Abstract
Objetivos
Para avaliar se genes que codificam cagA- interagindo moléculas (
SRC
,
PTPN11
,
CRK
,
CRKL
,
CSK
,
c-MET
e
GRB2
) estão associados com o risco de câncer gástrico e se uma interação entre esses genes e fitoestrógenos modificar o risco de câncer gástrico
Métodos
na fase de descoberta, 137. SNPs candidatos em sete genes foram analisados em 76 incidentes gástrica casos de câncer e 322 controles pareados do Cancer Cohort coreano multi-Center. Cinco SNPs significativas em três genes (
SRC
,
c-MET
e
CRK
) foram re-avaliado em 386 casos e 348 controles na fase de extensão. odds ratio (OR) para o risco de câncer gástrico foram estimados ajustados para idade, tabagismo,
H. pylori
soropositividade e CagA positividade tensão. RUP resumidos na população total do estudo (462 casos e 670 controles) foram apresentados usando pooled- e meta-análise. As concentrações plasmáticas de fitoestrógenos (genisteína, daidzeína, equol e enterolactona) foram medidos usando o fluoroimunoensaio resolvida no tempo.
Resultados
SRC
rs6122566, rs6124914,
c Met
rs41739, e
CRK
rs7208768 mostrou efeitos genéticos importantes para o câncer gástrico, tanto na meta-análise conjunta e sem a heterogeneidade (em pool OR = 3,96 [IC 95% 2,05-7,65], 1,24 [95 % CI = 1,01-1,53], 1,19 [IC 95% = 1,01-1,41] e 1,37 [IC 95% = 1,15-1,62], respectivamente; meta ou = 4,59 [95% IC 2,74-7,70], 1,36 [95% IC = 1,09-1,70], 1,20 [IC 95% = 1,00-1,44] e 1,32 [IC 95% = 1,10-1,57], respectivamente). alelo risco de
CRK
rs7208768 tiveram um risco significativamente aumentado de câncer gástrico em baixos níveis fitoestrógeno (
p interação Art 0,05).
Conclusões
nossos resultados sugerem que
SRC
,
c-MET
e
CRK
desempenham um papel fundamental na carcinogênese gástrica através da modulação transduções sinal CagA e interação entre
CRK
gene e fitoestrógenos modificar o risco de câncer gástrico
Citation:. Yang JJ, Cho LY, Ko KP, Shin A, Ma SH, Choi BY, et al. (2012) susceptibilidade genética em CagA-Interacting Moléculas e interação gene-ambiente com Fitoestrógenos: um fator de risco putativos para o cancro gástrico. PLoS ONE 7 (2): e31020. doi: 10.1371 /journal.pone.0031020
editor: Deodutta Roy, da Universidade Internacional da Flórida, Estados Unidos da América
Recebido: 30 de novembro de 2011; Aceito: 29 de dezembro de 2011; Publicação: 24 de fevereiro de 2012
Direitos de autor: © 2012 Yang et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. Este estudo foi apoiado por uma bolsa da R Nacional o programa Laboratório de Pesquisa básica (BRL) através da Fundação Nacional de Pesquisas da Coreia do programa D de Controle do Câncer, Ministério da Saúde e Bem-Estar, República da Coreia (0.520.140), e financiado pelo Ministério da educação, Ciência e Tecnologia (2011-0.001.564). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
Helicobacter pylori
(
H. pylori
), um grupo I cancerígena gástrico humano pela Agência Internacional de Investigação do Cancro (IARC) [1], é o mais forte factor de risco no desenvolvimento do câncer gástrico, e persistente
H. pylori
é o primeiro passo para a carcinogênese gástrica [1] – [3]. Apesar das inúmeras evidências de que
H. pylori
desempenha um papel crucial na carcinogênese gástrica, apenas uma pequena parte das pessoas infectadas desenvolvem câncer gástrico. Isto implica que outros fatores envolvidos no mecanismo patogênico da
H. pylori
pode modificar a suscetibilidade individual para o câncer gástrico. Nossos estudos anteriores demonstraram
H. pylori
infecção em si não foi associado com o risco de câncer gástrico mas especificamente CagA positiva
H. pylori
risco aumentado de desenvolver câncer gástrico por 3,57 vezes [4], [5].
associada à citotoxina do gene A (CagA), uma proteína imunodominante secretado pelo
H. pylori
, parece ser um dos factores patogénicos modificadores [6] – [8]. Após infectar
H. pylori
em células epiteliais gástricas, CagA actua como um importante componente cancerígeno e virulento através CagA sequencial via de transdução de sinal. O primeiro passo começa com a interacção entre CagA e diversas proteínas, tais como SRC, SHP2, CRK, CRKL, e CSK após fosforilação e de c-met e GRB2 sem fosforilação [9] – [12]. Tirosina CagA fosforilada pelas quinases da família Src interage com fosfatase SHP2 tirosina (codificada pelo
PTPN11
oncogene), CRK, CRKL e CSK e induz a dispersão celular, dissociação e mortalidade ligada ao desenvolvimento de câncer [8], [12] – [15]. Além disso, CagA não fosforilada interage com c-Met e GRB2 que promove a resposta oncogénica incluindo a proliferação de células e alterações morfológicas, tais como formação colibri [8], [16] – [19]. Esta translocação CagA e sua interação celular com essas proteínas pode ser um passo crucial iniciar na carcinogênese gástrica [9] – [12].
alteração celular no CagA positiva
H. pylori
mecanismo patogênico parece explicar diferente susceptibilidade de câncer gástrico entre os
H. Pylori
pessoas infectadas. Uma vez que as funções celulares pode ser regulada pelos seus genes hospedeiros, variantes genéticas relacionadas com as moléculas que interagem CagA pode ser a chave para o indivíduo susceptibilidade a cancro gástrico. Com base nas diferenças genéticas putativos, a hipótese de que genes que codificam proteínas que interagem com CagA pode modificar o risco para o cancro gástrico. Além disso, nós nos concentramos em fitoestrogênios como modificador de efeito no processo de transdução de sinal CagA. Estudos relataram que fitoestrogénios com propriedades anti-inflamatórias, anti-bacteriana e anti-oxidantes pode inibir
H. pylori
actividade de crescimento celular e cancro gástrico e proliferação [20] – [22]. Especialmente, a genisteína, um dos fitoestrogênios e inibidores de fosfotirosina quinase, é relatado para ser um bloqueador eficaz para a fosforilação CagA [23].
Para avaliar as hipóteses, uma análise genética de dois estágios que incidiu sobre genes que codificam diretamente moléculas CagA vinculativo,
SRC
,
PTPN11
,
CRK
,
CRKL
,
CSK
,
c- MET
e
GRB2
, foi realizado que incluiu: 1) a fase de descoberta que rastreados e identificados polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) com uma associação genética significativo sobre câncer gástrico; 2) a fase de extensão que re-analisados os SNPs mais significativos na fase de descoberta. Além disso, em uma sub-análise, foi avaliada a interação gene-ambiente para determinar se os níveis fitoestrógeno modificou a associação entre polimorfismos de genes que codificam diretamente moléculas de ligação CagA e risco de câncer gástrico.
Métodos
Ética Declaração
os protocolos de estudo foram aprovados pelo Conselho de Hospital Seoul National University (H-0110-084-002 para o estudo KMCC e C-0910-049-297 revisão Institucional para o caso aninhada atual estudo -control) e pela Institutional Review Board do Hospital Universitário de Hanyang (2003-4). Além disso, todos os participantes assinaram um termo de consentimento informado antes de entrar nos estudos.
População do estudo
estudo de associação genética de duas fases foi realizado. A população do estudo caso-controle foi recrutado do coreano Multi-Cancer Center Cohort (KMCC). Informações detalhadas sobre o KMCC é descrito em outro lugar [24]. Resumidamente, os participantes foram recrutados a partir de quatro áreas urbanas e rurais (Hamã, Chungju, Uljin, e Youngil) na Coréia. Informações sobre as características individuais, incluindo estilo de vida geral e exposição ambiental foram coletados por meio de questionários padronizados baseados em entrevistas. Amostras de sangue e urina local também foram coletadas. Todos os participantes foram passivamente acompanhados através de ligações registo informático para o registo nacional do cancro, a certidão de óbito nacional, eo seguro de saúde registros médicos. Os métodos de acompanhamento passivos do KMCC foram relatados para ser altamente eficiente e completo [25].
Em dezembro de 2002, um total de 136 casos de câncer gástrico definido de acordo com a Classificação Estatística Internacional de Doenças e Afins Problemas de saúde 10ª Revisão (CID-10, C16) foram identificados na fase de descoberta. Entre eles, 84 casos exceptuando os casos diagnosticados antes do recrutamento (n = 36) e sem as amostras de sangue (n = 16) foram inicialmente seleccionadas para genotipagem. Quatro controles sem câncer (n = 336) foram combinados para cada caso de câncer gástrico por amostragem densidade de incidência com base na idade (± 5 anos), sexo, zona residencial, e no ano de inscrição. Oito casos e 14 controles foram excluídos devido ao desempenho genotipagem pobres, e assim, 76 casos e 322 controles foram incluídos na fase de descoberta.
Na fase de extensão, foram selecionados 388 com câncer gástrico conjuntos de caso-controle como se segue : 1) 334 casos de câncer gástrico, incluindo 136 casos identificados em 31 de dezembro de 2002, foram apuradas pela KMCC em 31 de dezembro de 2008. Excluindo os casos analisados na fase de descoberta (N = 84) e sem amostras de sangue (N = 51), 199 casos de câncer gástrico foram pareados 01:01 aos controles de acordo com a idade (± 5 anos), sexo e ano de inscrição. 2) 189 casos de câncer gástrico recém-diagnosticados no Hospital Universitário Chungnam e Hanyang University Hospital GURI com o consentimento informado foram recrutados a partir de março de 2002 a setembro de 2006. As amostras de sangue foram coletadas no momento do diagnóstico ou antes da cirurgia de câncer gástrico. Além disso, 189 controles baseados na comunidade pareados por idade (± 5 anos), sexo e ano de inscrição (de 2001 a 2005) foram selecionados aleatoriamente a partir da KMCC. Dos 388 com câncer gástrico partidas de caso-controle, dois casos e 40 controles foram eliminados devido à má genotipagem e insuficiente de amostra e, finalmente, 386 casos e 348 controles foram analisados na fase de extensão.
genes candidatos e seleção SNP
na via de transdução de sinal CagA, CagA, liga-se directamente a sete proteínas que conduzem a processos sequenciais. genes do hospedeiro que codificam as proteínas sete foram selecionados os seguintes: v-Crk vírus do sarcoma homólogo CT10 oncogene (
CRK); v-Crk sarcoma vírus CT10 oncogene homólogo (aviária) -como (
CRKL
); c-Src de tirosina quinase (
CSK
); fator de crescimento de proteínas 2 ligado ao receptor (
GRB2
); Met proto-oncogene (
c-MET
); factor nuclear das células T activadas, proteína tirosina fosfatase, do tipo não-receptor 11 (
PTPN11
) que codifica a tirosina fosfatase SHP2 e v-Src sarcoma (Schmidt-Ruppin A-2) viral oncogene homolog (
. SRC
)
SNPs candidatos foram selecionados de acordo com os três critérios: SNPs relataram ter 1) a possível relevância funcional para o câncer em estudos anteriores; 2) menor freqüência do alelo (MAF) 0,05 na população asiática em bancos de dados públicos, como SNP500Cancer ou o projeto HapMap internacional usando IDs dbSNP (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp); e ao mesmo tempo 3) MAF 0,05 em japonês (JET) no projeto HapMap internacional. Finalmente, 137 SNPs com uma pontuação de design = 1.1 e R
2 0,8 foram genotipados para rastrear os SNPs significativas para o risco de câncer gástrico. 108 SNPs estão localizados na região do intrão; 24 SNPs estão localizados na região promotora (região ou UTR flanqueando); cinco SNPs estão localizados na região de codificação.
A genotipagem
Na fase de descoberta, 137 SNPs em sete genes candidatos que codificam proteínas que interagem CagA foram genotipados. Depois de medir concentrações de ADN genómico para todos os sujeitos de estudo por um espectrofotómetro (NanoDrop ND-1000, NanoDrop Technologies), genotipagem foi realizada utilizando o ensaio ™ GoldenGate (Illumina®, San Diego, CA, EUA). Para garantir o controle de qualidade e avaliar a taxa de concordância intra-sujeito, 52 amostras duplicadas foram distribuídos aleatoriamente na placa de genotipagem. As taxas de concordância para todos os ensaios foram maiores do que 99%. Dos 137 SNPs, 21 SNPs foram lançados para fora devido a uma falha de genotipagem (4 SNPs), taxa de chamada SNP 90% (7 SNPs), HWE 0,0001 (1 SNPs) e MAF ≤0.05 (9 SNPs). Oito casos e 14 controles, também foram excluídos devido a genotipagem taxa de chamada de 90%. Por fim, foram analisados 116 SNPs em sete genes (taxa de genotipagem de 99,6%) em 76 casos e 322 controles
Na fase de extensão, cinco SNPs com uma matéria-
p
valor 0,02, tag SNPs ou pontuações de design mais elevadas (rs6122566 e rs6124914 no
SRC
; rs41739 e rs41737 em
c-MET
; rs7208768 no
CRK
) identificados na análise descoberta foram genotipados utilizando o Illumina Veracode GoldenGate Ensaio com BeadXpress de acordo com o protocolo do fabricante (Illumina®, EUA) [26]. Para assegurar a fiabilidade dos métodos de genotipagem em duas fases, as amostras foram genotipados 188 duas vezes por cada método. A taxa de concordância foi 98,4%. Dois casos e 40 controlos com ADN insuficiente (n = 15) ou a taxa de chamada genotipagem 90% (n = 27) foram excluídos. Finalmente, cinco SNPs em três genes (taxa de genotipagem de 99,6%) foram analisados em 386 casos e 348 controles.
H. pylori
infecção e CagA soropositividade
H. pylori
infecção e CagA soropositividade foram avaliados utilizando o ensaio de immunoblot, Helico Blot 2.1 ™ (MP Biomedicals Asia Pacific, Singapore). Helico Blot 2.1 ™ kits de ter sido relatada a ter alta sensibilidade e especificidade (para sensibilidade, 99% idêntica em ambos; para a especificidade, 98% e 90%, respectivamente). [27]
Medições de biomarcadores Phytoestrogen
As concentrações plasmáticas de quatro biomarcadores fitoestrógeno que eram 1) isoflavonas: genisteína, daidzeína e equol (daidzeína metabólitos) e 2) lignana: enterolactone foram medidos usando kits time-resolved fluoroimmunoassay (LabMaster, Finlândia). Depois de biomarcadores fitoestrogénio livres foram extraídos a partir de 200 mL de amostra de plasma, a VICTOR3 ™ 1420 Multilabel Contador de fluorescência resolvida no tempo medidos (Perkin-Elmer). métodos de medição detalhadas para biomarcadores de fitoestrógenos são descritos em outro lugar [28]. Da população total do estudo, as concentrações plasmáticas dos quatro biomarcadores foram medidos em 406 casos e 417 controles com volume plasmático suficiente ( 200 mL).
A análise estatística
Para comparar as características básicas entre os casos de câncer gástrico e controles, o teste do qui-quadrado e Student
foram conduzidos t-
teste.
P
-Valores pela diferença na proporção de sexo, idade,
H. foram determinados pylori
infecção, CagA e VacA soropositividade, tabagismo, consumo de álcool e história gastrite entre casos e controles.
Hardy-Weinberg (HWE) no grupo controle foi avaliada utilizando o qui quadrado ou o teste exato de Fisher, com um nível de corte de HWE 0,0001. Na fase de descoberta, mínimo global
p
-Valores (
p Art 0,05) no teste da razão de verossimilhança (LRT), com um grau de liberdade (df) no modelo aditivo e LRT com 2 df no modelo genotípica foram calculados para selecionar SNPs significativos. Usando três modelos genéticos, aditivos, modelos recessivos e dominantes, foi analisada a associação entre os SNPs seleccionados e risco de câncer gástrico. Permutado
p
-Valores foram estimadas em 100.000 testes de permutação na análise SNP única. Para evitar associações espúrias com resultados falsos positivos, as corrigida permutated
p
-Valores na condição de múltiplos SNPs ea taxa de descoberta de falsas (FDR), utilizando um método Benjamini-Hochberg foram computados [29]. o risco de câncer gástrico foi estimada como odds ratio (OR) e intervalos de confiança de 95% (IC), utilizando modelo de regressão logística não condicional o ajuste para fatores de risco que foram idade, tabagismo (nunca
vs.
nunca),
H. pylori
infecção (positiva
vs.
negativo) e CagA soropositividade (positivo
vs.
negativo). Além disso, análise de haplótipos foi realizada para os genes que contêm SNPs significativamente associados a partir de uma análise de SNP individual usando Haploview 4.1 software (www.broad.mit.edu/mpg/haploview/).
Na fase de extensão, a mais significativa SNPs identificados na fase de descoberta foram reavaliadas. Com base no aditivo ou modelos recessivos, o risco de câncer gástrico foi estimada como RUP e ICs de 95%, utilizando modelo de regressão logística incondicional ajuste para as mesmas co-variáveis acima mencionadas. Para resumir os resultados da descoberta e as fases de extensão, pooled- e meta-análises foram realizadas. Usando o modelo de efeito fixo, resumiu RUP e ICs de 95% foram computados. Além disso, a heterogeneidade entre os estudos foi avaliada pelas estatísticas Cochran Q [30].
Usando a análise de variância e covariância (ANCOVA) com a idade, tabagismo (nunca
vs.
Nunca),
H. pylori
infecção (positiva
vs.
negativo) e soropositividade CagA (positivo
vs.
negativo) como potenciais fatores de risco para o câncer gástrico, as médias dos níveis fitoestrógeno biomarcadores entre casos e controlos foram comparados. A análise estratificada por altos e baixos níveis de biomarcadores de fitoestrógenos (genisteína, daidzeína, equol e enterolactona), onde os níveis de corte foram determinados pela análise Spline foi realizado utilizando modelos de regressão logística não condicional. Efeitos de interação entre os SNPs mais significativos e biomarcadores de fitoestrógenos também foram calculados como RUP e ICs de 95% ajustados para idade, tabagismo (nunca
vs.
nunca),
H. pylori
infecção (positiva
vs.
negativo) e soropositividade CagA (positivo
vs.
negativo).
Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando software SAS versão 9.2 ( SAS Institute, Cary, Carolina do Norte), e Plink software versão 1.07 (https://pngu.mgh.harvard.edu/purcell/plink) [31]. Meta-análises foram realizadas usando STATA versão 10 (Stata, College Station, TX).
Resultados
Não houve diferença significativa entre casos e controles de acordo com sexo,
H. pylori
, CagA /VacA soropositividade, tabagismo /alcoolismo e os antecedentes de úlcera gástrica nas fases de descoberta e de extensão (p 0,05). CagA /soropositividade VacA ea proporção de fumantes atuais foram significativamente maiores entre os casos de câncer gástrico em dados agrupados (
p
= 0,03,
p Art 0,01,
p
= 0,02, respectivamente) (Tabela S1).
dos 116 SNPs nos sete genes candidatos que codificam proteínas que interagem CagA analisados na fase de descoberta, 22 SNPs em três genes,
SRC
,
c-MET
, e
CRK
, foram significativamente associados com câncer gástrico (
p
-lrt 0,05).
SRC
rs6122566 aumento significativo do risco de câncer gástrico nos modelos recessivos (OR = 4,90, [IC 95% 1,19-14,2]). Treze SNPs que foram rs41739, rs16945, rs41738, rs6566, rs10435378, rs41737, rs2023748, rs41736, rs41735, rs6951311, rs183642, rs2237717 e rs38859 em
gene c-MET
mostrou um efeito dose-gene significativa no linear testes de tendência (
p Art 0,05).
CRK
rs7208768 tiveram um efeito marginalmente significativa dose-gene. 100.000 testes de permutação na análise SNP única mostrou
SRC
rs6122566,
c-MET
rs41739 e
CRK
rs7208768 com o mais significativo permutado
p viajantes – valor em cada gene (
p
permutação = 0,00284,
p
permutação = 0,00989,
p
permutação = 0,01392, respectivamente). A importância marginal da corrigido permutated
p
-valor foi observado para
SRC
rs6122566 (
p
= 0,0918), mas todos FDR
p
-Valores em todos os modelos genéticos não foram significativas (
p Art 0,2). (Tabela S2)
blocos haplótipos foram identificados pela trama LD (Figura S1). O maior bloco foi construído com os SNPs mais significativos, incluindo rs41739, rs6566, e rs41738, mas o omnibus
p
-valor não foi significativa (
p Art 0,05). Quatro blocos definidos pelo
SRC
e um bloco definido pelo
CRK
não apresentaram significância estatística no teste omnibus. Os resultados da análise de haplótipos não apresentam informações além dos resultados de SNP individuais (dados não mostrados).
Na fase de extensão, dois SNPs, rs6122566 e rs6124914, no
SRC
gene e rs7208768 em
CRK
permaneceu significativamente associado com um risco aumentado para câncer gástrico (OR = 4,01, [IC 95%: 1,62-9,96]; OR = 1,30, [95% CI: 1,00-1,70]; OR = 1,33, [IC 95%: 1,08-1,64], respectivamente). As associações entre os SNPs em
gene c-MET
(rs41739 e rs41737) eo risco de câncer gástrico foram atenuadas. Na análise combinada, que incluiu as fases de descoberta e de extensão, a estimativa de risco de
SRC
rs6122566 no modelo recessivo foi significativamente associada com o câncer gástrico, tanto no reunidas e meta-análises (OR = 3,96, [95% CI: 2,05-7,65]; OU = 4,59, [IC 95%: 2,74-7,70], respectivamente). Além disso,
SRC
rs6124914,
c-MET
rs41739 e
CRK
rs7208768 apresentou efeito significativo de doses gene para câncer gástrico em ambas as análises. Não houve heterogeneidade entre as análises (teste de Cochran Q,
p Art 0,05). (Tabela S3)
Entre um total de 823 indivíduos (406 casos e 417 controles) que foram medidos os níveis de plasma dos quatro biomarcadores fitoestrogénio, as concentrações globais de genisteína, daidzeína e enterolactona em casos eram significativamente menores do que os dos controles (genisteína 167,6 nmol /L em casos
vs.
200,2 nmol /L nos controlos ,
p
= 0,0004; daidzeína 91,4 nmol /L em casos
vs
131,6 nmol /L nos controles,
p
. 0,0001; enterolactone 51,0 nmol /L em capas
vs
77,7 nmol /L nos controles,
p
. 0,0001). concentrações plasmáticas globais de equol, um metabólito daidzeína, foram menores nos casos, mas não estatisticamente significativa (50,3 nmol /L para casos
vs
62,2 nmol /L para os controlos;.
p
= 0,0977) . Na análise estratificada de acordo com biomarcadores fitoestrógeno, observou-se uma significativa interação gene-ambiente em
CRK
. alelo risco de
CRK
rs7208768 tiveram um risco significativamente aumentado de câncer gástrico em baixos níveis fitoestrógeno. Especificamente, o alelo A rs7208768 foi associada a um maior risco de câncer gástrico em genisteína baixa, daidzeína, equol e enterolactone e estatisticamente significativa (OR = 1,91, [95% CI: 1,44-2,52] em baixa genisteína; OR = 2,09, [IC 95%: 1,46-3,01] em baixa daidzeína; OR = 1,87, [IC 95%: 1,26-2,78] em baixa equol; OR = 1,77 [IC 95%: 1,10-2,85] em baixa enterolactone). O
p
-interaction foi significativa (
p = 0,0001
,
p
= 0,0013,
p
= 0,0147,
p
= 0,0404, respectivamente) (Tabela S4).
Apesar de análises estratificadas adicionais também foram realizados para detectar uma interacção entre seropositividade CagA e cada efeito do gene para o risco do cancro gástrico, interacções não foram significativas em qualquer um dos três genes,
SRC
,
c-MET Comprar e
CRK
(dados não mostrados).
Discussão
-CagA secretoras
H. pylori
parece desempenhar um importante papel na carcinogênese gástrica através de via de transdução de sinal CagA sequencial. CagA se liga inicialmente para sete componentes proteicos para activar respostas celulares aberrantes que fundamentam o desenvolvimento de câncer gástrico. Uma vez que a função da proteína pode ser regulada pelos seus genes do hospedeiro, genes que codificam para moléculas que interagem CagA pode ser capaz de modificar o risco para o cancro gástrico. Para avaliar esta hipótese, genotipados 137 SNPs em sete genes candidatos e demonstrou que as variantes genéticas do
SRC
(rs6122566 e rs6124914),
c-MET
(rs41739) e
CRK
(rs7208768) foram significativamente associados com o risco de câncer gástrico. Além disso, um efeito interativo de
foram analisados CRK
genética polimorfismo, rs7208768, e quatro biomarcadores fitoestrógeno, a genisteína, daidzeína, equol e enterolactone no risco de câncer gástrico.
SRC, uma proteína não receptora tirosina quinase (TK), parece ser essencial na carcinogénese gástrica. Uma vez injectada em células epiteliais gástricas, CagA sofre fosforilação da tirosina por cinases da família Src [8], [12], [18]. A fosforilação da tirosina de CagA é um passo essencial na determinação do mecanismo de sinalização celular sequencial. Porque alguns CagA interagindo moléculas tais como SHP-2, CRK e CSK só são capazes de responder com CagA fosforilada, SRC pode ser mais importante na influência de outras funções celulares e induzindo o desenvolvimento de câncer gástrico. Além disso, SRC tem sido relatada a desempenhar um papel fundamental na progressão tumoral e metástase e desenvolvimento mediar [32] do cancro. atividade celular da SRC parece ser alterada pelo gene de acolhimento e os nossos resultados indicam que o
SRC
rs6122566 e rs6124914 pode ser modificadores de risco na carcinogênese gástrica.
SRC
variações genéticas que influenciam a capacidade celular em células epiteliais gástricas estão associados com o risco de câncer gástrico.
Apesar da importância atenuada na análise de extensão,
c-MET
que é sinónimo de
HGFR
(receptor do factor de crescimento de hepatócitos) pode ser um gene de risco independente para o cancro gástrico. Numerosos estudos prévios relataram que a c-Met, uma da TK do receptor, promove o crescimento invasivo de tumores, invasão celular, e a mortalidade, e a amplificação e /ou a sobre-expressão de c-Met foi associado a vários carcinoma humanos incluindo cancro gástrico [17], [ ,,,0],33] – [36]. Em termos de c-Met mecanismo celular, CagA desempenha um papel como uma proteína adaptador, Gab, para mediar a sinalização TK do receptor, controlando um conjunto de componentes a jusante para o receptor activado como Grb2, PLCy, e SHP-2 [37], [38]. Por funcionalmente imitando a proteína adaptadora Gab, CagA pode estimular a proliferação e mortalidade das células gástricas epitherial [39] anormal. No presente estudo, um polimorfismo de
c-MET
gene (rs41739) foi significativamente associada com o risco de câncer gástrico e um possível fator suscetível genética no cancro gástrico. Consistente com a importância e função celular,
gene c-MET
parece modificar o risco de carcinogênese gástrica através de via de transdução de sinal CagA.
proteína adaptadora CRK que tem isoformas de splicing, CRK-I ( SH2-SH3) e CRK-II (SH2-SH3-SH3), liga-se à TKS e controla a transcrição e do citoesqueleto reorganização modulação atividades celulares [40]. Além disso, esta proteína adaptadora integra vários sinais celulares e a sua desregulação é ligado ao carcinoma humano [41]. Interacção entre CRK e CagA fosforilada tem sido relatada como sendo um pré-requisito biológico que conduz a alterações morfológicas, espalhamento de células e a desregulação de adesão célula-célula no epitélio gástrico [14]. Vários estudos indicaram que a sobre-expressão de CRK está associado a vários tipos de cancros humanos, incluindo os de pulmão, gástrico e cancro do cólon [42], [43]. Nossos resultados também apoiam o potencial genético de
CRK
rs7208768 no desenvolvimento de câncer gástrico e ambos magnitude genética e celular do CRK.
Mais interessante, interações significativas entre o
CRK
polimorfismo genético e quatro fitoestrógeno biomarcadores, a genisteína, daidzeína, equol e enterolactone, modificado risco de câncer gástrico. Estudos indicaram efeitos protetores de fitoestrogênios em câncer gástrico [20], [28] e, em particular, a genisteína inibiu a cascata de transdução de sinal de ERK induzida por
H. pylori
infecção desempenhando um papel como um inibidor da tirosina-quinase [44]. Considerando CRK é a principal molécula a montante da ativação ERK, as variantes genéticas de risco de
CRK
para ativar a sinalização ERK pode ser bloqueada por fitoestrogênios, e mediar o desenvolvimento de câncer gástrico.
SRC, c-Met e CRK também estão envolvidos na TKs proteína que é uma família de multigenes diversa que controla a via de transdução de sinal celular mediar uma variedade de processos celulares a jusante e desempenha um papel significativo no desenvolvimento de várias doenças clínicas [45], [46]. TK são também conhecidos como oncogenes envolvidos em malignidades humanas. SRC pertence a um TK não receptora e c-Met é um receptor de TK, enquanto CRK é uma proteína adaptadora que se liga a proteínas TK-fosforilados e fortalece as principais proteínas na via de transdução de sinal [41]. Estes três moléculas codificadas pelo
SRC
,
c-MET
, e
CRK
genes podem induzir independentemente diferenciação celular, adesão, morte e as alterações morfológicas por transmitindo sinais celulares relacionadas com as suas actividades TK independentemente de interacção com CagA. Além disso, os genes relacionados com a acção TK parecem desempenhar um papel crucial como um factor susceptível para o cancro gástrico, considerando que a genisteína é um inibidor da tirosina cinase pode reduzir o risco do cancro gástrico [28]. Isso indica que susceptibilidades genéticas de
SRC
,
c-MET
, e
CRK
na carcinogênese gástrica deve ser tratado como fatores de risco independentes que modificam a transdução de sinal celular em TK maneiras dependentes porque as pessoas não infectadas com CagA secretoras
H. Pylori
pode estar em risco para o câncer gástrico dependendo variantes genéticas individuais dos três genes.
Apesar de
PTPN11
,
CRKL
,
CSK
e
GRB2
não mostraram qualquer associação significativa com câncer gástrico no presente estudo, os efeitos genéticos não deve ser esquecido. Ao nível celular, estas moléculas estão significativamente relacionadas com efeitos aberrantes subjacentes a carcinogénese gástrica [12]. Como um dos proto-oncogenes humanos,
PTPN11
codifica fosfatase da tirosina citoplasmática com SHP2 e pode induzir a hiperactivação aberrante da sinalização ERK [47]. Um estudo também relatou que um
PTPN11
variante genética aumentou o risco de atrofia gástrica e câncer entre CagA positiva
H. pylori
pessoas infectadas [48]. Na via de transdução de sinal CagA, CRKL funciona muito semelhante a CRK; CSK frustra uma actividade de quinase família SRC e sinalização CagA-SHP2; e GRB2 actua como um gatilho para activar a via de Ras /MEK /ERK [14], [18], [49]. Novos estudos com um número maior de casos de câncer gástrico e maior cobertura de polimorfismos genéticos nestes genes são garantidos.
carcinogênese gástrica induzida por CagA positiva
H. pylori
pode ser inferido a partir de nossos resultados de estudo e revisão dos mecanismos celulares [16], [18], [47] (Figura S2). Uma vez CagA é injectada em células gástricas ephithelial, SRC inicia fosforilação CagA que interage com a proteína adaptadora CRK e SHP2 para promover a activação de ERK. d.