Abstract

Fundo

A quimioterapia adjuvante para o cancro colorectal é baseada principalmente na combinação de 5-fluorouracil, ácido folínico e oxaliplatina (FOLFOX-4). O alvo farmacológico de oxaliplatin permanece intracelular e, portanto, dependente da sua entrada nas células. A distribuição intracelular de oxaliplatina é mediada por transportadores de catiões orgânicos 1, 2 e 3 (OCT1, 2 e 3), um transportador de cobre (CTR1) e ATPase Cu

2+ polipeptídeo transportador beta (ATP7B) e podem modular a eficácia de -oxaliplatin baseado quimioterapia. O objetivo deste estudo foi realizar um estudo retrospectivo para avaliar a relação entre a expressão dos transportadores de oxaliplatina em câncer colorretal antes da quimioterapia e da resposta à quimioterapia FOLFOX-4 adjuvante em pacientes respondedores e não-respondedores.

Métodos

Este estudo retrospectivo foi realizado em um único centro (Hospital Universitário de Clermont-Ferrand, França). A população-alvo foi pacientes com câncer colorretal resectable operados entre 2006 e 2013. Os critérios de inclusão foram definidos para os doentes com resposta e como não houve recorrência do cancro de 3 anos após o fim da quimioterapia, e para os pacientes que não responderam como recorrência de câncer dentro de 1 ano. Outros critérios de inclusão foram estágios cancros IIb-IV, de primeira linha adjuvante FOLFOX-4 quimioterapia, e da disponibilidade de amostras de tumores primários ressecados. Os critérios de exclusão foram quimioterapia pré-operatória e /ou radioterapia, a terapia-alvo, outros fármacos anti-cancerígenos, recorrência do câncer entre o primeiro eo terceiro ano após o fim da quimioterapia e acompanhamento 3 anos. Imunocoloração de transportadores de oxaliplatina (OCT1, 2, 3, CTR1 e ATP7B) e Ki-67 foi avaliada em amostras de tumor.

Resultados

Retrospectivamente, 31 pacientes foram selecionados de acordo com inclusão e exclusão critérios (15 respondedores e 16 não responderam). Antes de FOLFOX-4 regime, expressão OCT3 foi significativamente menor em doentes com resposta em comparação com não-respondedores (p 0,001). De acordo com uma análise multivariada, OCT3 continua a ser um critério independente para a resposta à quimioterapia adjuvante FOLFOX (p = 0,039). Nenhuma relação significativa é relatada entre a resposta a quimioterapia ea expressão de OCT1 (p = 0,49), OCT2 (p = 0,09), CTR1 (p = 0,45), ATP7B (p = 0,94) e Ki-67 (p = 0,34) em tumores .

Conclusões

High expressão de OCT3 poderia ser um fator independente relacionado à resistência à quimioterapia FOLFOX-4

Citation:. Le Roy B, Tixier L, Pereira B, Sauvanet P, E Buc, Pétorin C, et ai. (2016) Avaliação da relação entre a expressão de oxaliplatina Transportadores em câncer colorretal e Resposta a FOLFOX-4 Quimioterapia Adjuvante: estudo caso-controle. PLoS ONE 11 (2): e0148739. doi: 10.1371 /journal.pone.0148739

editor: Shrikant Anant, Universidade de Kansas School of Medicine, Estados Unidos

Recebido: 05 de outubro de 2015; Aceito: 22 de janeiro de 2016; Publicação: 09 de fevereiro de 2016

Direitos de autor: © 2016 Le Roy et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Data Availability:. Todos relevante os dados estão dentro do papel e seus arquivos de suporte de informação

financiamento:.. os autores não têm apoio ou financiamento para relatar

CONFLITO dE iNTERESSES:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Abreviaturas: ATP7B, ATPase Cu

2 + polipeptídeo transportador beta; IMC, índice de massa corporal; CRC, câncer colorretal; CTR1, cobre Transporter 1; FOLFOX, 5-fluorouracilo, ácido folínico e oxaliplatina; HES, hematoxilina /eosina /safranina; OCT1, transportadores de catiões orgânicos 1; OCT2, transportadores de catiões orgânicos 2; OCT3, transportadores de catiões orgânicos 3; SLC, família portadora de soluto; TNM, metástase de tumor

Fundo

A sobrevida global de pacientes com câncer colorretal de alto risco (CRC) (fases II, III ou IV) é melhorada pela quimioterapia adjuvante [1,2] . Quimioterapia de primeira linha vulgarmente associa 5-fluorouracilo, ácido folínico e oxaliplatina no protocolo FOLFOX-4. No entanto, quase metade dos pacientes que receberam tratamento adjuvante não beneficiam de oxaliplatina [2,3]. sais de platina (por exemplo, oxaliplatina) aductos de platina em forma de DNA cadeias duplas, resultando na inibição da replicação de ADN. Por conseguinte, a distribuição celular de sais de platina é considerada como sendo um factor determinante significativo a sensibilidade de drogas [4]. transportadores de membrana de xenobióticos são importantes fatores envolvidos na distribuição intracelular e eficácia de drogas anticâncer [4].

In vitro

estudos têm demonstrado que os transportadores de catiões orgânicos OCT1, OCT2 e OCT3, pertencendo à família de transportador de solutos 22 (SLC22a1, SLC22a2 e SLC22a3, respectivamente), estão envolvidos na absorção celular de sais de platina, especialmente para oxaliplatina [5-7]. O transportador de cobre 1 (CTR1), pertencente à família transportadora de soluto 31 (SLC31A1), também está ligada ao fluxo de sais de platina tais como oxaliplatina em células, enquanto que o seu efluxo pode ser ligada ao transportador de cobre, ATPase Cu

2+ polipeptídeo transportador beta (ATP7B) [8]. Assim, no contexto da CRC, a expressão de tumores de OCT1, OCT2, OCT3, e CTR1 ATP7B podem afectar a resposta a FOLFOX-4 quimioterapia. Contudo, até esta data, os estudos clínicos muito pouco tem sido feito na CRC e nenhum estudo no contexto da quimioterapia adjuvante. Em CRC metastático, uma elevada expressão de OCT2 tem sido associada a um melhor prognóstico e uma elevada expressão de ATP7B com um mau prognóstico [9-11]. No estudo clínico já avaliou a relação entre a resposta à quimioterapia e a expressão de OCT1, OCT3 e CTR1 no CRC. O objetivo deste estudo foi realizar uma avaliação retrospectiva, em amostras de tumor após a cirurgia e antes da quimioterapia, da relação entre a expressão de transportadores de oxaliplatina (OCT1, OCT2, OCT3, CTR1 e ATP7B) ea resposta ao adjuvante FOLFOX-4 quimioterapia , em pacientes respondedores e não-respondedores.

Métodos

pacientes e desenho do estudo

Este estudo retrospectivo foi realizado em um único centro, do Hospital Universitário de Clermont-Ferrand ( França). A população-alvo foi pacientes com CRC resectable operados no Serviço de Cirurgia do Aparelho Digestivo do Hospital Universitário de Clermont-Ferrand (França) entre 2006 e 2013. Os critérios de inclusão foram definidos para os doentes com resposta e como não houve recorrência do câncer (descoberto em imagem ou colonoscopia) 3 anos após o final da quimioterapia, e para os pacientes que não responderam a recidiva do cancro dentro de 1 ano após o final da quimioterapia. Outros critérios de inclusão foram estágios IIB, IIC, III ou IV CRC, de primeira linha adjuvante FOLFOX-4 (ácido folínico, 5-fluorouracil e oxaliplatina) quimioterapia após ressecção CRC, e da disponibilidade de amostras de tumores primários ressecados. Os critérios de exclusão foram quimioterapia pré-operatória e /ou radioterapia, a terapia-alvo, outros fármacos anti-cancerígenos, recorrência do câncer entre o primeiro eo terceiro ano após o fim da quimioterapia e acompanhamento 3 anos. A aprovação ética foi obtida a partir Comitê de Ética Local (CPP sud-est 6; IRB: 00008526). Considerando a gravidade deste tipo de doença (CDC), a ausência de exploração genética e de acordo com a lei francesa, o Comitê de Ética Local deu sua aprovação para uma isenção da obrigação de informar os pacientes.

Tissue amostras e análise de histopatologia

Após a ressecção do tumor, amostras frescas foram transportados para o laboratório de patologia, fixadas em ácido acético /formalina, álcool (AFA), embebidas em parafina, cortadas em fatias de 5 mm, e analisados ​​com HES stain (hematoxilina /eosina /safranina). Os tumores foram classificados de acordo com a classificação do nó tumor metástase (TNM) do 7

th Comité Misto americana sobre o Câncer /União de Controle do Câncer International. Os seguintes elementos também foram avaliadas para cada tumor:. Grau de diferenciação (pobres, moderado ou alto), invasão perineural, vascular e /ou êmbolos linfáticos, e status da margem

Imunohistoquímica

Five secções micrométricas de tecido embebidas em parafina foram marcadas com anticorpos policlonais de coelho: anti-OCT1 (1: 125, Novus Biologicals, UK), anti-OCT2 (01:50, anticorpos Atlas, EUA), anti-CTR1 (1: 200, Novus Biologicals, UK), anti-ATP7B (01:25, Abcam, França), anticorpos monoclonais de coelho: anti-OCT3 (EPR6630 clone, 1: 300, Abcam, França) e anti-Ki-67 (clone MIB-1, pronto-para-uso, Dakko, Dinamarca). Ki-67 foi utilizado como um marcador para a proliferação celular e um factor de prognóstico em CRC [12]. A imunocoloração foi realizada com o Kit Ultra Ver Detecção em um stainer XT Referencial (Ventana Medical Systems, EUA). A avaliação foi realizada de forma independente por 2 patologistas experientes (autores: LT e PD) que avaliaram PTU, CTR1, ATP7B e Ki-67 expressões por microscopia de luz. PTU e CTR1 foram marcados semi-quantitativamente com um H-score, como descrito anteriormente [13]. intensidade da coloração foi graduada de 0 a 3+ (0: sem coloração; 1+: coloração fraca, 2+: coloração moderada, 3+: coloração forte). A percentagem de células de tumor coradas foi avaliada para cada intensidade e um H-score (0-300) foi calculada como se segue: (1x percentagem de células albergando coloração fraca 1+) + (2x percentagem de células albergando coloração moderada 2+) + (3x percentagem de células que abrigam coloração forte 3+). ATP7B e Ki-67 foram avaliadas pela percentagem de células coradas. Quando havia discrepâncias entre os observadores, as amostras foram analisadas até que o consenso foi alcançado.

Gestão de dados e análise estatística

Os dados do estudo foram coletados e gerenciados usando o REDCap aplicação (Investigação Electronic Data Capture) hospedado no Hospital da Universidade de Clermont-Ferrand [14]. A análise estatística foi realizada utilizando Stata 13 software (StataCorp LP, College Station, EUA). Os testes foram em frente e verso, com um erro de tipo I fixado em α = 0,05. Parecia difícil propor uma estimativa do tamanho da amostra de acordo com a falta de conhecimento sobre literatura sobre o principal resultado objetiva e associados nesta população. Além disso, o tamanho da amostra foi fixada de acordo com a capacidade de recrutamento e de acordo com projeto sequencial sem inflação erro tipo I [15]. No entanto,

a posteriori

cálculo poder estatístico foi proposto. Estes aspectos foram esclarecidas na discussão. As características basais foram apresentados como média (± desvio-padrão) ou mediana [variação interquartil] para dados contínuos (suposição de normalidade avaliada pelo teste de Shapiro-Wilk) e como o número de pacientes e porcentagens associadas para variáveis ​​categóricas. Comparações das características dos pacientes entre os grupos independentes (resposta da quimioterapia) foram feitas usando o teste exato de Fisher para variáveis ​​categóricas (sexo, tipo de cirurgia, localização do tumor primário, estado histológico, grau neurotoxicidade) qui-quadrado ou, eo teste t de Student ou Mann-Whitney se as suposições do teste t não foram cumpridas ((1) normalidade e (2) pressuposto de homocedasticidade estudada pelo teste de Fisher-Snedecor) para os parâmetros quantitativos (idade, índice de massa corporal (IMC), creatinina sérica de biomarcadores tumorais, número de ciclos de quimioterapia, doses cumulativas de oxaliplatina). A relação entre os parâmetros quantitativos foi estudada utilizando coeficientes de correlação (Pearson ou Spearman de acordo com a distribuição estatística). Um modelo de regressão logística multivariada foi utilizada para estudar a relação entre a expressão de transportadores de oxaliplatina em resposta a quimioterapia (variável dependente), por considerar ajustes em parâmetros clínicos relevantes: localização do tumor, classificação TNM, linfáticos e embolia venosa, invasão perineural, Número de isolado nós, doses de oxaliplatina cumulativos e número de ciclos de quimioterapia. Devido ao pequeno tamanho da amostra relativa, uma estimativa de bootstrap foi considerado para completar a análise multivariada. O modelo final foi validado por um processo de inicialização de dois passos. Em cada etapa, 1.000 amostras de bootstrap com substituições foram criados a partir do conjunto de treinamento. Na primeira, utilizando o procedimento passo a passo, determinou-se a percentagem de modelos, incluindo cada uma das variáveis ​​iniciais. Na segunda etapa, estimou-se de forma independente os parâmetros de regressão logística do modelo final. As estimativas de bootstrap de cada coeficiente de co-variável e erro padrão da média foram em média a partir dessas réplicas. Uma análise usando uma curva ROC (característica de operação do receptor) foi proposto e vários índices foram calculados (índice de Youden, o índice de Liu, eficiência) para investigar o valor limite para otimizar a sensibilidade e especificidade de expressão OCT3 para prever a resposta à quimioterapia. Quando apropriado (para a área sob a curva ROC (AUC-ROC) e odds ratio), 95% de intervalo de confiança foram estimados. A AUC-ROC foi comparado a 0,75 [16].

Resultados

As características dos pacientes

Retrospectivamente, 31 pacientes foram selecionados de acordo com critérios de inclusão e exclusão (Fig 1) . Quinze pacientes foram identificados como respondedores e 16 pacientes como não-respondedores. Os resultados clínicos, patológicos e terapêuticos desses 31 pacientes estão resumidos na Tabela 1. Todos os pacientes eram caucasianos e sem qualquer diagnóstico de cânceres nos últimos 5 anos. foi identificada nenhuma diferença entre os doentes com resposta e não responderam por idade, sexo, IMC, procedimento cirúrgico, complicações pós-operatórias, localização do tumor primário, os dados histológicos, venosa, linfática ou invasão nervosa, a diferenciação do tumor, ou biomarcadores tumorais. No entanto, o número de ciclos de quimioterapia e as doses cumulativas de oxaliplatina foram significativamente maiores para os pacientes que respondem comparado com os não-respondedores (P = 0,004 e p = 0,04, respectivamente).

Os pacientes foram identificados e seleccionados a partir de o banco de dados da Unidade de Cirurgia do Aparelho digestivo, entre 2006 e 2013.

expressão de PTU, CTR1 e ATP7B transportadores

coloração de OCT1 e ATP7B revelou a localização subnuclear corpuscular enquanto OCT2 e OCT3 foram localizados na membrana citoplasmática e também no citoplasma. CTR1 por sua vez está localizado no citoplasma (Figura 2). Não houve diferença significativa da mediana H-score entre os pacientes respondedores e não-respondedores para OCT1 (80 [20-160]

vs

65 [6-170], p = 0,49), OCT2 (130 [100 -185]

vs

175 [148-203], p = 0,09), CTR1 (95 [80-110]

vs

80 [48-130], p = 0,45) e ATP7B (35 [4-60]

vs

33 [2-70], p = 0,94) (Fig 3). Para a expressão OCT3 em tumores, a mediana H-score foi significativamente menor para os pacientes que respondem comparação com os doentes que não responderam (5 [0-60]

vs

123 [70-178], p 0,001) (Fig 3). Expressão de OCT3 no tecido do cólon normal, foi avaliada em 5 amostras de doentes com resposta e 5 amostras de pacientes que não responderam. Em comparação com amostras de tumores de cólon, a intensidade da imunocoloração era baixa em tecido normal. Nenhuma diferença de OCT3 imunocoloração foi colocado em evidência entre o grupo de pacientes (doentes com resposta: 3 pacientes sem imunomarcação e 2 pacientes com imunocoloração; pacientes não respondedores: 2 pacientes sem imunomarcação e 3 pacientes com imunocoloração). Exemplos de OCT3 imunocoloração em tecido de cólon normal são apresentados na Figura 4.

Diversas intensidade da imunocoloração por: (A) controlo negativo, (B) uma expressão elevada (3+) de OCT1, (C) OCT2, ( D) OCT3, (e) CTR1 e (F) ATP7B (x400; barra de escala = 25 um)

(NS:. não significativa, p 0,05; ***: p 0,001).

Vários intensidade da imunomarcação: (a) nenhuma expressão em um paciente responder, (B) de alta expressão de um paciente responder, (C) nenhuma expressão em um paciente não responder, (D) de alta expressão em um paciente não responder,. (x400; barra de escala = 25 um)

a relação entre a expressão do PTU em tumores ea resposta ao FOLFOX-4 quimioterapia foi avaliada por meio de análise multivariada (considerando o seguintes variáveis: localização do tumor, classificação TNM, linfáticos e embolia venosa, invasão perineural, número de nós isolados, doses de oxaliplatina cumulativos e número de ciclos de quimioterapia). A análise multivariada mostrou que apenas baixa expressão OCT3 em tumores preservou o significado prognóstico independente da resposta à quimioterapia (odds ratio = 0,95 IC

95% [0,91-0,98]; p = 0,039). Após a análise com uma curva ROC (AUC-ROC = 0,92 IC

95% [0,82-1]) e determinar o índice discriminante para o H-score de OCT3, um limiar de 67,5 foi encontrado para ser o valor mais discriminante entre doentes com resposta e não responderam (sensibilidade = 87% IC

95% [60% -98%], especificidade = 88% IC

95% [62% -98%]) (Fig 5). Considerando-se esse limite H-score de 67,5, 86,7% (13/15) dos doentes com resposta e ficaram abaixo deste limiar, contra apenas 12,5% (2/16) dos pacientes não respondedores (p 0,001).

x -axis: 1-especificidade, eixo y:. sensibilidade

A expressão do Ki-67

Não há diferença de Ki-67 foi encontrada entre os pacientes respondedores e não-respondedores (65 [40-80]

vs 52,5 [43,75-60], p = 0,34) (Figura 3). Ki-67 não se correlacionou com a expressão OCT3 em amostras de tumor (rho de Spearman = -0,12).

Discussão

OCT1, OCT2, OCT3, CTR1 e ATP7B foram detectados por imuno-histoquímica em vários níveis em amostras de tecido CRC após a cirurgia e antes da quimioterapia adjuvante. Apesar do pequeno número de pacientes, de expressão elevada de OCT3 em amostras de tumor permaneceu um factor independente de CRC não-resposta ao adjuvante FOLFOX-4 quimioterapia. A expressão de OCT1, OCT2, CTR1 e ATP7B não foram relacionados à resposta FOLFOX-4. Como foi mencionado nas considerações estatísticas (veja acima), devido às dificuldades de propor tamanho da amostra estimativa,

a posteriori

cálculo poder estatístico foi proposto acordo com os resultados observados para o resultado primário. Com 16 pacientes que não responderam n = 15 respondedores e n =, o poder estatístico foi superior a 95% para mostrar uma diferença de 118 pontos para a expressão OCT3 em tumores (H-score: 5 [0-60]

vs

123 [70-178]), o comando sampsi de software Stata considerando distribuição não-normal [17]. Este poder estatístico parecia satisfatória. Para a expressão de OCT2, o poder estatístico foi em torno de 80% (H-score: 130 [100-185]

vs

175 [148-203]). Se a diferença parecia clinicamente relevante para a expressão de OCT2, foi mais ambígua para a expressão de OCT1, e CTR1 ATP7B. Como indicado por Feise [18], deve ter o cuidado de se concentrar não apenas sobre a significância estatística, mas também sobre a qualidade da investigação no âmbito do estudo e a magnitude da diferença. Finalmente, o efeito tamanho (diferença entre as médias, dividido pelo desvio padrão) para a expressão OCT3 entre respondedores e não-respondedores foi de cerca de 1,84 [0,98; 2,68], que pode ser considerado como grande (≥0.8) [19].

In vitro

, a expressão de OCT1, OCT2, OCT3 e CTR1 foi positivamente relacionada com o afluxo de oxaliplatina em células e citotoxicidade enquanto ATP7B foi relacionado com a sua efluxo e resistência [5,7,8]. No caso de CRC, a relação entre OCT1, OCT3 e CTR1 e resposta quimioterapia nunca foi avaliado em ensaios clínicos. Apenas dois estudos observaram uma relação positiva entre a expressão OCT2 em câncer colorretal metastático com uma melhor sobrevida livre de progressão e a resposta do tumor [9,10]. No entanto, a comparação com os nossos resultados é bastante difícil, porque apenas os pacientes com CCR foram incluídos metastáticos, tratados por quimioterapia FOLFOX-4, com ou sem bevacizumab. Os únicos resultados clínicos foram a sobrevida livre de progressão e a resposta do tumor. Além disso, o número de pacientes tratados com o bevacizumab, ciclos de quimioterapia e doses cumulativas de oxaliplatina era desconhecida [9,10]. As mesmas observações podem ser feitas com o estudo clínico prévio estabelecimento de uma ligação entre a expressão elevada ATP7B e um mau resultado em pacientes de CRC receber quimioterapia baseada em oxaliplatina [11]. Este estudo incluiu apenas pacientes com CCR metastático e características de tratamento não foram mencionados [11].

Tendo em vista a

in vitro

resultados da Yokoo

et al

., Poderíamos esperamos que a expressão da proteína de OCT3 no CRC seria positivamente relacionada com a resposta à quimioterapia [7]. a expressão do gene OCT3 foi significativamente mais elevada em tecidos de CRC do que em tecidos normais, e as células transfectadas com ADNc de OCT3 humana acumulada significativamente mais do que as células de platina vazio do vector transf [7]. No entanto,

in vivo

, a função exata de OCT1, OCT2 e OCT3 na distribuição celular de xenobióticos ainda permanece incerto [20]. PTU são facilitadas difusão transportadores bidirecionais de uma grande variedade de xenobióticos e translocar seus substratos para baixo o gradiente electroquímico através da membrana [20]. Com base na literatura, OCT2 parecia ser expresso no lado basolateral do enterócito, OCT3 no lado apical e OCT1 em ambos os lados [21-23]. Em ratinhos, OCT1 pode facilitar a excreção intestinal de tetraetilamónio a partir do sangue para o lúmen intestinal [24]. Além disso, trabalhos recentes sobre acumulação de metformina e secreção nas glândulas salivares sugerem que OCT3 pode mediar tanto o influxo e efluxo de metformina em glândulas salivares [25]. OCT3 transportador em CRC não metastático poderia participar para o efluxo de oxaliplatina a partir de células de cancro, e, finalmente, diminuir a citotoxicidade de oxaliplatina nestas células cancerígenas. Mas temos de tomar precauções para interpretar todos estes resultados, porque a extrapolação entre os

in vitro Comprar e

in vivo

resultados é aqui contraditória. Seria interessante avaliar em cultura de células e em modelos animais de CRC que expressam transportador OCT3, a distribuição e a citotoxicidade de oxaliplatina, considerando vários expressão ou actividade de OCT3 transportador. Mesmo que estes resultados preliminares devem ser confirmadas, ele poderia ser interessante para discutir a estratégia alternativa para superar a superexpressão OCT3 em pacientes com CCR. O irinotecano (CPT-11) demonstrou uma boa eficácia em cancros colo-rectais metastáticos [26,27] e seria um candidato interessante como um substituto de oxaliplatina, em pacientes com elevada expressão de proteína OCT3. Irinotecano parece ser tanto um substrato e um inibidor da OCT1 [28,29] e nenhuma informação está realmente disponível a respeito de sua interação com OCT3. Da mesma maneira, vários medicamentos, tais como os inibidores da bomba de protões podem inibir o transporte de OCT3 [30], e, por conseguinte, iria ser capaz de aumentar a citotoxicidade de oxaliplatina no CRC.

Algumas críticas podem ser feitas sobre o nosso trabalho. A avaliação quantitativa da expressão dos genes e proteínas em amostras de tumor frescas e análises de correlação seria reforçar os nossos resultados. Da mesma forma, uma vez que 5-FU é também um medicamento chave na quimioterapia CRC, que teria sido interessante para explorar 5-FU e os transportadores de nucleosídeos. Por exemplo, a expressão elevada de humano transportador nucleósido de equilíbrio 1 (hENT1) pode estar relacionado com uma resposta clínica pobre em CRC [31]. Em doentes com resposta, número de ciclos de FOLFOX-4 e doses cumulativas de oxaliplatina foram maiores do que em pacientes não-respondedores (p = 0,004 e p = 0,04, respectivamente). Estas diferenças foram explicadas pelo fracasso do tratamento. Para todos os pacientes, a capacidade de resposta à quimioterapia foi avaliada após 6 ciclos de FOLFOX-4 por tomografia computadorizada. Para os pacientes que não responderam, o protocolo de quimioterapia foi alterada de oxaliplatina para irinotecan (FOLFIRI) e para doentes com resposta e FOLFOX-4 quimioterapia foi mantida até 12 ciclos. Depois disso, nos pacientes que não responderam, tamanhos tumor tendeu a ser maior (PT-respondedores

vs

não-respondedores, p = 0,07) e 3 pacientes deles estavam em um nível metastático. Estes 3 pacientes metastáticos tinha apenas uma metástase hepática e os tumores primários e secundários foram ressecados no mesmo procedimento cirúrgico. análise patológica de cada lesões ressecadas relatou um ressecções R0. Com uma ressecção R0 de toda a doença metastática, a sobrevivência em 5 anos tem sido relatada como sendo tão elevada como 58% [32]. A ressecção de fígado metastático continua sendo a estratégia mais eficaz para alcançar a sobrevida global a longo prazo e a única opção curativa para metástases hepáticas colorretais especialmente com apenas uma lesão metastática [33]. Finalmente, a expressão alta OCT3 neste grupo também poderia estar relacionada com a agressividade ou progressão do câncer, mas a análise multivariada de expressão OCT3 permaneceu significativa independentemente do estatuto TNM de doentes, e nenhuma correlação foi posto em evidência entre OCT3 e Ki-67 expressões .

Conclusão

Este estudo é o primeiro a abordar a relação entre a expressão OCT3 no CRC e resposta FOLFOX-4. Neste estudo clínico retrospectivo, a expressão de OCT3 em tumores foi inversamente relacionada com a resposta à quimioterapia. Maior escala e um estudo prospectivo é necessário para confirmar estes resultados preliminares e mais

in /ex vivo

estudos são necessários para elucidar o papel íntimo de OCT3 na farmacocinética de sais de platina.

Informações de Suporte

S1 Dataset.

doi:. 10.1371 /journal.pone.0148739.s001

(XLSX)

Reconhecimentos

Agradecemos Emmanuel Bourgeois por sua ajuda na coloração imuno-histoquímica