Abstract
Fundo
O objetivo deste estudo foi determinar a incidência e significado clínico-patológico de
c-MYC
gene copy-número (GCN) ganho em pacientes com câncer colorretal primário (CRC).
Métodos
O
c-MYC
GCN foi investigado em 367 pacientes CRC consecutivos (coorte 1) usando prata dual-cor
in situ
hibridização. Além disso, para avaliar a heterogeneidade regional, que examinaram o tecido CRC de 3 sites, incluindo o cancro primário, metástases à distância, e metástases do nó de linfa em 152 pacientes com CCR avançado (coorte 2).
KRAS
exons 2 e 3 foram investigados para mutações.
Resultados
Na coorte 1,
c-MYC
amplificação do gene, definida por um
c-myc
: centrómero de cromossoma 8 rácio ≥ 2,0, foi detectada em 31 (8,4%) de 367 pacientes. A
c-MYC
ganho de GCN, definida por ≥ 4.0
c-MYC
cópias /núcleo, foi encontrada em 63 (17,2%) pacientes e foi associada com mau prognóstico (
P
= 0,015). A análise de regressão multivariada de Cox mostrou que a taxa de risco para
c-MYC
ganho de GCN foi de 2,35 (95% de intervalo de confiança, 1,453-3,802;
P Art 0,001). Em um subgrupo de estágio II-III pacientes com CCR,
c-MYC
GCN ganho foi significativamente associada com mau prognóstico por univariada (
P
= 0,034) e multivariada (
P
= 0,040) analisa.
c-MYC
superexpressão da proteína foi observada em 201 (54,8%) dos 367 pacientes e fracamente correlacionados com
c-MYC
ganho de GCN (ρ, 0,211). Na coorte 2, o
status genético c-MYC
era heterogéneo em pacientes avançados CRC. A discordância entre o ganho de GCN no tumor primário e ou metástases à distância ou linfonodo foi de 25,7% e 30,4%, respectivamente. A frequência semelhante para
c-MYC
ganho de GCN e amplificação foi observada em pacientes com CCR com tanto do tipo selvagem e mutante
KRAS
.
Conclusões
c-MYC
ganho de GCN era um fator independente de mau prognóstico em pacientes CRC consecutivos e no estágio II-III subgrupo. Nossos resultados indicam que o estado de
c-MYC
pode ser útil para predizer os resultados dos pacientes e para o gerenciamento de pacientes com CCR
Citation:. Lee KS, Kwak Y, Nam KH, Kim DW , Kang SB, Choe L, et ai. (2015)
c-MYC
Copy-número de ganho é um fator independente prognóstico em pacientes com câncer colorretal. PLoS ONE 10 (10): e0139727. doi: 10.1371 /journal.pone.0139727
editor: Andreas Krieg, Heinrich-Heine-University e University Hospital Duesseldorf, Alemanha |
Recebido: 24 de maio de 2015; Aceito: 15 de setembro de 2015; Publicação: 01 de outubro de 2015
Direitos de autor: © 2015 Lee et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel e seus arquivos de suporte de informação
Financiamento: Esta pesquisa foi apoiada por uma bolsa da Coréia Saúde Tecnologia R D Projeto através do Korea Institute Indústria Saúde para o Desenvolvimento (KHIDI), financiado pelo Ministério da. Health Bem-estar, República da Coreia (número de concessão: HI14C1813, https://www.khidi.or.kr/eps). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
O
c-Myc proto-oncogene
codifica um factor de transcrio que desempenha um papel central na proliferação celular, diferenciação, apoptose, metabolismo, e sobrevivência [1, 2]. Pode promover a tumorigénese em uma variedade de malignidades humanas [3, 4].
c-MYC
alteração ocorre através de vários mecanismos, incluindo translocação cromossômica, a amplificação do gene, e perturbação de vias de sinalização a montante [5, 6]. Gene copy-número (GCN) ganho ou amplificação é o mais comum
c-MYC
alteração em tumores sólidos [7].
No entanto, poucos estudos examinaram as implicações clínico-patológicas de
c-MYC
estado câncer colorretal (CRC). Relatórios anteriores demonstraram que a in
c-myc
ganho GCN em CRC é encontrada em cerca de 10% dos pacientes [8]. Um estudo recente relatou que várias amplificações significativas foram focados no cromossomo 8, incluindo a região 8q24 que contém
c-MYC
, e sugeriu que
c-MYC
foi um novo marcador para a doença agressiva em CRC [9]. No entanto, mais recentemente, Christopher
et al
. dados reportados obtidos por imuno-histoquímica (IHQ), indicando que a sobre-expressão da proteína c-MYC foi significativamente associada com melhor prognóstico em pacientes CRC [10]. Consequentemente, o valor prognóstico da
c-Myc
alterações no CRC é controversa.
Recentemente, o leque de opções para a quimioterapia sistêmica se expandiu e terapia-alvo tem sido utilizado em pacientes avançados CRC, aumentando sobrevida do paciente [11]. No entanto, alguns pacientes CRC respondem mal à terapia-alvo, apesar de mostrar resultados positivos em estudos de mutação específica de terapia-alvo [12]. Tumor heterogeneidade é uma causa potencial de falha da terapia-alvo e vários estudos têm relatado que a CRC possuem um genótipo heterogêneo incluindo
KRAS
,
p53
, e
BRAF
[13- 15]. Portanto, a variação genética entre o tumor primário e correspondentes locais metastáticos precisa ser esclarecida para melhorar a gestão dos pacientes de CRC com doença metastática.
A heterogeneidade dos
c-MYC
e suas implicações prognósticos têm não foi sistematicamente estudado em pacientes com CCR primários. O objetivo deste estudo foi avaliar
c-MYC
estado do gene e sua relevância clínica em CRC. Analisamos também a heterogeneidade da
c-MYC
no tumor primário e metástases à distância.
Materiais e Métodos
Pacientes e amostras
Um total de 519 pacientes com CCR tratados com cirurgia radical em Seoul Bundang Hospital da Universidade Nacional foram incluídos neste estudo retrospectivo. Em primeiro lugar, avaliar o significado clínico-patológico de
c-MYC
estado do gene, 367 pacientes CRC consecutivos tratados entre janeiro de 2005 e dezembro de 2006 foram inscritos (coorte 1). Em segundo lugar, para investigar a discordância entre os tumores primários e metastáticos, 152 pacientes com CCR avançado com metástases síncrono ou metacrônica que haviam sido submetidos a ressecção cirúrgica para CRC primária entre maio de 2003 e dezembro de 2009, foram inscritos (coorte 2). Todos os casos foram avaliados por dois patologistas (K. S. L. e H. S. L.). As características clinicopatológicas foram obtidos a partir dos prontuários dos pacientes e relatórios de patologia. foi coletado informações de acompanhamento, incluindo o resultado do paciente e o intervalo entre a data da ressecção cirúrgica e morte. Os dados dos pacientes perdidos para follow-up ou aqueles que tinham morrido de outros que CRC causas foram censurados.
Ethical declaração
Todas as amostras foram obtidas de tumores cirurgicamente ressecados examinados patologicamente no Departamento de Patologia , Seoul National University Hospital Bundang. Todas as amostras e dados de prontuários médicos foram anónimos antes da utilização neste estudo e os participantes não forneceu consentimento informado por escrito. A utilização de dados de registros médicos e amostras de tecido para este estudo foi aprovado pelo Institutional Review Board of Seoul National Bundang Hospital Universitário. (Referência: B-1210 /174-301)
método de arranjo de tecido
cirurgicamente ressecados espécimes CRC primários foram fixados em formalina e embebidos em parafina (FFPE). Para cada caso, áreas representativas dos blocos doadores foram obtidos e reorganizados em novos blocos receptores (Superbiochips Laboratórios, Seoul, Coreia do Sul) [16]. Um único núcleo era de 2 mm de diâmetro e aqueles contendo 20 células tumorais% foram considerados núcleos válidos.
Dual-cor de prata
hibridização in situ
O
gene c-MYC
foi visualizada usando um sistema de blue-coloração (UltraView prata
in situ
hibridação dinitrofenol [DNP] kit [SISH] detecção e sonda c-MYC DNP, Ventana Medical Systems, Tucson, AZ, EUA). O centrômero do cromossomo 8 (CEP8) foi visualizada usando um sistema de coloração vermelha (UltraView ISH vermelho digoxigenina [DIG] kit de detecção e cromossomo 8 sonda DIG, Ventana Medical Systems). Os sinais positivos foram visualizados em 60 × ampliação e contados em 50 núcleos que não se sobrepõem de células de tumor para cada caso (figura 1) [17]. clusters de pequenas e grandes foram classificados como 6 e 12 sinais, respectivamente
(A)
c-MYC
ganho de número de cópias do gene (60 × ampliação).; (B)
dissomia gene (60 × ampliação). C-MYC
Imunohistoquímica
análise IHC do c-MYC foi realizada utilizando um coelho comercialmente disponível anti-c-myc o anticorpo (clone Y69, catálogo ab32072, Abcam, Burlingame, CA, EUA). Os procedimentos de coloração foram realizados utilizando o kit UltraView Universal DAB (Ventana Medical Systems) e um corante automatizado (BenchMark®XT, Ventana Medical Systems), de acordo com as instruções do fabricante. imunomarcação nuclear de c-MYC foi negativa em mucosa normal. Para análise estatística, coloração nuclear c-Myc de qualquer intensidade maior do que 10% de células neoplásicas foi classificado como positivo (Fig S2) [10].
instabilidade microssatélite
instabilidade microssatélite (MSI ) foi avaliada em casos de CRC com tecido disponível. MSI resultados foram gerados por comparação dos perfis alélicas de 5 marcadores microssatélites (BAT-26, BAT-25, D5S346, D17S250, e S2S123) no tumor e amostras normais correspondentes. reacção em cadeia da polimerase (PCR) a partir de produtos os tecidos FFPE foram analisados utilizando um sequenciador de ADN automático (ABI 3731 Genetic Analyser, Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA) de acordo com o protocolo descrito anteriormente [18].
análise de mutação KRAS
KRAS
detecção de mutações foi realizada por fusão análise da curva usando o sistema cobas 4800 (Roche, Branchburg, NJ, EUA) com software automatizado interpretação dos resultados . Este é um ensaio de PCR em tempo real baseado em TaqMelt projetado para detectar a presença de 21
KRAS
mutações nos códons 12, 13 e 61. O processo de fluxo de trabalho e os testes foram previamente descritos [19].
análise estatística
a associação entre as características clínicas e
c-MYC
estatuto foi analisada utilizando o teste do qui-quadrado ou teste exato de Fisher, conforme apropriado. A correlação entre os métodos de detecção foi analisada pelo coeficiente de correlação de Pearson. sobrevida dos pacientes foi analisada utilizando o método de Kaplan-Meier eo teste de log-rank foi utilizado para determinar se houve diferenças significativas entre as curvas de sobrevivência. A análise de regressão univariada e multivariada foram realizadas usando o modelo de riscos proporcionais de Cox para determinar a taxa de risco e os intervalos de confiança de 95% para cada fator. A
P-
valor 0,05 foi aceito como estatisticamente significativo. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando o estatístico SPSS 21 software (IBM, Armonk, NY, EUA).
Resultados
c-MYC
estado do gene e implicações clínicas para consecutivo pacientes com CCR primários
Em casos de CRC primários consecutivos (coorte 1), a mediana
c-MYC
: relação CEP8 foi de 1,29 (intervalo de 0,58-5,17).
c-MYC
amplificação do gene, definida por um
c-MYC
: CEP8 relação ≥ 2,0 e semelhante ao estabelecido para
HER2
[20], foi detectado em 31 (8,4%) de 367 pacientes. A média
c-MYC
GCN era 2,88 (variação, 1,22-13,12). No presente estudo, definimos o ganho GCN como ≥ 4.0
c-MYC
cópias /núcleo [21], e este foi detectada em 63 (17,2%) de 367 pacientes com CCR. Todos
c-MYC
amplificação foi incluído no
c-MYC
GCN ganho. A
c-MYC
GCN ganhar ≥ 4 teve o menor
P
-valor (
P
= 0,015) e, portanto, foi observada a ser o mais preditivo de corte ponto para o prognóstico do paciente (Figura 2); ≥ 5.0
c-MYC
cópias /núcleo também influenciou o prognóstico do paciente (
P
= 0,026). Não houve associação significativa entre o prognóstico do paciente e ou
c-MYC
amplificação (
P
= 0,149) ou 2, ≥ 3 e ≥ 6
c-MYC
cópias /núcleo (
P
= 0,752,
P
= 0,175, e
P
= 0,122, respectivamente)
(A)
c-MYC
número de cópias do gene (GCN) ganhar.; (B)
c-MYC
ganho de GCN no estágio II-III subgrupo; (C)
c-MYC
amplificação.
A tabela 1 mostra as relações entre os
c-MYC
status e os parâmetros clínico-patológicos em CRCs primários consecutivos (coorte 1 ). A amplificação do
c-MYC
correlacionada com a doença em estágio inicial (
P
= 0,039).
c-MYC
ganho de GCN foi frequentemente observada em tumores de cólon e reto sigmóide (
P
= 0,034), tumores pequenos (
P
= 0,041), e os classificados como microsatélites estáveis ou MSI-baixo (
P
= 0,029).
O significado prognóstico da
c-MYC
estado do gene no CRC pacientes
Todos os pacientes com CCR foram seguidos com sucesso para inclusão na análise de sobrevivência (Fig 2). Na coorte 1, o período médio de acompanhamento foi de 55 meses (variação, 1-85 meses) e 101 (27,5%) pacientes morreram durante o período de acompanhamento. Kaplan-Meier análise mostrou que
c-MYC
ganho de GCN foi significativamente associada com pior sobrevida em pacientes com CCR (
P
= 0,015), mas
c-MYC
amplificação foi não (
P
= 0,149). No estágio II-III subgrupo,
c-MYC
-GCN ganho também previu mau prognóstico (
P
= 0,034). A análise multivariada de
c-MYC
estatuto está resumida na Tabela 2, e mostrou que
c-MYC
-GCN ganhar prognóstico pobre previu de forma independente na coorte consecutiva (
P
. 0.001) e no subgrupo de pacientes com estágio II-III CRC (
P
= 0,040)
Correlação entre o
c-MYC
GCN ganho e proteína superexpressão
a superexpressão da proteína c-MYC foi detectada em 201 (54,8%) de 367 pacientes com CCR (coorte 1) e foi associada a fase pT precoce (
P Art 0,001 ), baixo grau de diferenciação histológica (
P
= 0,007), ausência de invasão perineural (
P
= 0,025) e menor tamanho (
P Art 0,001) ( Tabela 1). Superexpressão da proteína c-MYC foi associada com o ganho de GCN (ρ, 0,211;
P Art 0,001), que foi categorizado como correlação fraca de acordo com a categorização de Dancey e Reidy (2004) [22]. Além disso, apenas 46 (22,9%) de 201 pacientes com c-MYC superexpressão mostrou um ganho de GCN.
c-MYC
status e heterogeneidade de acordo com a localização do tumor em pacientes avançados CRC
para avaliar a heterogeneidade regional de
c-MYC
status, que examinaram o tecido a partir de 3 sites, incluindo o cancro primário, metástases à distância, e metástases do nó de linfa para cada paciente com CRC avançado (coorte 2). Nos tumores primários de coorte 2, a mediana
c-MYC
: relação CEP8 foi de 1,14 (intervalo de 0,57-2,97).
c-MYC
amplificação do gene foi detectada em 8 (5,3%) dos 152 pacientes. A média
c-MYC
GCN foi de 2,97 (intervalo de 1,40-9,94).
c-MYC
ganho de GCN foi detectado em 48 (31,6%) de 152 pacientes com CCR. Além disso,
c-MYC
ganho de GCN foi encontrada em 33 (21,7%) pacientes com tumores metastáticos distantes. metástases do nó de linfa foi observada em 79 de 152 pacientes avançados CRC e
c-MYC
ganho de GCN foi observada em 18 (22,8%) desses casos. A heterogeneidade dos
c-MYC
ganho de GCN de acordo com a localização do tumor é mostrada na Tabela 3. Dos 152 casos, discordância entre
c-MYC
ganho de GCN no tumor primário e metástases à distância foi observado em 39 (25,7%) casos. A discordância entre
c-MYC
ganho de GCN na metástase do tumor e da linfa-nó primário foi detectada em 24/79 (30,4%) casos. Assim, a heterogeneidade regional do
c-MYC
ganho de GCN era bastante comum no CRC avançado.
c-MYC
GCN heterogeneidade não se correlacionou com fatores clínico-patológicos e prognóstico (
P Art 0,05; dados não mostrados)
Não houve estatisticamente significativa. correlação entre os fatores clínico-patológicos e
c-MYC
ganho de GCN em metastático, distante e tumores metastáticos do nó de linfa de coorte 2 pacientes de CRC (
P Art 0,05; dados não mostrados) . O tempo médio de acompanhamento foi de 42 meses (variação, 1-105 meses) e 67 pacientes (44,1%) morreram de câncer durante o período de acompanhamento. A análise de Kaplan-Meier mostrou que pacientes com
c-MYC
ganho de GCN no tumor primário teve um mau resultado do que aqueles sem, mas este resultado não foi estatisticamente significativa (
P
= 0,499). No entanto, ≥ 3,0
c-MYC
cópias /núcleo no tumor primário foi significativamente associada com um prognóstico pobre (
P
= 0,044; S1 Fig). Não houve correlação significativa entre o prognóstico dos pacientes e
c-MYC
ganho de GCN em metástases distantes ou linfonodo (
P
= 0,981 e
P
= 0,417, respectivamente, dados não mostrados)
KRAS
mutações em avançado CRC
O cobas
KRAS
teste foi realizado em 152 tumores primários de casos CRC avançados. (coorte 2).
KRAS
mutações genéticas foram observadas em 84 (55,3%) casos e foram associados com tumores localizados no cólon direito (
P
= 0,019), mas não foram correlacionados com outros fatores clinicopatológicos (
P
0,05; dados não mostrados). Além disso, não houve diferença estatística entre a sobrevivência de pacientes com CCR com o tipo selvagem ou mutante
KRAS
(
P
= 0,688; dados não mostrados). De 68 casos com o tipo selvagem
KRAS
,
c-MYC
amplificação foi observado em 4 (5,9%) e um
c-MYC
ganho de GCN em 28 (41,2 %). De 84 casos com mutação
KRAS
, 4 mostrou
c-MYC
amplificação (4,8%) e 20 (23,8%) revelaram um
c-MYC
ganho de GCN.
c-MYC
alterações GCN ocorreram em pacientes com tanto do tipo selvagem e mutante KRAS. Portanto,
c-MYC
alterações GCN e
KRAS
mutações não eram mutuamente exclusivas.
Discussão
Embora tenha havido vários relatórios sobre
c-MYC estatuto
em cancros humanos, não existem critérios estabelecidos para o ganho de GCN. Cancros com um
c-MYC
ganho de GCN são frequentemente associados com um prognóstico pobre. Um estudo anterior do carcinoma gástrico mucinoso mostrou que
c-MYC
amplificação, definido como um
c-MYC
: relação CEP8 2.0, foi fortemente correlacionada com os estágios avançados de câncer [23]. Outro relatório descobriu uma associação entre
c-MYC
amplificação ( 4 cópias /célula a um mínimo de 10% das células tumorais) e os estágios avançados de câncer de ovário [21]. Em um estudo de câncer de próstata, o
c-MYC
ganho de GCN incluído o critério de um
c-MYC /Tablet CEP8 rácio 1.5, e um mau prognóstico foi observada para os pacientes nesta categoria [24]. Na pesquisa recente no adenocarcinoma do pulmão, os pacientes com 2
c-MYC
cópias /núcleo foram classificados como tendo um aumento da
c-MYC
GCN, que foi encontrado para ser um fator de prognóstico independente [25]. Em pacientes com CCR, foi relatado que
c-MYC
amplificação, definido como um
c-MYC /Tablet CEP8 rácio 2, foi frequentemente detectada usando fluorescente
in situ
hibridação (9,0-14,2%), mas não estava relacionado com a evolução clínica e os dados patológicos [26]. Portanto, temos aplicado critérios diferentes para determinar
c-MYC
ganho de amplificação ou GCN neste estudo, e ter definido o
c-MYC
ganho de GCN como ≥ 4 cópias /núcleo, porque teve o menor
P
-valor para o prognóstico da doença (Figura 2). Na coorte 1, o grande coorte consecutiva, os pacientes de CRC com um
c-MYC
ganho de GCN tiveram uma sobrevida pobres do que aqueles sem (
P
= 0,015). Além disso, na análise multivariada,
c-MYC
ganho de GCN foi um fator prognóstico CRC significativo, tanto na coorte consecutiva e para aqueles com doença em estágio II-III. O valor preditivo do
c-MYC
GCN foi encontrado para ser independente de fatores prognósticos conhecidos. O
c-MYC
critérios ganho GCN utilizados no presente estudo, em conjunto com o método SISH, pode ser útil na avaliação de pacientes CRC porque ele pacientes claramente identificadas deverá ter a sobrevivência pobre, independentemente da
c -MYC
:. rácio CEP8
na coorte 2, mostramos que havia
c-MYC
heterogeneidade regional GCN entre o site principal e as suas metástases relacionados. A
c-MYC
ganho de GCN (c-MYC GCN ≥ 4,0) no câncer primário não foi significativamente associada com pior sobrevida (
P
= 0,499; S1 Fig), que pode ser porque todos coorte 2 constituída por pacientes avançados CRC com metástase e coorte síncrona e metacrônica 2 foi em grande parte composta de estágio IV CRC (98 casos; 64,5%). Eles receberam uma variedade de tratamento personalizado, respectivamente, e estes podem refletir a insignificância estatística. Curiosamente, foram aplicados critérios ligeiramente não restritivas de ganho de GCN (
c-MYC
GCN ≥ 3,0) e seu prognóstico foi mudado para estatisticamente significativa (
P
= 0,044; S1 Fig). Em um sentido amplo, c-
MYC
GCN ganho de câncer primário tende a correlacionados com pior sobrevida no CRC avançado. Por outro lado,
c-MYC
estado lesão metastática distante e linfonodo não estava relacionado com o prognóstico do paciente embora nós tentou todos os possíveis critérios de GCN. Mesmo assim,
c-MYC
heterogeneidade foi observada com frequência em CRC avançado, um
c-MYC
ganho de GCN no câncer primário foi muitas vezes associada com a sobrevivência pobre. Consequentemente, a
c-MYC
GCN na lesão não metastático deve ser usado ao avaliar o prognóstico.
Em um estudo anterior, a superexpressão de
c-MYC
mRNA em CRC foi encontrado para ser associado com um prognóstico melhor [27], mas este resultado foi contrariada por um outro estudo [28]. Christopher
et al
. Recentemente, demonstrou que c-MYC superexpressão determinado por IHC sozinho, foi significativamente associada com uma melhor sobrevida em pacientes de CRC quando avaliados através da análise univariada, mas não por análise multivariada [10]. Curiosamente, encontramos resultados conflitantes em um estudo sobre-expressão c-MYC anterior; presumivelmente, porque a expressão de c-Myc é controlada por uma via reguladora complexo que envolve múltiplas interacções com outras moléculas, em vez de ganho GCN apenas simples [29]. Além disso, verificou-se uma fraca correlação entre superexpressão da proteína c-MYC e ganho de GCN em pacientes com CCR.
C-MYC
ganho GCN não foi observado na maioria dos casos, a superexpressão da proteína c-Myc. Ao contrário do
c-MYC
ganho de GCN, a sobre-expressão da proteína c-MYC foi correlacionada com características menos agressivas (Tabela 1). Estes resultados sugerem que
c-MYC
ganho de GCN é provavelmente apenas parcialmente responsável pela superexpressão da proteína. Como superexpressão de c-MYC não é o mesmo que um
c-MYC
ganho de GCN, é necessária mais investigação para explicar a diferença de c-MYC superexpressão e ganho de GCN no CRC tumorigênese.
mutações no
KRAS Quais são evidentes em 30-40% dos tumores colorretais [30-32]. Com efeito, estudos prévios relataram que um
KRAS
mutação foi associado com resistência a anti-receptor de factor de crescimento epidérmico (EGFR), terapia de anticorpo monoclonal e um mau sobrevivência [33-35]. Em nosso estudo,
KRAS
mutações estavam presentes em 55,3% dos pacientes com CCR avançado (coorte 2) e não foram associados com o prognóstico. Pode ser porque nós investigamos
KRAS
estado de mutação em pacientes avançados CRC. Phipps et ai. também informou que
KRAS
estatuto -mutation não foi associada a sobrevida específica pobres doença em casos que apresentaram CRC distante do palco [33].
c-MYC
amplificação foi observada em 5,9% do tipo selvagem
KRAS Comprar e 4,8% dos mutantes
KRAS
CRCs. A
c-MYC
ganho de GCN foi observada em 41,2% do tipo selvagem
KRAS
e 23,8% dos mutantes
KRAS
CRCs. Vale ressaltar que esses 2 eventos genéticos não eram mutuamente exclusivas. Mais estudos são necessários para investigar a possibilidade de usar
c-Myc
alterações genéticas como alvos terapêuticos em pacientes com CCR avançado com resistência primária e secundária a terapias anti-EGFR.
Em resumo, nós abrangente Analisamos a
c-MYC
estado do gene de pacientes CRC usando SISH.
c-MYC
GCN ganho e amplificação foram observadas em 17,2% e 8,4% dos pacientes CRC consecutivos, respectivamente. O
c-MYC
ganho de GCN foi um fator prognóstico independente, tanto na coorte consecutiva e no subgrupo de pacientes com doença em estágio II-III. Esses resultados mostram que
c-MYC
status pode ser usado para prever o prognóstico de pacientes com CCR, e pode informar futuros estudos sobre a patogênese e os mecanismos envolvidos na progressão da CRC.
Informações de Suporte
S1 Fig. curvas de sobrevida de Kaplan-Meier que ilustram o efeito prognóstico da
c-MYC
estado lesões primárias de câncer colorretal (coorte 2).
(A)
c-MYC
número de cópias do gene ( GCN) ≥ 3,0; (B)
c-MYC
GCN ≥ 4.0
doi:. 10.1371 /journal.pone.0139727.s001
(TIF)
S2 Fig. valores representativos de c-myc sobre-expressão por imuno-histoquímica (A e B) em doentes com cancro colorectal
(A) a sobre-expressão de c-myc (40 × ampliação).; (B) Nenhuma expressão c-MYC (40 × ampliação);
doi: 10.1371 /journal.pone.0139727.s002
(TIF)
Reconhecimentos
Os autores agradecem Superbiochips Laboratories para assistência técnica excelente.