Poli [ADP-ribose] polimerase 1 (PARP-1) é altamente abundante em células. A uma concentração de cerca de um nuclear PARP-1molecule por nucleossomas 20, que tem o potencial de afectar muitos processos nucleares. Ela catalisa a polimerização dependente de NAD + de longas cadeias de poli-ADP ribose (PAR) sobre si mesma, em resposta a danos no ADN e outras pistas. Aqui, nós relatamos que a modificação Auto de PARP-1 pode desempenhar um papel tanto acompanhante proteína estrutura e histona da cromatina.
Nós determinamos constantes de dissociação dos vários complexos de PARP-1-cromatina utilizando interações de alto rendimento por fluorescência FRET intensidade. Não modificado PARP-1 engata em pelo menos dois modos com cromatina, um dos quais não envolvem ADN extremidades livres, consistente com o seu papel como proteína de arquitectura da cromatina ligação de alta afinidade.
Auto-PARylation de PARP-1activated por uma variedade de estímulos associados com a transcrição e a reparação do ADN regula a sua capacidade de se compactar cromatina. Esta modificação reduz PARP-1 afinidade para cromatina intacta, mas não para nucleossomos com extremidades de ADN expostas. AM-PARP-1 concorre diretamente com o DNA de histonas, como previsto a partir de nossas medições de afinidade e de acordo com dados chaperones histonas.
Oferecemos um modelo de PARP-1 liga-se nucleossomos com alta afinidade por todo o genoma, assim, condensação da cromatina.
ALS e paraplegia espástica (SP) são classificados pela degeneração dos neurônios motores, levando à atrofia muscular e até mesmo a morte prematura. Um tipo de MNDs está relacionado com a respiração mitocondrial prejudicada e distribuição mitocondrial. Aqui, mostramos que Miro1 é essencial para o desenvolvimento de núcleos motores cranianos. Proteínas
mitocondrial Rho (Miro) GTPase são essenciais para o transporte porque eles são os receptores de superfície conhecidos apenas que atribuem mitocôndria para esses adaptadores e motores. O movimento das mitocôndrias neuronal entre o corpo celular e sinapse é regulada por adaptadores chamados tráfico de proteínas cinesina. Nós construímos um sistema cre-loxP para nocautear Miro1 em camundongos.
Infelizmente, os ratos KO são letalidade. O germe-line Miro1 KO do mouse completa embriogênese, mas não consegue respirar e morre no nascimento. Estes dados indicam que a morte de ratinhos KO Miro1 é causada por defeitos específicos nos neurónios motores necessários para a respiração após o nascimento.
Em seguida, vamos explorar o mecanismo molecular. Descobrimos que Miro1 eliminação conduz a perda de neurónios específicas necessárias para a respiração. Mitocôndrias marcadas com Mito Rastreador tinha a morfologia tubular característica e foram distribuídos por todo o citoplasma e no filopódios, os MEFs Miro1 KO foram agrupados em torno do núcleo e ausente do filopódios.
Para resumo, estes resultados mostram que os defeitos primários na motilidade mitocondrial e distribuição e causar doença neurológica.