Sumário

polimorfismos genéticos nos genes da via estresse oxidativo pode contribuir para a carcinogênese, a recorrência da doença, a resposta ao tratamento, e os resultados clínicos. Nós aplicamos uma abordagem baseada no caminho para determinar os efeitos de vários polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) dentro desta via sobre os resultados clínicos em pacientes não-músculo invasivo cancro da bexiga (NMIBC) tratados com Bacillus Calmette-Guérin (BCG). Foram genotipados 276 SNPs em 38 genes e avaliadas as suas associações com resultados clínicos em 421 pacientes NMIBC. Vinte e oito SNPs foram associados com a recorrência no grupo tratado com BCG (

P

0,05). Seis SNPs, incluindo cinco em

gene NEIL2

do grupo geral e BCG permaneceram significativamente associados com recorrência após vários ajustes de comparação (

q Art 0,1). análise do genótipo desfavorável cumulativa mostrou que o risco de recorrência aumentou com o aumento do número de genótipos desfavoráveis. Na análise dos fatores de risco associados à progressão para doença, rs3890995 no

UNG

, permaneceu significativa após ajuste para comparações múltiplas (

q Art 0,1). Estes resultados suportam a hipótese de que as variações genéticas em genes de estresse oxidativo de acolhimento em pacientes NMIBC pode afetar a resposta à terapia com BCG

Citation:. Wei H, Kamat A, Chen M, Ke HL, Chang DW, Yin J, et ai. (2012) Associação de polimorfismos em genes do estresse oxidativo com resultados clínicos para câncer de bexiga tratados com Bacillus Calmette-Guérin. PLoS ONE 7 (6): e38533. doi: 10.1371 /journal.pone.0038533

editor: Rajvir Dahiya, UCSF /VA Medical Center, Estados Unidos da América

Recebido: 08 de dezembro de 2011; Aceito: 06 de maio de 2012; Publicação: 12 de junho de 2012

Direitos de autor: © 2012 Wei et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Apoiado por doações de Institutos Nacionais de Saúde /Instituto Nacional do Câncer: U01 CA 127.615, R01 CA 74880, P50 CA 91846, e R01 CA 131335 (https://www.cancer.gov/researchandfunding). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

nos Estados Unidos, o câncer de bexiga é o quarto câncer mais comum ea oitava causa de morte por câncer em homens, com uma estimativa de 69,250 novos casos e 14.990 mortes em 2011 [1]. A maioria (75% -85%) cancros da bexiga são não-invasiva do músculo no primeiro diagnóstico, que incluem superficial não-invasiva (PTA), minimamente invasiva (pT1), ou carcinoma in situ (CIS) [2]. taxas de recorrência do cancro de bexiga globais de não-muscular câncer de bexiga invasivo (NMIBC) foram relatados para ser 31-78% em 5 anos, e para os grupos de alto risco, 17-45% dos pacientes irão progredir para doença invasiva muscular em 5 anos [3 ] – [4]. ressecção transuretral (RTU) é o padrão ouro para o diagnóstico e tratamento de baixo risco Ta T1 carcinoma de células transicionais (TCC) [5]. No entanto, a recorrência aos 3 meses de paciente com tumores multifocais variaram entre 7% e 46%, sugerindo diferentes qualidades TUR [5].

As células tumorais muitas vezes mostram um aumento do nível de produtos de oxidação do DNA e mutações induzidas por oxidação [ ,,,0],6]. O stress oxidativo provoca proteína, lípido, e danos no ADN e é um evento fisiopatológico crítica implicado em diversas patologias humanas, incluindo o cancro [7] – [8]. No entanto, a reparação acelerada de ADN oxidado pode proteger as células de cancro a partir de lesões oxidativas do ADN prejudiciais [9] e está associado com a metástase e a sobrevivência do paciente pobre [10]. Muitos genes de estresse oxidativo, tais como e

NOS, MnSOD,

e

GPX Quais são polimórficos e têm sido estudados para a associação com riscos de câncer e os resultados clínicos [11] – [14].

Para reduzir a recorrência ea progressão da NMIBC, instalação intravesical de Bacillus Calmette-Guérin (BCG) é muitas vezes administrada após TUR. BCG foi relatado para induzir o stress oxidativo local, o qual pode mediar a actividade anti-tumor [15]. Trabalhamos com a hipótese de que polimorfismos em genes de estresse via oxidativa pode modular o risco de recorrência e progressão na BCG tratado pacientes. Para testar essa hipótese, realizamos um estudo para avaliar os efeitos de 276 polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) em 38 genes-chave da via oxidativa-stress. Para o nosso conhecimento, este é o primeiro estudo a explorar a associação entre um painel abrangente de polimorfismos dos genes de estresse via oxidativa e risco de recorrência ou progressão em pacientes NMIBC, especialmente naqueles que receberam terapia com BCG.

Materiais e Métodos

Ética Declaração

consentimentos informados por escrito foram obtidas de todos os pacientes antes da inscrição no estudo. O estudo foi aprovado pelo Institutional Review Boards no MD Anderson Cancer Center e Baylor College of Medicine.

Procedimentos

Estudo da População

A população de estudo e matrícula foram descritos anteriormente [16]. Os pacientes foram recrutados a partir da Universidade do Texas MD Anderson Cancer Center e Baylor College of Medicine, como parte de um projeto em andamento desde 1999. Todos os pacientes foram identificados através da revisão horários clínica electrónica diárias nas clínicas Urologia e Oncologia Médica GU. Os pacientes recentemente diagnosticados foram NMIBC, confirmado histologicamente, e não tinham sido previamente tratados com quimioterapia ou radioterapia no momento do recrutamento. Não houve restrições para a idade, sexo, etnia, histologia ou fase de recrutamento. Uma vez que mais de 90% dos nossos casos recrutados eram carcinoma de células transicionais (TCC), que incluiu apenas casos de CTP neste estudo. Além disso, a maioria dos pacientes em nossa população de estudo (90,6%) eram caucasianos; portanto, restringimos a análise aos caucasianos para limitar o efeito de confusão de estratificação populacional. Um total de 421 pacientes NMIBC foram incluídos neste estudo.

Recolha de Dados epidemiológicos e clínicos

M.D. entrevistadores pessoal Anderson administrada a 45 minutos de entrevista pessoal a todos os participantes para recolher dados sobre as características demográficas, tabaco histórico de uso, histórico médico, ocupação e de exposição, e história familiar de câncer. No final da entrevista, todos os participantes doou uma pequena amostra de sangue para a extracção do ADN antes de receber qualquer tratamento. Os doentes tratados com TUR foram acompanhados com exames periódicos cistoscópicas e, posteriormente, alguns foram tratados com BCG. Este tratamento consistiu de BCG para 6 injeções semanais (indução BCG, IBGC) ou IBGC + manutenção BCG (mBCG) em 3 ciclos semanais dadas aos 3, 6, 12, 18, 24 e 30 meses após IBGC [17]. Os dados clínicos foram obtidos a partir de registros médicos por especialistas analisam gráfico treinados. Os pontos finais de avaliação de resultados neste estudo incluiu a recorrência e progressão, que foi calculado a partir da data do diagnóstico até a data dos eventos de ponto final, a morte ou o último acompanhamento, o que viesse primeiro. recorrência do tumor foi definida como um tumor da bexiga recentemente detectado após uma cistoscopia negativa de seguimento e progressão tumoral foi definida como a transição do não-invasiva do músculo para doença invasiva ou metastática. Os pacientes que morreram ou perdidos de seguimento antes dos parâmetros de avaliação foram censurados

Seleção e genotipagem de polimorfismos em genes Stress-via oxidativa

lista gene compilado usando ferramentas de bioinformática SNPs3D (http:. //www.snps3d.org) [18]. Nós, então, identificados SNPs marcação do banco de dados HapMap (https://www.hapmap.com). Semelhante ao nosso estudo anterior [19], todos os SNPs encaixar os seguintes critérios:

r

2 Art 0,8, freqüência do alelo menor (MAF) 0,05, e localizado dentro de 10 kb a montante do 5 ‘-untranslated região (UTR) e 10 kb a jusante da 3’-UTR do gene. Incluímos também SNPs potencialmente funcionais com MAFs 0,01 (por exemplo, codificação de SNPs e SNPs em UTRs, promotores, ou locais de splicing) .A genotipagem foi realizada utilizando iSelect matriz SNP costume da Illumina (Illumina, San Diego, CA) e a chamada média taxa foi de 99,7%

luciferase Reporter Ensaio para determinar o efeito do NEIL2:. rs4639 alelos no Regulamento de NEIL2 Expressão por microRNAs

a construção repórter derivado de pGL3 (Ambion) contendo o 3′- UTR de

NEIL2

foi gerado como se segue: um fragmento de 1,35 kb do

NEIL2

3′-UTR foi amplificado a partir de ADN genómico com os seguintes iniciadores: Forward1, 5′-GAAGATGGGTTACAGAGGCT; Reverse1, 5′-CAGACATCGTGGTGACAGAG. Subsequentemente, um fragmento de PCR interno de 0,35 kb de 3′-UTR contendo rs4639 foi gerado com os iniciadores: Forward2, 5′-AATTCTAGAGGGATACAGGCACCAAGAGGCGG; Reverse2, 5′- GTAGGCCGGCCGCGAGTAACAGTGAGCTTTAT. O produto amplificado foi digerido com Xbal e FseI e subclonado no vector de controlo pGL3. Variante

NEIL2

construção alelo foi gerado por mutagénese dirigida ao local com os primers:. Forward3, 5′- GATTTGTTGgACAATTCAGGAATCAAGG e Reverse3, 5′-TCCTGAATTGTcCAACAAATCAACAGTCAC

UM-UC-9 células de câncer de bexiga epitelial foram gentilmente cedido pelo laboratório do Dr. Barton Grossman e foram autenticados no prazo de seis meses antes de nosso estudo [20]. UM-UC-9 células foram transfectadas com 0,5 ug do tipo selvagem ou variante

NEIL2

3′-UTR construir juntamente com 5 pmol de ARN de controlo negativo (sequência mexidos), o miR-421, ou miR- 1200 microARN (miARN) mímico (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) e 10 ng de pGL4 Renilla luciferase repórter (Ambion, Carlsbad, CA) utilizando lipofectamina 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA) durante 36 horas. A expressão repórter foi analisada utilizando o Repórter Dual-Luciferase Assay System (Promega, Madison, WI) e as actividades da luciferase foram medidas num leitor de microplacas Fluostar Optima (BMG Labtech, Cary, NC). Cada ensaio foi repetido de forma independente por três vezes, com cinco repetições.

Análises Estatísticas

As análises estatísticas foram realizadas utilizando Stata 10.0 (Stata Corp., College Station, TX, EUA). A χ

2 de teste (para variáveis ​​categóricas) ou do estudante

t

-test (para variáveis ​​contínuas) foi usado para comparar as características entre os grupos de pacientes com ou sem doença resultado. desequilíbrio de ligação (LD) entre SNPs individuais foi avaliada, com

r

2 Art 0,8 foram definidos como sendo no mesmo bloco haplótipo

Para cada paciente, foi calculada a recorrência. tempo de sobrevida livre de como o tempo desde o diagnóstico até a recidiva, progressão ou à data da morte ou último follow-up. Os pacientes que foram perdidos para follow-up ou morreram antes do evento de ponto final foram censurados. Calculamos pessoas-anos em risco dentro de cada categoria genótipo que a soma dos tempos de sobrevida livre de recidiva de todas as disciplinas nessa categoria genótipo. Os efeitos de genótipos de SNPs em resultados do cancro da bexiga foram estimados em taxas de risco e intervalos de confiança de 95% (IC 95%), utilizando regressão de Cox multivariada sob os modelos dominantes, recessivos e aditivos de herança ajustados para idade, sexo e tabagismo, onde apropriado. Para controlar para comparação múltipla, uma

q

valor (a taxa de detecção falsa [FDR] -adjusted

P

valor) foi usado para ajustar o nível de significância para SNPs individuais. O

q valor

foi calculado pelo q

valor pacote implementado no software R. Um método de reamostragem de bootstrap, usando 100 amostras de bootstrap, foi aplicado para validar internamente os resultados.

P Compra de valor de tendência foi calculada com o número de genótipos desfavoráveis ​​como variável contínua por meio de regressão Cox incondicional.

Todas as análises foram estratificados por idade, sexo, status, estágio do tumor, o grau do tumor fumar, e tratamento. Para os efeitos cumulativos de múltiplas variantes genéticas, os genótipos adversos foram somados e classificados pelo número de genótipos adversos em indivíduos. Para avaliar os efeitos cumulativos de variantes genéticas, que resumiu genótipos adversos (genótipos associados com aumento significativo do risco na análise principal efeito após o ajuste para comparações múltiplas) para cada assunto. Gráficos de Kaplan-Meier e Log-Rank testes foram aplicados para comparar as diferenças entre os tempos de sobrevivência livre de recidiva de diferentes genótipos. Não-paramétrico de Wilcoxon Ranksum foi utilizado para comparar diferenças nas actividades da luciferase no ensaio repórter. Todos os testes estatísticos foram bilaterais.

Resultados

Características da População do Estudo

Dos 421 pacientes caucasianos que se seguiram, 346 (82,2%) eram homens e 75 ( 17,8%) eram mulheres. Entre eles, 232 (55,1%) tiveram recorrência da doença, com um tempo de sobrevida livre de recorrência médio de 14,05 meses. Como mostrado na Tabela S1, não houve diferenças significativas para a taxa de recorrência foram identificados com base na idade (

P

= 0,68), sexo (

P

= 0,11), status (fumar

P

= 0,69), o estágio do câncer (

P

= 0,13), ou câncer grau (

P

= 0,19). Não houve diferenças significativas na progressão por idade (

P

= 0,05) ou tabagismo (

P

= 0,96). Homens tiveram maiores taxas de progressão da doença do que as mulheres (

P

= 0,01) e pacientes com um estágio superior ou grau também foram mais propensos a experimentar progressão (

P Art 0,01). Desde BCG foi administrada principalmente para aqueles com maior risco de recorrência [21], comparamos diferentes tratamentos BCG sobre riscos de recorrência e progressão. Comparado ao IBGC, o tratamento mBCG foi significativamente associada com riscos reduzidos de recorrência e progressão (

P Art 0,01).

Análises de recorrência da doença estratificada por tratamento

Vinte e cinco SNPs foram significativamente associados com o risco de recorrência em pacientes em geral, e após o ajuste para múltiplas comparações, 6 permaneceu significativa, com um

q

-valor ≤0.1 (Tabela S2). Nos pacientes TUR, 34 SNPs foram significativamente associados com o risco de recorrência (

P Art 0,05), mas após o ajuste para comparações múltiplas nenhum permaneceu significativo (Tabela S3). Nos pacientes tratados com BCG, 28 SNPs foram significativamente associados com recorrência, e após o ajuste para múltiplas comparações, 6 permaneceu significativa, com um

q

-valor ≤0.1 (Tabela 1; Tabela S4)

.

para validar internamente estes resultados, foi realizada a amostragem de inicialização aleatória das SNPs significativas para 100 iterações e listou o número de vezes que o

P

valor foi 0,05. Em pacientes tratados com BCG, quatro dos cinco SNPs de topo em

NEIL2

teve resultados muito consistentes, com inicialização

P

valores 0,05 para mais do que 90% das amostragens (Tabela 1).

efeitos cumulativos de múltiplos SNPs sobre a recorrência em pacientes NMIBC

Nós resumiu o número de genótipos desfavoráveis ​​para cada indivíduo e categorizados os pacientes pela distribuição tertile do seu risco de recorrência, que mostrou a dose dependente de tendência entre os três grupos (

P

tendência 0,0001). No total de pacientes, em comparação com o grupo de baixo risco, os grupos medianos pelo risco e de alto risco teve um 1,2 vezes (HR, 1,21, 95% CI, 0,85-1,71) e uma dobra 2,2 (HR, 2,21, 95 CI%, 1,60-3,05) maior risco de recorrência, respectivamente (

P Art 0,01; Tabela 2). Entre BCG (IBGC sozinho ou IBGC mais mBCG) pacientes tratados, em comparação com o grupo de baixo risco, os grupos medianos pelo risco e de alto risco teve um 1,46 vezes (HR, 1,46, 95% CI, 0,9-2,38) e um 3,5 vezes (HR, 3,52, 95% CI, 2,23-5,55) maior risco de recorrência, respectivamente (

P Art 0,01; Tabela 2). As estimativas de Kaplan-Meier dos grupos totais e BCG-tratamento indicou diferenças nos tempos de sobrevida livre de recidiva mediana (MST) (log rank,

P

= 0,0001; Figura 1 A e B).

(a) as estimativas de Kaplan-Meier de sobrevida livre de recorrência em todos os pacientes NMIBC agrupados pelos três grupos de risco como classificados pelo número de genótipos desfavoráveis ​​no circuito do estresse oxidativo. tempo médio de sobrevida livre de recidiva [MST] = 42,3, 12,5 e 5,6 meses para baixa, média e pacientes de alto risco, respectivamente (

P

log-rank = 0,0001). (B) As estimativas de Kaplan-Meier de sobrevida livre de recorrência em pacientes tratados com BCG agrupados pelos três grupos de risco como classificados pelo número de genótipos desfavoráveis ​​no circuito do estresse oxidativo. MST = 66,1, 25,4 e 16,6 meses) para baixo, médio, e os pacientes de alto risco, respectivamente (

P

log-rank = 0,0001). (C) As estimativas globais de Kaplan-Meier de o efeito de

UNG

: genótipos rs3890995 na sobrevida livre de progressão em pacientes NMIBC (nos três subgrupos de risco, a sobrevivência livre de progressão foi maior do que o tempo de seguimento de 132,6 meses). Em comparação com pacientes portadores do genótipo homozigoto variante, aqueles com pelo menos um alelo tipo selvagem mostrou mais tempo de sobrevivência livre de progressão (

P

log-rank = 0,04). wildtype ww-homozigotos; heterozigoto wv-; vv-homozigoto variante.

Efeitos de SNPs na progressão da doença

Nos pacientes NMIBC, 23 SNPs foram significativamente associados com a progressão (

P 0,05, tabela 3). Após o ajuste para múltiplas comparações, um SNP,

UNG

: rs3890995, permaneceu significativa (

Q

= 0,08) e teve um resultado altamente consistente, com inicialização

valor de P 0,05 para 90% épocas de amostragens (Tabela 3). Os tempos de sobrevida livre de progressão mediana foi maior que o tempo de seguimento de 132,6 meses para todos os genótipos (Figura 1 C). No entanto, os pacientes que realizaram os alelos variantes homozigotos tinha um 1,92 vezes (HR 1,92, 95% CI, 1,33-2,77) maior risco de progressão (Tabela 3) e diminuiu a sobrevivência livre de progressão (-rank teste log,

P

= 0,04; Figura 1 C). Devido ao número limitado de casos de progressão, não realizamos análise similar em pacientes tratados com BCG.

Efeitos da HSA-mir-421 e HSA-mir-1200 em NEIL2 Expressão

uma vez que um dos SNPs mais significativos,

NEIL2

: rs4639, está localizado na 3’UTR do gene, que examinou o

NEIL2 Sims 3 região ‘UTR para sítios de ligação potencial miRNA TargetScan ( www.targetscan.org). Os resultados mostraram que o alelo rs4639 está localizado perto de um local de ligação potencialmente fraca para o miRNAs hsa-miR-421 e miR-HSA-1200 (Figura 2). Nós clonado 3’UTR de

NEIL2

e analisados ​​os efeitos deste SNP na regulação da expressão mediada por miRNA. Os dois miRNAs teve efeitos inibidores semelhantes em ambos tipo selvagem e variante expressão rs4639 (Figura 2), sugerindo

NEIL2

: rs4639 pode não afetar a segmentação por estes miRNAs

Resultado da dupla luciferase ensaio de repórter de exibição. os efeitos da variante rs4639, HSA-mir-421 (-421) e HSA-mir-1200 (-1200) sobre a expressão repórter. Todos os valores foram normalizados para o

Renilla

actividades de luciferase e expressa como percentagens da actividade luciferase para células transfectadas com construção repórter do tipo selvagem e RNA controle negativo (Ctrl). Os valores são as médias de cinco repetições, com barras de erro para o desvio padrão. **,

P Art 0,01 pelo teste de Wilcoxon Ranksum. Ensaio foi repetido três vezes com resultados semelhantes.

Discussão

Foi avaliada a associação de um painel de 276 SNPs em 38 genes de estresse oxidativo com a recorrência de NMIBC em doentes tratados com sem ou com BCG. Foram identificados 25 SNPs que foram significativamente associados com a recorrência do câncer em todos (perus e BCG-tratados) pacientes, 34 SNPs significativas na TUR apenas os pacientes, e 28 SNPs significativas em pacientes tratados com BCG. Além disso, encontramos efeitos de genes dosagem significativas a partir da análise cumulativa, e identificou um SNP associado com a progressão NMIBC

O SNP mais significativo associado à recidiva no grupo tratado com BCG era

NEIL2:.

rs804256, que está localizado na região do intrão. Em comparação com os genótipos do tipo selvagem, o risco de recorrência para o homozigoto genótipo variante CC foi aumentado mais de quatro vezes. No entanto, este SNP não foi significativa em único subgrupo TUR, sugerindo uma potencial interacção com rs804256 de tratamento com BCG. Cinco dos seis dos SNPs mais significativos estão localizados em

NEIL2

, que destaca a importância deste gene no risco de recorrência.

NEIL2

pertence a uma classe de ADN glicosilase bacteriana homóloga à família Fpg /Nei, que é essencial para a remoção de lesões derivadas de citosina, em particular 5-hydroxyuracil e 5-hydroxycytosine [22]. Tem sido relatado que dois polimorfismos 5′-UTR diminuir

NEIL2

expressão e aumentar o dano genético do ADN induzida por mutagénio [23]. Regulação negativa do

NEIL2

expressão pode levar ao estresse oxidativo aumentado e instabilidade genômica em tecidos de proliferação rápida [24].

NEIL2

também podem desempenhar um papel importante na reparação de danos ao DNA induzido por metais cancerígenos [25]. Um dos SNPs mais significativos associados à recorrência, rs4639, está localizado em 3′-UTR de

NEIL2

. Luciferase repórter resultados mostrou que os miRNAs HSA-mir-1200 HSA-mir-421 e tinha efeitos inibidores semelhantes em ambos tipo selvagem e variante expressão rs4639. Desde quer miRNAs mostrou efeitos inibidores semelhantes em ambos tipo selvagem e genótipos variantes, é possível que rs4639 pode não ser a variante causador, mas funciona como um SNP marcação para outros polimorfismos que podem contribuir para a recorrência de câncer de bexiga, alterando

NEIL2

expressão ou função. Alternativamente, o alelo variante deste SNP pode afectar segmentação por outros miARNs. mapeamento fino futuro das regiões do entorno das tagSNPs mais significativos são necessários para identificar as variações genéticas causais e seus mecanismos moleculares.

Também identificamos um efeito significativo gene-dosagem para os seis SNPs marcação que mostraram efeitos principais significativos. Os pacientes com o maior número de genótipos desfavoráveis ​​teve o maior risco de recorrência NMIBC, sugerindo que os genótipos de risco adicionais dentro desta via chave eram prejudiciais. Isso destaca a importância de avaliar vários SNPs dentro de um caminho comum para avaliação do resultado clínico

Um polimorfismo,

UNG

:. Rs3890995, foi significativamente associada com a progressão NMIBC. Rs3890995 está localizado 1,87 kb a montante do

UNG

5 ‘UTR. Uma função importante da UNG é para reconhecer e remover uracilo a partir de ADN por clivagem da ligação N-glicos�ico e iniciando a via de reparação de excisão-base. uracil DNA vem de desaminação de citosina ou má incorporação de resíduos de despejo [26]. É possível que o alelo variante de rs3890995 SNP pode afectar a transcrição do gene, assim, alterando o nível de proteína. Alternativamente, pode ser ligado a outras variantes causais em

UNG

.

Em resumo, mostramos que polimorfismos genéticos dos genes da via de estresse oxidativo podem modular o risco de NMIBC recorrência ea progressão na BCG pacientes tratados. Além disso, temos realizado uma consulta relativamente abrangente dos polimorfismos via do estresse oxidativo com informações e análises clínica detalhada, que forneceu evidência substancial para o envolvimento desta via nos resultados clínicos de pacientes com câncer de bexiga, particularmente com o tratamento BCG. Existem algumas limitações neste estudo. Por exemplo, apenas caucasianos foram incluídos. Seria interessante para exame desses SNPs em populações minoritárias. Além disso, o tamanho da amostra não é particularmente grande, embora o cálculo de energia mostrou que a nossa análise tinha poder suficiente ( 80%) para detectar os principais efeitos analisados. Embora nossos dados são validados em grande parte, internamente, são necessários estudos de replicação futuras em populações independentes para validar alguns dos resultados e traduzir os resultados dos ensaios clínicos.

Informações de Apoio

Tabela S1.

variáveis ​​demográficas e clínicas para 421 pacientes NMIBC.

doi: 10.1371 /journal.pone.0038533.s001

(DOC)

Tabela S2.

oxidativo SNPs gene do estresse e risco de recorrência em pacientes NMIBC globais.

doi: 10.1371 /journal.pone.0038533.s002

(DOC)

Tabela S3.

oxidativo SNPs gene do estresse e risco de recorrência em pacientes NMIBC que receberam apenas TUR.

doi: 10.1371 /journal.pone.0038533.s003

(DOC)

Tabela S4.

oxidativo SNPs gene do estresse e risco de recorrência em pacientes NMIBC que receberam tratamento BCG.

doi: 10.1371 /journal.pone.0038533.s004

(DOC)