Abstract
Purpose
Um dos mais importante função da estromal derivada factor-1 (SDF-1) e seus receptores, está regulando o processo de formação de metástases. O objetivo do nosso estudo foi investigar a correlação entre a SDF-1, os níveis de proteína CXCR4 e CXCR7 medidos por imuno-histoquímica com as características clínicas e a sobrevivência de doentes com cancro do endométrio.
Materiais e Métodos
92 pacientes com idades entre 37-84 (média 65,1 ± 9,5) foram inscritos para o nosso estudo entre janeiro de 2000 e dezembro de 2007. Após o diagnóstico de cancro do endométrio, todas as mulheres foram submetidas a histerectomia total abdominal, com salpingoophorectomy bilateral e dissecção de linfonodos pélvicos. Em todos os pacientes em estágio clínico (segundo a classificação da FIGO), grau histológico, invasão miometrial, linfonodos e metástases à distância foram determined.Furthermore, o tempo de sobrevivência foi avaliada. análises de imuno-histoquímica de SDF-1, CXCR4 e CXCR7 foram realizados em formalina parafina fixado secções de tecido incorporados Arquivo
Resultados
correlações estatisticamente significativa (p 0,01). foram relatados entre SDF-1 eo estágio clínico da doença, metástases em linfonodos, metástases à distância, invasão profunda do miométrio (≥50%), o envolvimento cervical, envolvimento dos anexos. correlação estatisticamente significativa (p 0,01) foi observada entre SDF-1 e expressão do risco de recorrência. Superior SDF-1 expressão foi associada com ahigher risco de recorrência (p = 0,0001). Os resultados de expressão CXCR4and CXCR7 não revelou diferenças significativas (p 0,05) entre a expressão das proteínas nas células tumorais primárias e as características clínico-patológicas. Além disso, a Kaplan-Meier análises demonstraram um comprometimento gradual de câncer de sobrevida global (OS) com o aumento da SDF-1 expressão.
Conclusão
O importante papel da SDF-1 como um preditor de negativo características clinicopatológicas de atumor sugere que a expressão desse fator do estroma deve ser incluída no painel de testes pathomorphological acessório e pode ser útil para estabelecer um prognóstico mais preciso em pacientes com câncer de endométrio
Citation:. Walentowicz-Sadlecka M, Sadlecki P, M Bodnar, Marszalek A, Walentowicz P, Sokup A, et al. (2014) estromal derivada Fator-1 (SDF-1) e seus receptores CXCR4 e CXCR7 no endométrio pacientes com câncer. PLoS ONE 9 (1): e84629. doi: 10.1371 /journal.pone.0084629
editor: Kaustubh Datta, University of Nebraska Medical Center, Estados Unidos da América
Recebido: 28 de setembro de 2013; Aceito: 25 de novembro de 2013; Publicação: 09 de janeiro de 2014
Direitos de autor: © 2014 Walentowicz-Sadlecka et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. Os autores não têm apoio ou financiamento para relatar
Conflito de interesses:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
Condições em que as células tumorais são capazes de iniciar locais ou spreadare distante muito importante, mas ainda desconhecido questão clínica. O crescimento do tumor e capacidade de iniciar metástases estão ligadas com a interacção contínua entre células cancerosas e microambiente do hospedeiro. O microambiente do tumor desempenha um papel importante em cada etapa do desenvolvimento do cancro. Há uma interacção contínua entre células cancerosas e da matriz extracelular (ECM), com os fibroblastos, células endoteliais e células inflamatórias [1]. Vários estudos têm indicado que o microambiente do tumor responde a factores derivados das células de tumor, bem como vice-versa e, em consequência tem um impacto sobre a transformação neoplásica [2]. O microambiente poderiam estar envolvidos na promoção da mutagénese de células tumorais, bem como a modificação do compartimento do estroma tumoral. Neoplastictransformationleads para phenotypicmodifications em stromalcells [3], [4].
Endometrialcancer (CE) é o sexto mais commonlydiagnosedcanceramongwomenglobally, com aproximadamente 288.000 newcases e 50.327 deathsoccurringworldwideeachyear.However, entre todos os cânceres do sistema reprodutivo feminino, endometrial o câncer se tornou o mais comum com as mulheres na Europa e nos Estados Unidos [5]. 5125 novos ECcases foram diagnosticados em 2010, na Polónia, o que torna o câncer endometrial o terceiro câncer mais comum, depois do câncer de mama e pulmão na população polonesa [Polish CancerRegister Nacional].
O curso natural do câncer endometrial é lento e a doença é caracterizada por um bastante bom prognóstico. Um início precoce dos sintomas clínicos permite definir o diagnóstico na fase precoce da doença. A taxa de 5 anos de sobrevida global (OS) de mulheres com câncer endometrial é mais de 80% para todas as etapas e mais de 90% para a fase I [6]. cancro do endométrio é tratada com sucesso com a cirurgia e /ou radioterapia [7]. No entanto, para os pacientes com uma doença avançada ou recorrente, ou para aqueles que desejam preservar sua fertilidade, as opções de tratamento arelimited. No entanto, existe um grupo de pacientes com um prognóstico pobre, que beneficiarão de um tratamento mais agressivo. Este grupo vai precisar de quimioterapia adjuvante ou radioterapia. A pesquisa dos fatores preditivos de recidiva ou morte é de grande importância.
reconhecidos fatores de mau prognóstico para o câncer endometrial são avançados estágio FIGO, do tipo histológico não-endometrioid, alto grau (G3), profunda invasão do miométrio ( 50%), presença de metástases em linfonodos, envolvimento cervical e invasão do espaço linfovascular (Lvsi) [6]. Todos os fatores de risco mencionados acima são identificados após extensa procedimento cirúrgico.
Mesmo que o nosso conhecimento das células tumorais tem melhorado muito ao longo dos últimos anos, os mecanismos precisos que controlam o processo de formação de metástases permanecem desconhecidos. As quimiocinas pertencem a uma superfamília de pequenos (7-16 kDa), citocinas pró-inflamatórias, as quais foram originalmente caracterizadas pelas suas propriedades de indução de migração de leucócitos [8]. Eles foram comprovados para desempenhar um papel importante em muitos processos biológicos relacionados com a inflamação, tais como a embriogénese, a angiogénese, a aterosclerose e cancro. Sabe-se que o nível molecular de cancro é causado pelo crescimento response.Tumor inflamatória prejudicada e a sua capacidade de iniciar metástases estão ligadas com a interacção contínua entre células cancerosas e estroma do hospedeiro [4].
estromal derivada do factor -1 (SDF-1), também conhecido como CXCL 12 desempenha um papel crucial na inflamação e hematopoese, agindo como um quimioatractor de células envolvidas na inflamação e na migração de células estaminais [9] dados.sdf-1 gene que codifica está localizado no cromossoma 10 .q.11.1 [10] dados.sdf-1 tem duas isoformas principais, α e β. Ambos são derivados de um único gene, devido ao splicing alternativo. SDF-1 α é a isoforma predominante, secretado por células do estroma da medula óssea e células endoteliais e é encontrado em quase todos os órgãos [10]. A quimiocina SDF-1 é um importante α-quimiocina que liga-se principalmente ao seu receptor cognato CXCR4 e, assim, regular o tráfico de células normais e malignas [11]. Acredita-se que o CXCR4 foi o único receptor para SDF-1, mas estudos recentes têm demonstrado que o SDF-1 também se liga a outro receptor de chamada CXCR7 [12], [13]. CXCR4 e CXCR7 mediar a metástase do tumor em diversos tipos de cancro (por exemplo da mama, cancro do pulmão, linfoma) [14].
Um dos mais importantes functionsof SDF-1 e os seus receptores, é que regula a formação de metástases. Os receptores das quimiocinas podem potencialmente facilitar a disseminação do tumor em cada um dos passos importantes de metástases, incluindo a aderência de células do tumor ao endotélio, extravasamento a partir de vasos sanguíneos, a colonização metastático, angiogénese, proliferação, e a fuga de resposta do hospedeiro através da activação de certas vias , tais como ERK /MAPK, PI-3K /AKT /mTOR, ou JAK /STAT e outros. A evidência crescente de existir, que as quimiocinas, incluindo SDF-1, facilitar a comunicação entre as células cancerosas e células não neoplásicas no microambiente tumoral, promover a infiltração e a activação de tumor Associates macrófagos e neutrófilos no estroma [15].
porque o eixo SDF-1 /CXCR4 /CXCR7 desempenha um papel crítico no desenvolvimento do cancro, o progresso, metástase e recidiva, os autores sugerem que o SDF-1 e seus receptores CXCR4 e CXCR7 também pode ser ligado com o resultado do tratamento de cancerpatients endometriais. Qualquer fator que nos dá mais conhecimento sobre a agressividade do tumor seria crucial para determinar a extensão da treatment.It seria de especial interesse para conhecer os mecanismos moleculares específicos responsáveis pelo desenvolvimento de linfonodos e metástases à distância e disseminação local do tumor. Quando se tornaram mais familiarizados com os mecanismos moleculares subjacentes a este processo, poderemos ser capazes de sublinhar a necessidade de regimes-alvo, que pode modificar ou inibir estes processos. O objetivo do nosso estudo foi investigar a correlação entre, os níveis de proteína CXCR4 e CXCR7 SDF-1 medidos por imuno-histoquímica com características theclinicopathological e sobrevivência de doentes com cancro do endométrio.
Materiais e Métodos
O estudo foi aprovado pela avaliação board.The Comissão de Ética institucional dos autores na LudwikRydygier Collegium Medicum, Nicolaus Copernicus University of Torun aprovou este protocolo de estudo (decisão nº 332/2007 KB). Todos os participantes forneceram theinformed, o consentimento escrito. características basais dos pacientes foram anonimamente levado para documentar o processo. comitês de ética aprovar este processo de aprovação.
Os pacientes
Noventa e dois pacientes com cancro do endométrio, com idades entre 37-84 (média 65,1 ± 9,5) foram inscritos para o nosso estudo entre janeiro de 2000 e dezembro de 2007. Após o diagnóstico de câncer endometrial com base em amostras obtidas de curetagem, todos os pacientes foram submetidos a histerectomia total abdominal, com salpingoophorectomy bilateral e dissecção de linfonodos pélvicos realizada por oncologistas ginecológicos experientes no Departamento de Oncológica Ginecologia da LudwikRydygier Collegium Medicum em Bydgoszcz, Nicolaus Copernicus University.
o estágio clínico foi avaliada com base na avaliação dos espécimes cirúrgicos realizados por dois patologistas experientes independentes, de acordo com a Federação Internacional de Ginecologia e Obstetrícia (FIGO) sistema de 2009.
o grupo de estudo incluiu 27 pacientes com estágio IA, 18 com o estádio IB, 14 com II, 10 mulheres com estádio IIIA, 17 com IIIC e 6 com IV. grau histológico foi avaliada de acordo com a classificação da OMS. Histológica grau 1 (G1) foi observado em 7 pacientes, G2 e G3 em 66 em 19 mulheres. invasão profunda do miométrio ( 50%) foi observada em 36 pacientes, metástase linfonodal em 23 mulheres, metástases à distância em 6, o envolvimento cervical em 38 e envolvimento anexial em 11 pacientes. As características iniciais do grupo de estudo são colocados na Tabela 1.
Todos os pacientes foram divididos em grupos de fatores de risco de três: baixo risco – FIGO IA, G1 ou G2, tipo Bokhman I (endometrioid); risco intermediário – IA G3, IB G1 ou G2, Bokhman tipo I (endometrioid); alto risco – todos os pacientes do tipo II (não-endometrióides), IB G3, FIGO II e superiores. Pacientes do grupo de baixo risco não receberam nenhum tratamento adicional após a cirurgia, as mulheres do grupo de risco intermediário receberam braquiterapia (VBT) 5 semanas após a cirurgia, e os pacientes do grupo de alto risco foram submetidos a teleradiotherapy e VBT. A quimioterapia adjuvante foi administrado a dez pacientes com o subtipo histopatológico não endometrióide (quimioterapia consistia em paclitaxel e carboplatina).
Em todos os casos, foi determinada a sobrevivência global (em meses). Entre todos os casos foram analisados único paciente comprovada morte relacionada ao câncer. O tempo de seguimento foi de 60-80 meses.
Métodos
Os estudos foram realizados em formalina parafina fixado secções de tecido embebidos de arquivo derivadas do Departamento de Clínica Pathomorphology Collegium Medicum Nicolaus Copernicus University.
Para estabelecer procedimentos de imuno-histoquímica, foram realizadas uma série de reacções de controlo positivo. Os controlos positivos foram realizadas num modelo de tecido, para a presença dos antigénios whichthe analisadas foi indicado em fontes de referência (a proteína humana Atlas), bem como em anticorpos fabricados folha de dados, (Tabela 2). As reacções de controlo negativo foram realizadas em estudos adicionais, bem como em secções de tecido de controlo durante a coloração imuno-histoquímica adequada, com a substituição do anticorpo primário, a solução diluída de 1% de BSA (albumina de soro de bovino) em PBS (solução salina tamponada com fosfato).
Os estudos de imuno-histoquímica foram realizadas de acordo com o protocolo padrão, utilizando polyclonalantibodies coelho contra: SDF-1 (ab9797, Abcam, Cambridge, UK), CXCR4 (ab7199, Abcam), CXCR7 (ab38089, Abcam). A coloração de SDF-1α e CXCR7 foram realizadas automaticamente no Dako AurostainerLink48, CXCR4 e coloração foi realizada manually.Epitopes foram desmascarado usando Epitopo Retrieval Solution pH-9 da PT-Link (Dako, Glostrup, Dinamarca). A actividade de peroxidase endógena foi bloqueada utilizando Peroxidase Block (DAKO) durante 10 minutos, e a ligação do anticorpo não específica foi bloqueada em 5% de BSA (solução de albumina bovina) em PBS (Solução Salina Tamponada com Fosfato). As secções de tecido foram incubadas com o anticorpo primário contra o SDF-1 e CXCR7 durante 30 min. em RT (temperatura ambiente) e durante a noite a 4 ° C com anti-CXCR4. Um complexo antigénio-anticorpo foi detectado usando EnVisionFLEX-HRP (Dako), e localizedaccording tothe brownreaction presença OFA productusing DAB (3-3’diaminobenzidine) como achromogen.
Avaliação da expressão da proteína.
os estudos foram feitos com ampliação de 20x objetivo original para cada um dos antibodiesusing estudou acesa microscopeECLIPSEE800 (Nikon Instruments Europa, Amsterdam, Holanda).
A expressão imuno-histoquímica de proteína foi estimada utilizando princípios morfométricas com base na escala theRemmele-Stegner [16 ] [IRS: 0-12], de acordo com a razão entre a intensidade da expressão da proteína (escala (0-3); 0 – negativo, 1 – baixa coloração, 2 – coloração moderada, 3 – coloração forte) e o número expresso positivamente de células ou área de tecido (escala (0-4); 0, negativa; 1, 10% de área positiva; 2, 10-50% de área positiva, 3, 50-80% de área positiva, 4, ≥80% positiva área).
os patologistas que foram avaliar a expressão imuno-histoquímica de antígenos examinados trabalharam de forma independente, e eles foram cegados por clínicos, bem como outros dados dos pacientes.
análise estatística.
Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando thePQStat versão 1.4.4.126.The significância estatística de SDF-1, CXCR4 e correlação CXCR7 em relação ao clinicopathologicalfeatures foi avaliada utilizando theKruskal-Wallis e o teste U de Mann-Whitney. valor de P 0,05 foi considerado estatisticamente significativo
A taxa de sobrevida global foi examinado para significância pelo teste de log-rank e as curvas de Kaplan-Meier.. Além disso, foram realizadas regressões de Cox univariada e multivariada.
Resultados
Nós avaliamos a expressão de SDF-1, CXCR4 e CXCR7 na expressão cells.The tumor primário de SDF-1 foi encontrado em 90% dos casos, a expressão ofCXCR4 e CXCR7was encontrada em 100% dos casos de cancro do endométrio (Figura 1) .Analysis de expressão avaliada em tecido normal adjacente revelou muito baixa expressão (IRS = 1) de CXCR4 no endométrio normal. Além disso, não houve expressão de SDF-1 e CXCR7 em áreas seleccionadas de endométrio normal (IRS = 0) (Figura 1).
(A) ampliação Objectivo principal 10 ×. (B) ampliação Objectivo principal 20 × .
os resultados obtidos para cada fator de acordo com características histopatológicas dos pacientes estão apresentados na tabela 3-5.
correlação estatisticamente significativa ( p 0,01) entre wasreported SDF-1expresion e a fase clínica da doença. maior expressão foi observada em todo o aumento fases da FIGO. No entanto, não houve correlação estatisticamente significante entre grau histológico (G) e Bokhman subtipo de cancro do endométrio (Tabela 3).
De acordo com o comprometimento de linfonodos maior SDF-1 expressão foi obtido no tumor primário de pacientes com metástase ganglionar em comparação com pacientes sem metástases em linfonodos (p = 0,0005). SDF-1 foi significativamente maior em pacientes com metástases em linfonodos (N1), metástases à distância (M1), invasão profunda do miométrio (≥50%), o envolvimento cervical, e envolvimento de anexos (Tabela 3).
correlação estatisticamente significativa (p 0,01) foi observada entre SDF-1 e expressão do risco de recorrência. Superior SDF-1 expressão foi associada ao maior risco de recidiva (p = 0,0001) (Tabela 3)
Os resultados da CXCR4and CXCR7 expressionsdidn’t revelaram qualquer correlação significativa (p 0,05). Entre o proteinsexpression na as células primárias de tumor e fase theFIGOclinical, classificação, bem como o Bokhmansubtype, e gânglios linfáticos e metástases distantes (Tabela 4, 5) .Ainda assim, as análises estatísticas não revelam qualquer significantcorrelationbetween CXCR4 e CXCR7expressions e invasão miometrial profunda (≥50% ), colo do útero e /ou adnexalinfiltration, eos risco de recorrência (Tabela 4, 5).
Além disso, o método de Kaplan-Meier demonstra um insuficiência gradual do cancro da sobrevivência global (oS) com o aumento da SDF-1. O teste Log-rank mostrou correlação estatisticamente significativa entre SDF-1 expressão e sobrevivência; no grupo de pacientes com a expressão elevada de sobrevivência SDF-1shorter foi relatado (p = 0,00099) (Figura 2)
O associationbetweenSDF-1 Survivalrate expressionand foi alsoperformed de acordo com a análise de regressão Cox theunivariable e multivariada (incluindo variáveis, tais como: avançado estágio FIGO, alto grau (G2 + G3), subtipo não-endometrioid (Bokhman II), metástases linfáticas e profunda infiltração do miométrio (≥50%) (Tabela 6).
SDF-1 expressão, estágio FIGO avançado, a infiltração de linfonodos e invasão do miométrio profunda eram fatores prognósticos estatisticamente importantes na análise univariada para a sobrevida global. grau e subtipo não-endometrioid não eram importantes na análise univariada (Tabela 6). na análise multivariada, somente SDF-1 expressão e invasão do miométrio profunda foi comprovada condicionalmente importante (Tabela 7).
Discussão
Neoplasia é composto de células em que as alterações são refletidas por meio de mecanismos de controle de crescimento prejudicado. Existem as células cancerosas em um microambiente específica, a qual exerce um efeito significativo sobre as várias fases de desenvolvimento do tumor. Existem numerosas interacções, não só entre as células cancerosas, mas também entre a matriz extracelular (ECM) e fibroblastos, endoteliais e células inflamatórias.
Deve ser lembrado que a neoplasia representa uma condição sistémica, a qual está associada com distúrbios que envolvem numerosos componentes do tumor e seu estroma, que interações constituem um pré-requisito para o processo de invasão e formação de metástases [17].
os resultados de muitos estudos confirmaram a importância do papel do fator do estroma SDF- 1 no desenvolvimento do tumor. O aumento da expressão de SDF-1 em fibroblastos, e especialmente a expressão do receptor CXCR4 nas membranas de células cancerosas, particularmente nas áreas hipoxêmicas do tumor, implica o crescimento, mobilidade, capacidade de invasão e da malignidade. Câncer associado fibroblastos (CAF) foram provado para estimular a progressão de malignidade através da liberação de SDF-1. Por sua vez, SDF-1 faz com que o recrutamento de células progenitoras endoteliais, estimulando a angiogénese. metástases tumorais em áreas ricas em SDF-1 estão associados com a expressão de CXCR4 na superfície das células cancerosas e a sua absorção de sítios SDF-1-ricas ao longo de um gradiente de concentração. Isto reflecte-se pela invasão de células cancerosas para o local de metástases e a destruição resultante de tecidos circundantes. Além disso, a expressão de CXCR4 é modulado pelo estroma, que também está associada com a progressão do tumor [17].
A expressão de SDF-1 vias de sinalização, modulado por receptores específicos, especialmente CXCR4 foi bem estabelecida [18]. A activação de CXCR4occurs em múltiplas vias de sinalização, e consequentlye leva a respostas celulares variedade biológica [19]. foi claramente comprovado que CXCR4 é o alvo para a regulação negativa de sinalização comG-proteína ligado que é capaz de regular a expressão de CXCR4 em várias formas. Foram identificadas duas vias. Em primeiro lugar a sinalização dependente de proteína G ligada a transcrição e expressão através da PI3K-AKT-NF-κβ, MEK1 /2 e ERK1 /2 de transdução de sinal. Em segundo lugar a via de sinalização independente do G-proteína através de estudos de JAK /STAT investigated.Numerous indicam o papel do receptor em CXCR7 SDF-1 de activação, tal como a via independente da proteína G [20]. Mas theresults de relatórios acima mencionadas partlystill permanece obscuro. Lee et al.evaluatedthe migração dos melanócitos para SDF-1. Os autores investigaram que o SDF-1 induz a migração de melanócitos através CXCR7, e não CXCR4. Os autores também estabelecido que o complexo de SDF-1 /CXCR7 promove a activação da via de sinalização β-arrestina 2-dependente. Portanto, é muito importante procurar caminhos SDF-1signalling apropriados através CXCR (ambos CXCR4 e CXCR7) em diferentes tipos de câncer que suggestnew estratégias terapêuticas.
Os mecanismos por meio dos quais SDF-1 /CXCR4 /CXCR7 pathway aumenta a progressão da malignidade permanecem inexplicados. Um número de estudos com modelos de tumores, especialmente cancro do ovário, foram conduzidos para answerthis questão. Confirmou-se que o SDF-1 estimula a angiogénese, principalmente através do aumento da síntese de VEGF. Talvez, SDF-1 promove a sobrevivência de células através da activação de cascatas de sinalização de PI3 e MAP quinases, sem a progressão do ciclo celular. SDF-1 modula a apoptose via Bcl-2 /BAD, e MEK, S6 e PI3K quinase. Além disso, os genes whichexpressions estão associados com a sobrevivência melhorada de células pode ser activado através de exposição a SDF-1. Portanto, SDF-1 pode promover a sobrevivência de células por meio de dois mecanismos: a inactivação de pós-translacional de apoptose, melhorada e a transcrição de genes associados com sobrevivência celular. fenótipo mais agressivo de tumores SDF-1-positivos pode ser associado com o aumento da síntese de metaloproteinases e reforçada a transcrição dos genes responsáveis pela activação de vias metabólicas promover a invasividade e a formação de metástases [21], [22], [23].
os resultados dos estudos esparsos publicados que tratam do papel da SDF-1 /CXCR4 /CXCR7 via no câncer de endométrio são contraditórios e inconclusivos. O objetivo deste estudo foi analisar a expressão de SDF-1, proteínas CXCR4, e CXCR7 no cancro endometrial primária.
Neste estudo, a expressão de SDF-1 foi documentada em 90% dos pacientes, enquanto todos eles mostraram a presença de receptores CXCR4 e CXCR7. Demonstrámos que a expressão da SDF-1 aumentou proporcionalmente à fase Figo (p 0,001). Em contraste, não observamos estatisticamente significativa correlationsbetweenSDF-1 expressão e do grau de diferenciação histológica, ou vários tipos de tumor de acordo com a classificação de Bokhman. Pacientes com comprometimento de linfonodos, metástases à distância, a infiltração do estroma cervical, e infiltração de miométrio superior a 50% de sua espessura apresentaram níveis significativamente mais elevados de SDF-1 expressão. A expressão de SDF-1 demonstrou ser um preditor significativo da presença destes factores de prognóstico negativo em pacientes de cancro do endométrio.
Em contraste, não houve associação significativa foi documentada entre a expressão de proteínas e CXCR4 CXCR7 e as características clinicopatológicas de Câncer do endométrio; Da mesma forma, estes parâmetros não foram comprovadas para desempenhar o papel de fatores prognósticos negativos desta malignidade.
O número de relatórios publicados sobre o valor prognóstico dos componentes do SDF-1 /CXCR4 /CXCR7 via em pacientes com cancro do endométrio é escassa. Além disso, os resultados destes estudos são inconclusivos e por vezes contraditórias.
Mizokami et ai. [24] analisaram a relationshipbetween o grau de histologicaldifferentiation, animportantprognosticfactor de endometrialcancer, e a expressão de SDF-1 de proteína e CXCR4 em 41 patientsaffected com thismalignancy. Os autores revelaram uma correlação inversa entre o grau de diferenciação e histológica da expressão de ambas SDF-1 e CXCR4. As expressões do estroma de SDF-1 e CXCR4 não provou ser associado com o grau do tumor.
Kodama et al. afirmou que há a associação entre a expressão CXCR4 eo estágio clínico do tumor [25]. Os autores analisaram o grupo de 55 doentes de cancro do endométrio e revelou que os estágios clínicos mais altos desta malignidade estão associados a níveis mais baixos de expressão de CXCR4. Eles observaram a diminuição da expressão de CXCR4 em pacientes com estágios mais elevados Figo, invasão miometrial profunda, linfonodo e metástases anexiais, e fenótipo mais agressivo do tumor. Além disso, similar ao nosso estudo, os autores revelaram que CXCR4 não constitui um preditor independente de sobrevivência.
Os resultados destes dois estudos foram contradictive aos achados documentados em pacientes com outras doenças malignas (mama, próstata e câncer de pulmão ), e não confirmaram a associação de SDF-1 /CXCR4 via de sinalização com um fenótipo mais agressivo do tumor, como a expressão de proteínas envolvidas nesta via provou inferior em tumores caracterizados pela pior prognóstico [15].
Outro estudo do papel da SDF-1 /CXCR4 via de sinalização foi conduzido por Tsukamoto et ai. [26]. Estes autores analisaram a relação entre a SDF-1 e expressão CXCR4 e potencial do tumor para a invasão do miométrio. A profundidade de infiltração miometrial representa um importante fator prognóstico em pacientes com câncer de endométrio, como a invasão profunda é mais frequentemente associada com a presença de metástases distantes e comprometimento de linfonodos. Os autores examinaram cinco linhas de células de cancro do endométrio e materiais obtidos de 34 pacientes com este tumor maligno [24]. O nível médio de expressão de CXCR4 foi mais elevada em pacientes nos quais a infiltração excedeu 50% da espessura do miométrio do que nas mulheres, sem invasão do miométrio profunda. Experiências com linhas de cancro do endométrio revelou que o SDF-1 activa PIK3 /Akt de sinalização, a qual é necessária para os processos de migração de células de cancro do endométrio. Este estudo foi o primeiro a sugerir que o eixo SDF-1α /CXCR4 desempenha um papel na invasão de câncer endometrial.
Outro estudo, conduzido por Gelmini et al., Analisaram a presença de mRNA e expressão de SDF -1, proteínas CXCR4, e CXCR7 em 41 pacientes operados por câncer endometrial [27]. CXCR7, recentemente descoberto por Burns et ai., Promove o crescimento e a adesão de muitas linhas de cancro in vitro [13]. Gelmini et al. determinados os níveis de ARNm por meio de RT-PCR, e analisada a expressão de proteínas, utilizando uma escala de imuno-3 item. Eles observaram que o nível de ARNm de tumor de CXCR4 foi mais elevada e o nível de SDF-1 de expressão mais baixos do que no tecido normal. Além disso, as células cancerosas CXCR4-positivos foram capazes de migrar para os níveis mais elevados de SDF-1, o que foi associado com uma maior capacidade de invasão do tumor e formação de metástases distantes. Os autores revelaram que a expressão de CXCR4 em tumores altamente diferenciadas (G1) foi reduzida em comparação com os pobremente diferenciadas (G3). Em contraste, nenhuma correlationsassociated significativa com o grau de diferenciação histológica foram documentadas no caso de os níveis de mRNA CXCR7. Semelhante ao nosso estudo, os autores não revelam qualquer estatisticamente significativa correlationsin as expressões de proteínas CXCR4 e CXCR7 associadas aos vários tipos histológicos do tumor primário [27].
Um estudo recentemente publicado sobre o papel da SDF- 1 /eixo CXCR4 no cancro endometrial envolveu 199 pacientes, nos quais o status do receptor de estrogênio foi examinada além do SDF-1 e CXCR4 expressões [28]. Os autores deste estudo não encontrou uma relação significativa entre o status do receptor de estrogênio ea expressão de SDF-1.
Esta evidência sugere que o papel dos-1 SDF /eixo CXCR4 /CXCR7 na progressão da endometrial câncer ainda permanece sem explicação. Os autores dos dois primeiros estudos mencionados acima relatada uma relação inversa entre as expressões de proteínas envolvidas na SDF-1 /via CXCR4 e do grau de diferenciação histológica ou estágio clínico do tumor. Em contraste, de acordo com os autores dos estudos restantes, maior expressão de SDF-1 /componentes do eixo CXCR4 está associado a um pior prognóstico. Deve-se notar, no entanto, que nenhum dos referidos estudos analisaram os exatos mesmos conjuntos de fatores prognósticos. Os parâmetros estudados foram o grau do tumor eo estágio FIGO, a profundidade da invasão do miométrio, ou o envolvimento do colo do útero, anexos, e gânglios linfáticos [24], [25], [26], [27]. Em segundo lugar, os autores destes estudos utilizaram diversos sistemas de classificação de expressão da proteína. No nosso estudo, a expressão de anticorpos foi avaliada com a escala Remmele-Stegner, considerando tanto a percentagem de células marcadas com anticorpo e a sua intensidade de coloração.
Neste estudo, o aumento da expressão de SDF-1 foi documentado em pacientes com fatores prognósticos negativos de câncer endometrial, como um estágio de alta clínica, o comprometimento dos linfonodos, uma invasão do miométrio profunda, uma infiltração de colo do útero e anexos, e a presença de metástases à distância. SDF-1 mostrou o indicador mais importante de prognóstico pobre em doentes com cancro do endométrio, e semelhante a outras doenças malignas, o aumento da expressão desta molécula foi associada com um fenótipo mais agressivo do tumor. Além disso, nós provedstatistically diferenças significativas no tempo de sobrevida em 5 anos. A sobrevivência de pacientes que apresentam elevada expressão de SDF-1 ( = 6) era significativamente mais curta do que aquelas com a expressão baixa ( = 4).
Zhang et al. mostrou que as expressões de SDF-1 e CXCR4 em cancro da próstata foram maiores do que no caso de hiperplasia benigna. Além disso, o aumento da expressão de SDF-1 estava associada com uma maior capacidade de invasão do tumor e a presença de metástases distantes [29]. Também Kajiyama et ai. Liu et al.