Abstract

Fundo

Câncer ginecológico é caracterizada por hipoxia tumor. No entanto, o papel do fator 1α hipoxia-inducible (HIF-1α) em câncer ginecológico permanece obscuro.

Método

bases de dados electrónicas, incluindo Cochrane Library, PubMed, Web of Knowledge e ensaios clínicos registros foram procurou desde o início até outubro de 2014 para publicados, estudos de caso-controle avaliando a associação entre o HIF-1α e as características clinicopatológicas de câncer ginecológico. Nós agrupou resultados de 59 estudos utilizando modelos fixos ou aleatórios de efeitos e resultados apresentam como odds ratio (OR) seguindo as diretrizes PRISMA.

Resultados

A nossa meta-análise, que incluiu 6.612 mulheres, demonstraram que a expressão de HIF-1α foi associada com as características clinicopatológicas de cancro ginecológico. A expressão de HIF-1α em câncer ou limítrofe tecido foi significativamente maior do que no tecido normal (câncer vs. normal: odds ratio (OR) = 9,59, intervalo de confiança de 95% (CI): 5,97, 15,39, p 0,00001; limítrofe versus normais: OR = 4,13, 95% (Cl): 2,43, 7,02,

P

0,00001; cancro vs limítrofe: OR = 2,70, 95% (Cl): 1,69, 4,31,

p Art 0,0001). A expressão de HIF-1α no estadio III-IV ou metástases linfonodais foi significativamente maior do que na fase I-II ou que, sem metástase ganglionar, respectivamente (OR = 2,66, 95% (CI): 1.87,3.79,

P

0,00001; OU = 3,98, 95% (Cl): 2.10,12.89,

P

0,0001). HIF-1α foi associada com grau histológico de cancro (Grau 3 Grau 1 vs: OR = 3,77, 95% (Cl): 2.76,5.16,

P

0,00001; Grau 3 Grau 2 vs: OU = 1,62, 95% (Cl): 1.20,2.19,

P

= 0,002; Grau 2 contra Série 1: OR = 2,34, 95% (Cl): 1.82,3.00,

p

0,00001), a 5 anos de sobrevida livre de doença (DFS) taxas (OR = 2,93, 95% (IC): 1.43,6.01,

p

= 0,001) e 5 anos a sobrevida global (OS ) taxas (OR = 5,53, 95% (IC): 2.48,12.31,

p Art 0,0001)

Conclusão

HIF-1α é associado com o maligno. grau, estágio FIGO, grau histológico, metástase linfonodal, 5 anos taxa de sobrevivência e taxa de recorrência do câncer ginecológico. Pode desempenhar um papel importante no tratamento clínico e avaliação prognóstica

Citação:. Jin Y, Wang H, Ma X, Liang X, Liu X, Wang Y (2015) Características clínico-patológicos do ginecológico câncer associado à hipóxia Fator induzível 1α Expression: uma meta-análise que incluiu 6.612 indivíduos. PLoS ONE 10 (5): e0127229. doi: 10.1371 /journal.pone.0127229

Editor do Academic: William B. Coleman, University of North Carolina School of Medicine, Estados Unidos

Recebido: 08 de janeiro de 2015; Aceito: 12 de abril de 2015; Publicado: 19 de maio de 2015

Direitos de autor: © 2015 Jin et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel e seus arquivos de suporte de informação

financiamento:.. os autores não têm apoio ou financiamento para relatar

Conflito de interesses:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

os tumores sólidos superar sua própria vasculatura além do tamanho de vários milímetros cúbicos, resultando em hipóxia. HIF-1 regula a homeostase celular de oxigénio, e desempenha um papel chave em condições hipóxicas que ocorrem durante a angiogénese de tumor, invasão e metástase [1, 2]. HIF-1 é um factor de transcrição heterodimérica que consiste em subunidades a e p. A subunidade β é expresso constitutivamente, enquanto que a expressão de HIF-1α é regulada pelo nível de [3], o oxigénio. Em condições de normóxia, HIF-1α seria comprometido devido a ubiquitination alvo e degradação pelo proteassoma. Este processo é mediado por ligação directa de von Hippel-Lindau proteína supressora de tumor (pvhl), um componente do complexo de ligase de ubiquitina-proteína E3, com o domínio de transactivação do terminal N mínima (N-TAD) localizado dentro da degradação dependente de oxigénio domínio de HIF-1α. Pelo contrário, em condições hipóxicas, a degradação do HIF-1α é suprimida e a expressão de HIF-1α aumentaria. A sobre-expressão de HIF-1α tem sido relatada em muitos tipos de doenças malignas, incluindo os do pulmão, da próstata, da mama, do cólon e carcinoma do recto, e em ambas as metástases regionais e distantes, o que implica que o HIF-1α pode desempenhar um papel essencial na progressão tumoral [ ,,,0],4-6].

malignidades ginecológicas, incluindo câncer de endométrio, colo do útero, ovário, vulva e vagina, são responsáveis ​​por 11,7% de todos os novos cancros nas mulheres. A American Cancer Society estima que 94,990 mulheres foram diagnosticadas com e 28,790 mulheres terão morrido de, cancro do tracto genital feminino em 2014 nos EUA [7]. Assim, é importante compreender os mecanismos da carcinogênese e progressão no câncer ginecológico. HIF-1α é uma proteína de sobrevivência celular chave durante a hipóxia, e está associada com a progressão de tumores e metástases em vários tumores sólidos. Em neoplasias malignas ginecológicas, Birner

et al

. [8] sugeriu que HIF-1α foi um facilitador da progressão da pré-maligna. Acs

et al

. [9] e Birner

et al

. [10] encontraram uma correlação consistente entre o estágio do tumor e expressão HIF-1α. Além disso, Seeber

et al

. [11], Bachtiary

et al

. [12] e Shimogai

et al

. [13] propôs HIF-1α como um preditor de mau prognóstico e resposta terapêutica. No entanto, os resultados de estudos sobre HIF-1α em câncer ginecológico nem sempre são consistentes. Realizou-se a primeira meta-análise para avaliar a associação potencial entre HIF-1α e os parâmetros clínico de câncer ginecológico. Os cancros da vulva e vagina são relativamente raros. Nenhum estudo em HIF-1α e as características clinicopatológicas destas doenças tem sido publicado. Cânceres de endométrio, colo do útero e ovário foram incluídos como subgrupos na análise final.

Materiais e Métodos

Estratégia de busca

Realizamos as pesquisas de literatura e meta-análise após a Itens de relatório preferidos para revisões sistemáticas e meta-análises (PRISMA) orientações (S1 PRISMA Checklist). As bases de dados electrónicas, incluindo Cochrane Library, PubMed, Web of Knowledge e ensaios clínicos registros, foram utilizados para pesquisas sistemáticas da literatura. Elegibilidade era restrita a estudos publicados desde o início a outubro de 2014, com resumo ou texto integral disponível. Não há restrições de linguagem foram feitas. Utilizou-se “factor de hipóxia indutível”, “HIF-1α”, ou “HIF-1”, concatenado com “ginecológico”, “endométrio”, “cervical”, “ovário”, “vulva”, “vaginal” e “tumores “,” câncer “,” carcinoma “, ou” doença maligna “, como termos de pesquisa. Uma pesquisa abrangente de listas de referência de todos os artigos de revisão e estudos originais recuperadas por este método foi realizada para identificar relatórios adicionais.

Critérios de inclusão e exclusão

Os critérios de inclusão para os estudos primários foram as seguintes : (1) prevenção do câncer ginecológico primário deve ser patologicamente comprovado; e (2) expressão de HIF-1α deve ser detectada com imuno-histoquímica (IHC); e (3) a associação entre variáveis ​​clínico-patológicas e expressão HIF-1α deve ser descrito; ou (4) fornece informações sobre os dados de sobrevivência; e (5) A metodologia laboratorial de IHC: (5.1) a coloração da proteína deve ser descrito (nuclear, citoplasma); e (5.2) a conservação amostra de tecido (fixação em formol, álcool ou parafina); e (5.3) a descrição do processo de teste revelação dos factores biológicos com o primeiro tipo de anticorpo, a identificação do clone, segundo tipo de anticorpo, as características de reacção, o método de coloração e método de desmascaramento epitopo; e (5.4) descrição do controle negativo e positivo; e (5.5) definição do nível de positividade do teste; ou (5.6) o patologista avaliar o resultado IHC foi duplo-cego (ou aleatória) para paciente dados clínico-patológico e resultado. Quando os estudos foram retrospectivos, o patologista ofuscante foi simples-cego

Os critérios de exclusão para estudos primários foram os seguintes:. Estudos (1) revisão, abstratos, relato de caso, animais ou celulares; ou (2) não é possível extrair os dados exatos (a associação entre variáveis ​​clínico-patológicas e expressão HIF-1α); ou (3) os pacientes receberam quimioterapia, radioterapia, terapia-alvo antes da operação; e (4) a metodologia laboratorial de IHC: (4.1) o desenho do estudo não foi definida; ou (4.2) não era clara e nenhuma descrição detalhada da metodologia padrão de laboratório sobre IHC; ou (4.3) o patologista mascaramento não foi cego.

procedimento e Revisão de extração de dados

Os títulos e resumos foram estudados para avaliar os critérios de inclusão e examinado de forma independente para a elegibilidade por dois revisores (Y. Jin e H . Wang). Discordâncias foram resolvidas por consulta de um terceiro revisor (Y. Wang). As características do estudo foram registrados da seguinte forma: (1) o primeiro autor, a nacionalidade dos pacientes incluídos, ano de publicação do artigo; (2) o número de pacientes, os casos de cancro, casos de fronteira e os controlos para expressão de HIF-1α positivo (HIF-1α expressão pontuação ≥ +), que foi medido pela semi-quantitativamente estimativa da percentagem de células de tumor que expressam o HIF-1α, intensidade de coloração celular e extensão da coloração; (3) o número de casos de teste (estágio FIGO III-IV, metástases em linfonodos) e casos de controle (FIGO I-II, sem metástases em linfonodos) para a expressão positiva HIF-1α; (4) o número de casos de teste (grau 3 ou grau 2) e casos de controle (grau 1); (5) a taxa de risco de sobrevida livre de doença em 5 anos (DFS) e OS.

As avaliações de qualidade

Newcastle-Ottawa Scale (NOS) foi utilizado para avaliar a qualidade metodológica do incluiu estudos de caso-controle. Um estudo pode ser atribuído um ponto para cada item numerado em nove das NOS. Estudos com dezenas de 0-4 são considerados como de baixa qualidade, enquanto 5-9 como de alta qualidade.

A análise estatística

Nós estimamos o odds ratio (OR) para as variáveis ​​clínico-patológicas (FIGO III-IV vs. FIGO I-II; metástases em linfonodos vs. sem linfonodos metástases; Grau 3 ou Grau 2 vs. Grau 1), de 5 anos DFS e sobrevida global em 5 anos (OS). Estatística pressuposto de heterogeneidade entre os estudos foi verificada usando o X

2-baseado no Q-teste. Quando

I

2 foi inferior a 50%, odds ratio agrupados, risco relativo e intervalo de confiança de 95% (IC) foram calculados utilizando o método de Mantel-Haenszel com modelos de efeitos fixos. Considerando foi detectada heterogeneidade significativa entre os estudos (

I

2 50%), foi adoptado um modelo de efeito aleatório. Se necessário, uma análise de sensibilidade também foi realizado para avaliar a influência de estudos individuais sobre o efeito final. Todos os valores de p foram em frente e verso. A

p

-valor 0,05 foi considerado significativo. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando RevMan 5.0 software (The Cochrane Collaboration, Oxford, Reino Unido).

Resultados

Inscrição e de qualidade avaliação dos estudos incluídos

A pesquisa bibliográfica rendeu um total de 698 estudos e texto completo ou resumo foi obtido para 91 estudos. Trinta e dois destes estudos não cumprem os critérios de inclusão: quatro estudos referidos um conjunto de dados duplicados, vinte e três estudos não apresentaram dados exactos para extrair e cinco foi estudos com animais. Finalmente, cinquenta e nove estudos independentes [2, 8-65] foram incluídos na revisão final. Os processos de selecção estudo foram resumidas no diagrama de fluxo (Figura 1). As principais características dos estudos elegíveis foram apresentados na Tabela 1, e as avaliações dos estudos incluídos qualidade foram resumidos na Tabela S1.

Sessenta estudos independentes foram incluídos na revisão final.

expressão HIF-1α e variáveis ​​patológicas

Todos os 59 estudos, incluindo 6612 pacientes explorou a associação entre a expressão HIF-1α e as variáveis ​​clínico-patológicas de câncer ginecológico. Eu executei reunidas análises com os dados disponíveis sobre a associação entre a expressão de HIF-1α e tipo patológico, estágio FIGO, tipo histológico e metástases em linfonodos. Tabela 2 resumidas as avaliações de associação entre a expressão HIF-1α e as variáveis ​​clínico-patológicas de câncer ginecológico

O estimado em pool ou para todos os estudos mostraram um risco significativamente aumentado de progressão maligna (câncer vs. fronteira:. OR , 2,70; 95% CI, 1,69-4,31, câncer vs. normais: OR, 9,59; IC 95%, 5,97-15,39, borderline vs. normais: OR, 4,13; 95% CI, 2,43-7,02, figuras 2-4, tudo

p Art 0,05), maior estágio FIGO (III-IV vs. I-II: OR, 2,66; 95% CI, 1,87-3,79, Fig 5,

p Art 0,05), tipo mais elevado grau (grau 3 vs. grau 1: OR, 3,77; 95% CI, 2,76-5,16, grau 3 vs. grau 2: OR, 1,62; 95% CI, 1,20-2,19, grau 2 vs. Grade 1: OR, 2,34; 95% CI, 1,82-3,00, Figs 6-8, todos os

p Art 0,05) e metástases em linfonodos (sim x não: OR, 3,98; IC 95%, 2,10 -12,89, Fig 9,

p Art 0,05) em pacientes com expressão positiva HIF-1α. Para explorar as potenciais fontes de heterogeneidade, realizamos análises de subgrupo considerando tipos de tumores de câncer ginecológico, incluindo endométrio, colo do útero e câncer de ovário. As análises quase todos subgrupo mantido a associação positiva com exceção da análise de endometrial (limítrofe vs. normais: OR, 3,48; IC 95%, 0,75-16,15, Fig 4,

p

= 0,11, Grau 3 Grau 2 vs. : OR, 1,15; 95% CI, 0,65-2,01, Fig 7,

p

= 0,63) e câncer cervical (Grau 3 vs. Grau 2:. OR, 1,62; 95% CI, 0,91-2,90, Fig 3,

p

= 0,10).

expressão HIF-1α e 5 taxa de DFS year, de 5 anos taxa oS

o estimado em pool ou por 14 estudos sobre o valor prognóstico da expressão HIF-1α mostrou a expressão positiva de HIF-1α foram associados com menor de 5 anos DFS e oS taxa ( 5 anos vs. ≥ 5 anos, Figuras 10 e 11,

p Art 0,05), o OR (IC 95%) foi 2,93 (1.43,6.01), 5,53 (2.48,12.31) , respectivamente. Para explorar as potenciais fontes de heterogeneidade, realizamos análises de subgrupo. No entanto, o subgrupo de endometrial (DFS: OR, 1,56; 95% CI, 0,36-6,83, Fig 10,

p

= 0,55, OS: OR, 3,67; IC 95%, 0,52-25,63, Fig 11 ,

p

= 0,19) e de ovário (DFS: OR, 2,42; 95% CI, 0,80-7,36, Fig 11,

p

= 0,12) não manter a associação positiva

análise de sensibilidade

a análise de sensibilidade foi realizada para explorar a influência de um estudo individual sobre os resultados reunidos, repetindo o meta-análise omitindo alguns estudos, obviamente, diferentes no momento . Os resultados estatisticamente semelhantes foram obtidos por este método, mostrando a estabilidade desta carne-análise (dados não mostrados).

Discussão

HIF-1α é um factor chave que regula a transcrição de reacção à hipóxia celular . Ele é sobre-expresso em muitos tipos de doenças malignas em resposta à concentração de oxigénio baixa [66], e desempenha um papel chave em condições hipóxicas que ocorrem durante a angiogénese de tumor, invasão e metástase [67, 68]. Em câncer ginecológico, HIF-1α tem sido sugerida como um fator prognóstico negativo, mas as conclusões conflitantes existem [69]. Assim, a análise reunida foi realizada com os dados disponíveis sobre a associação entre a expressão de HIF-1α e variáveis ​​clinicopatológicas.

Foi demonstrado que a expressão de HIF-1α em tecido normal era menor do que no tecido limítrofe ou cancro em ginecológico câncer, o que está de acordo com achados anteriores de estudos diferentes [2, 8, 9, 16, 27, 30, 52, 57, 70]. HIF-1α pode ser um facilitador da progressão da pré-malignas no câncer ginecológico. Esta associação positiva mantida na maioria análises de subgrupos, exceto na “fronteira vs. normal” de câncer endometrial. Esta inconsistência pode resultar de um número relativamente pequeno de estudos incluídos (apenas três estudos foram na análise de subgrupo).

Clinicopathologicfeatures incluindo o tipo patológico, estágio do tumor, e metástases linfonodais são os principais fatos relacionados ao câncer relacionada prognóstico. Em nossa meta-análise, maior expressão HIF-1α foi encontrado para ser associado com maior risco de metástase ganglionar, maior estágio FIGO, alto grau histológico, e menor OS 5 anos e taxa de DFS. Estes resultados revelaram que o HIF-1α poderia ser considerado como uma característica da progressão do tumor, e um factor de prognóstico para cancro ginecológico. Para revelar os mecanismos, vários estudos incluídos desta meta-análise relatou que HIF-1α está relacionada com muitos aspectos críticos da biologia do câncer ginecológico. síntese de HIF-1α pode ser aumentada por vários factores de crescimento, citoquinas e outras moléculas de sinalização responsáveis ​​pela estimulação de fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K), ou vias de proteína-quinase activada por mitogénio (MAPK) [38]. Os marcadores regulamentados de HIF-1α, como tipo de transportador de glicose 1 (GLUT1), anidrase carbônica 9 (CA9) e c-Met, foram encontrados para ser altamente associado com mau prognóstico em vários tipos de câncer [38]. HIF-1α também regula muitos câncer vias de sinalização, incluindo PI3K /AKT /mTOR, Notch, e Myc, para mediar a proliferação do tumor, invasão e migração [2, 8, 9, 16, 27, 30, 52, 57, 70].

no entanto, a associação entre o HIF-1α e as características clínico-patológicas não foi observado em análises de subgrupos de “Grau 3 vs. Grau 2” no endométrio e cancros cervicais. Quando estratificado por tipo de câncer, os resultados de análise de sobrevivência não foram estatisticamente significativas no subgrupo “cancro do endométrio e do ovário”. Sugerimos que, além da heterogeneidade dos estudos incluídos, outros fatores relacionados às características clínico-patológicas de câncer ginecológico pode contribuir para esta inconsistência. Por exemplo, o tipo I do cancro endometrial é muitas vezes caracterizado por mutações no supressor de tumor PTEN, enquanto o tipo II cancro do endométrio geralmente contém a mutação de outro gene supressor tumoral p53 [71-74]. No cancro do colo do útero, a sobre-expressão do vírus do papiloma humano (HPV) e a perda de p53 promover a invasão tumoral e metástase [75]. Assim, mais estudos incluiu tanto HIF-1α e outros fatores são necessários para validar os nossos resultados, e para desvendar o mecanismo de carcinogênese e progressão no câncer ginecológico.

Algumas limitações devem ser reconhecidas. Em primeiro lugar, imuno-histoquímica foi um método semi-quantitativo, e este facto pode afectar a precisão do resultado. Nesta meta-análise, nenhuma análise de sobrevivência de subgrupo foi realizada para diferentes subtipos histológicos. Diferenças em anticorpos primários, protocolos de coloração imuno-histoquímica, padrões de avaliação e valores de corte para a alta expressão de HIF-1α pode contribuir para a heterogeneidade. No entanto, esta meta-análise agrupada série de estudos e tinha maior poder estatístico para compensar esta desvantagem em certa medida. Futuras pesquisas multicêntricos usando métodos padronizados e quantitativos são incentivados. Em segundo lugar, esta meta-análise incluiu estudos publicados entre 2001 e 2014. Durante esses 13 anos, melhores técnicas cirúrgicas e melhores cuidados perioperatórios foram desenvolvidos em centros mais especializados. O regime terapêutico variável no tempo seria a principal fonte de heterogeneidade no prognóstico relacionada ao câncer. Por exemplo, na análise de sobrevivência do “endometrial e câncer de ovário” subgrupo, três estudos relataram quimioterapia adjuvante pós-operatório, quatorze estudos relataram radioterapia adjuvante pós-operatório, enquanto outros não forneceu qualquer informação sobre a terapia adjuvante pós-operatório. Assim, os resultados das análises de prognóstico devem ser interpretados com cautela. Em terceiro lugar, mais da metade dos estudos incluídos nesta meta-análise são provenientes da Ásia. Devido a esse viés população, os nossos resultados podem não revelar completamente a associação de HIF-1α e as características clínico-patológicas de pacientes em todo o mundo. Portanto, os pacientes de uma variedade de países deve ser estudado para melhorar a confiabilidade da nossa análise no futuro próximo.

Conclusões

Apesar das limitações desta meta-análise, confirmou que HIF- 1α está a emergir como um fator importante na carcinogênese do câncer ginecológico. HIF-1α é associado com o malignantdegree, estágio FIGO, grau histológico, metástase linfonodal, 5 anos de taxa de sobrevivência e taxa de recorrência do câncer ginecológico. Esperamos que HIF-1α pode servir como uma ferramenta confiável para previsão precoce e preciso do câncer e pode ser um potencial alvo terapêutico para câncer ginecológico.

Informações de Suporte

S1 PRISMA Checklist. PRISMA Checklist

doi:. 10.1371 /journal.pone.0127229.s001

(DOC)

S1 Table. As avaliações da qualidade dos estudos incluídos

doi: 10.1371. /journal.pone.0127229.s002

(DOC)