Abstract
Nos últimos quatro anos, Genome-Wide Studies Association (GWAS) identificaram dezesseis polimorfismos de baixa penetrância sobre catorze diferentes loci associados com cancro colorectal (CRC). Devido aos baixos riscos conferidos pela variantes comuns conhecidos, a maioria da herdabilidade no sentido amplo 35% estimado por estudos com gêmeos permanece inexplicado. Recentemente, nosso grupo realizou um estudo de caso-controle por oito Polimorfismos de Nucleotídeo Único (SNPs) em 4 genes CRC. A presente investigação é um follow-up desse estudo. Temos genotipados seis SNPs que mostraram uma associação positiva e realizaram uma meta-análise baseada em oito estudos adicionais compreendendo no total, mais de 8000 casos e 6000 controles. O odds ratio recessivo estimado para um dos SNPs, rs3219489 (MUTYH Q338H), diminuiu de 1,52 no estudo sueco original, para 1,18 na replicação sueco, e 1,08 na meta-análise inicial. Uma vez que o valor de probabilidade resumo correspondente foi de 0,06, decidimos recuperar informações adicionais para este polimorfismo. A incorporação de mais seis estudos resultaram em cerca de 13.000 casos e 13.000 controles. A OU recém-atualizado foi de 1,03. Os resultados do presente estudo grande, multicêntrico ilustram a possibilidade de diminuir o tamanho do efeito com o aumento da dimensão das amostras. heterogeneidade fenotípica, diferencial exposições ambientais, e os padrões de ligação específica população de desequilíbrio pode explicar a diferença observada de efeitos genéticos entre a Suécia e os outros grupos investigados
Citation:. Picelli S, Lorenzo Bermejo J, Chang-Claude J, Hoffmeister H, Fernández-Rozadilla C, Carracedo A, et al. (2013) Meta-Análise de polimorfismos de reparo incompatível dentro do Consórcio Cogent para Colorectal Cancer Susceptibilidade. PLoS ONE 8 (9): e72091. doi: 10.1371 /journal.pone.0072091
editor: Nathan A. Ellis, da Universidade de Illinois em Chicago, Estados Unidos da América
Recebido: 10 Janeiro, 2013; Aceito: 06 de julho de 2013; Publicação: 06 de setembro de 2013
Direitos de autor: © 2013 Picelli et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. Os autores gratos a: a -USC Espanhol Nacional de Genotipagem Center (CEGEN-ISCIII) e os nós UPF, bem como o Tumor Institucional Banco da Fondazione IRCCS Istituto Nazionale dei Tumori, Milão, Itália. O trabalho foi realizado (em parte) no Koplowitz Centro de Esther, Barcelona. Este estudo foi apoiado pelo Instituto de Salud Carlos III, Ministério da Saúde espanhol, (subsídios FIS PI08-1635 e PS09-1037, VM); Programa Cancer Research UK Grant (C348 /A12076) e um Grant Centre a partir do núcleo Charity (MD); CZ: GA CR: GAP304 /10/1286 e CZ: GA CR: GA310 /07/1430 (PV); Hunter Medical Research Institute concessão de pesquisa e Prioridade Centro de Investigação em informações baseadas Medicina (RS); Conselho de Pesquisa Alemão, Ministério Federal Alemão de Educação e Pesquisa (HB, HV); Baden Württemberg Estado Ministério da Investigação, Ciência e Artes (HB); Fondo de Investigación Sanitaria /FEDER (08/0024, 08/1276, PS09 /02368, 11/00219, 11/00681); Instituto de Salud Carlos III (Acción Transversal de câncer), Xunta de Galicia (RHI07 /04 e 08CSA005208PR); Ministerio de Ciencia e Innovación (SAF2010-19273); Asociación Española contra el Câncer (Fundação Científica y Junta de Barcelona); Fundació Olga Torres (CRP), e FP7 chibchas Consortium (AC e SCB); Fondo de Investigación Sanitaria (CP 03-0070 para SCB e PS09 /02368 para CFR). CIBERehd e CIBERER são financiados pelo Instituto de Salud Carlos III. JLB é parcialmente apoiado por uma bolsa da Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, SFB /TRR77, projeto Z2). LL é apoiado por uma bolsa da National Cancer Institute R01 CA136726. SB, JH, WVS e CS foram apoiados pelo Ministério alemão da Educação e Investigação, através do cancro da Rede German National Genome Research Network (NGFNplus) Colon (CCN). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
nos últimos anos de baixo risco alelos comuns têm atraído cada vez mais atenção na pesquisa para o “herdabilidade em falta” no cancro colorectal (CRC). Trata-se da parte da hereditariedade que não pode ser explicado por mutações em genes de alto risco já conhecidos, mas deve, de acordo com estudos individuais, são responsáveis por cerca de 35% [1]. Conhecidos mutações da linha germinativa de elevada penetrância em genes CRC contribuir para menos de 6% dos casos observados [2]. Portanto, grande parte da restante variação hereditária na susceptibilidade genética é provavelmente devido a múltiplas variantes de baixa penetrância, ambos comuns e raras
.
Para dezesseis data variantes comuns foram identificados através de grandes estudos de associação do genoma multicêntricos (GWAS) [3]. Tomados em conjunto, no entanto, eles explicam apenas uma pequena proporção de casos familiares CRC. Embora o risco associado a cada uma dessas variantes é modesto, eles contribuem para a carga da doença, devido à sua alta frequência na população e a possibilidade de atuar em conjunto uns com os outros, o que pode aumentar o risco do indivíduo de desenvolver CRC [4].
neste contexto, alguns anos atrás, tentou avaliar o papel dos oito SNPs em quatro genes CRC já conhecidos (
APC
,
MLH1
,
MSH6 Comprar e
MUTYH
) através de um estudo de associação de caso-controle na população sueca [5]. Estes 8 SNPs tinha sido previamente estudada, mas a sua patogenicidade era desconhecido e que foram assumidos para constituir polimorfismos. Em nosso primeiro estudo várias associações positivas foram detectadas, mas, devido à dimensão limitada da amostra (1785 casos e 1722 controles) [5], os resultados necessários para ser validado em um estudo de acompanhamento.
O presente estudo foi uma iniciativa do consórcio COGENT [4], [6], onde diferentes grupos se ofereceu para estender a genotipagem para outras coortes não suecos para SNPs que mostram associações estatisticamente significativas em pelo menos uma análise do estudo original. Isto restringiu a análise de seis dos oito SNPs originais.
Materiais e Métodos
Ética declaração
Recolha de amostras de sangue e informações clínicas de pacientes e controles foi obtida com consentimento livre e esclarecido, de acordo com os princípios da Declaração de Helsinki. Todos os participantes assinaram termo de consentimento para participar no estudo. O estudo foi realizado de acordo com a legislação sueca da permissão ética (2003: 460) e aprovado pelo Comitê de Ética de Estocolmo Regional Research (DNR 2002: 489).
Mutation triagem
Seis SNPs em quatro genes diferentes CRC foram incluídos na análise: rs459552: T a (
APC
D1822V), rs1799977: a G (
MLH1
I219V), rs1800932: a G (
MSH6
P92P), rs1800935: T C (
MSH6
D180D), rs3219484: G A (
MUTYH
V22M) e rs3219489: G C (
MUTYH
Q338H).
MUTYH
Q338H corresponde a Q324H em nosso primeiro estudo [5]. A nomenclatura SNP foi modificado para atender (veículos pesados) orientações do Genoma Variação da Sociedade Humano, que recomenda o uso de uma sequência de referência representando a maior transcrição teoricamente conhecido. Para
MUTYH
isto corresponde a NM_001128425.1 e NP_001121897.1 de mRNA e proteína, respectivamente [7], [8], [9].
assuntos
Detalhes sobre o número de casos e controles em todos os catorze estudos estão resumidos na Tabela S1. Um SNP, rs459552 (
APC
D1822V), foi genotipados em sete estudos, para um total de 8654 casos e 7731 controles. Quatro SNPs, rs1799977 (
MLH1
I219V), rs1800932 (
MSH6
P92P), rs1800935 (
MSH6
D180D) e rs3219484 (
MUTYH
V22M) foram genotipados em 8 estudos, para um total de 8308 casos e 7434 controles. O SNP com rs número 3219489 (
MUTYH
Q338H) foi genotipados em 13 coortes para um total de 12902 casos e 14602 controles.
Para todos os assuntos DNA genômico foi extraído de sangue periférico por padrão procedimentos. Informações adicionais sobre a localização do tumor, a idade no momento do diagnóstico, gênero e etnia foi recuperado sempre que possível. Fora de 5770 controles com informações etnia, 5647 era de origem caucasiana, sendo na maior parte Africano americanos do resto.
A genotipagem
Em estudos 1, 5, 6, 7, 8, 9 e 10 SNPs foram genotipados utilizando TaqMan SNP Genotyping Assay (Applied Biosystem, Foster City, CA). Genotipagem no estudo 2 e 12 (controlos apenas) foi levada a cabo usando a química Kaspar do K-Bioscience (Hoddesdon, Herts, Reino Unido) (https://www.kbioscience.co.uk/reagents/KASP_manual.pdf), que é um sistema de genotipagem competitiva específica de alelo de SNP por PCR que utiliza FRET quencher oligos cassete. Estudo 3 genotipados com a tecnologia MassARRAY (Sequenom Inc., San Diego, EUA). Estudo 4 genotipados por meio de curvas de fusão da sonda de hibridação fluorescentes, usando o instrumento de luz Cycler (Roche). Estudar 11 genotipados usando Illumina HumanHap 550 Bead Arrays. Estudo 12 foi genotipados por Sanger de sequenciação (apenas casos). Estudos 13 e 14 foram genotipados usando Illumina HumanHap300 e Illumina HumanHap240S.
A análise estatística
Desvios de freqüências genotípicas observadas nos controles das esperadas sob Hardy-Weinberg foram avaliadas por χ
2 testes. Riscos de CRC associados com genótipos foram comparadas pelo odds ratio (OR) com intervalo de confiança (IC) com base em regressão logística correspondente. heterogeneidade estudo foi resumido usando um teste de Mantel-Haenszel, mas assumimos que os estudos eram amostras aleatórias de uma população geral e usou um modelo de efeitos aleatórios para resumir ou estimativas segundo modelos penetrância dominantes, recessivos e aditivos nas meta-análises. Os resultados foram representados por parcelas florestais da seguinte forma: intervalos de confiança para cada estudo individual foram indicados por linhas horizontais, RUP individuais por praças e estimativas de síntese de diamantes com limites horizontais em limites de confiança e largura inversamente proporcional ao erro padrão. Meta-análises foram realizadas utilizando o pacote
rmeta
no ambiente de software livre para computação estatística R.
Resultados
A distribuição dos genótipos nos controles não desviar Hardy equilíbrio -Weinberg em qualquer estudo. Mantel-Haenszel testes identificados estudo heterogeneidade para rs1800932 (
MSH6
P92P) sob recessivo e aditivo de penetrância, com valores de p igual a 0,04 e 0,03, respectivamente (Tabela S2). Isto não constitui um grande problema uma vez que esta SNP não mostraram diferenças entre as distribuições de genótipos de casos e controles, tanto em estudos individuais ou na análise global. heterogeneidade estudo não foi encontrada para qualquer outro SNP. resultados de genotipagem para os 6 SNPs com base em estudos 1-8 são apresentados na Tabela S2.
O único SNP que foi marginalmente significativa na meta-análise foi rs3219489 (
MUTYH
Q338H), ambos com um modelo recessivo (resumo OR IC = 1,08, 95% 1,00-1,17; p = 0,05) e assumindo aditivo efeitos alélicas (resumo OR = 1,07, 95% CI 1,00-1,14; p = 0,06). Atribuímos o resultado combinado principalmente ao estudo sueco, com RUP individuais de (IC 95% = 1,01-1,38, modelo recessivo) 1,18 e (IC 95% = 1,05-1,35, modelo aditivo) 1,19 (Tabela S2). A qualidade do ajuste foi ligeiramente melhor para o recessivo do que para o modelo aditivo, e os modelos recessivos e aditivos superou claramente o modelo dominante.
Em uma tentativa de validar os resultados sob a herança recessiva, montamos colaborações com grupos adicionais e solicitou ao genótipo rs3219489 em seus companheiros. No fim, adicional de 4234 casos e 6800 controles foram incluídos, somando um total de 12232 casos e 13380 controles (Tabela S3).
Atualizamos a meta-análise, uma vez mais, considerando todas as amostras, independentemente da localização do tumor bem como estratificar-los para os tumores do cólon e rectal. Como mostrado na Tabela S4, os dados estavam disponíveis para 4573 cólon e 1774 casos de cancro rectal. Os resultados das meta-análises atualizadas são apresentados na Figura 1. O novo resumo ou para o câncer colorretal foi de 1,03 (95% CI 0,97-1,10, valor de probabilidade 0,25) (Figura 1A). O resumo OR foi praticamente idêntica após ajuste para idade e sexo OR = 1,03 (IC 95% 0,93-1,13). Estudo heterogeneidade não foi notado (P = 0,29, dados não apresentados). O combinado ou para o câncer de cólon foi de 1,07 (IC 95 de 0,99% a 1,16, a probabilidade valoriza 0,09 (OR = 1) e 0,37 (homogeneidade do estudo) (Figura 1B) e para o cancro rectal foi de 1,06 (IC 95% 0,94 a 1,19, valores de probabilidade 0,37 (OR = 1) e 0,31 (homogeneidade estudo)) (Figura 1C).
Discussão
na presente investigação foi realizado um estudo de associação de caso-controle de seis dos oito investigados anteriormente SNPs [5]. Para cinco deles, rs459552 (
APC
D1822V), rs1799977 (
MLH1
I219V), rs1800932 (
MSH6
P92P), rs1800935 (
MSH6
D180D) e rs3219484 (
MUTYH
V22M) amostras foram recuperados a partir de oito estudos adicionais num total de 8308 casos e 7434 controles. Pelo sexto SNP, rs3219489 (
MUTYH
Q338H), que foi selecionado com base em resultados promissores a partir de duas amostras de origem sueca (estudo 8, no presente manuscrito e de referência [5]), criámos um conjunto de dados de replicação ainda maior compreendendo 14 estudos diferentes, com um total de 12232 casos e 13380 controles.
para todos os SNPs incluídos na análise não fomos capazes de confirmar as associações com risco CRC encontrada na população sueca. Em particular, as RUP recessivas de CRC para rs3219489 diminuiu de 1,52 no estudo sueco original para 1,18 no grupo de replicação Sueco, a 1,08 (95% CI 1,00-1,17) no primeiro meta-análise e CI 1,03 (95% 0,97 a 1.10) na meta-análise atualizada (Tabela S2). As RUP sumárias nas prolongados meta-análises foram de 1,07 (IC 95% 0,99-1,16) para câncer de cólon e 1,06 (IC 95% 0,94-1,19) para o cancro rectal, em contraste com os resultados baseados em amostras suecas. A meta-análise atualizada teve poder estatístico de 99% para detectar uma recessivo OR de 1,52 e um poder de 89% para detectar uma recessivo OR de 1,18 (Tipo I taxa de erro de 5% e prevalência de genótipos CC entre os controles de 5,6%). plausibilidade biológica também foi inexistente. MUTYH Q338H é interessante porque representa uma alteração na proteína missense MUTYH, que está envolvido na via de reparação de excisão de bases (BER). Um produto comum de dano oxidativo de 2′-desoxiguanosina é 7,8-di-hidro-8-oxo-2′-desoxiguanosina (OG) [10], [11]. Em células de mamíferos OG foi mostrado ser altamente mutagénico e levando a um aumento da taxa de transversões de G → T, devido às suas propriedades de codificação errada que causam um pareado incorretamente com uma adenina durante a replicação do ADN para formar um OG estável: A falta de correspondência [11], [12]. A via BER desempenha um papel importante na reparação deste tipo de dano ao DNA através da ação do homólogo mutY
MUTYH
, em conjunto com
OGG1
e
MTH1
[11] , [13]. Está bem estabelecido que as mutações bialélicos em
MUTYH
gene introduzir G: a proliferação de células A transvers�s também na polipose adenomatosa coli gene (APC), levando a instabilidade genômica e anormal e dis-regulamentada no: C para T epitélio do cólon [14], [15]. Pacientes com duas mutações no gene
MUTYH
desenvolver a síndrome do
MUTYH
-associated polipose (MAP) [13].
Até o momento, 85 mutações associadas ao MAP diferentes têm verificou [16], espalhados ao longo de todo o comprimento da proteína, mas apenas (incluindo Q338H) mapa dentro de domínios de interacção proteína putativa 3 como revelado pela estrutura cristalina resolvida recentemente de hMUTYH [17]. É tentador especular que Q338H pode afetar essa interação proteína-proteína, mas o suporte experimental adicional é garantido.
Os resultados contrastantes sobre rs3219489 e sua associação com o risco de CRC na sueca em relação a outras populações pode sugerir que o efeito desta variante é específico para a população sueca ou não suficientemente grande nas outras populações de serem detectadas com o tamanho de amostra presente. Por exemplo, o poder estatístico da meta-análise atualizada foi de apenas 43% para detectar uma recessivo OR de 1,10 (Tipo I taxa de erro de 5% e prevalência de genótipos CC entre os controles de 5,6%). Um olhar mais de perto os dados realmente mostra que uma das coortes alemãs (Ester) deu resultados de acordo com os nossos companheiros suecos, com OR = 1,36 (IC 95% 1,00-1,86) para o cancro colorectal (Figura 1A) e OR = 1,61 ( IC de 95% 1,08-2,40) para o cancro rectal (Figura 1C). Isto é provavelmente um resultado espúrio, devido ao pequeno tamanho do que coorte (318 casos e 365 controlos)
.
Por outro lado, de acordo com os resultados suecos, rs3219489 também tem sido mostrado para ser associada com o risco de CRC em três estudos independentes na população japonesa [18], [19], [20] e entre os afro-americanos (Yuan et al., 2ª reunião Insight, Yokohama, Japão, não publicado), apesar de todos estes estudos têm uma dimensão limitada da amostra e os resultados precisam de uma validação adicional.
também é possível que rs3219489 representa uma variante associada ao risco na população sueca em combinação com factores ambientais em sentido lato. Por exemplo, programas de rastreio do CRC na Suécia poderia resultar em um diagnóstico mais cedo na vida, inflando, assim, os OR estimados na Suécia. Outra alternativa é que o polimorfismo está em desequilíbrio de ligação com outras variantes causais não identificados. O marcador e a variante de causalidade poderia estar localizado no mesmo haplotipo risco na população em sueco e em diferentes haplótipos em outras populações.
Independentemente da razão desconhecida para falha de replicação, os resultados do presente estudo mostram claramente a possibilidade de diminuir tamanhos de efeito com o aumento coleções de indivíduos, um fenômeno bem conhecido no campo da epidemiologia genética denominada maldição do vencedor [21]. Deve-se ter em mente que este resultado é bastante esperado em estudos de associação, nomeadamente aqueles que lidam com doenças complexas regionalmente heterogêneos.
Informações de Apoio
Tabela S1. .
Número de casos e controles genotipados nas catorze estudos
doi: 10.1371 /journal.pone.0072091.s001
(DOC)
Tabela S2.
Genótipo contagens e freqüências alélicas para rs459552 (APC D1822V), rs1799977 (MLH I219V), rs1800932 (MSH6 P92P), rs1800935 (MSH6 D180D), rs3219484 (MUTYH V22M) e rs3219489 (Q338H MUTYH). As razões de chances estimadas com intervalos de confiança de 95% para estudos individuais também são mostrados, juntamente com RUP combinados, IC95% e valores de probabilidade para OR = 1 com base em efeitos aleatórios valores do modelo e de probabilidade de homogeneidade estudo sob dominante, aditivo e penetrância recessivo.
doi: 10.1371 /journal.pone.0072091.s002
(DOC)
Tabela S3.
Genótipo contagens e freqüências alélicas para rs3219489 (MUTYH Q338H)
doi:. 10.1371 /journal.pone.0072091.s003
(DOC)
Tabela S4.
Genótipo conta para casos cólon e reto em estudos com a informação disponível sobre a localização do tumor
DOI:. 10.1371 /journal.pone.0072091.s004
(DOC)
Reconhecimentos
Agradecemos a todos os pacientes que participaram deste estudo. Os membros do EPICOLON Consortium (Gastrointestinal Oncology Group da Gastroenterological Association espanhol):
Hospital 12 de Octubre, Madrid: Juan Diego Morillas (coordenador local), Raquel Muñoz, Marisa Manzano, Francisco Colina, José Díaz, Carolina Ibarrola, Guadalupe López, Alberto Ibáñez; Hospital Clínic, de Barcelona: Antoni Castells (coordenador local), Virgínia Piñol, Sergi Castellví-Bel, Francesc Balaguer, Victoria Gonzalo, Teresa Ocaña, María Dolores Giráldez, Maria Pellisé, Anna Serradesanferm, Leticia Moreira, Miriam Cuatrecasas, Josep M. Piqué; Hospital Clínico Universitario, Zaragoza: Ángel Lanas (coordenador local), Javier Alcedo, Javier Ortego; Hospital Cristal-Piñor, Complexo Hospitalar de Ourense: Joaquin Cubiella (coordenador local), M
a Soledad Díez, Mercedes Salgado, Eloy Sánchez, Mariano Vega; Parc de Salut Mar, Barcelona: Montserrat Andreu (coordenador local), Anna Abuli, Xavier Bessa, Mar Iglesias, Agustín Seoane, Felipe Bory, Gemma Navarro, Beatriz Bellosillo; Josep M
a Dedeu, Cristina Álvarez, Marc Puigvehí; Hospital San Eloy, Baracaldo e Hospital Donostia, CIBERehd, Universidade do País Basco, San Sebastián: Luis Bujanda (coordenador local) Ángel Cosme, Inés Gil, Mikel Larzabal, Carlos Placer, María del Mar Ramírez, Elisabeth Hijona, Jose M. Enríquez- Navascués, Jose L. Elosegui; Hospital Geral Universitário de Alicante: Artemio Payá (EPICOLON I coordenador local), Rodrigo Jover (EPICOLON II coordenador local), Cristina Alenda, Laura Sempere, Nuria Acame, Estefanía Rojas, Lucía Pérez-Carbonell; Hospital Geral de Granollers: Joaquim Rigau (coordenador local), Ángel Serrano, Anna Giménez; Hospital General de Vic: Joan Saló (coordenador local), Eduard Batiste-Alentorn, Josefina Autonell, Ramon Barniol; Hospital Geral Universitário de Guadalajara e Fundación para la Formación e Investigación Sanitarias Murcia: Ana María García (coordenador local), Fernando Carballo, Antonio Bienvenido, Eduardo Sanz, Fernando González, Jaime Sánchez, Akiko Ono; Hospital Geral Universitário de Valencia: Mercedes Latorre (coordenador local), Enrique Medina, Jaime Cuquerella, Pilar Canelles, Miguel Martorell, José Ángel García, Francisco Quiles, Elisa Orti; CHUVI-Hospital Meixoeiro, Vigo: EPICOLON I: Juan Clofent (coordenador local), Jaime Seoane, Antoni Tardío, Eugenia Sanchez. EPICOLON II M
a Luisa de Castro (coordenador local), Antoni Tardío, Juan Clofent, Vicent Hernández; Hospital Universitário alemães Trias i Pujol, Badalona e Seção de Doenças Digestivas e Nutrição da Universidade de Illinois em Chicago, IL, EUA: Xavier Llor (coordenador local), Rosa M. Xicola, Marta Piñol, Mercè Rosinach, Anna Roca, Elisenda Pons, José M. Hernández, Miquel A. Gassull; Hospital Universitário Mútua de Terrassa: Fernando Fernández-Bañares (coordenador local), Josep M. Viver, Antonio Salas, Jorge ESPINOS, Montserrat Forné, Maria Esteve; Hospital Universitário Arnau de Vilanova, Lleida: Josep M. René (coordenador local), Carmen Piñol, Juan Buenestado, Joan Viñas; Hospital Universitário de Canarias: Enrique Quintero (coordenador local), David Nicolás, Adolfo Parra, Antonio Martín; Hospital Universitário La Fe, em Valência: Lidia Argüello (coordenador local), Vicente Pons, Virginia Pertejo, Teresa Sala; Hospital Sant Pau, Barcelona: Dolors Gonzalez (coordenador local) Eva romana, Teresa Ramon, Maria Poca, M
a Mar Concepción, Marta Martin, Lourdes Petriz; Hospital Xeral Cies, Vigo: Daniel Martinez (coordenador local); Fundacion Publica Galega de Medicina Xenomica (FPGMX), CIBERER, Genomic Medicine Group-Universidade de Santiago de Compostela, Santiago de Compostela, Galiza, Espanha: Ángel Carracedo (coordenador local), Clara Ruiz-Ponte, Ceres Fernández-Rozadilla, M
a Castro Magdalena; Hospital Universitário Central de Astúrias: Sabino Riestra (coordenador local), Luis Rodrigo; Hospital de Galdácano, Vizcaya: Javier Fernández (coordenador local), Jose Luis Cabriada; Fundación Hospital de Calahorra (La Rioja) La Rioja: Luis Carreño (coordenador local), Susana Oquiñena, Federico Bolado; Hospital Royo Villanova, Zaragoza: Elena Peña (coordenador local), José Manuel Blas, Gloria Cena, Juan José Sebastián; Hospital Universitario Reina Sofía, Córdoba: Antonio Naranjo (coordenador local)
.