Abstract

A doença inflamatória intestinal (DII) pode levar a um risco aumentado de desenvolver cancro colorectal (CRC). O objetivo deste estudo foi estabelecer um modelo de transplante de medula óssea combinada (BMT) e câncer colorretal associado a colite (CAC) e definir a contribuição de células BM-derivados durante a inflamação associada com a carcinogênese. Nós estabelecemos um modelo para BMT utilizando camundongos verdes proteína fluorescente (GFP) transgênicas, seguido por AOM /CAC induzida por DSS, e realizada análise de microscopia confocal em

in vivo

secções de tumores congelados tecido e viver. A nossa análise de imagens mostraram que as células positivas para GFP extensivamente infiltrado do estroma do tumor e algumas células que WGA e GFP ou GFP CD31 e duplamente positivas foram observadas no revestimento dos vasos tumorais. Citometria de fluxo das células que se infiltram no tumor demonstraram que as células a CD11c GFP-positiva + DCs foram um terço da GFP + /CD11C- células, e que a metade destes DCs (0,96% vs 1,02%) foram positivas para GFP BM-derivado células. A maioria dos CD4

+ T células foram GFP-negativo (12,02% vs 1,9%), e descobrimos um romance CD4

+ CD11c

+ subconjunto DC (0,34% vs 1,64%). Em conclusão, nós definimos a distribuição das células endoteliais BM-derivados, células CD11c

+ DCs e CD4

+ T em tumores. Este modelo pode ser útil para elucidar os diversos tipos de células BM-derivadas e funções durante a progressão do cancro colo-rectal associado a colite

Citation:. Xiao CX, Wang HH, Shi Y, Li P, Liu YP, Ren JL, et ai. (2013) Distribuição de Bone-Marrow-Derivado endotelial e células imunológicas em um modelo de câncer colorretal murino Colite Associada. PLoS ONE 8 (9): e73666. doi: 10.1371 /journal.pone.0073666

editor: Shi Yu Yang, da Universidade College London, Reino Unido

Recebido: 12 de maio de 2013; Aceito: 19 de julho de 2013; Publicação: 10 de setembro de 2013

Direitos de autor: © 2013 Xiao et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho foi apoiada pela National Science Foundation Natural da China (No. 81072013 e 91229201), fundos de pesquisa fundamental para a Universidades Central na China (No. 2010111082) e Fundamentos da Bureau of Xiamen Saúde da China (No. 3502Z200940010). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer colorretal (CRC) é uma das principais causas de morte por câncer no hemisfério ocidental. O seu desenvolvimento ocorre esporadicamente ou pode ser uma complicação de longo prazo de inflamação crónica, como pode ser visto na doença inflamatória do intestino (IBD) [1]. O risco cumulativo para a aquisição de CRC pode aumentar para aproximadamente 20% em pacientes com DII que vivem há 30 anos com a doença [2,3]. cancros do cólon com colite associada desenvolver na mucosa cronicamente inflamada e acredita-se desenvolver de uma maneira gradual, com a mucosa inflamada dando origem a displasia e, finalmente, para cancro. A inflamação crônica é acreditado para promover a carcinogênese. Estudos clínicos têm demonstrado que os pacientes com colite têm um risco relativo de 2 a 8 vezes maior de desenvolver câncer colorretal em comparação com a população em geral [4].

Camundongos que receberam DSS para induzir a inflamação (OMA /DSS) mostram uma aumento da incidência e extensão da formação de tumor de cólon em comparação com ratinhos de tipo selvagem [5]. Os componentes individuais das respostas imune inata e adaptativa também têm sido implicados na carcinogénese [4]. factores pró-inflamatórias dos sistemas imunitários inato e adaptativo contribuir para o desenvolvimento e crescimento da neoplasia do cólon. Osso células progenitoras derivadas de medula, que contribuem para a resposta inflamatória e a neovascularização do tumor, têm sido sugeridos para ter diversos papéis na progressão tumoral. No entanto, pouco se sabe sobre o papel das células derivadas da medula óssea em cancros do cólon com colite associada (CAC) [6].

células derivadas de medula óssea são surpreendentemente plástico [7], assumindo as funções, por vezes, fora do sistema hematopoiético. No transplante de medula (BMT) destinatários ósseas, os investigadores encontraram células derivadas do dador em diversos tecidos não hematopoiéticos, tais como o músculo esquelético, músculo cardíaco, endotélio vascular, células neuronais e células epiteliais [8]. células derivadas de medula óssea também mostraram desempenhar múltiplas funções no desenvolvimento do tumor. derivadas da medula óssea as células progenitoras endoteliais (CPE) contribuem para a neovascularização do tumor, enquanto que as células da linhagem mielóide imaturo que tem diversos papéis em progressão tumoral como células de iniciação de cancro agir como f ibroblastos associados a tumores que orquestram a reacção desmoplásica [9].

provas convincentes apoia a noção de que as células derivadas da medula óssea têm um papel importante na regulação da angiogénese e a progressão do tumor [10-12] e pode contribuir para a angiogénese do tumor através da secreção de factores pró-angiogénicos ou por incorporação directa no tumor vasculatura [13,14]. EPCs circulantes mobilizados da medula óssea foram detectados no sangue periférico de várias espécies e têm sido mostrados para ser envolvido na neoangiogénese em tumores, bem como na formação de novos vasos após trauma, lesão por queimadura, e enfarte do miocárdio [15-17 ]. Além disso, documentaram previamente que as células progenitoras CXCR4-positiva derivadas de medula óssea de murino contribuir para o crescimento de tumores através da promoção da angiogénese de tumores [18].

No entanto, acumular evidência indica que as células progenitoras derivadas de medula óssea têm diversas funções em respostas inflamatórias durante a progressão do tumor. Derivadas da medula óssea as células inflamatórias no microambiente tumoral promovem a angiogénese tumoral, a proliferação do tumor, invasão e sobrevivência e suprimem o anti-tumoral resposta imunitária específica de linfócitos CD4 e CD8 [19]. Assim, é importante para determinar a relação entre as células de osso derivadas de medula e células imunes específicas, as citocinas e quimiocinas durante a carcinogénese. Todos os linfócitos originam dentro da medula óssea a partir de um progenitor linfóide comum antes de se diferenciarem em tipos seus linfócitos distintos. células B maduras em linfócitos B na medula óssea, enquanto que as células T migram para e amadurecem no timo. Após a maturação, os linfócitos entram os órgãos de circulação e linfóides periféricos, onde eles buscam patógenos invasores e células tumorais [20]. Outros tipos de células, incluindo as células dendríticas (DC), neutrófilos e eosinófilos, também têm sido relatados para promover a angiogénese tumoral [13,21]. DCs são considerados para desempenhar um papel importante no tumor imuno-vigilância por induzir respostas de células T específicas do tumor. Evidências recentes indicam que as DCs pode também contribuir para a angiogénese tumoral, libertando factores pró-angiogénico, como o VEGF e IL-8, em resposta à hipoxia [22].

Estes resultados, em conjunto com a plasticidade intrínseca de osso marrow- células derivadas e células inflamatórias em resposta a sinais do microambiente e a persistência de sinais de polarização no microambiente tumoral, sugerem que o osso de células derivadas de medula dentro do microambiente do tumor pode eventualmente produzir factores pró-angiogénicos e pró-invasivos que promovem a progressão tumoral [19] .

neste estudo, nós estabelecemos combinada transplante de BM e um modelo de cancro colo-rectal associado a colite para definir a distribuição das células endoteliais BM-derivados, CD11c

+ DC e CD4

+ células T em tumores. Este modelo fornece uma ferramenta poderosa para estudar as contribuições das diversas células BM-derivados durante a progressão do câncer colorretal associado a colite e pode revelar novos BM-derivado tipos de células e funções que poderiam ser aplicáveis ​​em futuras estratégias terapêuticas.

Materiais e Métodos

Animais e células

C57BL /6, BALB /c e camundongos GFP foram comprados do centro do laboratório animal, Shanghai, China. Todos os procedimentos que envolvem animais experimentais foram realizados de acordo com protocolos aprovados pelo Comitê de Pesquisa Animal da Universidade de Xiamen e cumpriram com o Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório (publicação NIH No. 86-23, revista, 1985). Os ratos foram mantidos em um free-patógeno (incluindo

Helicobacter

-livre e livre de parvovírus) ambiente específico e foram geralmente usado entre 6 e 8 semanas de idade. células CT26-WT e CMT93 foram derivados de ratinhos BALB /c e C57BL /6, respectivamente. células CT26-WT e CMT93 (comercialmente adquiridas a partir da ATCC, EUA) foram cultivadas em DMEM e suplementado com 10% de soro fetal bovino, 100 U /ml de penicilina, 100 mg /mL de estreptomicina, glutamina 2 mM, piruvato de sódio 1 mM e 0,1 mM aminoácidos não essenciais a 37 ° C e 5% de CO2.

transplante de medula óssea

A medula óssea de ratinhos irradiados letalmente C57BL /6 foi reconstituído através de transplante com células de medula óssea a partir de GFP quimérica ratinhos (ratinhos GFP-BMT). Resumidamente, de tipo selvagem C57BL /6 murganhos foram letalmente irradiados com uma dose de 950 rad, após o que 2×10

6 células da medula óssea de murganhos GFP foram injectadas na veia da cauda dos ratos receptores irradiados. As células da medula óssea dos murganhos GFP-BMT foram avaliados às 4 semanas após o transplante de medula óssea, e o grau de quimerismo foi medida por citometria de fluxo. Mais de 90% das células nas células mononucleares circulantes foram substituídas por células positivas para GFP sob estas condições experimentais.

cancro colorrectal colite associada (CAC) e tumor modelo de implante

O GFP -BMT ratinhos foram injectados ip com 10 mg /kg de AOM em 0,2 ml de solução salina. Uma semana após a administração AOM, 3% DSS foi administrado na água de beber, durante 7 dias e, em seguida, transferido para água potável normal, durante 14 dias. Este procedimento foi repetido por 3 ciclos, seguido por uma mudança para a água normal. Os tumores foram induzidos por s.c injecção de 2×10

6 células CT26-WT e CMT93 no flanco às 4 semanas após o transplante de medula óssea. grandes tumores eram tipicamente observado por 4 semanas após a implantação do tumor, e os tecidos tumorais foram colhidas para análise histológica.

A microscopia confocal

Em camundongos GFP-BMT CAC, os vasos sanguíneos foram coradas com 50 ug Alexa 647 Fluor® WGA (Molecular Probes, Invitrogen), o qual foi injectado retrorbitally. Sete minutos depois Fluor® Alexa 647 WGA administração, os ratinhos foram sacrificados por asfixia com CO2. Todos os procedimentos foram realizados sob anestesia (0,5 mL Avertin, i.p.). Os tecidos foram imediatamente removido, aberto por incisão longitudinal e lavadas com PBS. Vivo amostras de tecido de tumor foram fotografadas com um Bio-Rad radiante 2000 microscópio confocal (Bio-Rad, Hercules, CA). A aquisição de imagens foi realizada com laser afiada Scanning Software (Bio-Rad), e reconstruções em 3D foram concluídas com software Volocity (Waltham, MA).

A citometria de fluxo análise

O tecido tumoral foi isolado a partir murganhos GFP-BMT CAC e cortada em pedaços de 1 mg /ml de colagenase ⅳ. digestão da colagenase foi realizada em solução de colagenase durante 45 minutos a 37 ° C. células eluídas foram então passados ​​através de um filtro celular de 70 ul. As células foram centrifugadas durante 10 minutos a 1400 rpm à temperatura ambiente e recolhida. As células foram então incubadas em soro de burro a 10% e Fc bloqueou (BD Pharmingen, San Jose, CA) durante 20 minutos a 4 ° C, após o que foram coradas com anticorpos conjugados fluorescentes. APC-conjugado anti-ratinho de CD11c (HL-3) e de ratinho anti-CD4 conjugado com PE (OX-38) foram adquiridos a BD Pharmingen (San Diego, CA) e utilizados para análise de FACS. As células foram analisadas num citómetro FACSCaliber (BD Bioscience, San Diego, CA) e depois analisados ​​utilizando o software FlowJo (ár, Ashland, OR).

imunofluorescência

ratinhos C57BL /6 foram sujeitos a eutanásia por CO

2 asfixia, e os tecidos do cólon foram imediatamente removidos e fixados durante 4 a 5 horas à temperatura ambiente em tampão de fixação GFP, incorporado em Tissue-Tek composto OCT (Miles Inc., Elkhart, IN), e congelado rapidamente e armazenado a -80 ° C, após o que 5-10 uM secções foram cortadas num criostato e transferidas para lâminas de vidro de microscópio revestida com pré- poli-lisina (Sigma-Aldrich). As secções foram depois fixadas com acetona fria durante 20 minutos à temperatura ambiente. secções fixadas foram lavadas três vezes com PBS e incubadas com soro normal de burro a 5% e 0,02% de BSA-PBS, durante uma hora à temperatura ambiente. Os anticorpos primários utilizados foram específicos para CD31 (concentração inicial, 0,5 mg /ml; diluição, 1/500; eBioscience), CD4 (diluição, 1/200; BD), CD11c (diluição 1/1000; BD), e Ly6C (diluição, 1/100; BD). DAPI (Vector Laboratories, Burlingame, CA) foi utilizado para coloração nuclear.

A análise estatística

Os dados são expressos como a média ± DP. As comparações entre os grupos foram analisadas utilizando Estudante de

t

-teste.

P Art 0,05 foi considerado estatisticamente significativo.

Resultados

O estabelecimento de uma combinação de transplante de medula óssea e modelo câncer colorretal associado a colite

de tipo selvagem C57BL /6 foram irradiados letalmente com uma dose total de 950 rads, após o que 2×10

6 células da medula óssea de murganhos GFP foram injectadas na veia da cauda dos ratos receptores irradiados. Quatro semanas após o transplante de medula óssea, tecido do cólon foi isolado a partir de murganhos GFP-BMT para análise por microscopia confocal, e o grau de quimerismo foi medida por citometria de fluxo. Descobrimos que o intestino foi preenchido com fluorescência verde, e mais de 90% das células mononucleares circulantes em ratinhos receptores foram positivas para GFP (Figura 1C, D).

(A) vista macroscópico mostra uma série de tumores do cólon nos dois pontos distais do modelo de ratinhos. (B) H E as manchas de cortes seriados de tecidos do rato do cólon. (C) análise de microscopia confocal de secções congeladas do cólon mostraram que as células derivadas da medula óssea (verde) no cólon. (D) citometria de fluxo de células mononucleares periféricas no modelo GFP-BMT.

Os camundongos GFP-TMO foram injectados i.p. com 10 mg /kg OMA em 0,2 ml de solução salina. Uma semana após a administração AOM, 3% DSS foi administrado na água de beber, durante 7 dias, seguido de 14 dias de água normal; esta alternância foi repetido por 3 ciclos. Observou-se tumores intestinais na maioria dos ratos, e os tipos de tumor foram confirmadas por análise histológica (Figura 1A, B).

da medula óssea derivadas de células endoteliais durante a angiogénese contribuem para o cancro colo-rectal associada à colite

para investigar se a células endoteliais derivadas BM-contribuiu para a angiogénese de tumores neste modelo, analisou-se a expressão da GFP no endotélio dos tumores em ratinhos GFP-TMO a seguir à indução de cancro do cólon associada à colite. A análise por microscopia confocal sobre espécimes de tecidos vivos mostrou que as células positivas para GFP extensivamente infiltrado para o estroma tumoral, e algumas das células foram cercado por uma margem de WGA-positiva no endotélio do tumor. foram observadas células WGA e GFP-positivas dupla que revestem os vasos (Figura 2A). secções de tumor congeladas foram coradas com anticorpo anti-CD31 (n = 5), e como mostrado na Figura 2B, as células positivas para GFP infiltrou o endotélio do tumor. Tomados em conjunto, os nossos dados indicam que as células endoteliais contribuíram para a angiogênese cancro do cólon associada a colite BM-derivado.

Os vasos sanguíneos (A) foram coradas com 647 WGA (azul), que foi injetado retrorbitally. A análise por microscopia confocal a partir de espécimes de tecidos vivos mostrou que as células-derivadas BM (verde) infiltrados do estroma, e uma porção de células foram encurralados por um (azul) margem de WGA-647-positivo no endotélio do tumor. células duplo-positivos foram observados revestem os vasos. (B) As secções congeladas de tumores foram coradas com um anticorpo anti-CD31 para detectar células endoteliais BM-derivados (verde). As células positivas para GFP (verde), com margens de CD31-positivas foram observados no endotélio do tumor. C (CMT93) e D (CT26) os tecidos de tumor de xenoenxerto de isolados de ratinhos transplantes BM foram coradas com anticorpos anti-CD31 (vermelho). GFP células positivas foram observadas ao redor dos vasos tumorais, e alguns alinhado ao endotélio.

Além disso, de acordo com nosso relatório anterior (22), foram detectados endotélio GFP-positiva em CMT93 e CT26 tumores de xenoenxerto em camundongos GFP-BMT (Figura 2C, D).

Distribuição de CD11c de medula óssea derivada

+ células dendríticas e CD4

células + T em câncer colorretal associado a colite

Para determinar a distribuição de células inflamatórias BM-derivados no microambiente do tumor, foram analisados ​​os ratos foram submetidos a que o transplante de medula óssea seguido pela indução de cancro colorectal associada à colite por microscopia confocal. Como a mostra na Figura 3A, B e C, os tecidos tumorais foram amplamente infiltrada por CD11c

+, Ly-6C e CD4

+ células do sistema imunológico, a maioria dos que expressaram GFP. Além disso, foi detectada a CD11c + DC GFP-positivas e células T CD4 + no tumor dos tumores de xenoenxerto CMT93 e CT26 em murganhos GFP-BMT (Figura 3D, E, F e G).

(A- coloração C) imunofluorescência da BMT combinados e amostras de cancro colo-rectal associado com colite com anti-CD11c, Ly-6C e anticorpos específicos para CD4 (vermelho). tecidos de tumor (D-E) CMT93 isolados de ratinhos transplantes BM foram coradas com anticorpo anti-CD11c e específico para CD4 (vermelho). tecidos de tumor (F-G) CT26 isoladas a partir de ratinhos transplantados-BM foram coradas com anticorpo anti-CD11c e específico para CD4 (vermelho).

Para definir quantitativamente a distribuição de CD11c + BM-DC e derivados as células T CD4 + no nosso modelo de cancro colorrectal associada à colite, foram isoladas as células que se infiltram no tumor a partir de tecidos de tumor do rato e realizada a análise por FACS. Os nossos dados indicam que protocolo de isolamento entre as células que se infiltram no tumor, 4,16 ± 0,12% eram células positivas para GFP, 14,2 ± 0,34% eram células CD4 +, e 2,05 ± 0,23% foram CD11c + DC (Figura 4A). Surpreendentemente, as células DCs CD11c + positivas para GFP foram um terço das células GFP + /CD11C-, e metade do DCs (0,96% vs 1,02%) foram as células de medula óssea originais positivas para GFP. A maioria das células T CD4 + foram GFP-negativos (12,02% vs 1.9%). Curiosamente, verificou-se um novo CD11c + subconjunto DC (0,34% vs 1,64%) CD4 + neste modelo (Figura 4B, C).

(A) o isolamento de células a partir de tecido de tumor, seguido de análise de FACS mostrou que a proporção de as células derivadas da medula óssea, CD4

+ e CD11c células

+ DCs no tecido de tumor do cólon. (B-C) Composição do CD11c

+ e CD4

+ células T derivadas de medula óssea. (C) As barras representam a média ± SD; As análises das amostras foram realizadas em triplicado.

Discussão

A doença inflamatória intestinal (DII) pode levar a um risco aumentado de desenvolver cancro colorectal (CRC). A patogénese molecular de cancro colorectal IBD-associado que difere da de CRC esporádica [23]. A inflamação é um dos principais contribuintes para a carcinogênese, e doenças inflamatórias crônicas, como IBD iniciar caminhos complexos para neoplasia [24]. Neste estudo, foi utilizado um agente cancerígeno potente, AOM, que induz adutos de DNA via espécies alquilantes. Estes aductos de formar ligações covalentes entre o agente cancerígeno reactivo e o ADN genómico, resultando em mutações durante a reparação do ADN e a promoção do desenvolvimento do tumor. Tais mutações incluem mutações genéticas murino em vias Tumorigênese (APC, p53, Msh2) [25]. administração ou repetidas ciclos de longo prazo de DSS, um produto químico que causa lesão epitelial, pode induzir a colite crônica e subsequente displasia em roedores [26].

Durante a última década, notáveis ​​avanços têm sido feitos no entendimento da biologia das células estaminais e o papel das células estaminais em doenças tais como CRC [27]. Em particular, as descobertas relacionadas com o controlo da proliferação de células-tronco e ao modo como a desregulação da proliferação conduz à oncogénese ter sido em primeiro plano. Assim, foi estabelecido um transplante de medula óssea combinadas e modelo de cancro colorrectal associada a colite para definir a distribuição e a função das células-derivadas BM no cancro do cólon.

Recentemente, EPCs circulantes mobilizados a partir da BM foram detectados na sangue periférico de várias espécies e têm sido mostrados para ser envolvido na neoangiogénese em tumores, bem como na formação de novos vasos após trauma, lesão por queimadura, e enfarte do miocárdio [28,29]. A maioria dos tumores sólidos requerem um fornecimento vascular para receberem oxigénio e nutrientes para melhorar progressão tumoral e invasão. O tumor pode explorar os navios existentes, ou recrutar e mobilizar células BM-Derived para induzir a neovascularização [30]. EPCs originam de células BM-Derived e possuem a capacidade de se diferenciarem em células endoteliais maduras, contribuindo para o processo complexo da neovascularização do tumor. Há provas de que a angiogénese do tumor pode ser estimulada pela célula tumoral secretado quimioquina CXC ligandos CXCL5 e CXCL8, através do seu receptor CXCR2 comum [31]. Audollent et al mostram que Óssea endoteliais derivadas da medula e células precursoras hematopoiéticas melhorar a metástase de câncer de cólon em um modelo de ratos sem pêlo ortotópico [32]. O nosso relatório anterior mostrou que as células endoteliais BM-derivados foram detectados em tumores de xenoenxerto utilizando Colon38 e células Panco2 [18]. Neste estudo, que mostrou por análise de microscopia confocal que as células endoteliais derivadas BM-participou na angiogénese associada ao cancro do cólon colite. Além disso, foi detectada a expressão da GFP no endotélio dos CMT93 CT26 e xenoenxertos de tumor em ratinhos GFP-BMT, consistente com o nosso relatório anterior [18].

Semelhante a outros tumores malignos sólidos, colo-rectal e os tumores associados com colite estão infiltrados por vários tipos de células do sistema imune [33]. As células do sistema imune inato, tais como neutrófilos, mastócitos, células assassinas naturais (NK), as células dendríticas e macrófagos associados a tumores, pode ser facilmente detectada nestes tumores. Além disso, tumores avançados recrutar subconjuntos mielóides específicos que representam uma população fenotipicamente heterogênea, mas funcionalmente semelhante de CD11b

+ Gr1

+ células, chamadas de células supressoras derivadas mielóides [34,35]. Estas células partilham algumas características com monócitos, macrófagos, neutrófilos, e células dendríticas e ajudam a suprimir as respostas imunitárias antitumorais e angiogénese tumoral. Estudos anteriores estabeleceram que as APCs BM-derivados são os principais responsáveis ​​para a indução de tolerância de células T induzida por tumores [36]. BM-derivado DC, marcador clássico de CD11c, pode capturar e apresentam antígenos específicos de tecidos periféricos ao ingénuo células CD8 +

T, levando à sua exclusão [37]. Existe uma exigência semelhante para o processamento de antigénios auto parenquimatosa hospedeiro por CC na indução de células T CD4

+ tolerância da célula T no tumor. DCs BM-derivadas de camundongos BALB /c são capazes de promover a expansão de células CD4

+ CD25

+ Foxp3

+ células T

in vitro

e que isso ocorre independente do estado de maturação da os DCs como células maduras e imaturas são capazes de expandir o Foxp3

+ população de células [38,39]. Esta ignorância imunológico e os mecanismos de tolerância imunológica contribuir para o desenvolvimento do tumor. Mostrámos a distribuição das células inflamatórias BM-derivados (CD11c

+, Ly-6C e CD4

+ células T) no microambiente tumoral. Surpreendentemente, as células DCs CD11c + positivas para GFP foram um terço das células GFP + /CD11C-, e metade de todos os DCs foram BM células originais positivas para GFP. Nós também descobrimos um novo CD4

+ CD11c

subconjunto + DC (0,34 vs 1,64) em nosso modelo de cancro colorectal associada à colite. As células do sistema imunitário adaptativo são recrutados para tumores colorrectais e associada com colite, em que desempenham funções tanto pro- ou anti-tumorigénica [40]. células T, por exemplo, são necessários não só para a inflamação, desenvolvimento de cancro, e a progressão do tumor, mas também para a imunidade anti-cancro [41].

estabelecida com sucesso um transplante de BM combinadas e modelo de cancro colorrectal associada a colite. Este modelo fornece uma ferramenta poderosa para estudar as contribuições das diversas células BM-derivados durante a progressão do cancro colo-rectal associado a colite e pode revelar novos BM-derivado tipos de células e funções que poderiam ser aplicáveis ​​em futuras estratégias terapêuticas.