Abstract

Fundo

células-tronco cancerosas (CSCs) hipótese afirma que apenas um pequeno subconjunto de células dentro de um tumor é capaz de ambos iniciação do tumor e sustentação. O epitelial-mesenquimal de transição (EMT) é um programa de desenvolvimento embrionário, que é muitas vezes activado durante a invasão e metástases de cancro. O objetivo deste estudo é lançar luz sobre a relação entre EMT e CSCs usando linha de células de câncer de pulmão primário LC31.

Materiais e Métodos

linhas A549 e celulares LC31 foram tratados com 2 ng /ml TGF-1 por 30 dias e 80 dias, respectivamente. Avaliar EMT, alterações morfológicas foram avaliadas por microscopia de luz, imunofluorescência e citometria de seguir marcadores: citoqueratinas, e-caderina, CD326 (marcadores epiteliais) e CD90 e vimentina (marcadores mesenquimais). Além disso, a RT-PCR para Slug, foram realizadas torção e genes de p-catenina. Em TGF-1 linhas celulares LC31 tratados e não tratados, foram realizados testes stemness como o crescimento pneumospheres e haste marcadores expressão como Oct4, Nanog, Sox2, c-kit e CD133. Western Blot para CD133 e ensaios de tumorigenicidade usando NOD /SCID foram realizadas.

Resultados

TGF-1 tratados linha de células LC31 perdeu sua morfologia epitelial assumindo uma aparência de fibroblastos-like. Os mesmos resultados foram obtidos para a linha celular A549 (como controlo). Imunofluorescência e citometria mostrou-regulação de vimentina e CD90 e para baixo-regulação da cytocheratin, e-caderina e CD326 no TGF-1 linhas celulares LC31 e A549 tratadas. Slug, Twist and β-catenina transcrições m-RNA foram regulados positivamente em TGF-1 linha celular LC31 tratada confirmando EMT. Esta linha de células mostrou também sobre-expressão de Oct4, Nanog, Sox2 e CD133, todos os genes de stemness. Além disso, em TGFp-1 linha celular LC31 tratada, uma maior capacidade de formação de tumores e pneumosphere formadoras de capacidade em ratinhos NOD /SCID foram detectáveis.

Conclusões

A indução de TGF-p por EMT -1 exposição, em primários de pulmão linha celular de cancro resulta na aquisição de perfil mesenquimais e na expressão de marcadores de células estaminais

citação:. PIROZZI L, V Tirino, Camerlingo R, R Franco, La Rocca a, liguori E, et al. (2011) epitelial para mesenquimal Transição por TGF-1 Indução Aumenta Características stemness em pequenas células Linha Non primária Cell Lung Cancer. PLoS ONE 6 (6): e21548. doi: 10.1371 /journal.pone.0021548

editor: Sumitra Deb, Virginia Commonwealth University, Estados Unidos da América

Recebido: 05 de abril de 2011; Aceite: 1 de junho de 2011; Publicado: June 30, 2011