Abstract

ligando CC-quimiocinas 18 (CCL18) é principalmente expresso por macrófagos e células dendríticas, alternativamente activados e desempenha um papel importante na fibrose pulmonar, artrite e outras doenças. Aqui CCL18 foi medida no soro de 31 voluntários saudáveis ​​e 170 doentes com cancro do pulmão e correlacionaram estes dados com a histologia, estágio do tumor e parâmetros clínicos. CCL18 nível sérico dos pacientes com cancro do pulmão de células não pequenas significar foi de 150 (857) ng /mL comparativamente com 32 (61) ng /ml no grupo de controlo saudável. Os grupos de doentes diferem significativamente de acordo com a sua histologia (adenocarcinoma 143 (528) ng /mL vs carcinoma de células escamosas 187 (857) ng /ml, p 0,02). Além disso, verificou-se uma diferença significativa entre os pacientes com menor relação maior T-estágio (p 0,003). Receiver operating characteristic (ROC) análises revelaram um ponto de corte de 83 ng /ml (área sob a curva (AUC): 0,968; p 0,0001) para discriminar entre os controlos saudáveis ​​e doentes com cancro do pulmão de células não-pequenas. ROC analisa a discriminar entre os pacientes, que morreram por causa da morte relacionada com câncer e aqueles que morreram por outras razões não levam a uma AUC válido. Para estratificar os pacientes com tumor, uma trama valor de critério foi realizada levando a um ponto de sensibilidade e especificidade iguais (54%) de 162 ng /ml. Os pacientes com um nível sérico CCL18 superiores a 160 ng /ml tiveram uma sobrevida média de 623 dias. Em contraste, aqueles em pacientes com um nível de linha de base entre 83 ng /mL e 160 ng /ml de o tempo médio de sobrevivência foi de 984 dias (P 0,005). Survival-análise revelou no adenocarcinoma sobrevida média de 1152 dias no grupo abaixo de 83 ng /ml. No grupo mediana do tempo de sobrevivência médio era de 788 dias, e no grupo com os níveis mais altos o tempo médio de sobrevivência foi de 388 dias (P 0,001). Em contraste, não foi encontrada correlação entre o nível CCL18 base FEV1 e. Em conclusão, em pacientes que sofrem de níveis de CCL18 soro adenocarcinoma aumentou prever um tempo de sobrevivência diminuída

Citation:. Plönes T, Krohn A, Burger M, Veelken H, Passlick B, Müller-Quernheim J, et al. (2012) nível sérico de CC-quimiocinas Ligand 18 é maior em pacientes com não-pequenas células do cancro do pulmão e se correlaciona com Survival Time em adenocarcinomas. PLoS ONE 7 (7): e41746. doi: 10.1371 /journal.pone.0041746

editor: Allen Waziri, University of Colorado School of Medicine, Estados Unidos da América

Recebidas: 1 de fevereiro de 2012; Aceite: 25 de junho de 2012; Publicação: 25 de julho de 2012

Direitos de autor: © 2012 Plönes et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. O trabalho foi feito com dinheiro intramural sem qualquer financiamento adicional. Não há fontes de financiamento externas atuais para este estudo

Conflito de interesses:. TP, AK, MB, HV e BP declaram não haver conflitos de interesse. JMQ e GZ um pedido de patente em CCL18 e CCL18R como biomarcador e alvo de terapia (patente pendente). Isto não altera a adesão dos autores para todos os PLoS ONE políticas sobre a partilha de dados e materiais. GZ é um membro do Conselho Editorial PLoS Academic.

Introdução

O câncer de pulmão é a principal causa de mortalidade relacionada ao câncer e é uma das neoplasias malignas mais importantes por causa de sua alta prevalência e aumento da incidência [1]. Quase 80% de todos os cânceres de pulmão são histológica definida como câncer de pulmão de células-não-pequenas células (NSCLC). Apesar das vantagens em novas tecnologias e no desenvolvimento de novas drogas que contribuem para um diagnóstico muito mais cedo e um tratamento mais suficiente, NSCLC continua a ser uma doença fatal. A sobrevida global em 5 anos para pacientes com NSCLC ainda é baixa e até mesmo nos estágios iniciais da doença, a taxa de recorrência é relativamente elevada [2], [3]. O prognóstico é mau, devido ao comportamento agressivo altamente expresso por crescimento tumoral progressivo rápido e precoce de metástases. Embora o mecanismo exacto da carcinogénese e metástase em NSCLC ainda são desconhecidas, o microambiente do tumor parece desempenhar um papel chave no desenvolvimento desta doença maligna e a disseminação das células tumorais. O microambiente de tumores sólidos é uma mistura complexa de factores celulares e não celulares [4]. Especialmente as células imunes localizados em torno do tumor e da quimiocina-diafonia promover o crescimento de células tumorais e o seu [5] espalhamento. macrófagos infiltrantes de tumor, que também são conhecidas como macrófagos associados a tumores (TAM) são um dos mais importantes subgrupo de células imunitárias no microambiente tumoral e representar até 50% da massa tumoral. Alguns estudos demonstram uma correlação significativa entre o número positivo de TAM e um pior prognóstico em doenças malignas [6]. Inicialmente monócitos são recrutados a partir da circulação sanguínea para o tecido e diferenciar nos dois fenótipos M1 = ovelhas ou macrófagos M2. O fenótipo M1 está associada com vias pró-inflamatória, caracterizada por a libertação de citocinas pró-inflamatórias e aumento de morte microbiana. O fenótipo M2 apresenta uma actividade pró-angiogénico, e prometastatic protumoral e está associada com a remodelação do tecido. TAM são principalmente M2-macrófagos que segregam um padrão específico de quimiocinas [6] – [8]. Eles caracterizam-se pela libertação de IL-10, CCL17, CCL22, IL-1Ra, e CCL18 [9]. O CC-quimiocinas CCL18, anteriormente denominado “quimiocinas pulmonar e regulados de ativação-” é fortemente expresso nos pulmões humanos e menos em outro tecido linfático como gânglios linfáticos ou timo. CCL18, que está constantemente presente no soro de indivíduos saudáveis, não tem correspondência em roedores e seu nível sérico é aumentada em várias doenças benignas e malignas tais como a fibrose pulmonar, a dermatite atópica, doença de Gaucher, e leucemia [10] – [13]. Alguns autores demonstraram também que o nível de CCL18 é elevada em fluidos corporais e de soro de pacientes com carcinoma do ovário [14], [15]. O exame do tecido tumoral localizado a origem de CCL18 numa subpopulação de TAM baseados em frente do tumor [16]. Curiosamente CCL18 mostra alguma similaridade com TGF-ß, mas o papel da CCL18 no ambiente do tumor de NSCLC ainda é desconhecido. Recentemente, Chang et al. demonstraram que CCL18 gera células T reguladoras, que podem ajudar as células de tumor para escapar da vigilância imunológica [17]. Por isso, investigamos o nível sérico de pacientes com câncer de pulmão com câncer de pulmão de células não-pequenas ea correlação de CCL18 aos parâmetros clínicos.

Materiais e Métodos

Características das NSCLC pacientes saudáveis ​​controles

cento e setenta pacientes diagnosticados com NSCLC (UICC Fase I à Fase IV, 6

th Edition) e um grupo de 31 voluntários saudáveis ​​de controle estão incluídos neste estudo. A média de idade dos pacientes foi de 64 ± 10 anos e 125 do sexo masculino e 45 do sexo feminino. Adenocarcinoma foi diagnosticada em 70 pacientes, 54 pacientes apresentaram carcinoma espinocelular e em 46 casos o patologista examinar descreveu uma histologia mista. O estadiamento foi realizado com base em exame patológico sempre que possível; em outros casos, foi realizada estadiamento clínico em combinação com a confirmação citológica ou histológica de metástase. O tamanho do tumor foi estimada utilizando os dados fornecidos pelos patologistas. De acordo com a classificação UICC estadiamento (6

th Edition) encontramos 22 pacientes em estágio IA, 19 em estágio IB, 5 em estágio IIB, 29 em IIIA, 25 em IIIB e 69 em estágio IV. Em um caso, a fase UICC não foi determinada devido a registos de dados descritas insuficiente, o que apenas o estado nodal. O grupo controle consistiu de 23 do sexo feminino e 8 do sexo masculino, com idade média de 54 ± 5 ​​anos (Tab. 1). classificação tumor de acordo com a histologia é mostrada na Tabela 2.

Todos os procedimentos de consentimento informado, coleta de dados e proteção de privacidade foram aprovados pelos conselhos de ética do Centro Médico da Universidade de Freiburg. Os dados clínicos foram extraídas do registo banco de dados médico do Centro Médico da Universidade de Freiburg. As amostras de soro a partir de cada indivíduo foram obtidas no momento do diagnóstico durante o seu trabalho clínico-se antes de qualquer tratamento terapêutico foi iniciado. Os soros foram armazenados a -80 ° C até que a análise foi realizada. O diagnóstico de NSCLC foi confirmado histologicamente ou citologicamente. tipo histológico foi determinada de acordo com a classificação da Organização Mundial de Saúde. Todos os tumores foram classificados de acordo com o procedimento Staging 6ª Edição UICC incluiu radiografia de tórax, tomografia computadorizada, PET /CT, broncoscopia e /ou mediastinoscopy. testes de função pulmonar (TFP) foram rotineiramente realizado com uma metodologia padrão no ponto de tempo antes do tratamento. A sobrevida global foi calculado a contar da data do diagnóstico. Sempre que possível, as informações básicas foi recuperado por registros médicos do Centro Médico da Universidade de Freiburg, de médico de clínica geral ou a partir de entrevistas por telefone. contato transversal para todos os pacientes sobreviventes foi realizada em abril 2011.Mean o tempo de acompanhamento foi de 1325 dias.

imunodetecção de soro CCL18

O sangue venoso foi coletado usando um procedimento de rotina. As amostras de sangue descansou 20 minutos antes da centrifugação. Após centrifugação, as amostras de soro foram congeladas a -80 ° C e armazenadas. CCL18 foi quantificada utilizando DuoSet ELISA Desenvolvimento do Sistema Kit (R D Systems Europe, Wiesbaden, Alemanha). O limite de detecção para CCL18 ELISA foi de 7 pg /ml. Todas as amostras foram medidas em duplicado. Para amostras duplicadas, os coeficientes intra-ensaio de variação de 10% e os coeficientes de variação de 20% inter-ensaio foram aceites.

Estatísticas

As concentrações são dadas como mediana (intervalo) e como diagramas de caixa. A análise estatística foi realizada utilizando StatView 5.0 software (SAS Institute, NC). As comparações entre os grupos de pacientes foram realizados usando análise de variância e teste de Bonferroni-Dunn para comparações múltiplas. Em comparações individuais foram considerados significativos os valores de probabilidade se fossem menos do que 0,05. Em comparações múltiplas níveis de p foram ajustados para o número de comparações (Bonferroni). ROC analisa e enredo valor de critério foram realizadas utilizando MedCalc versão 11.6 (MedCalc Software, Bélgica). As curvas de sobrevivência foram realizadas de acordo com o método de Kaplan-Meier. As diferenças de sobrevida foram analisados ​​por um teste de log-rank. análise Multivariante foi realizada utilizando o modelo de riscos proportonal cox e as correlações foram realizadas utilizando Spearman.

Resultados

Os níveis séricos de CCL18 em pacientes com NSCLC e correlação com clínicas e patológicas Parâmetros

O nível médio de CCL18 nas amostras de soro de pacientes de carcinoma (n = 170) foi de 150 (857) ng /ml, o que foi significativamente mais elevado do que as amostras de controlo (n = 31, 32 (61) ng /ml; p 0,0001). Houve uma diferença significativa de todos os grupos de pacientes comparados com os controles (p 0,0001; Fig. 1). O nível de soro CCL18 em pacientes com carcinoma de células escamosas foi maior do que em soros de doentes com adenocarcinoma (187 (857) ng /ml, 143 (528) ng /ml; respectivamente; p 0,02). CCL18 níveis séricos aumentaram significativamente gradualmente e com o progresso do t-fase (Fig. 2). Em comparação com o nível sérico controlos CCL18 foi significativamente maior no t-fase 1 (119 (332) ng /ml, n = 39, p = 0,0002) e mais ainda em t-fase 2 pacientes (150 (421) ng /ml, n = 61 p 0,0001). As comparações entre os pacientes com tumores revelaram que os níveis de t-fase 1 foram significativamente mais baixos em comparação com o t-fase 3 (210 (374) ng /ml, n = 26, p 0,005) e t-fase 4 (182 (845) ng /ml, n = 28, p = 0,002). nível de CCL18 em T-estágio 3 e 4 diferiram significativamente também com os controles (p 0,0001). Para verificar que o soro concentrações CCL18 correlacionam-se com o tamanho do tumor foi estimado volumes tumorais pelos dados patológicos e correlacionados o volume tumoral com concentrações CCL18 soro. Na verdade, houve uma correlação fraca, mas significativa do volume do tumor e CCL18 soro (rho = 0,48, p 0,005; Fig. S1). . Não houve diferenças significativas nos níveis séricos CCL18 entre os diferentes N-estágios e m-estágios (dados não mostrados)

Houve também uma diferença entre os pacientes com carcinoma escamoso e adenocarcinoma (p 0,02). No entanto, esta não foi significativa após a correção de Bonferroni.

Além disso, houve uma diferença significativa entre os grupos de pacientes com menor contra as duas maiores T-estágios.

análise univariada não houve correlação entre o nível sérico CCL18 e idade, nem no controle nem nos grupos de pacientes. Adicionando uma segunda coorte de idade significativamente mais jovens (24 (18) anos) controle encontramos uma correlação fraca, mas significativa de CCL18 com a idade (rho = 0,45, p 0,0001). No entanto, a diferença de concentração do soro CCL18 entre estas duas coortes não alcançar um nível significativo (32 (62) ng /ml, contra 45 (63) ng /ml; não significativo; A Fig. S2). Não houve diferenças significativas entre machos e fêmeas foram encontrados dentro dos subgrupos pesquisados. Além disso, a análise multivariada dos dados de nossos pacientes com tumor indicou que CCL18 depende estágio do tumor, mas é independente da idade, sexo e FEV1 (dados não mostrados).

Determinação da CCL18 nível sérico de pontos de corte

Receiver operating characteristic (ROC) análises revelaram um ponto de corte de 83 ng /ml (área sob a curva (AUC):. 0,968; p 0,0001; Fig 3). discriminar entre controles saudáveis ​​e pacientes com NSCLC

ROC analisa a discriminar entre câncer relacionado ou não câncer de morte relacionada não levar a uma AUC válido. Assim, para estratificar os pacientes com tumor, uma trama valor de critério foi realizada levando a um ponto de sensibilidade e especificidade iguais (54%) de 162 ng /ml. Os pacientes com NSCLC e nível sérico CCL18 superior a 162 ng /ml tiveram uma sobrevida média de 623 dias, enquanto que em pacientes com NSCLC e um nível sérico entre 160 ng /ml e 80 ng /ml tempo médio de sobrevivência foi de 984 dias. No subgrupo com um nível de soro CCL18 de 80 ng /ml ou inferior ao tempo de sobrevivência médio era de 841 dias. (P 0,004; Fig. 4).

O tempo de sobrevida varia significativamente com diferentes níveis de CCL18 soro (p 0,004).

CCL18 nível sérico e Sobrevivência por histológica Subgrupos

em pacientes com adenocarcinoma do pulmão, encontramos um tempo médio de sobrevivência de 388 dias no grupo com o nível mais alto CCL18. No grupo com o nível CCL18 entre 160 ng /ml e 80 ng /ml a sobrevivência média foi de 788 dias e no grupo com um nível CCL18 abaixo de 80 ng /ml a sobrevivência média foi de 1152 dias (p 0,002; Fig. 5A ). Em contraste encontramos nenhuma diferença significativa em todos os três grupos se os pacientes sofriam de carcinoma de pulmão com a histologia mista ou de carcinoma de células escamosas (Fig. 5B).

O tempo de sobrevida de pacientes com diferentes níveis de CCL18 soro varia significativamente em adenocarcinoma pacientes (p 0,002; a). mas não em pacientes com carcinoma espinocelular (B, painel esquerdo) e misturado NSCLC (B, painel da direita)

CCL18 nível sérico e FEV1

Para excluir a possibilidade de que as correlações observadas são causadas por DPOC que possam acompanhar doença do cancro em nossos pacientes nós níveis de CCL18 soro também se correlacionou com o volume expiratório forçado em 1 segundo (FEV1) [18]. No entanto, não foram encontradas diferenças significativas em FEV1 sobre a histologia (adenocarcinoma: 84 (82)%; NSCLC 77 (69)%; carcinoma espinocelular 76 (80)%, não significativa, Fig S3.) Ou estágio T (T1:77 ( 78)%; T2: (79 (69)%; T3:. (. 72 (60)%; T4:87 (80)%, Fig S4) Além disso, não houve correlação significativa entre o parâmetro de função pulmonar FEV1 e o nível de CCL18 em qualquer subgrupo histológico (adenocarcinoma: rho = -0,02; NSCLC rho = -0,3; escamosas carcinoma rho = -0,12, não significativa)

Discussão

a infiltração de macrófagos associados a tumores. (TAM) em adenocarcinoma pulmonar está associado com prognóstico pobre [19]. Além disso, tem sido mostrado que CCL18 libertação TAM que nos levou à hipótese de que CCL18 pode servir como biomarcador no soro em pacientes com cancro do pulmão [16]. Nós observaram que o nível sérico médio de CCL18 em pacientes com câncer de pulmão é mais de quatro vezes aumentada comparativamente com controles saudáveis. Nossos dados demonstram que o nível sérico CCL18 aumenta de acordo com a T-palco. Em contraste, N e M andares não se correlacionam com níveis séricos CCL18. Curiosamente, os níveis séricos CCL18 diferiu de acordo com o tipo histológico de câncer de pulmão. Pacientes que sofrem de carcinoma escamoso divulgado um dizer um pouco maior nível sérico CCL18 em comparação com pacientes que sofrem de adenocarcinoma de pulmão, no entanto, este foi de menor importância.

CCL18 é um produto típico de macrófagos alternativamente activados e é um possível marcador de MAT [20]. Portanto, a hipótese de que o nível sérico CCL18 pode refletir o número de TAMs. Porque TAM estão localizados no interior do tumor, o seu número deverá aumentar com a massa do tumor. Assim, analisamos a correlação entre o nível sérico CCL18 e T-palco como um marcador substituto para o tamanho do tumor. Isto aplica-se em especial nos mais baixos t-estágios e de fato o nível sérico CCL18 aumenta com o aumento T-estágios da T-estágios 1 a T-estágios 3. A principal diferença entre as T-estágios 3 e T-4 estágios etapa é a infiltração de estruturas importantes do mediastino, mas não reflete necessariamente um aumento no tamanho. Foi, portanto, não é surpreendente que nenhuma diferença notável foi encontrado no nível sérico CCL18 de pacientes com T-estágios 3 e T-estágios 4. Além disso, encontramos também uma correlação fraca, mas significativa de CCL18 soro com o volume do tumor, indicando que o soro CCL18 que é o tamanho do tumor, pelo menos, um concentrações séricas CCL18 factor determinante. No entanto, há sérias limitações na estimativa do volume do tumor. Normalmente, os tumores são de forma irregular e sem modelo de corpo padrão (esfera, o cilindro ou quadrado) refletem forma tumor real. Assim, usando as dimensões extraídos dos relatórios dos patologistas para calcular os volumes dos tumores com base em um modelo simples, regular, corpo (comprimento x largura x altura), os volumes indicados são apenas estimativas aproximadas de volumes reais. Isso pode explicar a baixa correlação entre volume tumoral e os níveis de CCL18 soro.

N e M- estágios são marcadores substitutos para hematogênica e metástase lymphogenous. Não foi possível encontrar uma correlação destes parâmetros com os níveis séricos de CCL18 que também não é surpreendente. O envolvimento dos gânglios linfáticos ea formação de metástases não, ou só pode aumentar marginalmente o número de TAMs de forma detectável.

O fato de que nós não encontraram diferenças significativas quanto ao nível sérico CCL18 na histológico subgrupos de pacientes com cancro do pulmão de não-pequenas células pode depender do mecanismo de indução de CCL18. Apesar da biologia tumoral diferente de escamosas e adenocarcinoma parece haver um campo de indução concordante em ambos os subtipos histológicos e a potência para estimular a activação de macrófagos alternativa e, subsequentemente, para induzir a libertação de CCL18 pode ser uma propriedade geral de células malignas [21]. Atualmente, a função fisiológica de CCL18 é pensado para afetar principalmente a quimiotaxia e homing de leucócitos e a regulação da resposta imunológica [22]. No entanto, resultados recentes do nosso grupo e outros demonstram que CCL18 também está envolvido na indução da produção de matriz pelos fibroblastos [23], [24]. Assim, CCL18 pode também ser envolvida na formação do estroma tumoral.

TAM tem um forte valor prognóstico em muitos tumores malignos [6], [25], [26] em que estimulam directamente o crescimento de tumores, metástases , e a angiogénese através da libertação de vários factores de crescimento, citocinas e proteases de matriz. As funções de promoção de tumores MAT incluem também a supressão da imunidade adaptativa por vários mecanismos que contêm pouca capacidade apresentadora de antigénio e a inibição da proliferação das células T [27], [28]. CCL18 também é capaz de gerar células T reguladoras adaptativas (Tregs) a partir de CD4

+ CD25

– células T de memória [17]. Tregs são fisiologicamente envolvida na manutenção da auto-tolerância imunológica, mas eles também inibem a actividade anti-tumoral de células T. Uma grande quantidade de Tregs estão presentes nos tumores de pacientes com diferentes entidades e os seus nódulos linfáticos de drenagem [9], [29], [30]. É importante salientar o número de Tregs em tumores de pacientes com câncer de pulmão, câncer de mama, câncer de estômago e câncer de ovário correlacionam-se com mau prognóstico e recidiva da doença [31] – [38]. Assim, CCL18 pode desempenhar um papel no recrutamento e a indução de Tregs no ambiente tumoral e subsequentemente promove a fuga do tumor a partir de vigilância imunológica.

Recentemente foi possível demonstrar que as influências CCL18 sobrevivência de pacientes em pulmonar idiopática fibrose (IPF) [13]. Portanto, nós também definidos pontos de corte e analisadas sobrevida nos pacientes com NSCLC. Estratificamos os pacientes em uso de um gráfico de valores critério, o que nos leva à concentração CCL18 de 162 ng /ml como ponto de corte. Nossas análises de ROC revelou um ponto de corte com uma elevada especificidade e sensibilidade. Em contraste, o ponto de corte definido pela trama valor de critério tem apenas um valor preditivo limitado como demonstrado pela bastante baixa sensibilidade e especificidade. No entanto, usando esse valor como uma ferramenta de estratificação encontramos diferenças marcantes no tempo de sobrevida média de pacientes com NSCLC. Os pacientes com uma concentração CCL18 de 160 ng /mL ou acima divulgado um tempo médio de sobrevivência que foi reduzido de um terço em comparação com os pacientes com uma concentração CCL18 inferior a 160 ng /ml. Este efeito é mais distintiva no subgrupo de pacientes com adenocarcinoma. Curiosamente, Leung et al. expressão CCL18 estimada dentro do tecido adenocarcinoma gástrico e encontraram uma associação da expressão de mRNA alta CCL18 no tumor com sobrevida global prolongada [16]. Além disso, os autores descobriram uma correlação positiva entre a expressão de ARNm CCL18 e marcadores de células T no interior do tecido. Isto é de interesse, porque CCL18 é descrito como um quimioatractor de célula T [39]. Assim, o aumento da expressão de CCL18 dentro do tumor promove o influxo de células T para o tumor e, portanto, pode ser protectora. Por outro lado, altos níveis de CCL18 no soro pode reter as células T dentro da periferia e inibe sua migração para o tumor

.

Pode-se argumentar que a correlação de bom prognóstico e concentrações séricas CCL18 inferiores são coincidências em vez de causalidade dependências porque T1 etapas que estão associados com menor CCL18 soro são R0 ressecado e, consequentemente, têm taxas de sobrevivência mais elevadas do que outras fases. No entanto, embora T1 estágios em carcinoma espinocelular ou NSCLC mista também são R0 ressecado encontramos uma correlação entre o nível sérico CCL18 e tempo de sobrevida apenas em pacientes com adenocarcinoma, mas não em carcinoma espinocelular ou misturado NSCLC. Assim, a ligação do tempo de sobrevivência e CCL18 soro não depende de diferentes opções de tratamento em diferentes estádios.

Recentemente, Sin e colaboradores demonstraram que CCL18 é aumentada na doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC) e que este aumento está relacionado com o aumento da mortalidade total em pacientes com DPOC [18]. Porque a maioria dos nossos pacientes são fumantes a presença de DPOC pode ser possível. No entanto, embora significativo, o aumento em CCL18 relatado por Sin et al. é muito mais baixa, tal como descrito aqui. Além disso, os valores de FEV1 em nossos coortes divulgada uma grande variabilidade, mas não diferiu significativamente entre os vários grupos ou histológicas entre as T-fases. Mais importante ainda, CCL18 não se correlacionou com FEV

1.

Apesar de nossos controles são significativamente mais jovens do que os pacientes com tumor as diferenças observadas entre pacientes com tumor e controles não se baseiam apenas na idade. As diferenças observadas entre os diferentes grupos etários testados não são significativos e as medianas das nossas diferentes coortes de controle estão localizados no intervalo de dados dos controles. Assim, embora possa haver uma influência da idade sobre o nível sérico CCL18, as diferenças observadas entre controles e pacientes com tumor não pode ser explicado pelas diferentes idades medianas desses grupos.

Conclusões

CCL18 é um marcador de macrófagos alternativamente activados e tem, portanto, um impacto importante na orquestra do “cross-talk quimiocinas” no microambiente do câncer de pulmão de células não-pequenas. Especialmente no cancro do pulmão é de importância urgente de compreender a forma como o estroma tumoral comunica com as células tumorais e como as quimioquinas e células imuno-competentes influenciar o processo de crescimento de tumores e metástases. Um aspecto especial de CCL18 também é a função imuno-reguladora e a indução de células T reguladoras. Isto implica um enorme potencial de CCL18 para actuar como um agente imunossupressor, o qual desempenha um papel importante não só na doença maligna mas também na doença benigna com aspectos auto-imunes. Estritamente limitada às espécies de primatas e falta de roedores, CCL18 escapou até agora à atenção da maioria dos investigadores.

O nosso estudo investigou pela primeira vez que o nível de soro de pacientes com CCL18 de pulmão de células não-pequenas Câncer. Há um aumento substancial dos níveis séricos CCL18 e análise ROC demonstra que CCL18 pode ser um marcador de soro altamente preditivo de diferenciar entre pacientes tumorais e não tumorais. A correlação entre CCL18 soro e fase do tumor implica que CCL18 é um marcador substituto para o tamanho do tumor. CCL18 prever também o tempo de sobrevivência em doentes com adenocarcinoma do pulmão. A presença de níveis séricos CCL18 altamente elevados em pacientes com cancro do pulmão de não-pequenas células poderiam apontar para um papel importante da CCL18 no microambiente do câncer de pulmão e pode ser um alvo potencial na terapia de câncer de pulmão.

Informações de Apoio

Figura S1.

CCL18 concentração sérica (ng /ml) correlaciona-se com o volume do tumor (cm

3 como logaritmo de base 10). (Rho fator de correlação de postos de Spearman =).

doi: 10.1371 /journal.pone.0041746.s001

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Figura S2. níveis

Median CCL18 em duas coortes de idade diferente de controle. Controles mais jovens do que 45 anos (idade média de 26 ± 4,5 anos) revelam níveis séricos CCL18 mais elevados do que os controles com uma idade de 45 anos ou mais (idade média de 54 ± 4,9 anos); no entanto, esta diferença não atingiu significância estatística

doi:. 10.1371 /journal.pone.0041746.s002

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Figura S3.

volume expiratório forçado num minuto (FEV1) em coortes do paciente. Todos os três coortes revelam uma grande variação no FEV1, no entanto, não há diferenças significativas em FEV1 entre as coortes

doi:. 10.1371 /journal.pone.0041746.s003

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Figura S4.

Volume expiratório forçado em um minuto (FEV1) nas diferentes fases T. Todas as etapas divulgar uma grande variação no FEV1, no entanto, não houve diferenças entre os estágios T pôde ser observado

doi:. 10.1371 /journal.pone.0041746.s004

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Reconhecimentos

os autores gostariam de agradecer a Olga Meyer por sua ajuda hábil nas medições de ELISA.