Surpreendentemente, descobrimos que a proteína Cdc14A está sob condição de não-pressionados uma proteína bem equilibrada, sem retorno da proteína detectável dentro de 4 tempos. A seguir, investigou o programa de tempo para a deposição de proteína ofhCdc14A seguinte inibição do proteosoma com MG132. A inibição da actividade de proteassoma MG132 por rapidamente resulta na deposição e estabilização ofp53, uma vez que a proteína p53 é normalmente rapidamente degradado de um modo dependente de proteassoma. Portanto, embora hCdc14A recolhe dramaticamente inibição próxima proteassoma, nossos resultados não recomendam que o hCdc14A proteinis rapidamente transformando ao longo de um dependente do proteassoma-manner.Lenalidomide

Desde MG132 incubação resultou na indução de p53 antes da indução de hCdc14A, consideramos que talvez p53 foi mediando a manifestationdc1 de hC4A. tinha-se verificado que graus hCdc14A subido para precisamente a mesma extensão seguinte cura MG132 em ambas as linhas celulares. Além disso, quantidades de proteína hCdc14A foram consideravelmente aumentada também na linha de células mutante p53 HT29. Na verdade, MG132 aumentou substancialmente hCdc14A aparência independentemente da p53 que está em todas as linhas celulares examinadas. Participar no ciclo celular regulation.Thus para além do gene supressor tumoral p53 foi recentemente é comprovado para se ligar a e desfosforilado pela fosfatase hCdc14A, desregulação da hCdc14A pode provavelmente desempenham Arole na carcinogénese. No entanto, a regularidade das mutações encontradas no gene hcdc14A em linhas de células tumorais é bastante baixa. Empregando dois anticorpos anti-hCdc14A monoclonais distintas nós aqui presentes que a fosfatase hCdc14A é diferencialmente expressos em linhas celulares de cancro humano.

Em melanoma e neuroblastoma linhas celulares de expressão hCdc14A foi observado para se tornar surpreendentemente baixa ou não detectável, enquanto sua aparência variaram substancialmente entre as diferentes linhas de células de tipos de câncer adicionais. Quando a expressão da proteína de hCdc14A nas linhas celulares de cancro originais foi definido juntamente com o estado de p53 dos traços, um forte preconceito contra a alta termo hCdc14A foi observada no tipo selvagem, mas não células que expressam p53 mutantes. O erro forte para baixo a expressão de hCdc14A em células cancerosas com o estado de p53 do tipo selvagem em comparação com as células cancerosas com p53 mutante indica-nos que certamente é um processo de selecção sólido contra as células que expressam quantidades elevadas de hCdc14A no contexto de p53 funcional. É provável que a frase alta hCdc14A pode ativar p53 em última análise, causando a parada do ciclo celular ou apoptosis.We anteriormente revelou que hCdc14A e hCdc14B pode dephosphorylate o site ser315 de p53 in-vitro. Aqui demonstramos prova o mesmo papel em relação hCdc14A indephosphorylaing o site ser315 de p53 in vivo. Estes website R315 de p53 pode ser fosforilada por Cdk2 Cdk1 /cyclinA e /ciclina B in vitro e por tecido aurora quinase Ain.

Para que a ligação de p53 para centrossomas Não repetitiva, o que é essencial no âmbito do regulamento da duplicação centrossoma padrão do local ser315 de p53 tem-se demonstrado ser crucial. falhas Cdc14 pode ser resgatado por igualmente hCdc14A e hCdc14B em células de levedura, indicando que eles são homólogos funcionais. Mas, enquanto hCdc14A se localiza centrossomas a fosfatase hCdc14B se localiza nucléolo recomendando que os dois fosfatases pode ter vários conjuntos de substratos e, portanto, pode servir características únicas em associação cells.The de hCdc14A de centrossomas e o fato de que ele pode se comunicar com e dephosphorylate p53, tanto in-vitro e in vivo sugerem que hCdc14A provavelmente pode controlar p53 function.AGI-5198

Além disso, ele é colocado por sua localização centrosomal em estreita proximidade com o seu número de outras cinases do ciclo celular e seus substratos tais como Cdk1, Cdk2, Plk1, Aurora cinases e BRCA1. Os resultados demonstram que é hCdc14A numa sofisticada usando Cdk1 e ciclina B durante a interfase mas não durante a mitose sugerem que hCdc14A pode garantir que a experiência do complexo Cdk1 /ciclina T é suprimida por hCdc14A durante a fase de entre, mas não durante a mitose.