (31270947, 31170849 e 30972748, https://www.nsfc.gov.cn/), Natural Science Foundation da província de Jiangsu (BK2011472) e da Fundação de Pós-Doutorado da China (2012M511705 ). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer de esôfago (ECA) é uma das neoplasias mais comuns em todo o mundo e a quarta morte por câncer líder na China [1] – [3]. Há evidências crescentes de o papel crucial do sistema imunológico em tumores malignos, mas os mecanismos precisos de modulação imunológica em pacientes TCE permanecem ainda desconhecidos. Na última década, o papel do imunossupressor e o compartimento mielomonocítica promotoras de cancro dentro do ambiente tumoral também tem recebido uma grande atenção [4]. Embora os mecanismos não são completamente compreendidos, cancro promove a acumulação de uma piscina heterogénea de osso imaturo derivadas da medula, células mielomonocíticas pouco diferenciados (monócitos, neutrófilos, macrófagos imaturos e células dendríticas), chamados mielóides derivadas de células supressoras (MDSCs), que são principal hospedeiro componente que contribui para o ambiente imunossupressor. Em condições patológicas, um bloqueio parcial na diferenciação de células mielóides imaturas em amadureceu resultados células mielóides em uma expansão de MDSCs [5]. Recentemente, tornou-se claro que a actividade supressora de MDSCs requer vários factores que promovem a sua expansão ou induzir a sua activação. Estes factores, que incluem a IL-4, IL-13, os ligandos para os receptores semelhantes a Toll (TLRs), e factor de crescimento transformante-β (TGF-β), activar várias vias de sinalização diferentes em MDSCs que envolvem STAT6 e factor nuclear-kB (NF-kB).

Semelhante a MDSCs, os macrófagos são uma população diversa de células mielóides que sofrem diferenciação específica, dependendo dos agentes de estimulação, como documentado extensivamente. Estudos imunológicos recentes, foram identificados dois estados distintos da activação de macrófagos polarizada: o classicamente activado (ou M1) e as alternativamente activada (ou m2) fenótipos de macrófagos. macrófagos M1 são tipicamente activadas por IFN-γ e LPS, enquanto os macrófagos M2 são activadas por IL-4 e IL-13 [6]. macrófagos M1 são tumoricida e promover a rejeição do tumor, enquanto que os macrófagos M2 promover a progressão tumoral [7] – [9]. Ambos os macrófagos e MDSCs M2 são uma importante fonte de imunossupressão que permite tumor-escape de respostas eficazes anti-câncer, mas nenhuma informação sobre a relação entre macrófagos e MDSCs M2 no desenvolvimento de câncer de esôfago está atualmente disponível.

uma observação interessante foi descrito no laboratório do Dr. Teramoto, cujo grupo mostrar que a activação simultânea da função Th1 pode aumentar a potência da imunoterapia do cancro baseados em células dendríticas [10]. No nosso estudo anterior, verificou-se que existe um fenótipo Th2 predominante em doentes com cancro gástrico [11]. conjecturado-se que o desequilíbrio de Th1 /Th2 podem contribuir para a ocorrência e o desenvolvimento do tumor. macrófagos MDSCs e /ou M2, como os principais componentes do hospedeiro que contribuem para o ambiente de supressão da imunidade tumor [12], a sua polarização deve estar relacionado com os distúrbios do equilíbrio do sistema imunológico. No presente estudo, foram analisados ​​os níveis de macrófagos M2 e MDSCs em pacientes TCE, detectou a expressão de alguns fatores relacionados, incluindo tipo de citocinas Th1 /Th2 e avaliou a relação entre as células Th2 e macrófagos M2 ou MDSCs. O objetivo geral do estudo foi contribuir para uma melhor compreensão da importância do MDSCs e macrófagos M2 de pacientes com câncer de esôfago no estado de polarização de células Th2.

Materiais e Métodos

Os pacientes

Cinquenta pacientes TCE recém-diagnosticados recebendo tratamento no Hospital Popular afiliada da Universidade de Jiangsu foram incluídos neste estudo: 38 homens e 12 mulheres, com idade média de 61,97 ± 1,24 anos. Nenhum dos pacientes tinha sido submetido a quimioterapia ou radioterapia antes do início do estudo. As características dos pacientes TCE foram resumidos na Tabela 1. Todos os casos de tumores primários foram encenadas clinicamente de acordo com as orientações da União Internacional de Controle do Câncer e do Comité Misto Americana do Cancro (UICC-AJCC) atualizou o nódulo-metástase tumor-(TNM) sistema de estadiamento do câncer [13]. Trinta voluntários saudáveis, sem qualquer condição inflamatória crônica foram estudados simultaneamente como controle, composto por 24 homens e 6 mulheres. Inscrição ocorreu entre Março de 2011 e Dezembro de 2012. Este estudo foi aprovado pelo comitê de ética da Universidade de Jiangsu, e consentimento informado por escrito foi obtido de todos os indivíduos.

preparação celular

Periférico amostras de sangue foram coletadas de pacientes TCE e voluntários saudáveis. As células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) foram isoladas por Ficoll-Hypaque de densidade-gradiente de centrifugação (GE Healthcare). As suspensões de células foram divididas em duas alíquotas iguais; um foi imediatamente utilizado para as experiências. O outro foi criopreservados a -80 ° C e descongeladas para teste em uma data posterior

A citometria de fluxo

população MDSCs foi definida como HLA-DR

-. /CD14

– /CD11b

+ /CD33

+. o sangue venoso heparinizado foi obtido de fresco a partir de pacientes da ECA ou voluntários saudáveis. As PBMC foram isoladas por centrifugação padrão de densidade de Ficoll-Hypaque ‘, e coradas com a seguinte mistura de anticorpos: FITC-conjugado anti-humano HLA-DR, PerCP-Cy5.5-CD14 conjugado anti-humano, conjugado com APC-CD11b anti-humano, ou CD33 conjugado com PE anti-humano. O anticorpo de controlo de isotipo foi utilizado em todos os casos. aquisição e análise de dados foram realizados num citómetro de fluxo FACSCalibur (Becton Dickinson, CA, EUA) utilizando o software CellQuest (Becton Dickinson, CA, EUA).

extracção de ARN e quantitativa PCR em tempo real

Seguindo as instruções do fabricante, o RNA total foi extraído a partir de PBMC utilizando Trizol reagente (Invitrogen, Carlsbad, CA). O DNA complementar foi sintetizado a partir de ARN total utilizando o kit de reagente de 1 ug de RT (Takara, Ohtsu, Japão). Para quantitativa PCR em tempo real, de ADNc transcrito de forma inversa (2 ul) foi amplificado por PCR em tempo real com o kit de SYBR Green Premix EX Taq (Takara, Ohtsu, Japão). Cada amostra foi analisada em duplicado com o CFX-96 Cycler (térmica) e o nível do sinal normalizado foi calculado com base na sua relação com o sinal de arrumação β-actina correspondente. Os iniciadores utilizados na PCR foram relatadas na Tabela 2.

ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA)

Para a detecção quantitativa de IFN-γ, IL-4, IL-6, IL -13 e Arg1 no plasma, kits ELISA disponíveis comercialmente foram utilizados de acordo com as instruções do fabricante (Biovender). Todas as amostras foram corridas em lotes para minimizar a variabilidade inter-ensaio e quantificada utilizando uma curva padrão.

A imuno-histoquímica

tecidos ECA e tecidos adjacentes emparelhados foram fixadas em solução de formalina tamponada a 10% e embebidos em parafina . Cortes seriados de 4 mm foram cortadas a partir dos blocos de parafina. CD68 ou CD163 anticorpo foi utilizado para identificar respectivamente os macrófagos e macrófagos M2 subtipo. Como controlos negativos, os anticorpos primários foram substituídos por um IgG1 anti-ratinho do isotipo irrelevante. detecção imunohistoquímica foi realizada pelo método avidina-biotina peroxidase. Um microscópio com várias cabeças foi usada para ler resultados de imuno-histoquímica, as células detectadas foram compensadas em 10 áreas selecionadas aleatoriamente por três pesquisadores diferentes ao × 40 ampliação. O resultado final foi estimado de acordo com a profundidade de cor das células e a percentagem de células coradas.

A análise estatística

A análise estatística foi realizada com GraphPad Prism, versão 5.0, software (San Diego, CA , EUA). Correlações entre as variáveis ​​foram determinadas pelo coeficiente de correlação de Spearman. As comparações entre os grupos foram realizadas usando

t

teste não pareado ou emparelhado de Student. foram consideradas estatisticamente significativas as diferenças quando o

P

-valor. 0,05

Resultados

MDSCs elevados correlacionados com aumento do nível plasmático de Arg1 no ECA pacientes

MDSCs, definidos como HLA-DR

– /CD14

– /CD11b

+ /CD33

+ células, foram determinadas por citometria de fluxo e calculado como% de PBMC. O nível de MDSCs individuais foi significativamente elevados em pacientes ECA em comparação com controles saudáveis ​​(

P Art 0,05; Figura 1). Como mostrado na Tabela 3, a proporção de MDSCs em pacientes com cancro avançado foi significativamente maior do que em doentes com cancro na fase inicial (2,56 ± 0,25% vs 0,77 ± 0,15%;

P

0,05). Além disso, a proporção de MDSCs em pacientes com metástase ganglionar foi maior do que aqueles sem metástases em linfonodos (3,71 ± 0,34% vs. 1,47 ± 0,13%;

P Art 0,0001). No entanto, não houve diferenças significativas entre a proporção de MDSCs e idade dos pacientes, sexo, localização do tumor, o tamanho do tumor, ou a profundidade de infiltração tumoral. Nós também medida a concentração no plasma de Arg1, que é um dos factores mais importantes supressoras [14], [15]. O resultado mostrou que o plasma de controlo tinha Arg1 mínima em comparação com pacientes ECA (9,57 ± 1,51 ng /ml vs. 28,28 ± 4,10 ng /ml;

P Art 0,001). Além disso, uma correlação positiva entre a proporção de MDSCs de PBMC e nível plasmático de Arg1 em pacientes TCE em testes subsequentes.

A frequência de MDSCs em PBMC foi analisada por citometria de fluxo, os pacientes e controles saudáveis utilizado neste experimento tinha sido combinado com sexo, idade e número. um: Diagrama Representante da análise de citometria de fluxo para MDSCs circulando de controles saudáveis. b: Diagrama Representante da análise de citometria de fluxo para MDSCs circulante de pacientes TCE. MDSCs, células supressoras derivadas de mielóides; ECA, câncer de esôfago; FSC, dispersão para a frente; FITC, isotiocianato de fluoresceína; PerCP-Cy5.5, peridinina clorofila-proteína cianina 5,5; PE, ficoeritrina; APC, aloficocianina.

macrófagos M2 melhorados em pacientes TCE

CD163 é um receptor de limpeza, regulada por macrófagos em ambientes anti-inflamatórios [16] e considerado como um altamente monócito /macrófago marcador específico para macrófagos M2 [17] – [19]. A maioria dos trabalhos na meta-análise utilizado CD68 como um marcador para macrófagos associados a tumores (TAMs) [20]. CD68, no entanto, reconhece tanto macrófagos M2 [21] e M1. Portanto, utilizou-se CD68 e CD163 como marcadores de macrófagos e macrófagos m2, respectivamente. Para analisar se a localização de CD163

+ e CD68

+ macrófagos teve uma correlação com as características clínicas, a distribuição de CD163

+ e CD68

+ macrófagos em tecidos tumorais e livres de tumor foi avaliado separadamente (Figura 2). As categorias de coloração foram inicialmente pontuadas de 0 a 3 em densidade de infiltração de macrófagos. Os resultados mostraram que a maioria dos tecidos tumorais teve maiores densidades de CD163

+ e CD68

+ infiltração de macrófagos do que aqueles nos tecidos livres de tumor. As taxas de expressão positiva CD163

+ e CD68

+ eram 68% e 78%, respectivamente, em tecidos de cancro comparativamente com 4% e 6% nos tecidos de cancro adjacentes. Além disso, o aumento da relação de MDSC em PBMC de pacientes com TCE estava intimamente relacionado com a expressão de CD163 em tecidos de cancro (Tabelas 4-5).

representativos imagens de imuno-histoquímica mostrou a expressão de CD68 em tecido de cancro adjacente (uma). e um tecido de cancro (b). Representativos imagens de imuno-histoquímica mostrou a expressão de CD163 em tecido de cancro adjacentes (C). e um tecido de cancro (d). Normal epitélio escamoso do esôfago (hematoxilina-eosina /HE coloração) (e). carcinoma de células escamosas do esôfago (coloração HE) (f). A análise do número de CD68

+ macrófagos (g). e CD163 + macrófagos (h). no cancro e tecidos cancerosos-adjacente, os resultados mostraram que a maioria dos tecidos de câncer tinham maior número de CD68 + e CD163 + macrófagos infiltração do que nos tecidos cancerosos-adjacente.

O aumento da IL -4 e GATA3 ARNm enquanto diminuiu IFN-γ mRNA em PBMC de pacientes com TCE

Os níveis relativos de expressão de genes de citoquinas que codificam a IL-4, IL-6, IL-12, IL-13 e IFN-γ, bem como factores de transcrição e GATA3 T-bet foram avaliadas utilizando PCR em tempo real. Como mostrado na Figura 3, os pacientes de ECA tinha aumentado de expressão de IL-4 e mRNA de GATA3, em comparação com os controlos saudáveis ​​(

P

0,05). IFN-y, IL-12, e mRNA de IL-13 em expressões grupo ECA foram significativamente mais baixos do que aqueles no grupo de controlo (All

P

0,05). Mas não foi encontrada diferença significativa em termos de expressão de mRNA T-bet entre os dois grupos (

P Art 0,05).

Os níveis de mRNA de IFN-γ (a), T- aposta (b), IL-4 (c), GATA3, (d) e IL-12 (e) foi determinada por PCR em tempo real. Os dados foram analisados ​​pelo teste t de Student. *

P Art 0,05, ***

P Art 0,001 vs. grupo controle. NS, não houve diferença significativa. ECA, câncer de esôfago; PCR, reação em cadeia da polimerase; IFN, interferão; IL, interleucina. Os pacientes e controles saudáveis ​​utilizadas neste experimento tinha sido combinado com sexo, idade e número.

O aumento da IL-6, IL-13, Arg1 no plasma de doentes ECA

Plasma IFN-γ, IL-4, IL-6, IL-13, e Arg1 foram determinados por ELISA. Como mostrado na Figura 4, IL-6 e IL-13 As concentrações foram significativamente maiores nos pacientes CEA em comparação com os sujeitos de controlo (

P

0,05 e

P

0,001). Além disso, um maior nível de Arg1 foi encontrada no plasma de pacientes com TCE. No entanto, não houve diferenças significativas em IFN-γ ou concentração de IL-4 entre os dois grupos.

Os pacientes e controlos saudáveis ​​utilizados nesta experiência tinham sido combinado com o sexo, a idade e o número. As concentrações plasmáticas de IFN-γ (a), IL-4 (b), IL-6 (c), Arg1 (d) e IL-13 (e), foram determinados por ELISA. Os dados foram analisados ​​pelo teste t de Student. *

P Art 0,05, ***

P Art 0,001 vs. grupo controle. NS: não houve diferença significativa, ECA: câncer de esôfago, ELISA: ensaio imunoenzimático, IFN: interferon, IL: interleucina, Arg1: arginase 1.

A análise de correlação entre as diferentes citocinas em pacientes com TCE

foram analisadas as correlações entre as diversas citocinas nos pacientes TCE. Como mostrado na Figura 5, houve uma correlação positiva significativa entre os níveis de Arg1 (MDSCs e M2 citocina associada) e IL-13 (Tipo Th2 citocina) no plasma dos pacientes com TCE. IL-4, tal como uma citocina de Th2, a expressão de ARNm foi aumentada após o reforço Arg1 plasma, mas uma correlação negativa entre o IFN-γ e Arg1. Além disso, a concentração de IL-13 no plasma mostrou correlação positiva com o nível de ARNm de IL-4 em PBMC (r = 0,45,

P

0,05)

A:. Correlação entre a concentração plasmática de Arg1 e as percentagens de MDSCs circulantes em pacientes ECA. correlação positiva foi encontrada entre Arg1 e MDSCs (r = 0,493,

P

= 0,006). b: Correlação entre a concentração de plasma de Arg1 e o nível de ARNm de IL-4 a partir de pacientes com TCE. correlação positiva foi encontrada entre Arg1 e mRNA de IL-4 (r = 0,510,

P

= 0,009). C: Correlação entre a concentração plasmática de Arg1 e IL-13 a partir de pacientes com TCE. correlação positiva foi encontrada entre Arg1 e IL-13 (r = 0,455,

P

= 0,017). d: Correlação entre os níveis de mRNA de IL-4 e o plasma nível de IL-13 a partir de pacientes com TCE. Houve correlação positiva entre a IL-4 e IL-13 (r = 0,484,

P

= 0,016). E: A correlação entre o nível de ARNm de nível no plasma de pacientes de Arg1 ECA IFN-γ e. correlação negativa foi encontrada entre IFN-γ e Arg1 em pacientes ECA (r = -0,381,

P

= 0,038). f: Correlação entre o número de CD163

+ macrófagos nos tecidos cancerosos e os percentuais de MDSCs circulando em PBMC de ECA pacientes (r = 0,410,

P

= 0,003). g: correlação entre o número de CD163

+ macrófagos em tecidos de câncer e a concentração plasmática de IL-13 a partir de pacientes ECA (r = 0,405,

P

= 0,036)

Discussão

MDSCs, em condições normais migrar para diferentes órgãos periféricos e se diferenciar em células dendríticas, macrófagos e /ou granulócitos. No entanto, os factores produzidos no microambiente do tumor, isoladamente ou em combinação, promover a acumulação de MDSCs, impedir a sua diferenciação e induzir a sua activação. No ambiente do tumor, MDSCs também se podem diferenciar em TAM, que são um fenótipo único, cuja função é distinta da MDSCs [5]. Os macrófagos são células de plástico, uma vez que pode mudar de um estado activado M1 volta a um estado de M2 ​​/MAT, e vice-versa, mediante a indução de sinais específicos. Os macrófagos que se infiltram nos tecidos de cancro são referidos como TAM, que estão intimamente envolvidos no desenvolvimento do microambiente do tumor. A heterogeneidade dos fenótipos é observada entre MAT em vários tumores malignos, e uma proporção significativa de MAT /M2 fenótipo está associada a um pior prognóstico clínico e de alto grau de malignidade [22]. Em 2007, Sinha et al. [23], utilizado o carcinoma mamar io de ratinho 4T1 espontaneamente metastática, e demonstraram que MDSCs prejudicada imunidade tumoral suprimindo a activação das células T, bem como interagindo com os macrófagos para aumentar a IL-10 e diminuir a IL-12, desse modo promovendo um tipo indutor de tumores 2 resposta, um processo que pode ser parcialmente revertida por gemcitabina. Com base nisso, nosso estudo alvejado ECA e investigados MDSCs no sangue periférico, macrófagos nos tecidos tumorais e os níveis de alguns fatores relacionados. Como esperado, o aumento MDSCs foram encontrados no sangue periférico, e uma certa quantidade de macrófagos M2 infiltrado nos locais de tumor, o que indica que estas populações celulares estavam envolvidos na patogénese da ECA. Além disso, o aumento do nível de plasma de Arg1, que foi correlacionada com MDSCs e macrófagos M2 funções, foi também encontrada em pacientes com TCE. Notavelmente, o aumento da relação de MDSCs em CMSPs de pacientes com TCE estava intimamente relacionado com a expressão de CD163 em tecidos de cancro.

Anteriormente mostrou que havia um fenótipo Th2 predominante em doentes com cancro gástrico, e acredita-se que as citocinas Th2 associadas a IL-4, IL-13, IL-6 e factores de transcrição GATA3 pode ser estreitamente relacionada com a polarização de M2 ​​e MDSCs, e promoveu um ambiente imunossupressor em doentes com cancro. No presente estudo, foi demonstrado que pacientes com TCE exibiram aumentos notáveis ​​nos níveis de mRNA de IL-4 e GATA3, bem como os níveis plasmáticos de IL-13 e IL-6. Em contraste, o nível plasmático de IFN-γ e os níveis de mRNA de IFN-γ e IL-12 foram diminuídos. Houve uma correlação positiva entre o nível de mRNA de IL-4 e o plasma nível de IL-13, e estas duas citoquinas aumentada após o reforço Arg1 no plasma. Entretanto, uma correlação negativa foi encontrada entre IFN-γ e Arg1. Os presentes dados indicam que houve um fenótipo Th2 predominante em doentes ECA e era consistente com o aumento do nível de Arg1, que foi MDSCs e M2 citocina associada. Recentemente, Gabitass et ai. [24], relataram que MDSCs foram elevados no cancro pancreático e gástrico, e demonstraram que eram um factores de risco independentes, e associado com a elevação significativa da citocina Th2 IL-13. Esses resultados foram parcialmente coerente com nossos dados. Deve mencionar-se que o ARNm de IL-4 foi aumentada em PBMC, enquanto que a expressão de IL-4 no plasma de proteína não foi alterada em doentes com cancro. Não era um resultado totalmente coerente, que pode devido a IL-4 transcrição do gene e sua secreção de proteínas não foram síncrono, mais pesquisa era necessário investigar isso com mais detalhes.

Alguns pesquisadores acreditam que a IL-4 e IL-13 são suficientes para desempenhar papéis importantes na activação de macrófagos M2 [6]. Além disso, Gabitass RF et ai. [24] e JT Pesce et ai. [25], indicaram que as citoquinas Th2: IL-4 e IL-13 pode regular positivamente a actividade da arginase, aumentando assim a função supressora de MDSCs e macrófagos M2. Portanto, propomos que a IL-4, IL-13 e Arg1 são factores essenciais que medeiam a distribuição de macrófagos MDSCs e M2, e está estreitamente relacionado com a polarização celular Th2. Ostrand-Rosenberg et ai. [26], mostram que a diafonia entre MDSCs macrófagos e promove a sinergia entre estas células, assim, aumenta os efeitos supressores imunitários das populações de células individuais. Como resultado, MDSCs e macrófagos no microambiente tumoral estão intimamente interligado de modo que as funções de uma população são impactada pela quantidade das outras populações [27] – [30]. Em uma recente revisão da análise de sobrevivência, verificou-se que muitos estudos têm indicado características clínicas e patológicas de pacientes com carcinoma de esôfago, como variáveis ​​explicativas em relação à sobrevivência, e mostrou uma melhor taxa de sobrevivência para as mulheres ou pacientes jovens. As razões para isso são susceptíveis de incluir uma combinação de uma melhor saúde geral e do estado imunológico mais eficaz [31] – [32]. No entanto, houve limitações com o presente estudo, no qual a correlação entre MDSCs% e os fatores patológicos clínicos de pacientes ECA não foram analisadas, deve ser considerado em nosso trabalho futuro.

Conclusão

Nós revelou uma conexão interessante entre as células Th2 associadas citocinas e MDSCs ou macrófagos M2 no ECA. As alterações detectadas na IL-4, IL-6, IL-13 e GATA3 níveis correlacionados positivamente com MDSCs e M2 macrófagos activação, mas de IFN-γ jogado o efeito oposto. A estreita relação entre circulam MDSCs e infiltração de macrófagos M2 indicou que a infiltração de macrófagos M2 em tecidos TCE pode estar relacionado com MDSCs polarização envolvendo vantagem Th2. Estes resultados fornecem uma melhor compreensão da imunossupressão sistémica, tais como a interacção entre as células T e MDSCs ou macrófagos M2, citoquinas sistémicas e as suas vias de sinalização, e pode contribuir para desencadear novas estratégias para a terapia anti-cancro, os quais são baseados na modulação dos efeitos imunossupressores de tumor MDSCs -associated, macrófagos M2 e células Th2.

Reconhecimentos

Os autores são gratos ao Zhijian Zhang, Sheng Xia, Qixiang Shao e Peifang Yang para excelente ajuda técnica. Este trabalho foi apoiado por subsídios da National Science Foundation Natural da China (31270947, 31170849 e 30972748), Natural Science Foundation da província de Jiangsu (BK2011472) e Fundação de Pós-Doutorado da China (2012M511705).