Abstract

Objetivos

O objetivo do presente estudo é avaliar o desempenho de um de alto risco papilomavírus humano (HR-HPV) teste de DNA com indivíduo HPV-16 /HPV- 18 genotipagem como um método para o cancro do colo do útero Primária triagem em comparação com a citologia em base líquida (LBC) em uma população de mulheres gregas que participam no rastreio do cancro do colo do útero.

Métodos

O estudo, conduzido pela “multicêntrico Helénica vida real rastreio cervical” grupo de estudo (HERMES), envolveu o recrutamento de 4.009 mulheres, com idades entre 25-55, que participaram no rastreio do colo do útero às nove Ginecologia Departamentos na Grécia. Na primeira visita amostras cervicais foram coletadas para LBC e teste HPV utilizando o sistema Roche Cobas 4800. Mulheres com resultados positivos tanto para a citologia ou HPV foram encaminhadas para colposcopia, enquanto as mulheres negativas para ambos os testes serão testadas novamente após três anos. O estudo está em curso e os resultados da primeira exibição rodada são aqui relatados.

Resultados

resultados válidos para o teste citologia e HPV foram obtidos para 3.993 mulheres. A prevalência global de HR-HPV foi de 12,7%, de HPV-16 e 2,7% de HPV-18 1,4%. Daqueles encaminhados para colposcopia, intraepitelial cervical neoplasia grau 2 ou pior (CIN2 +) foi detectado em 41 mulheres (1,07%). No limiar do CIN2 +, citologia [células escamosas atípicas de significado indeterminado (ASC-US) ou pior] e teste de HPV mostrou uma sensibilidade de 53,7% e 100%, respectivamente, sem alterações entre os grupos etários. Citologia e HPV testes mostraram especificidade de 96,8% e 90,3% respectivamente, o que foi aumentada em mulheres idosas (≥ 30) em comparação com os mais jovens (25-29). Genotipagem para HPV16 /18 teve precisão semelhante a citologia para a detecção de CIN2 + (sensibilidade: 58,5%; especificidade 97,5%), bem como para a triagem para colposcopia (sensibilidade: 58,5% vs 53,7% para citologia).

conclusão

o teste de HPV tem muito melhor sensibilidade do que a citologia para identificar lesões cervicais de alto grau com especificidade ligeiramente inferior. teste de HPV com indivíduo HPV-16 /HPV-18 genotipagem poderia representar um método mais preciso para o rastreio do cancro cervical primária em comparação com a citologia em base líquida, especialmente em mulheres mais velhas

Citation:. Agorastos T, Chatzistamatiou K, Katsamagkas t, Koliopoulos L, Daponte A, Constantinidis T, et al. (2015) rastreio primário para Cervical Cancer Based on-Alto Risco Papilomavírus Humano (HPV) Detecção e HPV 16 e HPV 18 Genotipagem, em comparação à citologia. PLoS ONE 10 (3): e0119755. doi: 10.1371 /journal.pone.0119755

Editor do Academic: Xuefeng Liu, da Universidade de Georgetown, Estados Unidos

Recebido: 20 de setembro de 2014; Aceito: 15 de janeiro de 2015; Publicação: 20 de março de 2015

Direitos de autor: © 2015 Agorastos et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel

Financiamento:. os kits de teste cobas HPV e consumíveis para este estudo foram fornecidos pela Roche Diagnostics (https://molecular.roche.com). Não houve outras fontes de financiamento ou as fontes de apoio. Todo o trabalho necessário para o estudo realizado por médicos, parteiras e técnicos foi incorporada em sua prática diária de rotina. Não há custos adicionais necessários a serem cobertos. Roche Diagnostics não desempenhou nenhum papel no desenho do estudo, a escolha de pacientes arrolados, análise e interpretação de dados, ou a preparação ou aprovação de manuscrito

Conflito de interesses:. Os autores leram a política da revista e os autores deste manuscrito têm os seguintes interesses concorrentes: KC e TK tiveram suas despesas de viagem e taxas de dois Congressos (EUROGIN 2012 e EUROGIN 2013) cobertos pela Roche Diagnostics. GK, AD, TC e TCC declararam que não existem interesses conflitantes. TA tem realizado ensaios de investigação parcialmente suportados pelo Vianex /Sanofi Pasteur MSD e teve despesas de viagem para conferências /reuniões /simpósios ocasionalmente Carta cobertos por qualquer Vianex /Sanofi Pasteur MSD, GlaxoSmithKline e Roche Diagnostics. Isto não altera a adesão dos autores para PLoS ONE políticas de dados e materiais de compartilhamento. Todos os autores declaram que não há interesses conflitantes relacionados com o financiador comercial, Roche Diagnostics, em matéria de emprego, consultoria, patentes, produtos em desenvolvimento, os produtos comercializados etc.

Introdução

rastreio generalizado de mulheres com a teste de Papanicolaou tem levado a uma diminuição substancial na incidência e mortalidade por câncer do colo do útero em países onde tem sido sistematicamente implementados [1,2]. No entanto, os programas de rastreio do cancro do colo do útero baseados na citologia apresentaram resultados significativamente piores nos países onde o rastreio não foi implementado de forma sistemática, especialmente nos países em desenvolvimento (https://globocan.iarc.fr/Pages/fact_sheets_cancer.aspx). A baixa cobertura e aderência do paciente, interpretação subjetiva dos resultados, em conjunto com fatores relativos à saúde pública e questões legais, são algumas das possíveis razões para os resultados abaixo do padrão que foram observados no rastreio baseado na citologia [3].

durante o consenso últimas décadas tem sido alcançada a relação directa entre a infecção por HPV e cervical carcinogénese [4,5], e tem sido demonstrado que a infecção por HPV é uma condição necessária para o desenvolvimento da pré-invasivos e invasivos do colo do útero do cancro [ ,,,0],6,7]. Atualmente, mais de 200 tipos de HPV foram identificados e aqueles infectar o colo do útero foram classificados de acordo com seu potencial oncogénico como de alto risco (HR), (ou seja), com provas suficientes para a causa do câncer cervical (16 – o tipo mais potente – , 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 e 59), possível de alto risco, (ou seja) com evidência limitada para a causa do câncer cervical (26, 53, 66, 67 , 68, 70, 73, 82), e não classificável quanto à sua carcinogenicidade para seres humanos (6, 11) [8].

como tipos HR-HPV são detectadas em mais de 99% dos casos de câncer invasivo e na grande maioria dos casos de elevado grau de pré-invasivas, a detecção do HPV pode ser uma alternativa razoável como um teste de rastreio para a detecção de lesões precursoras que progridem para o cancro, se não for tratada. Na verdade, a detecção de tipos HR-HPV é considerada hoje, por muitos, como um melhor método de rastreio do que a citologia [9-15].

Vários estudos têm demonstrado que o rastreio do HPV é mais sensível na detecção de lesões de alto grau de transformação e cancro do que o exame de Papanicolaou [16-20], assim como na prevenção da mortalidade por esta doença [15,21]. Além disso, um resultado negativo em teste de HPV permite um maior intervalo de tempo antes de se repetir o rastreio torna-se necessário, em comparação com um resultado normal de teste de Papanicolau, permitindo o teste menos frequente e aumento da complacência do paciente com programas de rastreio [14,22,23].

a principal desvantagem do teste de HPV como uma técnica de rastreio principal é a incidência relativamente elevada de casos falsos positivos (baixa especificidade). Isto é porque a maioria das infecções por HPV-RH são transientes e não vai resultar em doenças, particularmente em mulheres mais jovens. O risco de isso acontecer depende em parte do tipo de HPV específica [24-26], mas também na genética [27] e /ou fatores ambientais, tais como o fumo do tabaco [28].

Portanto, a melhoria da o desempenho do rastreio do cancro do colo do útero sistemática que é inicialmente baseada em testes de HPV depende da implementação de técnicas de triagem secundários que, no grupo de mulheres HPV-positivos, irá identificar essa sub-grupo de mulheres com um risco especialmente elevado de desenvolver pré lesões invasivos ou invasivos. Uma das abordagens que tem sido proposto é a identificação do tipo de HPV. Mulheres infectadas com HPV16 e /ou HPV18 são mais propensos a desenvolver grau intermediário CIN (CIN2) ou lesões piores do que as mulheres infectadas por outros genótipos de alto risco [29]. De acordo com o grande estudo Portland Kaiser coorte, a probabilidade cumulativa de 10 anos de lesões CIN3 ou pior foi de 17,2% para HPV16 + mulheres e 13,6% para HPV18 + mulheres, mas apenas 3,0% para as mulheres positivas para o HPV de alto risco, mas negativos para HPV16 ou HPV18 [24]. Resultados semelhantes foram relatados para a probabilidade cumulativa de 16 anos do mesmo grupo [30].

Finalmente, antes da implementação do teste HPV como uma ferramenta fundamental no programa de rastreio de um país, o método específico usado para a detecção do DNA do HPV deve ser testado na configuração do país, como o desempenho pode não ser semelhante entre os testes e países. Com efeito, uma meta-análise demonstrou que existe uma considerável heterogeneidade entre os estudos, dependendo tanto da localização geográfica do estudo e do tipo de HPV teste utilizado [31]. Com base nisso, os “HERMES” (Multicêntrico Helénica vida real rastreio cervical) grupo de estudo foi realizado o presente estudo multicêntrico no âmbito de-população em geral preventiva rastreio do cancro do colo do útero na Grécia, tendo como objetivo principal examinar a eficácia ea precisão do o teste Cobas HPV (Roche Molecular Systems, Pleasanton, CA, EUA) como uma técnica primária em comparação com o método estabelecido citológica. O objetivo secundário foi a formulação e avaliação de vários algoritmos de triagem após duas rodadas de triagem. Aqui os resultados da primeira rodada de triagem são apresentados.

Este é o único estudo multicêntrico que avalia o desempenho de uma Food and Drug Administration (FDA) teste de HPV em vários hospitais universitários, hospitais públicos e Família aprovou centros na Grécia.

Materiais e Métodos

Estudo da População

Mulheres com idade 25-55 presentes rastreio cervical de rotina nos ambulatórios de ginecologia nove Departamentos (2 em Atenas, 4 em Salónica, 1 em Larissa, 1 em Patras e 1 em Alexandroupolis) foram convidados a serem incluídos no estudo. Os critérios de exclusão foram gravidez atual, atual ou história prévia de CIN nos últimos cinco anos, o acompanhamento de alterações citológicas e histerectomia.

Desenho do estudo

De abril de 2011 até setembro de 2013 mulheres freqüentando regularmente preventiva procedimentos de rastreio do cancro do colo do útero foram informados da lógica estudo e propósito e solicitado a fornecer consentimento informado por escrito. Em cada visita (triagem redondas) foram coletadas amostras para avaliação citológica inicial. Depois que uma aliquota da amostra restante foi utilizado para testes de ADN de HPV.

O fluxograma do desenho do estudo é apresentado na Fig. 1. O desenho do estudo especifica que as mulheres com os resultados do teste do DNA do HPV e citologia negativa será reanalisada 3 anos após a primeira visita. Mulheres com resultados positivos tanto para citologia (ASCUS ou pior) ou HPV teste de DNA (14hr HPV positivo) submetidos a um exame de colposcopia em cada Departamento de OB /GYN envolvidos. Com a presença de achados anormais colposcópicos, múltiplas biópsias focais e /ou curetagem endocervical (CEC) deve ser tirado. Se não houvesse achados colposcópicos anormais as mulheres serão recordadas para testes e citologia exame de DNA HPV um ano após o teste inicial. No momento da segunda visita se HPV DNA testes e citologia são negativos, as mulheres serão novamente testados 3 anos após a segunda visita, enquanto que, se qualquer um destes testes é positivo, colposcopia /biópsia será realizada.

Este artigo apresenta os resultados da primeira triagem rodada (fase transversal) de um estudo de precisão teste de triagem longitudinal.

Citologia Testing

as amostras foram coletadas usando o especialmente concebido Trident-shaped escova Cervex (Rovers Dispositivos médicos, BV Oss, Holanda) de acordo com as instruções do fabricante. A escova foi rodado cinco vezes, numa direcção dos ponteiros do relógio retirando uma amostra a partir do cérvix externo e interno e cúpulas cervicais. Depois da recolha da amostra, o dispositivo de amostragem do tipo vassoura foi directamente imerso no líquido de recolha (ThinPrep, Hologic, Bedford, MA, EUA). O frasco foi selado hermeticamente, e uma etiqueta de código de barras pré-impresso foi afixada para a identificação da amostra. Uma fração foi utilizada para exame de citologia, enquanto o restante foi transportado dentro de duas semanas para o laboratório onde o teste de DNA do HPV foi realizada.

O exame de citologia esfregaço foi realizado nos laboratórios de citologia correspondentes dos hospitais que colaboraram no estudo como acordo com a prática habitual. Os citologistas não tinham conhecimento dos resultados do teste de DNA do HPV, nem foram os biólogos moleculares dos resultados de citologia. Classificação dos resultados de citologia foi realizada de acordo com a directiva Bethesda de 2001 [32]. resultados positivos, portanto preenchendo os critérios para encaminhamento colposcopia, foram considerados como aqueles classificados como ASCUS ou pior (ASCUS +).

DNA HPV teste

Após a citologia, uma alíquota da amostra coletada foi transportado dentro duas semanas sob um ambiente de temperatura controlada de 2-30 ° C para o Laboratório de Higiene e Protecção Ambiental /Laboratório de Microbiologia da Universidade Demócrito da Trácia em Alexandroupolis, onde HPV teste de DNA foi realizado. As amostras recolhidas foram analisadas para a detecção do genoma de 14 de alto risco do papiloma humano vírus (teste de ADN de HPV) e para a identificação individual de HPV16 /18, utilizando o teste Cobas HPV pela Roche.

O Cobas 4800 HPV PCR master mix inclui iniciadores e sondas com marcação fluorescente para detectar o DNA de 14 tipos de alto risco (HR) de HPV (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 e 68) e beta-globina humana, o qual actua como uma medida da celularidade humana na amostra. Especificamente, o teste Cobas HPV emprega iniciadores que amplificam uma região de aproximadamente 200 pares de bases dentro da região polimórfica da L1 do genoma de HPV. O sinal de fluorescência a partir de doze tipos de RH de HPV (12HR HPV) (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 e 68) é detectado usando o mesmo marcador fluorescente, enquanto que o HPV 16 , sinais de HPV 18 e beta-globina são detectados com três marcadores fluorescentes espectralmente distintas separadas, respectivamente. Os comprimentos de onda individuais distintas que caracterizam cada etiqueta permitir a genotipagem simultânea de HPV 16 e HPV 18 amplicon separadamente dos outros doze tipos de RH.

Colposcopia e exame histológico

De acordo com o desenho do estudo, as mulheres encontraram positiva tanto para citologia ou DNA HPV teste foi submetido a colposcopia em cada Departamento de OB /GYN envolvido, por um especialista experiente. Além disso, 106 mulheres selecionadas aleatoriamente, com resultados de citologia normais e um teste de DNA HPV negativo foram encaminhadas para colposcopia (2,6% do total de pacientes que tomam parte na primeira triagem e volta). Com a presença de Código 1-3 anormal ou suspeita de invasão achados colposcópicos -ASSIST colposcopia [33] correspondente à terminologia colposcópicos de 2011 da Federação Internacional de Patologia Cervical e Colposcopia [34] -, múltiplas biópsias focais e /ou ECC foram tomadas a partir da área anormal do colo do útero. CEC, foi realizada no caso da zona de transformação invisível. Se os resultados /ECC biópsia eram normais, as mulheres foram convocados para os testes de DNA HPV e exame de citologia após um ano. Se a biópsia revelou lesões CIN1, as mulheres foram reexaminados após 6 meses. No caso de a biópsia revelou lesões CIN2 ou pior (CIN2 +), os pacientes foram imediatamente encaminhados para tratamento. O objectivo primário do estudo foi o diagnóstico histológico de CIN2 ou pior, e, como mencionado, essas mulheres foram oferecidos tratamento e saiu do estudo. Após o tratamento, quando dois resultados diferentes de histopatologia foi obtido [i.e. a partir das biópsias /ECC e da excisão ampla da zona de transformação (LLETZ) ou conisation], o mais grave dos dois valores obtidos foi considerada como diagnóstico final. histologia foi realizado em cada um dos hospitais que colaboraram, e os patologistas estavam cientes da citologia e colposcopia resultado, mas não do resultado do teste de DNA HPV. achados patológicos (CIN de qualquer grau) foram independentemente re-avaliada por um patologista especializado independente. Se houvesse consenso no diagnóstico, as amostras não foram reexaminadas. Se o consenso não foi alcançado após o segundo exame, um terceiro patologista especializado independente analisou o espécime em questão, para que no final a dois dos três decisão foi tomada.

Análise Estatística

O objetivo de triagem é a detecção de lesões CIN2 ou pior. Para 80% validade estatística e um nível de significância estatística p = 0,05, 44 casos de CIN2 + são necessárias a fim de detectar de forma fiável um aumento na sensibilidade de 75% para 96%. Usando uma prevalência calculado de 1,1% para CIN2 + [19,35], o número necessário de mulheres seria de aproximadamente 4.000 por triagem rodada.

Os seguintes índices de precisão de diagnóstico com intervalos de confiança de 95% (IC) foram calculados para LBC e teste HPV: sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo (VPP), valor preditivo negativo (VPN), razão de verossimilhança positiva (PLR) e razão de verossimilhança negativa (NLR). Para LBC dois limites de positividade foram examinados (ASCUS + e LSIL +). A partir do teste de HPV resulta os índices de precisão de positividade para 14 tipos, de positividade para os tipos 16 18 e do tipo de 16 anos só foram calculados. Os índices de precisão da combinação de positivo LBC (ASCUS +, LSIL + ou HSIL +) e HPV 16 e só HPV16 ou HPV18 positividade também foram calculados. Para além dos valores relativos dessas variáveis, a verificação dos valores de especificidade e sensibilidade absolutos foi corroborada por colposcopia aleatória de 2,6% das mulheres envolvidas no estudo, independentemente dos seus resultados do rastreio.

Todas as análises foram realizadas para toda a população do estudo e separadamente para as mulheres 25-29 anos e para as mulheres de 30 anos ou mais, bem como para as mulheres de diferentes faixas etárias. Isso foi feito, a fim de avaliar as diferenças na precisão do diagnóstico, principalmente para testes de HPV em idosos contra as mulheres mais jovens. Os índices de precisão de diagnóstico entre os testes foram comparados com base da sobreposição dos seus intervalos de confiança de 95% e com o teste de McNemar. riscos relativos para abrigar CIN2 + foram calculados para o teste de HPV e o estado citologia usando tabelas quádruplas [36,37]. Todas as análises foram realizadas com SPSS 22.0 software estatístico (IBM Co., Nova Iorque, Estados Unidos).

declaração Ética

O protocolo do estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Universidade Aristóteles de Salónica . (Número do protocolo A13719 /31.08.2010). Nosso método envolve a coleta de dados de mulheres que consentem anónimos. Uma folha de dados do paciente é preenchido pelo médico /parteira para cada mulher inscritos. Esta folha é acompanhado por uma folha de informações do paciente, que cada mulher lê e sinais que dão o seu consentimento informado por escrito. Um único código de barras é então atribuído a cada participante, que acompanha a sua amostra. Se a mulher escolhe não participar seus detalhes encontro não são gravadas. Os investigadores são convidados a não dar autorização por escrito ao organismo de investigação, pois isso impede recrutou mulheres de permanecer anônimo.

Resultados

Os centros colaboradores recrutados 4.009 mulheres que preencheram os critérios de elegibilidade. A idade média das mulheres foi de 39,9 anos (desvio padrão 9.01), ea grande maioria deles eram mulheres brancas em idade reprodutiva. Aproximadamente 80% das mulheres tinham idade superior a 30 anos e 13,8% estavam na pós-menopausa. A maioria das mulheres (90%) tinham sido submetidos a triagem de citologia cervical nos últimos 5 anos, e 77% deles eram fumantes. Apenas 4% das mulheres relataram ter iniciado a vacinação contra o HPV, que estava previsto desde a vacinação HPV foi aplicado na Grécia em 2008 e foi fornecido gratuitamente para as mulheres até a idade de 26. O demográfica completa, bem como características clínicas da população do estudo são apresentados na Tabela 1.

das 4009 mulheres, 16 foram excluídos ou porque eles não têm um LBC ou um teste de HPV realizada. Dos restantes 3.993 mulheres, 604 foram encaminhados para colposcopia com base em uma citologia anormal (ASCUS ou pior, N = 210) ou por causa de resultado positivo 14hr HPV com negativo para lesões intraepiteliais ou malignidade (NILM) citologia (N = 394) . No entanto, devido a várias razões (não-disponibilidade, imigração, indisposição) colposcopia não foi realizado em 150 mulheres, de modo que a análise final incluiu 454 mulheres que foram submetidas a colposcopia. Além disso, 106 (2,6%) mulheres com citologia NILM que testou HR-HPV negativo foram aleatoriamente designados a passar por colposcopia para ajustar o viés de verificação. Em 93,4% (99/106) destas mulheres os resultados colposcópico estavam dentro dos limites normais [33]. Para os restantes 7 mulheres com impressão colposcópicos anormais, as biópsias realizadas mostraram em apenas um caso de lesão intraepitelial de baixo grau (CIN1), (ou seja) não CIN2 ou lesão pior foi perdido por um ou outro teste de DNA HPV ou citologia.

as exclusões /os ausentes e os resultados após a primeira exibição rodada são dadas na STARD [38] (Normas para o Relatório de diagnóstico por Precisão) fluxograma, que é mostrado na Fig. 2. Do finalmente incluiu 3.993 mulheres que tiveram ambos os testes, os resultados LBC foram NILM em 3783 (94,7%), ASCUS em 118 (2,9%), LSIL em 77 (1,9%) e HSIL ou ASC-H em 15 (0,4 %). Os resultados do teste do HPV foram positivos em 507 mulheres de 3993 (12,7%), dos quais 109 (2,7%) foram positivos para o HPV 16, e 55 (1,4%) para HPV 18. Havia 41 casos de CIN2 ou pior finalmente diagnosticados por histologia (27 CIN2 e CIN3 14). A prevalência de CIN2 + foi de 1,07%. O diagnóstico final estratificada pelo rastreio do resultado do teste é dado na Tabela 2.

Entre as 3.783 mulheres com citologia NILM a prevalência da infecção 14hr HPV foi de 10,4% ea prevalência de HPV 16, 18 e os outros tipos de HPV 12HR foi de 1,3, 0,6 e 7,3%, respectivamente, mostrando em todos os grupos etários uma tendência decrescente com o aumento da idade, como um sinal indireto de infecção pelo HPV transiente (Tabela 3). Na medida em que o grupo de mulheres com citologia positiva (ASCUS ou pior) está em causa, a prevalência de HPV foi de 53,6, 36,2, 6,2 e 1,9% em qualquer um dos tipos de alto risco 14, para os tipos de HPV 12 de alto risco, para de HPV 16 e HPV 18, respectivamente (Tabela 3). Neste grupo de mulheres uma diminuição na prevalência dos respectivos tipos de HPV é observado pela primeira vez após a idade de 39 anos, com a excepção de HPV 18 -, um sinal indirecta da persistência da infecção por HPV, como uma causa provável da citologia anormal.

risco absoluto de CIN2 ou pior por resultado do teste HPV

As mulheres positivas para DNA de HPV com citologia normal tiveram um risco aumentado de abrigar CIN2 ou pior. O risco global estimado absoluto para NIC 2 ou pior em mulheres NILM que foram positivos para HPV, variou de 3,1 (IC 95% 1,4-6,5) para 12 HR positividade HPV para 15,0 (CI 7,5-27,1 95%) em mulheres que eram positivos para o HPV 16 (Tabela 4). Essas mulheres como previsto tiveram o maior risco, seguidos por mulheres positivas para o HPV 16 ou 18 [(IC 95% 7,6-23,2) 13,8] e mulheres positivas para o HPV 18 apenas [12,9 (IC 95% 4,2-30,8)]. O risco global de 14 HR positividade HPV apresentou um ligeiro aumento, como as mulheres ficou mais velho. Este também foi o caso para o subgrupo de HPV 16 ou 18 mulheres positivas, bem como para as 12 mulheres HR HPV positivos. No que diz respeito HPV 16 única, o aumento do risco para o desenvolvimento de CIN2 ou pior observadas em mulheres entre os 30-39 anos de idade, em comparação com mulheres 25-29 foi seguido por uma diminuição para mulheres com 40 anos ou mais.

no que diz respeito as mulheres com citologia alterada resultar uma tendência semelhante para o impacto de positividade HR HPV no risco de desenvolvimento de CIN2 + é observado. Isto é, o risco absoluto global para CIN2 + para mulheres com ASCUS ou pior citologia variou de 15,6 (8,1-27,3 CI 95%) de 45,4 (18,1-75,4 IC 95%) para mulheres positivas para HPV 12 e RH para HPV 18, respectivamente. Mulheres positivos para o HPV 16 apresentaram um risco mais elevado com o aumento da idade (Tabela 4).

O risco relativo de CIN2 ou pior por resultado do teste HPV

A positividade para um tipo específico de HPV desempenha um papel importante no risco de desenvolvimento de alterações cervicais. O risco relativo de NIC 2 ou pior por status HPV em mulheres com idade entre 25-29 anos ou ≥30 anos com NILM, bem como com anormal (ASCUS ou pior) a citologia são fornecidos na Tabela 5. A inexistência de 14hr falso-negativo resultados HPV faz o cálculo do risco relativo de HPV resultados diferentes em comparação com + 14hr HPV resultados negativos impossíveis. No entanto, o risco relativo de NIC 2 ou pior foi maior em mulheres com citologia normal encontrado para ser HPV16 positiva em comparação com HPV16 mulheres negativos em ambos os grupos etários. No grupo das mulheres com NILM citologia, mas também entre as mulheres com citologia anormal (ASCUS ou pior), este risco foi ligeiramente maior nos mais velhos em comparação com mulheres mais jovens [NILM: RR: 47,5 (IC 95% 16,2-139,0) vs 32,7 ( IC 95% 6,2-172,7) e ASCUS ou pior: 5,8 (IC 95% 2,2-15,1) vs 1,2 (IC 95% 0,3-5,1), respectivamente]. Em contraste, o risco relacionado com o HPV18 para CIN2 + entre estes dois grupos etários de mulheres foi quase semelhante e, além disso, entre as mulheres jovens com citologia alterada foi maior do que a relacionada com o HPV16 [7,0 (IC 95% 2,4-20,5) vs 1.2 (95% CI 0,3-5,1)].

o desempenho dos testes

o desempenho de cada teste ou a combinação dos testes foi avaliada pelo cálculo da sensibilidade, especificidade, positivo e negativo razão de verossimilhança, e valor preditivo positivo e negativo. Esta análise foi realizada para toda a população do estudo para a CIN2 limiar doença + ou CIN3 +, bem como para as mulheres 25-29 anos e ≥ 30 anos de idade separadamente para a CIN2 limiar doença + somente.

Todos os casos de CIN2 + foram positivos para o teste Cobas HPV, por conseguinte, no limiar de teste CIN2 + HPV tinha uma sensibilidade de 100% (95% IC 91,4% -100,0%), que foi mais elevada do que a sensibilidade da citologia [ASCUS +: 53,7% (95% IC 37,4% – 69,3%)] para um grau estatisticamente significativo (

P

0,05). A diferença de sensibilidade (ASCUS + teste de HPV citologia-14hr) foi (IC 95%: -0.61–0.30) -0.46. Em contraste, a especificidade da citologia [ASCUS ou pior: 96,8% (95% IC 96,2% -97,4%), LSIL ou pior: 98,8% (95% IC 98,4% -99,1%)] foi significativamente mais elevada do que a especificidade de HPV teste [90,3% (IC 95% 89,3% -91,2%)] (

P Art 0,05). A diferença especificidade (ASCUS + teste de HPV citologia-14hr) foi (IC 95%: 0,06-0,08) 0,07. Testes para os tipos 16 18 só tinha índices de acurácia diagnóstica semelhantes aos de citologia. Positividade para a combinação dos dois testes (co-teste), que é positividade para qualquer ASCUS + ou teste de HPV 14hr, resultou em especificidade reduzida (Tabela 6).

No limiar do teste CIN3 + HPV tinha uma sensibilidade de 100% (95% IC 76,8% -100,0%), que foi mais elevada do que a sensibilidade da citologia [ASCUS +: 64,3% (95% IC 35,1% -87,2%)], mas a diferença não atingiu significância estatística. A diferença de sensibilidade (ASCUS + teste de HPV citologia-14hr) foi (IC 95%: -0.61–0.07) -0,36. Em contraste, a especificidade da citologia [ASCUS +: 96,5% (95% IC 95,9% -97,1%), LSIL +: 98,6% (95% IC 98,2% -98,9%)] foi significativamente mais elevada do que a especificidade do teste de HPV [89,7% (IC 95% 88,7% -90,6%)] (

P Art 0,05). A diferença especificidade (ASCUS + teste de HPV citologia-14hr) foi (IC 95%: 0,06-0,08) 0,07. O teste para o tipo 16 só tinha índices de acurácia diagnóstica semelhantes aos de citologia. Testes para os tipos 16 18 apenas tinha, pelo menos, igual a precisão em comparação com citologia para CIN3 + mas não num grau estatisticamente significativo. A combinação dos dois testes (ensaios de co-) resultou novamente em especificidade reduzida (Tabela 6).

Com a excepção de testes de 14 horas de HPV, que tem uma sensibilidade de 100% em ambos os casos, a alteração do limiar a partir de CIN2 CIN3 + a + conduziu a um aumento da sensibilidade e valor preditivo negativo para todos os testes examinados. O maior aumento de sensibilidade, a partir de 58,5% (95% IC 42,1% -73,7%) para 78,6% (IC 95% 49,2% -95,3%), observou-se para o HPV 16 ou 18 de positividade. DCP foi ligeiramente aumentado, se o limiar foi CIN3 + em todos os testes para além de positividade para os tipos de HPV 14 horas, e NLR bem como PPV marcadamente diminuída. Comparação entre o diagnóstico do teste cobas HPV à citologia com o teste de McNemar revelou uma diferença estatisticamente significativa (

P Art 0,0001).

A adição de teste de HPV resultou em 188% a mais referências colposcopia do que a citologia isolada (210 casos com ASCUS + vs 604 casos com ASCUS + e /ou 14hr HPV positivo), mas também em 86% mais casos de CIN2 + detectados (22 casos com ASCUS + vs 41 casos com ASCUS + e /ou 14hr HPV positivo) . O número de colposcopies necessários para detectar um CIN2 + após uma citologia positiva ou testes 14hr HPV positivo ou ambos (co-teste) foi de 11,1 [41 CIN2 + detectada após a realização de 454 colposcopies (454/41)], ao passo que o respectivo número de HPV 14hr teste sozinho foi de 10,0 (409/41) e para citologia (ASCUS +) sozinho foi de 6,4 (141/22).

infecção por HPV em geral, e especialmente as infecções por HPV assintomáticos ou transitórios são mais comuns nos grupos etários mais jovens comparados a mais velha, enquanto o oposto é o caso para a prevalência de lesões cervicais de alto grau (NIC 2 ou pior) [39,40]. Por conseguinte, duas análises separadas foram realizadas relativo aos índices de precisão de teste para a detecção de lesões CIN2 ou piores. A primeira análise envolveu mulheres de 25 a 29 e as segundas mulheres de 30 a 55 anos (Tabela 6). Em geral, a sensibilidade de qualquer teste de DNA de HPV ou citologia não mostram uma diferença estatisticamente significativa entre mulheres jovens e idosos, ao passo que o oposto é observado para a especificidade, que aumentou para todos os testes realizados em mulheres mais velhas. A especificidade do teste HPV cobas foi significativamente maior no grupo de mulheres ≥30 anos em comparação com mulheres mais jovens [92,5% (IC 95% 91,6% -93,4%) vs 79,1% (IC 95% 75,7% -82,2%)], mas permaneceu significativamente mais baixa do que a citologia [97,7% (IC 95% 97,1% -98,1%)]. Como esperado, um aumento estatisticamente significativo em DCP foi observado em mulheres mais velhas, referentes a todos os testes. É digno de nota que, em relação PLR, a ligeira superioridade da detecção do HPV 16/18 em comparação com citologia positiva (ASCUS +) torna-se mais acentuada em mulheres mais velhas. Alterando o aparecimento de rastreio de 25 a 30 anos de idade, não influencia a sensibilidade dos diferentes ensaios, no entanto, é interessante que tanto, a especificidade e a RVP de teste do HPV (14hr HPV) são significativamente aumentadas [90,3% (95% Cl 89,3% -91,2%) vs 92,5% (95% IC 91,6% -93,4%) e 10,3 (95% CI 9,4-11,4) vs 13,4 (IC 95% 11,8-15,1), respectivamente]. No que diz respeito a citologia um aumento desses dois índices de precisão também foi notado, no entanto, não a um grau estatisticamente significativo.

Finalmente, a Tabela 7 resume sensibilidade, PPV, RR e LR para várias combinações de HPV 16/18 genotipagem e LBC