Abstract
TP53
e
FGFR3
mutações são as mutações mais comuns em cancros da bexiga.
FGFR3
mutações são mais frequentes em tumores de baixo estágio de baixo grau, enquanto que
TP53
mutações são mais freqüentes nos tumores de alto estágio de alto grau. Vários estudos têm relatado
FGFR3
e
TP53
mutações a ser mutuamente eventos exclusivos, enquanto outros relataram que eles sejam independentes. Realizou-se uma meta-análise dos resultados publicados para
FGFR3
e
TP53
mutações no cancro da bexiga (535 tumores, 6 publicações) e dados não publicados adicionais para 382 tumores.
TP53
e
FGFR3
mutações não foram eventos independentes para todos os tumores considerados em conjunto (OR = 0,25 [0,18-0,37],
p
= 0,0001) ou para pT1 tumores sozinho (OR = 0,47 [0,28-0,79],
p
= 0,0009). No entanto, se a análise se restringiu aos tumores PTA ou sozinho tumores músculo-invasivo,
FGFR3
e
TP53
mutações foram eventos independentes (OR = 0,56 [0,23-1,36] (
p
= 0,12) e OR = 0,99 [0,37-2,7] (
p
= 0,35), respectivamente). Após a estratificação dos tumores de estágio e grau, nenhuma dependência foi detectado em cinco grupos de tumores considerados (pTaG1 e pTaG2 juntos, pTaG3, pT1G2, pT1G3, pT2-4). Estas diferenças nos resultados pode ser atribuída à existência putativa de duas vias diferentes de progressão do tumor no cancro da bexiga: o
CIS
caminho, em que
FGFR3
mutações são raras, e a via de Ta, em que
FGFR3
mutações são freqüentes.
TP53
mutações ocorrem na fase mais precoce da
CIS
caminho, enquanto eles ocorrem seria muito mais tarde na via Ta, na T1G3 ou estágio músculo-invasivo.
citação: Neuzillet Y, X Paoletti, Ouerhani S, Mongiat-Artus P, Soliman H, de The H, et al. (2012) A Meta-análise da relação entre o
FGFR3
e
TP53
mutações no cancro de bexiga. PLoS ONE 7 (12): e48993. doi: 10.1371 /journal.pone.0048993
editor: Hari Koul, University of Colorado, Estados Unidos da América
Recebido: 24 Abril de 2012; Aceito: 03 de outubro de 2012; Publicação: 13 de dezembro de 2012
Direitos de autor: © 2012 Neuzillet et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. Este trabalho foi apoiado pelo Centro Nacional de la Recherche Scientifique (CNRS), Institut Curie, Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM), Assistance Publique – Hôpitaux de Paris (APHP), Ligue Nationale Contre Cancer le (programa CIT e YN, SO, AH, M-LL, FR, Équipe labellisée), Institut National Contre le Câncer (Inca) e Cancéropôle Ile de France. Yann Neuzillet foi apoiado por uma bolsa da Association pour la Recherche sur le Câncer (ARC). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
o câncer de bexiga é um dos cânceres mais comuns em todo o mundo. É o quarto cancro mais prevalente nos homens e a 11
th cancro mais prevalente em mulheres nos Estados Unidos [1]. Mais de 90% dos cancros são carcinomas da bexiga, que podem apresentar em diferentes fases. tumores Ta são papilar, geralmente tumores de baixo grau, que não invadem além da membrana basal. Carcinoma
in situ
(CIS) é um tumor plana que não invade a membrana basal, mas é sempre de alta qualidade. tumores T1 invadir o tecido conjuntivo sub-epitelial, mas não se infiltrar na muscularis própria subjacente. T2, T3 e T4 tumores invadem a muscular própria, tecidos e órgãos adjacentes perivesical, respectivamente [2]
Há evidência clínica e molecular para a existência de duas vias de progressão do tumor da bexiga:. A assistência técnica e as vias da CEI [3] – [6]. tumores Ta muitas vezes ocorrer após a ressecção cirúrgica, mas que progridem apenas raramente (5-10% dos casos) e imprevisível aos tumores T1 de alto grau e depois para tumores músculo-invasivo. Por outro lado, muitas vezes progride CIS (em cerca de 50% dos casos) para T1 e, em seguida, para tumores invasivos musculares-. Cerca de 80% dos tumores invasivos musculares-se pensa que surgem através da via CIS [5], [7]. A activação de mutações
FGFR3
, que codifica um receptor do factor de crescimento da família de receptores do factor de crescimento de fibroblastos, foram mostrados para ser associado principalmente com a via de Ta de progressão tumoral, tais como mutações têm sido relatados em 65% de tumores PTA, menos frequentemente em pT1 (33%) e tumores pT2-4 (22%) e não a todos no CIS [4], [8], [9] [Tabela S1]. Por outro lado,
TP53
mutações são pouco frequentes nos tumores Ta (19% dos casos) e freqüente tanto no carcinoma
in situ
(52% dos casos) e em tumores músculo-invasivo (44% dos casos) [3] [Tabela S2]. Resultados conflitantes foram publicados sobre a relação entre
TP53 Comprar e
FGFR3
mutações.
TP53
e
FGFR3
mutações foram inicialmente pensado para ser essencialmente mutuamente exclusivas, com
FGFR3
mutações específicas para a via Ta e
TP53
mutações específicas para a via CIS [10], [11]. No entanto, Hernandez
et al.
, Em um estudo de uma grande série de tumores pT1G3 (n = 119), que são particularmente difíceis de gerir clinicamente, relatou
FGFR3
e
TP53
mutações para ser distribuído de forma independente [12]. Isto foi interpretado como indicando que os tumores pT1 constituem um grupo particular de tumores da bexiga, dos quais nem todos se enquadram nas duas vias conhecidas de progressão do tumor da bexiga [6]. Vários outros estudos também têm investigado tanto
FGFR3 Comprar e
TP53
mutações e têm relatado a presença de ambos os tipos de mutação em alguns tumores. O número de mutantes duplos era pequeno em cada um destes relatórios (5 em Zieger
et al
[13];.. 2 em Lindgren
et al
[14], 5 em Lamy
et al
[15];.. 9 em Ouerhani
et al
[16]). Em todos estes estudos, as mutações p53 e mutações FGFR3 foram encontrados estar inversamente relacionado com o grau e o estádio do tumor. Estágio e grau, portanto, pode atuar como potenciais fatores de confusão que podem criar associações espúrias entre os riscos de cada uma das mutações. Apenas grandes tamanhos de amostra com tumores de cada grau e fases permitiria ajustar adequadamente análise de associação destes dois fatores.
Temos feito uso de todos os dados publicados anteriormente (535 tumores) e dados não publicados do Henri Mondor, Foch, IGR, e Saint-Louis hospitais (382 tumores) para análises de ambos
FGFR3
e
TP53
mutações, em uma meta-análise de investigar a relação entre estas duas mutações. Nós investigamos se
FGFR3
e
TP53
mutações eram dependentes (
TP53
ocorrendo mais raramente em
tumores FGFR3
-mutated) ou eventos independentes (
TP53
ocorrem com frequências semelhantes nos tumores com e sem
FGFR3
mutações) nessa grande série de tumores. A frequência de
FGFR3
e
TP53
mutações depende fortemente do estágio do tumor e grau. Estamos, portanto, também realizou a análise em subgrupos de tumores definidos com base em estágio, grau ou ambos os parâmetros.
Resultados
Os dados disponíveis
Mantivemos apenas tumores para que etapa foi documentada a partir dos vários estudos (publicados e não publicados) relatam mutações de ambos
FGFR3
e
TP53
no cancro da bexiga (Tabela 1). Foram excluídos CIS pura e papiloma, como havia apenas dois casos de CIS e um caso de papiloma no total, em todos os estudos considerados. Foram selecionados, assim, 917 tumores no total para o estudo, e grau foi documentado para 827 desses tumores. Grades foram fornecidos no estudo de Lamy
et al.
, Mas era impossível para recuperar informações sobre ambos estágio e grau para um determinado tumor [15]. Nós, portanto, excluídos os dados do estudo de Lamy
et al.
Da investigação combinada de estágio e grau. As fases e graus de tumores para cada estudo são resumidos nas Tabelas S1 e S2 (estudos publicados) e S3 (Tabela estudos não publicados). No total, havia 350 pta, 358 PT1, 209 pT2-4 e 88 G1, G2 249 e 490 tumores G3. Para a análise combinada de estágio e grau, foram considerados os seguintes cinco categorias de tumores: pTaG1 mais pTaG2 (como uma única categoria) tumores, pTaG3, pT1G2, pT1G3 e pT2-4. Classificamos tumores pTaG1 e pTaG2 juntos, e tumores pT2, PT3 e pT4 juntos como, em cada um desses grupos, os tumores em questão são consideradas como constituindo a mesma entidade clínica, independentemente do grau.
Distribuição de
FGFR3
e
TP53
mutações por fase e por grau
FGFR3
estado de mutação estava disponível para 916 dos 917 tumores com um palco documentado e
TP53
estado de mutação estava disponível para 898 dos 917 tumores. Esta meta-análise, como muitos estudos anteriores, mostrou uma relação inversa entre
FGFR3 Comprar e
TP53
mutações tanto para estágio e grau (Figura 1). A frequência de
FGFR3
mutações diminuiu com o aumento estágio e grau: 65% no PTA, 30,2% no PT1, 11,5% no pT2-4 e 69,8% no G1, uma taxa muito similar em G2 (68%) e 18,6% no G3. Estas tendências, tanto para estágio e grau, foram altamente significativos (
p Art 0,0001 e
p Art 0,0001, respectivamente). Por outro lado, a frequência de
TP53
mutações aumentou com o aumento estágio e grau: 6,55% no PTA, 40,6% no PT1, 50,7% em pT2-4, e 3,8% no G1, 12,05% no G2 e 46,3 % em G3. Estas tendências, tanto para estágio e grau, foram altamente significativos (
p Art 0,0001 e
p Art 0,0001, respectivamente)., Sugerindo que estágio e grau podem ser fatores de confusão
Proporção de tumores do tipo selvagem e de tumores com mutações
FGFR3
(linha superior) e
TP53
(linha inferior) como uma função do estágio patológico (coluna da esquerda) e qualidade (por coluna da direita). O número de casos em cada subgrupo é indicado nas barras do gráfico.
Associação entre
FGFR3 Comprar e
TP53
mutações, ajustando para o palco ou para a classe
em seguida, estudou estado de mutação tanto para
FGFR3
e
TP53
, em função do estágio (Figura 2). Para os tumores PTA, o mais comum dos quatro grupos possíveis (tipo selvagem
FGFR3
além do tipo selvagem
TP53
, do tipo selvagem
FGFR3
mais mutado
TP53
, mutado
FGFR3
além do tipo selvagem
TP53
, mutado
FGFR3
mais mutado
TP53
) foi tumores com mutação
FGFR3 Comprar e do tipo selvagem
TP53
(208/336; 61,9% dos casos), seguido pelos tumores de tipo selvagem tanto para
FGFR3
e
TP53
( 106/336; 31,5% dos casos). Um pequeno número de tumores tinham
TP53
mutações e eram ou de tipo selvagem para
FGFR3
(11/336; 3,3%) ou mutado para
FGFR3
(11/336 ; 3,3%). Para os tumores PT1, os dois grupos mais comuns foram os tumores de tipo selvagem tanto para
FGFR3
e
TP53
(134/355; 37,7% dos casos) ou do tipo selvagem para
FGFR3 Comprar e mutado para
TP53
(115/355; 32,4% dos casos). Para tumores invasivos (pT2-4), os dois grupos mais comuns foram também tumores do tipo selvagem tanto para
FGFR3
e
TP53
(88/207; 42,5% dos casos) ou wild- tipo para
FGFR3 Comprar e mutado para
TP53
. (95/207; 45,9% dos casos)
Proporção de tumores com ambos
FGFR3
e
TP53
mutações (laranja), com mutado
FGFR3 Comprar e do tipo selvagem
TP53
(cinza), com o tipo selvagem
FGFR3 Comprar e mutado
TP53
(roxo), ou com o tipo selvagem
FGFR3 Comprar e do tipo selvagem
TP53
(azul), em função do estágio patológico. O número de casos em cada subgrupo é indicado no rectângulo correspondente.
Em seguida, investigou se
FGFR3 Comprar e
TP53
mutações foram eventos independentes. Nós definidos quatro grupos (tipo selvagem
FGFR3
além do tipo selvagem
TP53
, do tipo selvagem
FGFR3
mais mutado
TP53
, mutado
FGFR3
além do tipo selvagem
TP53
, mutado
FGFR3
mais mutado
TP53
). Foi realizado um teste de Mantel-Haenszel, estratificada para o estágio, para determinar se a proporção de tumores com
TP53
mutações diferiu significativamente entre os tumores com o tipo selvagem
FGFR3 Comprar e tumores com
FGFR3
mutações, assumindo uma associação comum para cada etapa. Para todos os tumores considerados em conjunto, encontramos uma forte associação entre o
FGFR3
e
TP53
mutações (OR = 0,49 [0,33, 0,72],
p
= 0,001), tais que as chances de um determinado
FGFR3
tumor -mutated ter um
TP53
mutação tinham metade daqueles para
FGFR3
tumores do tipo selvagem. O teste Briant e interação Dia sugeriu que a associação não diferiram significativamente entre os estratos (
p
= 0,72). Na análise de subgrupos,
FGFR3
e
TP53
mutações não foram significativamente associados em tumores PTA (
p
= 0,20) ou em tumores pT2-4 (
p
= 0,345), mas estes dois tipos de mutação foram fortemente associados, mesmo depois de nível de correção (significância Bonferroni para os três testes = 0,017) em tumores pT1 (ORA = 0,52 [0,30, 0,88],
p
= 0,0009) (Tabela 2).
foi possível realizar uma análise semelhante para a classe, ao contrário de encenar, durante sete estudos (Mongiat-Artus cima, BladderCIT cima, Bakkar
et al.
de 2003, Hernandez
et al.
de 2005, Lamy
et al.
de 2006, Lindgren
et al.
de 2006, Ouerhani
et al.
de 2009), incluindo 638 pacientes para os quais estavam disponíveis dados de status de mutação para ambos
TP53
e
FGFR3
. Foi detectada alguma heterogeneidade na associação entre graus (
p
= 0,05 no Briant e teste Day). Encontramos uma associação entre
FGFR3
e
TP53
mutações única em tumores G3 (OR = 0,57 [0,35-0,93],
p
= 0,0245), mas este achado foi da diferença limítrofe após o ajuste para testes múltiplos.
Associação entre
FGFR3
e
TP53
mutações, ajustando para as categorias combinadas de ambas estágio e grau
em seguida, os tumores atribuída a grupos com base em ambos estágio e grau (Figura 3). Definimos cinco categorias: pTaG1 e pTaG2 (uma única categoria), pTaG3, pT1G2, pT1G3, pT2-4 (todas as fases, uma única categoria). Esta divisão é baseada na noção que, na prática clínica. Houve uma forte associação entre o
TP53
mutações e categoria, como a frequência de
TP53
mutações foi 4,55% em pTaG1-2, 14,3% no pTaG3, de 18,5% em pT1G2, 46,15% em pT1G3 e 50,25% em tumores pT2-4, a maior diferença é, assim, que, entre pT1G2 e pT1G3 tumores. Uma associação entre a
também foi observada FGFR3
estado de mutação e categoria, embora a tendência era menos clara, por causa da forte influência tanto do grau e estágio na taxa de mutação FGFR3: a frequência de
FGFR3
mutação era muito similar em tumores pTaG1-2 (70,2%) e tumores pT1G2 (64,6%), mas significativamente menor nos tumores pTaG3 (40,5%) (χ
2 de teste;
p = 0,0001
). A frequência de
FGFR3
mutação foi ainda menor nos tumores pT1G3 (20,8%) e tumores pT2-4 (11,8%).
Proporção de tumores com ambos
FGFR3 Comprar e
TP53
mutações (laranja), com
FGFR3
mutações e do tipo selvagem
TP53 do tipo selvagem
(cinza), com o tipo selvagem
FGFR3
e mutado
TP53
(roxo), ou com o tipo selvagem
FGFR3 Comprar e do tipo selvagem
TP53
(azul), em função da fase /série. O número de casos em cada subgrupo é indicado no rectângulo correspondente.
Em seguida, estudaram a associação entre a
FGFR3
e
TP53
mutações no estágio cinco tumor /categorias de grau (tabela 3). Como antes, nós definimos quatro grupos dentro de cada categoria (tipo selvagem
FGFR3
além do tipo selvagem
TP53
, do tipo selvagem
FGFR3
mais mutado
TP53
, mutado
FGFR3
além do tipo selvagem
TP53
, mutado
FGFR3
mais mutado
TP53
). No geral, nenhuma associação significativa foi detectada após o ajuste para palco e grupo (OR = 0,69; IC95% = 0,44-1,08, teste de Mantel-Haenszel = 0,075) e nós não detectou heterogeneidade estatisticamente significativa entre os estratos (
p
= 0,41 para heterogeneidade).
FGFR3
e
TP53
mutações foram consideradas como eventos independentes em todas as categorias (Tabela 3), com a proporção de tumores com mutação
TP53
não diferiram significativamente entre o tumores com tipo selvagem e mutante
FGFR3
(Tabela 4).
Foi avaliada a robustez dos resultados, realizando a mesma análise, enquanto representando o potencial estudar o efeito. Resultados semelhantes foram obtidos apesar da correção continuidade necessária para corrigir o tamanho das amostras muito pequenas em alguns definido pela combinação de fase /série.
Discussão
Devido às suas distribuições inversa em função do estágio e graus, com o pequeno número de tumores dupla mutado (
FGFR3
mutado,
TP53
mutado) observado em pequenas séries,
FGFR3 Comprar e TP53 mutações tinha sido relatada a ser eventos mutuamente exclusivos, com
FGFR3
mutação fortemente associada com a via Ta e
TP53
mutação fortemente associada com a via CIS [10], [11]. O grupo do Real mostrou, pela primeira vez, em um estudo de uma grande série de tumores, que
FGFR3
e
TP53
mutações foram eventos independentes em tumores pT1G3 (
n
= 119) [12]. Nossa meta-análise de 917 tumores (incluindo todos os dados publicados (535 tumores) mais uma série adicional de 382 tumores de todas as fases e graus) confirma e amplia os resultados de Hernandez
et al.
, Mostrando que
FGFR3
mutações e
TP53
mutações são eventos independentes não só em tumores pT1G3 (confirmados aqui para 260 tumores pT1G3), mas também no PTA, pT1G2 e tumores músculo-invasivo (pT≥2). Por outro lado,
FGFR3
mutações e
TP53
mutações não foram eventos independentes se considerarmos todos os tumores juntos, sem levar em conta estágio e grau (
p
= 0,0001), ou todos os tumores pT1 juntos (pT1G2 e tumores pT1G3) (
p
= 0,0009).
as duas vias conhecidas de progressão do tumor e as diferentes frequências de
FGFR3
e
TP53
mutações nos diferentes grupos de tumores definidos com base no grau e estágio pode ser responsável por estas observações. Numa fase inicial (pTaG1 e pTaG2), a frequência de
FGFR3
mutação foi alta na via de baixo grau Ta, enquanto que TP53 da
mutação era muito baixo. Se estes tumores progredir para tumores músculo-invasivo, eles vão levar
TP53
mutações com frequência similar à de tumores da via CIS. De fato, em nossa meta-análise, músculo-invasivo
TP53
mutações foram encontradas em 42% dos tumores com
FGFR3
mutação (10/24). Esta proporção é mais baixa do que os 52% (95/183) dos tumores músculo-invasivo com o tipo selvagem
FGFR3
observado, mas não de forma significativa. Para os tumores da via Ta, a frequência de
TP53
mutações parece aumentar gradualmente com o estágio, de PTA (11/219; 5% dos tumores com
FGFR3
mutações também têm
TP53
mutações) ao pT1 (29/106;
TP53
mutações em 27% dos tumores) e tumores pT2-4 (10/24;
TP53
mutações em 42% dos tumores ). Grade também parece ser importante, como, por
tumores -mutated FGFR3
, a frequência de
TP53
mutação foi de 17% em tumores pT1G2 e 37% em tumores pT1G3. A frequência de
FGFR3
mutação se verificou ser muito semelhante em tumores pT1G2 e pTa G1G2, sugerindo que a maioria dos tumores pT1G2 são derivados da via de Ta em vez da via CIS. Consistente com esta hipótese, a frequência de
TP53
mutação em tumores pT1G2, embora maior do que em tumores PTA (18% versus 7%), foi encontrado para ser muito menor do que a relatada em casos de displasia ou CIS tumores (65-72%) [3], [17]. Assim, a falta de independência do
FGFR3
e
TP53
mutações quando todos os tumores pT1 são considerados em conjunto, podem refletir os dois caminhos diferentes que dão origem aos tumores desta fase, com diferentes frequências de
TP53
mutação.
Há também explicações mais complexas para as conclusões desta meta-análise. dados de mutação para uma série de tumores fornecer apenas uma imagem da situação, a partir do qual a progressão de tumores individuais é inferida. validação definitiva do modelo proposto vai exigir extensos estudos de
TP53
e
FGFR3
mutações em múltiplos tumores dos pacientes individuais, incluindo a não-musculares tumores ambos invasiva e músculo-invasivos.
deve notar-se que uma elevada proporção de tumores da bexiga apresentar um fenótipo de tipo selvagem (sem
FGFR3
ou
TP53
mutações): 32% de tumores Ta, 40% de T1 tumores e 43% dos tumores T2-4). Estes tumores provavelmente tem mutações em outros animais que genes
FGFR3
ou
TP53
, mas com um efeito semelhante (ativação do
FGFR3
via de sinalização em tumores Ta de baixo grau e mutações de genes que causam a instabilidade genética em tumores de grau elevado ou de fase alta).
RAS
mutações, que são observados em cerca de 10% dos cancros da bexiga e nunca são encontrados com
FGFR3
mutações, são pensados para afetar a via de sinalização FGFR3 [5], [18].
MDM2
amplificações, que ocorrem em cerca de 6% dos cancros da bexiga músculo-invasivo [19] T1 e, deverá conduzir a
TP53
inativação. Outras mutações recentemente identificado [20], ou ainda a ser identificados também pode explicar a ausência de
FGFR3
e
TP53
mutações.
Recentemente, mostrou que a maioria (80 %) tumores músculo-invasivo com
FGFR3
mutações abrigar
CDKN2A
deleções, resultando na perda de ambos p16INK4a e P14ARF [21]. A perda de P14ARF deverá conduzir à activação de MDM2, diminuindo assim os níveis de TP53. No entanto, em tumores com
FGFR3
mutações, homozigótico
CDKN2A
eliminação e
TP53
mutação pode ocorrer em conjunto (dados não mostrados), sugerindo que estes dois acontecimentos não são mecanismos alternativos de inactivação para o mesmo caminho. Na verdade, a perda de
CDKN2A
também leva à supressão de
p16INK4a, que codifica uma quinase ciclina inibidor controlar a atividade da proteína RB através CDK4 no G1 /S. Além disso, p14ARF pode ter várias actividades independentes de TP53 [22] e
TP53
mutações podem ter efeitos de ganho de função [23]. Assim, os vários eventos (
perda de CDKN2A
e
TP53
mutação) pode contribuir de forma adicional ao fenótipo transformado.
As meta-análises são muitas vezes realizadas em dados clínicos , mas mais raramente em dados biológicos. Meta-análise é muito mais poderosa do que a análise individual, mas tem vários inconvenientes: 1) Diferentes estudos utilizam diferentes metodologias. De fato, nos estudos analisados, diferentes métodos foram usados para avaliar a frequência de ambos
FGFR3
(instantâneo ou seqüenciamento) e
TP53
(sequenciação directa ou FASAY) mutações. Além disso, diferentes exons foram exploradas em diferentes estudos: exons 7, 10, 15 ou 7, 10, 13, 15 para
FGFR3 Comprar e exons 5-8, 4 a 9, 4-11 ou 2-11 para
TP53
. Diferenças devido à escolha de exons estudados devem ser insignificante; mutações do exão 15 do
conta FGFR3
para apenas 3% de todas as mutações identificadas quando exons 7, 10 e 15 são considerados, e mutações em exons 2, 3, 4, 9, 10 e 11 do
TP53
mutações são responsáveis por apenas 6,3% de todas as mutações identificadas quando exons 2 a 11 deste gene são considerados. FASAY e sequenciação directa são de natureza muito diferente (FASAY ser um ensaio funcional e mais sensível), mas eles dão resultados muito semelhantes [24]. A maioria dos tumores exploradas pelo método FASAY na nossa análise foram pTaG1-G3 ou tumores pT1G2. A comparação dos dados FASAY com dados de sequenciamento direto para os mesmos tumores mostraram as freqüências de
TP53
mutação obtidos com estas duas técnicas para ser muito similar. 2) Esta meta-análise também pode ter sido influenciado pela falta de avaliação de fase e determinação série. Os estágios e graus atribuídos a tumores podem apresentar diferenças, entre os estudos incluídos na meta-análise. Isto pode ser problemático para os tumores PT1, porque alguns tumores PTA pode ter sido superestadiado e classificados como tumores pT1 [25].
Esta meta-análise é um bom exemplo do efeito de fatores de confusão que não são tidos em conta. Tais fatores podem não só modificar a magnitude de qualquer associação, mas também criar associações espúrias. amostras maiores e dados mais pormenorizados são, portanto, necessários para uma análise estatística válida. Em tais condições, meta-análise é uma abordagem eficaz, tornando-se possível tirar conclusões confiáveis, pois baseia-se nos pontos fortes de vários estudos que podem não ser suficientemente poderosos individualmente para gerar resultados conclusivos. No entanto, meta-análises só pode ter em conta os factores de confusão que foram efectivamente medidos. Outras variáveis podem afectar desconhecidos a relação entre a via e a gravidade da doença e permanecer não detectada. Todas as publicações retidas para esta análise teve uma alta qualidade dos relatórios, tornando-se possível extrair as informações relevantes
.
Apesar das deficiências conhecidas de meta-análise, a grande amostra ea homogeneidade dos resultados após add ajuste peso às nossas conclusões: descobrimos que
FGFR3
e
TP53
mutações ocorreram de forma independente quando estágio e grau foram tidas em conta, e que a frequência de
TP53
mutação foi alta em tumores pT1G3 e pT2-4, independentemente da presença ou ausência de
FGFR3
mutações nestes tumores. Assim,
TP53
mutações podem ocorrer em tumores da via Ta, quando estes tumores progridem. No entanto, o período de tempo de
TP53
mutação difere consideravelmente entre os dois caminhos:
TP53
mutações ocorrem antes da invasão da membrana basal no carcinoma
in situ
via, enquanto que eles provavelmente ocorrer depois ou durante a invasão da membrana basal na via de Ta. Nossos resultados também indicam que é necessário cuidado na análise dos tumores de bexiga, como ambas as vias de progressão do tumor para cânceres de bexiga deve ser levado em conta na interpretação dos dados.
Materiais e Métodos
Estudos
Estudos de pacientes adultos com carcinoma da bexiga foram elegíveis para inclusão na análise se eles relataram
FGFR3 Comprar e
TP53
mutações em função do estágio. Doentes pediátricos (13 casos de carcinoma urotelial) foram excluídos porque o processo de carcinogênese nesses pacientes é provavelmente diferente do que nos casos em adultos [26].
Foram pesquisados os bancos de dados (MEDLINE, PubMed, Embase) com referências cruzadas termos de pesquisa personalizadas para cada um dos motores de busca utilizados, para identificar artigos relevantes publicados em Inglês e lidar com
FGFR3
e
TP53
mutações nos carcinomas da bexiga. Foram pesquisados os listas de referências de artigos de revisão manualmente para identificar publicações adicionais. Em conformidade com as orientações PRISMA [27], os oito estudos identificados, incluindo um total de 963 pacientes são apresentados na Figura 4. Todos, exceto um (Hernandez
et al.
, 2005) destes estudos foram retrospectivos simples ou estudos multicêntricos investigaram a associação entre mutações genéticas e caminhos no carcinoma urotelial. Um estudo centrou-se no palco pT1G3 (Hernandez
et al.
, 2005), enquanto que os outros incluídos pacientes no estágio inicial (PTA e pT1) (Lindgren
et al.
2006), tarde estágios (pT1-4) (Ouerhani
et al.
, 2009) ou em qualquer fase. Três estudos em questão pacientes recém-diagnosticados (Bakkar 2003, Hernandez
et al
, 2005;. Lamy 2006). Dois desses estudos ainda não foram publicados e são indicados abaixo pelo nome do investigador principal ou o programa de apoio ao estudo plus “UP” (para não publicados, assim, Mongiat-Artus UP e BladderCIT UP)
as informações sobre o tratamento (irradiação ou quimioterapia) antes da biópsia não estava disponível para uma grande proporção dos pacientes. Por isso, incluímos todos os pacientes, independentemente do seu tratamento prévio. As principais características desses oito estudos estão resumidos na Tabela 1. Nós referem-se às publicações para todos os detalhes nos casos de dados publicados. No estudo bexiga CIT UP, os tumores PTA e pT1 eram de casos incidentes e os tumores pT2-4 eram de ambos os casos recentemente diagnosticados e progredindo (pacientes com história de tumores não-músculo-invasivos anteriores).
FGFR3
mutações foram avaliadas pela técnica SNaPshot no estudo BladderCIT UP [28] e por PCR alelo-específico [29] no estudo Mongiat-Artus UP.
TP53
mutações foram avaliadas por sequenciação directa em ambas as cadeias, seguido de confirmação das mutações identificadas em uma PCR independentes no estudo BladderCIT UP e pelo método FASAY [30], [31] seguido de confirmação do mutações identificadas por um PCR independente no estudo Mongiat-Artus UP.
Nós não incluem o estudo de van Rhijn
et al.
(2004) [32], porque alterações TP53 foram avaliadas por imunohistoquímica neste estudo e demonstrou-se que há apenas 57-71% de similaridade entre as alterações detectadas pela avaliação de mutação e os detectados por imuno-histoquímica [Tabela S3]
as seguintes variáveis foram coletadas:.
TP53
e
FGFR3
mutações, estágio e grau da doença e do tipo de mutação. Dados para pacientes individuais estavam disponíveis para quatro estudos (Mongiat-Artus cima, BladderCIT cima, Lindgren
et al.
De 2006, Ouerhani
et al.
, 2009) [Tabela S4 e S5] . Para os outros relatórios, os dados foram extraídos diretamente das publicações através de tabelas de referência cruzada. Durante três estudos (Bakkar
et al
, 2003;.. Lindgren
et al
, 2008;. Ouerhani
et al
de 2009), os autores foram contatados e forneceu informações adicionais.
Os dados biológicos e patológicos
As frequências de
FGFR3
e
TP53
mutações por estágio grau e tumor foram registrados em todos os estudos. Os dados foram extraídos das publicações ou a partir dos dados brutos, quando disponível [Tabela S4 e S5].
A classificação foi avaliada com a classificação da OMS de 1973, em todos, mas um dos estudos (Zieger
et al.
, 2005), o estudo restante usando a classificação Bergkvist. Graus 1 e 2 desta classificação foram classificados como graus 1 e 2, respectivamente, da classificação da OMS de 1973. Graus 3 e 4 (um tumor) da classificação Bergkvist foram consideradas para corresponder ao grau 3 da classificação da OMS de 1973.